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桑黄水提物诱导黑色素瘤细胞系B16-F10 G_(0)/G_(1)期阻滞的研究
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作者 霍进喜 李有贵 +4 位作者 孙雨晴 潘美良 马焕艳 梁菲 钟石 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期544-550,共7页
通过噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞分析、转录组测序和蛋白印迹等手段,探究桑黄水提物(SH)对黑色素瘤细胞系B16-F10的抑制作用及分子作用机制。MTT实验结果显示,SH能够抑制B16-F10细胞系增殖,且呈剂量依赖性。流式细胞分析发现,SH能够诱... 通过噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞分析、转录组测序和蛋白印迹等手段,探究桑黄水提物(SH)对黑色素瘤细胞系B16-F10的抑制作用及分子作用机制。MTT实验结果显示,SH能够抑制B16-F10细胞系增殖,且呈剂量依赖性。流式细胞分析发现,SH能够诱导细胞G_(0)/G_(1)期阻滞,但对细胞凋亡无明显影响。RNA-seq、qRT-PCR和Western blot分析发现,SH主要通过上调p53信号通路中p21的表达,进而抑制细胞周期通路中CyclinD3、CDK2和CDK6的表达来影响细胞周期阻滞。研究结果证明SH对黑色素瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,p21-CyclinD3-CDKs信号通路介导的G_(0)/G_(1)期阻滞是其作用机制之一。 展开更多
关键词 桑黄 水提物 g_0/g_1期阻滞 黑色素细胞瘤
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重楼皂苷Ⅰ诱导G_2/M期阻滞及干扰微管结构抗结肠癌HCT116细胞作用机制 被引量:16
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作者 于思 曹治兴 +3 位作者 杨雨婷 白姣姣 彭成 李玉芝 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期149-154,共6页
目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPI)对人结肠癌HCT116细胞周期的影响,并研究其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测PPI对HCT116细胞的体外抑制活性;采用Hoechst33258染色法观察PPI对HCT116细胞核数量的影响;采用流式细胞仪检测PPI... 目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPI)对人结肠癌HCT116细胞周期的影响,并研究其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测PPI对HCT116细胞的体外抑制活性;采用Hoechst33258染色法观察PPI对HCT116细胞核数量的影响;采用流式细胞仪检测PPI对HCT116细胞周期的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶(CDC2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)蛋白的表达和活性,利用细胞免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜检测PPI对HCT116细胞微管的影响。结果:PPI以剂量-时间依赖的方式抑制HCT116的体外增殖,Hoechst 33258染色发现PPI处理组双核细胞数量明显增加(P<0.05,P<0.01);将其细胞周期阻滞于G2/M期;PPI未能抑制G2/M期相关蛋白CDC2,CDC25C的表达和活性,却有促进作用;PPI可导致细胞微管结构紊乱。结论:PPI会导致HCT116细胞阻滞在G2/M期,其作用机制与干扰细胞内微管结构有关。 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅰ HCT116细胞 g2/M期阻滞 微管
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氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的研究 被引量:11
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作者 李丹妮 刘华钢 +2 位作者 刘丽敏 刘林 梁霜 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期40-43,共4页
目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,... 目的研究氯化两面针碱诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测人肝癌细胞SMMC-7721生长活力;Hoechst33258核染色,观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率。结果氯化两面针碱作用于细胞后,在体外呈浓度、时间依赖性显著抑制SMMC-7721细胞的生长,作用24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(19.5±1.8)、(3.8±0.2)、(2.8±0.1)mg/L;Hoechst33258染色后,可见核染色质凝集,凋亡细胞呈致密浓染,与对照组相比,氯化两面针碱处理后凋亡细胞比例增加;流式细胞仪检测到G2/M细胞比例增加,G0/G1、S期细胞比例下降。药物作用于SMMC-7721细胞后,随浓度增加细胞凋亡率增加。结论氯化两面针碱对SMMC-7721细胞有明显的生长抑制作用,可能与改变细胞周期并诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 SMMC-7721细胞 g2/M期阻滞 细胞凋亡 肝癌
