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双金属协同调控G-三链体/血红素比色传感探针的构筑及应用 被引量:1
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作者 张珊 张燕 +5 位作者 高渝萌 黄瑶瑶 蔡慧珊 魏袁 苏小东 周倩羽 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期707-714,共8页
该文首次将一条富含G碱基的DNA序列(5’-CTGGGAGGGAGGGA-3’)与血红素结合,形成的G-三链体/血红素复合物具有类过氧化氢酶活性,能够催化H2O2的氧化反应,使反应底物2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)由无色变为绿色。通过对... 该文首次将一条富含G碱基的DNA序列(5’-CTGGGAGGGAGGGA-3’)与血红素结合,形成的G-三链体/血红素复合物具有类过氧化氢酶活性,能够催化H2O2的氧化反应,使反应底物2,2′-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)由无色变为绿色。通过对金属离子的筛选,发现K+和Sr2+同时存在能稳定G-三链体结构,基于此构筑了双金属协同调控的G-三链体/血红素比色传感探针,并将其用于H2O2的定量分析。在最佳实验条件下,溶液的吸光度与H2O2浓度在0.5~4.5 mmol/L范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.07 mmol/L。将该方法用于牛奶中H2O2的检测,加标回收率为92.5%~103%,相对标准偏差为1.2%~5.4%。该探针具有碱基序列短、成本低廉、适用性强等诸多优势,为G-三链体功能化核酸探针的研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 g- 血红素 钾离子 锶离子 比色探针 协同调控
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基于G-三链体DNA探针的汞离子检测新方法 被引量:2
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作者 刘艳 肖虔 +1 位作者 彭俊彬 周慧 《赣南师范大学学报》 2019年第3期69-72,共4页
开发简单快速的汞离子(Hg^(2+))检测新方法对人类了解重金属污染具有重要的意义.基于G-三链体DNA探针设计一种非标记的荧光方法用于汞离子检测.富含G碱基的DNA序列能自主装形成G-三链体结构.在没有Hg^(2+)存在的情况下,G-三链体DNA能与... 开发简单快速的汞离子(Hg^(2+))检测新方法对人类了解重金属污染具有重要的意义.基于G-三链体DNA探针设计一种非标记的荧光方法用于汞离子检测.富含G碱基的DNA序列能自主装形成G-三链体结构.在没有Hg^(2+)存在的情况下,G-三链体DNA能与荧光染料硫黄素T结合生成非标记的荧光探针.硫黄素T与G-三链体结合后,ThT的荧光信号会显著增强.在Hg^(2+)存在的情况下,G-三链体DNA环部的胸腺嘧啶T能与Hg^(2+)发生反应,从而改变DNA的构型,抑制G-三链体结构的形成,使得ThT的荧光减弱.该方法通过对ThT-G-三链体的荧光强度变化实现溶液中的Hg^(2+)离子的检测.对该方法的可行性进行论证,并对实验条件进行优化.实验结果表明该方法可用于Hg^(2+)检测,并具有良好的灵敏度和选择性. 展开更多
关键词 硫磺素T g- Hg2+检测
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G-三链体可视化核酸传感器用于四环素的检测
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作者 刘宁宁 王鑫昕 +5 位作者 兰欣悦 褚华硕 陈旭 常世敏 李腾飞 许文涛 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期106-114,共9页
四环素因其广谱活性和低成本,在畜牧业和水产养殖中被广泛用于预防细菌感染和提高生长速度,四环素的过度使用导致抗生素在食品中残留,严重威胁人类的健康。硫代黄素T(ThT)可以嵌入到特殊核酸结构中,从而荧光强度得到强激发实现信号输出... 四环素因其广谱活性和低成本,在畜牧业和水产养殖中被广泛用于预防细菌感染和提高生长速度,四环素的过度使用导致抗生素在食品中残留,严重威胁人类的健康。硫代黄素T(ThT)可以嵌入到特殊核酸结构中,从而荧光强度得到强激发实现信号输出。本文中四环素适配体可与富G序列结合形成双链,但四环素存在时优先与适配体结合,经解除结合后的富G序列可自身折叠形成G-三链体结构,增强了ThT的荧光强度,依据靶标浓度与ThT荧光强度良好的线性关系,实现对四环素的定量检测。本方法在四环素浓度为1 nmol/L-1μmol/L范围内有良好线性,R^(2)高达0.99,检测限为0.07 nmol/L,并且在25 min内可以完成检测。因此,一种基于G-三链体的双链竞争内劈裂可视化方法被开发出来并实现了四环素的简便、快速、灵敏、特异、低成本的检测。 展开更多
关键词 硫代黄素T 四环素 g- 适配 功能核酸
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基于G-三链体分子信标的多聚核苷酸激酶荧光检测新方法
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作者 朱文平 刘硕硕 李志怡 《周口师范学院学报》 CAS 2022年第5期52-56,共5页
G-三链体(G3)由三段连续G碱基的富G序列组成的,因其潜在的生物学功能和特殊的结构受到越来越多的关注。G3序列能结合硫磺素T(ThT)发出强荧光,以此作信号报告分子,本文提出了一种基于G3分子信标(MB)的T4多聚核苷酸激酶(PNK)荧光检测新方... G-三链体(G3)由三段连续G碱基的富G序列组成的,因其潜在的生物学功能和特殊的结构受到越来越多的关注。G3序列能结合硫磺素T(ThT)发出强荧光,以此作信号报告分子,本文提出了一种基于G3分子信标(MB)的T4多聚核苷酸激酶(PNK)荧光检测新方法。有T4 PNK时,P1的5'末端被磷酸化,P1/G3MB双链结构中的P1被外切酶酶切,封闭在G3MB中的G3序列不能结合ThT,得到弱荧光信号。无T4 PNK时,P1/G3MB双链结构能阻止外切酶酶切,G3MB被打开,释放G3序列结合ThT荧光增强。该方法对T4 PNK检测的线性范围为0.0002~0.01 U/μL,检测限为0.0002 U/μL。该方法具有操作简便、成本低和选择性高等优点,并可用于T4 PNK酶活性抑制剂的评估。 展开更多
关键词 T4多聚核苷酸激酶 硫磺素T g- 分子信标
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以G-三链体/硫黄素T为探针非标记荧光法检测DNA
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作者 李凤 刘强 李保新 《延安大学学报(自然科学版)》 2022年第3期34-37,45,共5页
为了获得一种简单、灵敏、低成本的DNA检测方法,提出了一种非标记荧光定量检测DNA的方法。信号探针(Signal DNA)和封闭探针(Block DNA)通过部分杂交形成双链DNA结构。所形成的双链DNA结构与靶标DNA作用,释放出一段富G的DNA序列;此富G的... 为了获得一种简单、灵敏、低成本的DNA检测方法,提出了一种非标记荧光定量检测DNA的方法。信号探针(Signal DNA)和封闭探针(Block DNA)通过部分杂交形成双链DNA结构。所形成的双链DNA结构与靶标DNA作用,释放出一段富G的DNA序列;此富G的DNA序列可形成G-三链体(G-triplex,G3),可结合硫黄素T(ThT)形成G3/ThT复合物,产生强的荧光信号。通过测定体系中荧光的强度,实现对目标DNA的定量检测,检出限为21 nmol/L。该方法不需要标记荧光染料,成本低,操作简单,灵敏高,在DNA定量检测领域有良好的应用前景。 展开更多
关键词 DNA检测 荧光分析 非标记 g- 硫黄素T
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