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成都地区婴幼儿腹泻轮状病毒的基因分型研究 被引量：8
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作者 廖虹瑜 张梦妍 +3 位作者 陈喜凯 陈智瑾 樊学军 裴晓方 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期511-514,共4页
目的了解成都市婴幼儿轮状病毒的基因分型特点,以及流行优势毒株VP4基因核酸序列变异情况。方法收集2010年3月华西第二医院75份门诊婴幼儿腹泻标本,RT-PCR检测轮状病毒并进行G、P基因分型。据检测结果确定流行优势株,对两株优势株VP4基... 目的了解成都市婴幼儿轮状病毒的基因分型特点,以及流行优势毒株VP4基因核酸序列变异情况。方法收集2010年3月华西第二医院75份门诊婴幼儿腹泻标本,RT-PCR检测轮状病毒并进行G、P基因分型。据检测结果确定流行优势株,对两株优势株VP4基因进行T-A克隆和测序比对。结果 A组轮状病毒检出率为17.3%(13/75),其中G1型7株,G3型2株,4株未分型;P基因分型结果为P[8]型6株,P[4]型2株,P[10]型、P[6]型、P[9]型各1株,2株未分型;G/P组合结果以G1P[8]型为主,共5株;G1P[4]型,G3P[6]型各1株。VP4测序结果显示,两株优势株均为P[8]基因型,且毒株之间具有高度同源性(97%),与标准株之间同源性也达90%以上。结论 A组轮状病毒是成都地区2010年春季婴幼儿腹泻的重要病原之一,其血清型主要为G1型,流行优势株G/P组合为G1P[8]型。 展开更多
关键词 A组轮状病毒 RT-pCR g1p[8] Vp4
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G1P[8]型轮状病毒HN15D2株在Vero细胞上适应及传代稳定性的研究
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作者 寇桂英 关文竹 +5 位作者 王云瑾 火文 王名强 包红 周旭 李雄雄 《微生物学免疫学进展》 CAS 2023年第4期12-17,共6页
目的 将G1P[8]型轮状病毒HN15D2株适应于Vero细胞,评价其在Vero细胞上的传代稳定性。方法 将从MA-104细胞上分离纯化的HN15D2毒株按照感染复数(multiplicity of infection, MOI)为0.01、0.05和0.10分别接种Vero细胞,通过显微镜观察细胞... 目的 将G1P[8]型轮状病毒HN15D2株适应于Vero细胞,评价其在Vero细胞上的传代稳定性。方法 将从MA-104细胞上分离纯化的HN15D2毒株按照感染复数(multiplicity of infection, MOI)为0.01、0.05和0.10分别接种Vero细胞,通过显微镜观察细胞病变(cytopathogenic effect, CPE),采用细胞培养半数感染量(50%cell culture infective dose,CCID_(50))检测病毒滴度并绘制病毒增殖曲线,确定HN15D2在Vero细胞上的最适MOI。在病毒传代过程中,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)检测病毒基因带型;通过全基因测序分析病毒在MA-104细胞和Vero细胞中基因序列的同源性;电镜观察HN15D2毒株病毒形态;将HN15D2毒株在Vero细胞上连续传15代后分析各代次病毒滴度及基因电泳带型变化。结果 HN15D2毒株感染Vero细胞后形成明显的细胞病变;当MOI为0.05时,获得的病毒收获液滴度最高,为5.75 lgCCID_(50)/mL,确定病毒接种的最适MOI为0.05;全基因测序结果显示,2种细胞培养获得的病毒11个基因节段同源性在99.7%~100.0%;电镜下可以观察到典型的轮状病毒颗粒;HN15D2毒株在Vero细胞上连续传15代,病毒基因带型未发生变化,滴度稳定在5.25~5.75 lg-CCID_(50)/mL。结论 轮状病毒HN15D2毒株成功适应于Vero细胞,在连续传代过程中具有良好的稳定性。 展开更多
关键词 轮状病毒 型 VERO细胞 病毒适应 病毒传代 稳定性
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