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汉防己甲素对人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞株的放疗增敏作用 被引量:12
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作者 王君 常利红 +6 位作者 李霞 陈贤珍 吴喜福 王志远 黄子真 黄健聪 张革化 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1611-1618,共8页
目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和C... 目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和CNE2细胞;流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot检测各组细胞γ-H2AX、cleaved caspase-3、p-CDC25C、CDK1、p-CDK1、cyclin B1、ERK和p-ERK的蛋白水平。结果:最大非毒性剂量Tet联合放疗后可上调CNE1和CNE2细胞中γ-H2AX的表达。放疗组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例分别为(18.09±0.42)%和(18.48±1.32)%,联合处理组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例降为(15.88±1.04)%和(13.80±0.82)%,与放疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。联合处理可增加放疗所致的cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05)。不同浓度Tet处理CNE1和CNE2细胞后,p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平随Tet浓度增加而升高(P<0.05),CDK1的表达无明显改变;最大非毒性剂量Tet不影响p-CDC25C、p-CDK1和CDK1的蛋白水平。在CNE1和CNE2细胞中,联合处理可明显降低放疗引起的p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平(P<0.05),上调放疗后cyclin B1的表达,而对总CDK1的表达无明显调节作用;联合处理可显著抑制放疗所致的pERK蛋白水平(P<0.05)。结论:最大非毒性剂量Tet可以增加放疗引起的CNE1和CNE2细胞的DNA断裂及细胞凋亡,其放疗增敏的机制可能与Tet调控ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路、去除放疗导致的G2/M期阻滞有关。 展开更多
关键词 汉防已甲素 鼻咽癌 g2/M期阻滞 ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路
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人参皂苷Rb1、Rg1、Re对白血病细胞株KG1α增殖的影响 被引量:11
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作者 王红宁 左国伟 +7 位作者 陈地龙 官涛 李春莉 姜蓉 李静 雷翠蓉 顾恒伟 王建伟 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期56-58,共3页
目的:探讨人参皂苷Rb1、Rg1、Re对急性髓系白血病细胞株(KG1α)增殖的影响。方法:取对数生长期KG1α细胞,分设人参皂苷Rb1、Rg1、Re组和常规培养组,以MTT比色法检测作用24h、48h、72h时对KGIα细胞增殖抑制作用,并计算Rb1的IC50值,以此... 目的:探讨人参皂苷Rb1、Rg1、Re对急性髓系白血病细胞株(KG1α)增殖的影响。方法:取对数生长期KG1α细胞,分设人参皂苷Rb1、Rg1、Re组和常规培养组,以MTT比色法检测作用24h、48h、72h时对KGIα细胞增殖抑制作用,并计算Rb1的IC50值,以此浓度为工作浓度,设常规培养组和处理组,台盼蓝计数法观察对KG1α细胞增殖的影响;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果:MTT、台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1、Rg1可抑制KG1α细胞增殖,呈浓度依赖性,以Rb1抑制效应最佳,于作用48h抑制率最高。台盼蓝计数显示人参皂苷单体Rb1-120μmol/L作用48h时抑制率达50.22%;流式细胞术结果提示,与对照组比较,Rbl-120μmol/L组G2/M期KG1α细胞比例增加(P<0.05)。结论:Rb1可抑制KG1α细胞体外增殖,其增殖抑制作用与将KG1α细胞阻滞于G2/M期有关。 展开更多
关键词 人参皂苷单体Rb1、Rg1、Re Kg1α细胞 g2/M期阻滞 增殖抑制
