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磷酸化FOXO1对高糖刺激的人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响
被引量：
3
1
作者
朱琳
刘青娟
+5 位作者
徐宁
要红叶
邢玲玲
李凡
刘淑霞
郝军
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期2001-2005,共5页
目的:研究叉头框蛋白O1(FOXO1)表达和磷酸化过程对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞株HKC,给予高糖刺激后免疫荧光及Western blotting检测总FOXO1、磷酸化FOXO1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1...
目的:研究叉头框蛋白O1(FOXO1)表达和磷酸化过程对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞株HKC,给予高糖刺激后免疫荧光及Western blotting检测总FOXO1、磷酸化FOXO1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的表达,油红O染色测定细胞内脂质沉积;构建野生型和磷酸化位点突变型FOXO1质粒,转染入HKC细胞后给予高糖刺激,采用免疫荧光、Western blotting和油红O染色确定FOXO1磷酸化位点突变对肾小管上皮细胞脂质代谢的影响。结果:高糖刺激HKC细胞48 h后,总FOXO1在正常糖组和高糖组的表达未见差异,而磷酸化FOXO1及SREBP-1表达明显上调,细胞内脂滴显著增加。将构建的野生型FOXO1质粒转染人细胞后,上调了总FOXO1和磷酸化FOXO1的表达,增加了SREBP-1表达和细胞内脂滴含量;而磷酸化位点突变的FOXO1质粒避免了高糖诱导引起的SREBP-1上调和细胞内脂质沉积。结论:磷酸化FOXO1参与了高糖诱导的肾小管上皮细胞SREBP-1上调和细胞内脂质聚集;磷酸化位点的突变可避免高糖引起的肾小管上皮细胞SREBP-1上调和脂质沉积。
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关键词
糖尿病肾病
高糖
HKC细胞
foxo
1
蛋白
脂质沉积
下载PDF
职称材料
miR-365通过靶向FoxO1抑制胃癌细胞的增殖
被引量：
1
2
作者
陈路
胡爽
+3 位作者
张慧敏
王君
黄凤
王志文
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2021年第2期109-116,共8页
为了探究miR-365对胃癌细胞活力、增殖的影响及作用机制,使用RT-qPCR技术检测胃癌细胞(AGS和MGC80-3)与正常胃上皮细胞(GES-1)中miR-365的内源性表达水平及临床样本中胃癌组织和癌旁组织中miR-365的内源性表达水平;使用CCK-8检测细胞增...
为了探究miR-365对胃癌细胞活力、增殖的影响及作用机制,使用RT-qPCR技术检测胃癌细胞(AGS和MGC80-3)与正常胃上皮细胞(GES-1)中miR-365的内源性表达水平及临床样本中胃癌组织和癌旁组织中miR-365的内源性表达水平;使用CCK-8检测细胞增殖活力;使用RT-qPCR及Western-blot检测周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、CDK6、周期蛋白D1(cyclinD1)和FoxO1的mRNA及蛋白质水平;采用荧光素酶报告实验验证miR-365与FoxO13´-UTR的结合能力。实验结果显示,与正常胃上皮细胞相比,两种胃癌细胞内miR-365的表达下调;转染miR-365模拟物后,胃癌细胞的增殖活力下降,cyclinD1、CDK4、CDK6及FoxO1的mRNA和蛋白质水平均下调;miR-365可结合FoxO1的3´-UTR,进而抑制FoxO1蛋白的表达;与癌旁组织比较,癌组织中miR-365的表达降低。以上结果表明,miR-365可通过靶向结合FoxO1的3´-UTR抑制FoxO1蛋白表达,进而抑制胃癌细胞的增殖。
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关键词
miR-365
胃癌
细胞增殖
foxo
1
蛋白
细胞周期相关
蛋白
质
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职称材料
PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应中的作用及机制
被引量：
1
3
作者
孙雪皎
陈琳
+3 位作者
陈慧
黄尤
刘琼霞
宁宇
《吉林医学》
CAS
2022年第3期587-588,共2页
目的:通过应用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002及FoxO1-siRNA的作用,明确PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞细胞株炎性反应中的重要作用及机制。方法:以U937细胞为研究对象,分为对照组、烟草烟雾提取物(CSE)组、PI3K抑制...
