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G蛋白耦联受体55拮抗剂CID16020046在小鼠肾脏纤维化中的作用
1
作者 张宇 白咪 +5 位作者 何佳 徐爽 郭钰贤 曾润鑫 龙广凤 张爱华 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期646-656,共11页
目的探讨G蛋白耦联受体55(G protein-coupled receptor 55,GPR55)拮抗剂CID16020046在小鼠肾脏纤维化中的作用,为肾脏纤维化治疗提供新的方法和思路。方法(1)在体外大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)中分别过表达GPR55和使用GPR55拮抗剂CID16... 目的探讨G蛋白耦联受体55(G protein-coupled receptor 55,GPR55)拮抗剂CID16020046在小鼠肾脏纤维化中的作用,为肾脏纤维化治疗提供新的方法和思路。方法(1)在体外大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)中分别过表达GPR55和使用GPR55拮抗剂CID16020046,同时使用转化生长因子β1(TGF-β1)刺激,观察纤维化相关因子和炎性因子的表达。(2)体内构建单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)小鼠肾脏纤维化模型,将8周龄雄性C57BL/6J小鼠(20~25 g)按照随机数字表法随机分为3组:假手术组(Sham组,n=6)、造模组(UUO组,n=7)、造模+CID16020046药物组(UUO+CID组,n=8),UUO+CID组在造模前1 d、造模当日和术后每日均腹腔注射药物CID16020046(10 mg/kg),每日1次,Sham组和UUO组均腹腔注射对应剂量的0.9%生理盐水。UUO术后7 d处死小鼠取材,检测其肾功能指标、肝脏转氨酶、心肌标志物,Western印迹和实时荧光定量PCR检测肾脏纤维化相关因子和炎性因子的表达,免疫组化、天狼猩红染色、Masson三色染色检测肾组织的病理改变。结果(1)使用TGF-β1刺激NRK-49F细胞后,GPR55 mRNA和蛋白表达量均明显增加(均P<0.05);TGF-β1组和TGF-β1+GPR55过表达质粒组纤维化相关因子纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和炎性因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子αmRNA表达的差异均无统计学意义(均P>0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+CID组纤维化相关因子α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)蛋白及CollagenⅠ、α-SMA mRNA表达均较低(均P<0.05)。(2)与Sham组比较,UUO组GPR55 mRNA和蛋白表达均较高(均P<0.05)。与UUO组比较,UUO+CID组血清肌酐较低(P<0.05),两组血尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶的差异均无统计学意义(均P>0.05)。与UUO组比较,UUO+CID组肾组织纤维化相关因子纤连蛋白、CollagenⅠ、Vimentin蛋白及纤连蛋白、CollagenⅠ、Ⅲ型胶原蛋白、α-SMA mRNA表� 展开更多
关键词 肾功能不全 慢性 受体 g-蛋白偶联 纤维化 g蛋白耦联受体55 CID16020046
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孤儿G蛋白偶联受体55在糖尿病性胃轻瘫小鼠发病中的作用 被引量：3
2
作者 林旭红 魏丹丹 +6 位作者 王慧超 王斌 白春洋 王亚强 李国恩 李荟苹 任学群 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期332-340,共9页
本文旨在探讨孤儿G蛋白偶联受体55(GPR55)在糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DG)小鼠发病中的作用。采用链脲菌素(streptozotocin,STZ,65 mg/kg)腹腔注射制备小鼠DG模型。观察造模后小鼠体重及血糖含量变化,同时测定胃电图和酚... 本文旨在探讨孤儿G蛋白偶联受体55(GPR55)在糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DG)小鼠发病中的作用。采用链脲菌素(streptozotocin,STZ,65 mg/kg)腹腔注射制备小鼠DG模型。观察造模后小鼠体重及血糖含量变化,同时测定胃电图和酚红排空功能,用放射免疫分析法测定血浆胃动素(motilin,MTL)、胃泌素(gastrin,GAS)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、生长抑素(somatostatin,SS)水平,用Real-time PCR和Western blot测定胃组织GPR55表达,用免疫组织化学法观察胃组织GPR55分布,并观察GPR55激动剂溶血磷脂酰肌醇(lysophosphatidylinositol,LPI)对DG的治疗作用。结果显示,STZ组小鼠血糖于STZ注射后第4周末升至(26.6±1.2)mmol/L,体重明显减轻,胃电图慢波振幅下降,胃排空能力明显降低,而腹腔注射LPI可逆转STZ导致的上述变化;STZ小鼠血浆中MTL、GAS明显低于对照组(P<0.01),而SS、VIP明显升高(P<0.01),LPI可拮抗STZ对四种激素的影响;GPR55存在于正常小鼠胃组织,在DG时其表达明显上调,LPI不影响正常小鼠GPR55表达和分布,但可拮抗STZ对GPR55表达和分布的影响。以上结果提示,GPR55参与调节DG胃运动,可以作为DG治疗的新靶点;GPR55激动剂LPI对STZ导致的DG小鼠有保护作用,该作用机制与GPR55表达的改变、胃肠激素的调整有关。 展开更多
关键词 g蛋白偶联受体55 糖尿病性胃轻瘫 溶血磷脂酰肌醇
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新型大麻制剂O-1602和大麻二酚对LPS导致的啮齿动物小肠运动紊乱的影响 被引量：1
3
作者 林旭红 李永渝 +5 位作者 冯雅静 曹明华 徐菁 李琨 冯佳燕 余良英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1082-1090,共9页
目的:通过离体及在体实验,观测2种新型大麻类制剂O-1602和大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的啮齿动物小肠运动紊乱的影响,并探讨其可能的机制。方法:LPS腹腔注射复制小鼠小肠运动紊乱模型,碳末悬液灌胃评估小肠排推功能,Western blottin... 目的:通过离体及在体实验,观测2种新型大麻类制剂O-1602和大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的啮齿动物小肠运动紊乱的影响,并探讨其可能的机制。方法:LPS腹腔注射复制小鼠小肠运动紊乱模型,碳末悬液灌胃评估小肠排推功能,Western blotting测定回肠G蛋白偶联受体55(GPR55)的表达,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。LPS与大鼠、小鼠回肠肌条共孵育制备离体动力紊乱模型,应用器官浴槽采集自发性以及10 Hz电刺激时收缩活动的变化;细胞内微电极技术记录平滑肌细胞膜电位变化;定磷法测定平滑肌组织Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase)活性变化。结果:在体实验:LPS引起动物明显的炎症表现及小肠运动紊乱(P<0.01),CBD改善小肠运动(P<0.05),并降低IL-6水平(P<0.01)和GPR55表达(P<0.01)。离体实验:O-1602和CBD在体外选择性逆转LPS诱导的平滑肌自发性及电刺激时的收缩紊乱(P<0.05或P<0.01),但二者不影响生理及病理状态下平滑肌细胞膜电位水平,CBD预处理降低LPS诱导的平滑肌组织Ca2+-ATPase活性升高的效应(P<0.05)。结论:在体内CBD通过减轻炎症程度,降低GPR55表达水平,改善LPS导致的小肠运动紊乱;在体外O-1602和CBD可一定程度逆转LPS导致的大、小鼠小肠运动功能紊乱,其机制不是通过改变平滑肌细胞膜电位实现的,而可能与其调节平滑肌组织Ca2+-ATPase活性有关。 展开更多
关键词 O-1602 大麻二酚 脂多糖类 g蛋白偶联受体55
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