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Anti-proliferative and apoptotic effects of S1,a tetrandrine derivative,in human gastric cancer BGC-823 cells 被引量:8
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作者 LEI Rong-Rong HU Hai-Feng +5 位作者 BAI Fan LIU Ying WU Chun-Zhen HUANG Xiao-Xing XIE Li-Ping HU You-Jia 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2016年第7期527-533,共7页
[ABSTRACT] The aim of the study was to investigate the anti-proliferation and apoptosis-inducing effects of S1, a novel tetrandrine derivative, in human gastric cancer BGC-823 cells and explore the possible mechanism ... [ABSTRACT] The aim of the study was to investigate the anti-proliferation and apoptosis-inducing effects of S1, a novel tetrandrine derivative, in human gastric cancer BGC-823 cells and explore the possible mechanism of action. The anti-proliferative activity was determined by MTT assay; the induction of cell cycle arrest and apoptosis were detected by flow cytometry. Quantitative real time RT-PCR and Western blotting were used to evaluate the mRNA and protein expression levels in mitochondrial pathway. SI significantly reduced cell viability and induced a G2/M phase arrest and apoptosis in dose- and time-dependent manner. Further studies showed that S1 increased mRNA and protein expression of Bax and the Bax/Bcl-2 ratio. Moreover, S1 decreased the protein expression of procaspase-9 and procaspase-3, suggesting that the induction of apoptosis may be related to the alteration of the ratio of Bax/Bcl-2 and the activation of caspases. These findings suggested that S1 merits further investigation as a novel therapeutic agent for the treatment of human gastric cancer. 展开更多
关键词 TETRANDRINE DERIVATIVE BgC-823 cells g2/M phase arrest Apoptosis
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电离辐射诱导的细胞G_2期阻滞 被引量:5
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作者 刘光伟 龚守良 《国外医学(放射医学核医学分册)》 2002年第4期180-182,共3页
哺乳动物受X射线照射后,可以使细胞周期延迟或阻滞,包括G1期阻滞、S期延迟和G2期阻滞。G1期阻滞仅在野生型p53基因存在时出现,在清除DNA损伤的细胞中具有重要作用;而G2期阻滞更有利于损伤后DNA的修复和细胞存活,并且与p53基因存在状态... 哺乳动物受X射线照射后,可以使细胞周期延迟或阻滞,包括G1期阻滞、S期延迟和G2期阻滞。G1期阻滞仅在野生型p53基因存在时出现,在清除DNA损伤的细胞中具有重要作用;而G2期阻滞更有利于损伤后DNA的修复和细胞存活,并且与p53基因存在状态无关。因此,对电离辐射诱导细胞G2期阻滞机制的探讨成为近年来国内外放射生物学领域的研究热点。 展开更多
关键词 g2期阻滞 电离辐射 细胞周期调控点 肿瘤治疗 P53基因 放射生物学
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G6976转变8-氯-腺苷引起的G_2/M期阻滞为S期阻滞并促进K562细胞凋亡 被引量:4
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作者 周静 贾秀珍 +3 位作者 安国顺 李淑艳 倪菊华 贾弘禔 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期854-860,共7页
8-氯-腺苷可抑制多种人类肿瘤细胞生长.8-氯-腺苷可引起细胞有丝分裂异常、G2/M期阻滞和晚期凋亡.为探索增强8-氯-腺苷的抗肿瘤作用,本研究以人慢性髓性白血病细胞株K562为靶细胞,联合使用Chk1抑制剂G6976与8-氯-腺苷,观察G6976处... 8-氯-腺苷可抑制多种人类肿瘤细胞生长.8-氯-腺苷可引起细胞有丝分裂异常、G2/M期阻滞和晚期凋亡.为探索增强8-氯-腺苷的抗肿瘤作用,本研究以人慢性髓性白血病细胞株K562为靶细胞,联合使用Chk1抑制剂G6976与8-氯-腺苷,观察G6976处理后肿瘤细胞对8-氯-腺苷的增敏效果,探索其作用机制.流式细胞分析发现,G6976可消除8-氯-腺苷引起的K562细胞G2/M期阻滞,使转换为S期阻滞.蛋白质印迹及免疫共沉淀实验显示,G6976可灭活Chk1,激活Chk2,使Chk1-Cdc25C-CDK1级联反应转换为Chk2-Cdc25A-CDK2级联反应,从而引起细胞周期阻滞发生改变.蛋白质印迹实验证明,G6976可明显增强8-氯-腺苷作用引起的凋亡相关分子procasepase-3和PARP的激活;流式细胞分析显示,G6976促进8-氯腺苷引起的细胞凋亡.研究结果提示,G6976增强了靶细胞对8-氯-腺苷的敏感性,通过转换8-氯-腺苷引起的G2/M期阻滞为S期阻滞,促进细胞凋亡. 展开更多
关键词 8-氯-腺苷 go6976 g2/M期阻滞 S期阻滞 凋亡
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莱菔硫烷诱导HepG-2细胞G_2/M期阻滞及其对Cdk1和CyclinB1蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 邹翔 曲中原 +2 位作者 高鹏 孙胜男 季宇彬 《中医药学报》 CAS 2010年第2期8-12,共5页
目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对H... 目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对HepG2细胞内Cdk1、p-Cdk1(Thr14)和CyclinB1蛋白表达的影响。结果:SFN作用于HepG-2细胞48h后,随着SFN浓度的增大,G2/M期细胞比例逐渐升高,当SFN浓度达到40μmol·L-1时,G2/M期细胞比例达到31.95%,且出现凋亡峰;随SFN浓度的增大,细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),同时p-Cdk1(Thr14)的表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞发生G2/M期阻滞;SFN可通过下调HepG-2细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达、上调p-Cdk1(Thr14)的蛋白表达水平,进而抑制Cdk1-CyclinB1复合物的形成和活化使人肝癌HepG-2细胞阻滞在G2/M期。 展开更多
关键词 莱菔硫烷 人肝癌HEPg-2细胞 g2/M阻滞 CDK1 p-Cdk1(Thr14) CYCLINB1
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人肝细胞氧化应激模型中热休克蛋白90α对细胞周期蛋白B1的降解调控机制研究
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作者 段丹萍 黄婷苑 +5 位作者 刘晨阳 李艳 李燕茹 邹飞 王致 陈雪梅 《实用预防医学》 CAS 2023年第2期152-156,共5页
目的 观察人肝细胞(L02)氧化应激模型中热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, Hsp90α)和相关底物蛋白细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的蛋白水平变化,以及Hsp90α表达下调后对Cyclin B1表达的影响,明确Hsp90α对Cyclin B1功能的影响,为... 目的 观察人肝细胞(L02)氧化应激模型中热休克蛋白90α(heat shock protein 90α, Hsp90α)和相关底物蛋白细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的蛋白水平变化,以及Hsp90α表达下调后对Cyclin B1表达的影响,明确Hsp90α对Cyclin B1功能的影响,为氧化应激相关的肝脏疾病防治提供新思路。方法 以200μM H_(2)O_(2)建立氧化应激L02细胞损伤模型;通过CCK-8法观察氧化应激对细胞存活的影响,比色法测定细胞内谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测氧化应激对细胞内Hsp90α及Cyclin B1蛋白水平的影响。结果 随着氧化应激刺激时间的延长,GSH含量逐渐减少,抗氧化能力不断降低。从6 h开始,胞内GSH水平较对照组明显下降(均P<0.05);H_(2)O_(2)对L02细胞增殖的抑制程度增强;氧化应激后细胞周期检测点G2/M期阻滞明显;氧化应激导致胞内Hsp90α蛋白水平先增加后降低,在刺激24 h时Hsp90α表达出现明显下降,Cyclin B1蛋白水平则在24 h明显增加,与对照组相比,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 氧化应激可动态影响细胞内Hsp90α及CyclinB1蛋白表达水平;氧化应激下,Hsp90α表达降低可影响与G2/M期调节有关的底物蛋白Cyclin B1水平,Hsp90α对Cyclin B1功能维持起保护性作用。 展开更多
关键词 人肝细胞L02 H_(2)O_(2) 氧化应激 热休克蛋白90Α 细胞周期蛋白B1 g2/M期阻滞
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毛蚶抗癌蛋白对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用 被引量:4
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作者 付莹 赵晨 +2 位作者 常振战 林华英 孙震晓 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2015年第6期415-420,共6页
目的:从毛蚶软体部位中分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,研究其对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用。方法:以新鲜毛蚶软体部分为原材料,分离获得毛蚶抗癌蛋白组分(命名为NS);倒置相差显微镜观察不同浓度(50、100、200、400μg/mL... 目的:从毛蚶软体部位中分离出具有一定抗癌活性的毛蚶蛋白组分,研究其对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用。方法:以新鲜毛蚶软体部分为原材料,分离获得毛蚶抗癌蛋白组分(命名为NS);倒置相差显微镜观察不同浓度(50、100、200、400μg/mL)NS组分对MCF-7癌细胞生长的影响,将200μg/mL NS组分作用MCF-7细胞不同时间(12、24、48 h)后,Giemsa染色观察癌细胞及核形态的变化,流式细胞术检测NS组分对MCF-7细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测细胞周期及细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,各浓度NS组分对人乳腺癌MCF-7细胞生长均具有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01);倒置相差显微镜下可见200μg/mL NS组分作用MCF-7细胞12 h后,部分细胞收缩变圆、脱落,24、48 h后细胞脱落现象更加明显;Giemsa染色发现,NS组分处理12 h后细胞出现有丝分裂相增加,继而出现多核或核碎裂等现象;流式细胞术检测发现NS组分主要引起细胞G2-M期阻滞;NS处理组凋亡率均较对照组明显升高(P均<0.01),且随着药物作用时间的延长,细胞凋亡比例逐渐增加。Western blot检测发现NS组分作用MCF-7细胞后p53及procaspase-3蛋白表达量均上调。结论:毛蚶抗癌蛋白NS组分体外对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞毒作用主要通过引起细胞发生G2-M期阻滞、诱导细胞凋亡实现的,期间伴随p53及procaspase-3蛋白表达上调。 展开更多
关键词 毛蚶 乳腺癌 MCF-7细胞 g2-M期阻滞 细胞凋亡
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二烯丙基二硫诱导肿瘤细胞G_2/M期阻滞的分子机制 被引量:4
12
作者 陆丽峰 苏琦 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2008年第3期240-242,共3页
二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对乳腺癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、胃癌、白血病等许多肿瘤均有明显的抑制作用,其作用与G2/M期阻滞有关。DADS阻滞G2/M期的分子机制包括抑制p34cdc2的活性,激活MAPK信号通路,增加p21WAF1/cip1蛋白... 二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对乳腺癌、肺癌、膀胱癌、结肠癌、胃癌、白血病等许多肿瘤均有明显的抑制作用,其作用与G2/M期阻滞有关。DADS阻滞G2/M期的分子机制包括抑制p34cdc2的活性,激活MAPK信号通路,增加p21WAF1/cip1蛋白表达与ROS生成等。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 肿瘤 g2/M阻滞
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汉黄芩素对多发性骨髓瘤细胞周期及P-Wee1和P-Akt蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 张萌 刘丽萍 +2 位作者 郭友逢 李智 莫穗林 《热带医学杂志》 CAS 2012年第11期1301-1303,1308,共4页
目的探讨汉黄芩素对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的增殖抑制作用及其可能的机制。方法以不同浓度的汉黄芩素(5~100μg/ml)作用于RPMI8226细胞24h,使用CCK-8法、流式细胞仪检测细胞的增殖活性和细胞周期的变化;运用Western-blot法检测汉黄... 目的探讨汉黄芩素对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的增殖抑制作用及其可能的机制。方法以不同浓度的汉黄芩素(5~100μg/ml)作用于RPMI8226细胞24h,使用CCK-8法、流式细胞仪检测细胞的增殖活性和细胞周期的变化;运用Western-blot法检测汉黄芩素作用前后细胞内P-Wee1、P-Akt蛋白表达的变化。结果汉黄芩素对RPMI8226细胞具有增殖抑制作用,并有剂量依赖性,IC50为43.71μg/ml;汉黄芩素浓度为50μg/ml时,用药组的G2/M%为(25.4333±2.35433)%,明显高于溶剂对照组的(6.8333±1.52753)%;Western-blot检测结果显示,用药组汉黄芩素浓度≥50μg/ml时,与对照组相比,P-Wee1、P-Akt蛋白表达明显减少。结论汉黄芩素能明显抑制RPMI8226细胞的增殖,可能是通过Akt/Wee1途径使肿瘤细胞发生G2/M期阻滞,从而发挥增殖抑制作用。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 汉黄芩素 g2 M期阻滞 P-Wee1 P-AKT
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泰素对放射所致鼻咽癌细胞周期阻滞、凋亡的影响
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作者 孙银萍 胡国清 《泰山医学院学报》 CAS 2007年第2期101-103,共3页
目的研究泰素对放射所致鼻咽癌细胞(CNE)细胞周期阻滞和凋亡的影响。方法采用流式细胞术和MTT法分别检测放射或放射联合泰素诱导的细胞周期阻滞、凋亡及其细胞存活率。结果泰素可使放射所致的;1)G2/M期阻滞峰值降低,阻滞时间缩短,有极... 目的研究泰素对放射所致鼻咽癌细胞(CNE)细胞周期阻滞和凋亡的影响。方法采用流式细胞术和MTT法分别检测放射或放射联合泰素诱导的细胞周期阻滞、凋亡及其细胞存活率。结果泰素可使放射所致的;1)G2/M期阻滞峰值降低,阻滞时间缩短,有极显著的统计学意义(P<0.01);2)凋亡率明显升高,有极显著的统计学意义(P<0.01);3)细胞存活率明显降低,有显著的统计学意义(P<0.05)且其Dq(实验组)<Dq(对照组)。结论泰素可作为鼻咽癌放射治疗的增敏剂。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞 泰素 g2/M期阻滞 凋亡 放射增敏剂
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PM2.5降尘诱导A549细胞G2/M期阻滞的机制研究 被引量:3
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作者 杨洁 霍婷婷 +3 位作者 王玉琳 董发勤 曾娅莉 邓建军 《岩石矿物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期894-902,共9页
PM_(2.5)降尘作用于A549细胞后,MTT法检测细胞存活率,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期改变,RT-PCR检测周期阻滞相关基因p53、p21、CDK1、c-myc和lncRNA H19的表达水平,Western-blot检测周期蛋白cyclin B1表达。通过转染H19... PM_(2.5)降尘作用于A549细胞后,MTT法检测细胞存活率,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期改变,RT-PCR检测周期阻滞相关基因p53、p21、CDK1、c-myc和lncRNA H19的表达水平,Western-blot检测周期蛋白cyclin B1表达。通过转染H19 siRNA干扰H19的表达,RT-PCR检测其对p53、c-myc及CDK1表达的影响,以探讨PM2.5降尘诱导A549细胞周期阻滞的作用机制。结果显示,PM2.5降尘暴露可降低A549细胞存活率,随作用浓度及时间增加呈递减趋势,并可观察到细胞形态破坏,细胞膜表面吸附聚集大量粉尘颗粒。PM2.5作用于细胞24 h后,A549细胞增殖阻滞在G2/M期,周期阻滞相关基因p53、p21及H19表达增加,CDK1及cyclin B1表达降低。此外,转染H19 siRNA后成功干扰H19的表达,并调控CDK1表达进一步降低。综合以上结果,PM2.5降尘处理A549细胞后可通过激活p53及p21活性,抑制CDK1和cyclin B1表达水平,诱导G2/M期阻滞从而抑制细胞增殖。短期暴露于PM2.5后,lncRNA H19在染毒细胞中可能发挥特异性癌基因的作用,通过与p53及c-myc结合参与调控细胞周期,干扰H19低表达使细胞G2/M期阻滞更加明显。 展开更多
关键词 PM2 5降尘 A549细胞 g2/M期阻滞 毒性机制
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刺槐素影响人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡分子机制 被引量:3
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作者 陈伟达 袁磊 +3 位作者 王桁扬 谭嗣伟 刘文庆 苗成利 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2020年第20期1616-1621,共6页
目的刺槐素(acacetin,Aca)是从豆科植物刺槐的花中提取的一种黄酮类化合物,具有抗感染、抗菌和抗肿瘤等药理作用,但是否具有抗骨肉瘤活性尚不明确。本研究旨在探讨Aca对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法体外... 目的刺槐素(acacetin,Aca)是从豆科植物刺槐的花中提取的一种黄酮类化合物,具有抗感染、抗菌和抗肿瘤等药理作用,但是否具有抗骨肉瘤活性尚不明确。本研究旨在探讨Aca对人骨肉瘤MG-63细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法体外常规培养MG-63细胞,用0、15、30、60、120和240μmol/L Aca处理MG-63细胞24或48h后,CCK-8法检测细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖,AnnexinⅤ-PI染色检测细胞凋亡,PI染色检测细胞周期,蛋白质印迹法分析Survivin、Cdc25C、c-Met、p-c-Met、Akt和p-Akt蛋白的表达。结果 Aca可抑制MG-63细胞活力,24和48h的IC50分别为77.94和57.36μmol/L,且具有剂量和时间依赖性。MG-63细胞经0、30、60和120μmol/L Aca作用24h后,平板克隆形成实验结果显示,克隆形成率分别为(62.73±4.59)%、(50.42±3.83)%、(37.65±3.14)%和(25.18±2.67)%,差异有统计学意义,F=59.64,P<0.001;AnnexinⅤ-PI染色结果显示,细胞凋亡率分别为(2.41±0.68)%、(9.72±1.43)%、(20.36±1.92)%和(31.85±2.27)%,差异有统计学意义,F=174.89,P<0.001;PI染色结果显示,G2/M期细胞构成比分别为(10.73±1.81)%、(20.36±2.05)%、(31.58±1.72)%和(42.11±2.16)%,差异有统计学意义,F=138.42,P<0.001;蛋白质印迹法结果显示,Survivin和Cdc25C蛋白表达水平以及c-Met和Akt蛋白磷酸化水平随药物剂量增加而降低,两两比较差异均有统计学意义,F值分别为110.49、70.85、93.72和96.14,均P<0.001。结论 Aca可诱导MG-63细胞发生G2/M期阻滞和凋亡,这可能与其下调Survivin和Cdc25C蛋白表达,以及抑制c-Met/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 刺槐素 骨肉瘤 Mg-63细胞 g2/M期阻滞 凋亡
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Differential Responses to UVB Irradiation in Human Keratinocytes and Epidermoid Carcinoma Cells 被引量:2
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作者 ZHOU Mei Juan ZHENG Li +5 位作者 GUO Ling LIU Wei Ling LV Chao JIANG Li Hong OU Cheng Shan DING Zhen Hua 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2012年第5期583-589,共7页
Abstract Objective To examine UVB-induced responses in normal human keratinocytes (HaCaT) and epidermoid carcinoma cells (A431) at the cellular and molecular level, and investigated the protective effect of salidr... Abstract Objective To examine UVB-induced responses in normal human keratinocytes (HaCaT) and epidermoid carcinoma cells (A431) at the cellular and molecular level, and investigated the protective effect of salidroside. Methods Cells irradiated by UVB at various dosage and their viability was assessed by MTT assays, cell cycle was analysed by flow cytometry. The expression of NF-KB, BCL-2, and CDK6 after 50 J/㎡ UVB irradiation were detected by RT-PCR and western blotting. Results Our results confirmed greater tolerance of A341 cells to UVB-induced damage such as cell viability and cell cycle arrest, which was accompanied by differential expression changes in NF-KB, BCL-2, and CDK6. UVB exposure resulted in HaCaT cells undergoing G1-S phase arrest. When treated with salidroside, HaCaT survival was significantly enhanced following exposure to UVB, suggesting great therapeutic potential for this compound. Conclusion Taken together, our study suggests that A431 respond differently to UVB than norma HaCaT cells, and supports a role for NF-KB, CDK6, and BCL-2 in UVB-induced cell G1-S phase arrest Furthermore, salidroside can effectively protect HaCaT from UVB irradiation. 展开更多
关键词 UVB g1-S phase arrest HACAT A431 NF-KB BCL-2 CDK6 SALIDROSIDE
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二烯丙基二硫对人白血病细胞HL-60增殖、细胞周期及p21表达的影响 被引量:2
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作者 汪煜华 曾勇志 +2 位作者 谭力铭 赵雪琴 唐圣松 《南华大学学报(医学版)》 2005年第3期303-305,367,共4页
目的观察二烯丙基二硫(DADS)作用于人白血病细胞系HL-60后,细胞增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p21表达的变化,探讨DADS抑制HL-60增殖、诱导G2/M阻滞的作用机制。方法不同浓度DADS作用HL-60后,MTT法检测细胞增殖情况,流... 目的观察二烯丙基二硫(DADS)作用于人白血病细胞系HL-60后,细胞增殖、细胞周期及细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p21表达的变化,探讨DADS抑制HL-60增殖、诱导G2/M阻滞的作用机制。方法不同浓度DADS作用HL-60后,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期,Westernblot检测p21蛋白水平。结果在一定浓度范围之内,DADS能抑制HL-60细胞增殖,细胞周期发生G2/M期阻滞,并上调p21蛋白水平。结论DADS能通过上调p21的表达而抑制HL-60增殖,诱导其G2/M期阻滞。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人白血病细胞HL-60 g2/M期阻滞 P21
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冷休克对PG、HeLa细胞周期调控及p21WAF1/cip1蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 吕怀盛 张波 侯琳 《实用癌症杂志》 2002年第6期569-570,573,共3页
目的 研究冷休克对p5 3基因突变的PG细胞、p5 3野生型的HeLa细胞的周期调控及 p2 1WAF1/cip1蛋白表达的影响。方法 将PG、HeLa细胞置 4℃冷冻 4h ,使细胞发生冷休克 ,用流式细胞仪分析细胞DNA含量及凋亡细胞百分率 ,Westernblot检测 p... 目的 研究冷休克对p5 3基因突变的PG细胞、p5 3野生型的HeLa细胞的周期调控及 p2 1WAF1/cip1蛋白表达的影响。方法 将PG、HeLa细胞置 4℃冷冻 4h ,使细胞发生冷休克 ,用流式细胞仪分析细胞DNA含量及凋亡细胞百分率 ,Westernblot检测 p2 1WAF/cip1蛋白的表达。 结果 冷休克诱导PG、HeLa细胞发生G2 /M期周期阻滞及凋亡 ,p2 1WAF/cip1蛋白表达增高 (PG以 12h、HeLa以 18h最为显著 )。冷休克诱导PG、HeLa细胞发生G2 /M期周期阻滞及凋亡与 p2 1WAF/cip1蛋白表达增高同步。结论 冷休克诱导PG、HeLa细胞发生G2 /M期阻滞及凋亡、p2 1WAF/cip1表达的增高与细胞的 p5 3状态无关。 展开更多
关键词 冷休克 p21WAF1/cip1基因 g2/M期阻滞 抑癌基因 肺癌
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miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响及其机制 被引量:2
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作者 信瑞 李冬 +3 位作者 徐慧英 王春宇 曲丹华 孙海峰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期772-778,共7页
目的:观察miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:乳腺癌T47D和MDA-MB-361细胞分别给予0.0、2.5和5.0 Gy γ射线照射,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程,实时定量PCR法检测72 h内细胞中miRNA... 目的:观察miRNA-21对乳腺癌细胞放射敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:乳腺癌T47D和MDA-MB-361细胞分别给予0.0、2.5和5.0 Gy γ射线照射,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程,实时定量PCR法检测72 h内细胞中miRNA-21表达水平。T47D和MDA-MB-361细胞分别转染anti-miRNA-21序列(anti-miRNA-21组)和阴性对照序列(阴性对照组),并设置未转染细胞为空白对照组,实时定量PCR法检测各组细胞中miRNA-21表达水平;经0.0和5.0 Gy γ射线照射后,CCK8法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期进程。结果:经5.0 Gy γ射线照射后,T47D细胞存活率明显高于MDA-MB-361细胞(P<0.05);与0.0 Gy照射组比较,5.0 Gy 照射组T47D和MDA-MB-361细胞G 2/M期细胞百分率均明显升高(P<0.05),miRNA-21表达水平均明显升高(P<0.05)。与空白对照组比较,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞中miRNA-21表达水平均明显降低(P<0.05或 P<0.01);给予5.0 Gy γ射线照射后,anti-miRNA-21组T47D和MDA-MB-361细胞存活率均明显降低(P<0.05或 P<0.01),T47D细胞G 2/M期细胞百分率明显降低(P<0.05),而sub G 1期细胞百分率明显升高(P<0.05)。结论: miRNA-21表达下调能够增强乳腺癌细胞的放射敏感性,其机制可能与抑制细胞周期G 2/M期阻滞有关。 展开更多
关键词 MIRNA-21 乳腺肿瘤 放射敏感性 细胞存活率 g2/M期阻滞
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