目的:通过应用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002及FoxO1-siRNA的作用,明确PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞细胞株炎性反应中的重要作用及机制。方法:以U937细胞为研究对象,分为对照组、烟草烟雾提取物(CSE)组、PI3K抑制剂组。应用Brdu法确定实验中CSE的合适浓度。PI3K抑制剂组的细胞给予LY294002预孵育2 h后给予CSE刺激过夜,之后给予TNF-α刺激过夜;CSE组不应用LY294002,其余同抑制剂组;对照组仅给予肿瘤坏死因子(TNF)-α。应用ELISA检测细胞培养上清液中IL-8的水平,应用Western印迹检测PI3K/Akt通路关键蛋白Akt、p-Akt蛋白以及FoxO1及p-FoxO1蛋白的表达。结果:CSE组的IL-8水平明显高于PI3K抑制剂组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PI3K抑制剂组的p-Akt表达较CSE组减弱,但较对照组增强,p-FoxO1表达较CSE组增强,但较对照组减弱,差异有统计学意义(P<0.05),Akt及FoxO1表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PI3K抑制剂LY294002可明显减弱通路关键蛋白p-Akt的表达,增强p-FoxO1的表达,进而明显减弱烟草烟雾暴露下单核细胞的炎性反应,PI3K/Akt信号通路活性及其下游FoxO1蛋白的表达与烟草烟雾暴露的单核细胞炎性反应表达有关。
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关键词
PI3K/AKT抑制剂
foxo
1
蛋白
烟草烟雾提取物
炎性反应
慢性阻塞性肺疾病
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职称材料
题名
磷酸化FOXO1对高糖刺激的人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响
被引量：
3
1
作者
朱琳
刘青娟
徐宁
要红叶
邢玲玲
李凡
刘淑霞
郝军
机构
河北医科大学第三医院肌电图室
河北医科大学病理学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第11期2001-2005,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81100517)
河北省自然科学基金资助项目(No.H2012206008)
文摘
目的:研究叉头框蛋白O1(FOXO1)表达和磷酸化过程对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响。方法:体外培养人肾小管上皮细胞株HKC,给予高糖刺激后免疫荧光及Western blotting检测总FOXO1、磷酸化FOXO1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的表达,油红O染色测定细胞内脂质沉积;构建野生型和磷酸化位点突变型FOXO1质粒,转染入HKC细胞后给予高糖刺激,采用免疫荧光、Western blotting和油红O染色确定FOXO1磷酸化位点突变对肾小管上皮细胞脂质代谢的影响。结果:高糖刺激HKC细胞48 h后,总FOXO1在正常糖组和高糖组的表达未见差异,而磷酸化FOXO1及SREBP-1表达明显上调,细胞内脂滴显著增加。将构建的野生型FOXO1质粒转染人细胞后,上调了总FOXO1和磷酸化FOXO1的表达,增加了SREBP-1表达和细胞内脂滴含量;而磷酸化位点突变的FOXO1质粒避免了高糖诱导引起的SREBP-1上调和细胞内脂质沉积。结论:磷酸化FOXO1参与了高糖诱导的肾小管上皮细胞SREBP-1上调和细胞内脂质聚集;磷酸化位点的突变可避免高糖引起的肾小管上皮细胞SREBP-1上调和脂质沉积。
关键词
糖尿病肾病
高糖
HKC细胞
foxo
1
蛋白
脂质沉积
Keywords
Diabetic nephropathies
High glucose
HKC cells
foxo
1
protein
Lipid accumulation
分类号
R692.6 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
miR-365通过靶向FoxO1抑制胃癌细胞的增殖
被引量：
1
2
作者
陈路
胡爽
张慧敏
王君
黄凤
王志文
机构
岳阳职业技术学院慢性病重点实验室
湖南师范大学附属岳阳医院/岳阳市二人民医院
武汉科技大学生命科学与健康学院
出处
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2021年第2期109-116,共8页
基金
湖南省自然科学基金科教联合项目(2020JJ707)
岳阳市社科联基金项目(岳社科2019x93)。
文摘
为了探究miR-365对胃癌细胞活力、增殖的影响及作用机制,使用RT-qPCR技术检测胃癌细胞(AGS和MGC80-3)与正常胃上皮细胞(GES-1)中miR-365的内源性表达水平及临床样本中胃癌组织和癌旁组织中miR-365的内源性表达水平;使用CCK-8检测细胞增殖活力;使用RT-qPCR及Western-blot检测周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、CDK6、周期蛋白D1(cyclinD1)和FoxO1的mRNA及蛋白质水平;采用荧光素酶报告实验验证miR-365与FoxO13´-UTR的结合能力。实验结果显示,与正常胃上皮细胞相比,两种胃癌细胞内miR-365的表达下调;转染miR-365模拟物后,胃癌细胞的增殖活力下降,cyclinD1、CDK4、CDK6及FoxO1的mRNA和蛋白质水平均下调;miR-365可结合FoxO1的3´-UTR,进而抑制FoxO1蛋白的表达;与癌旁组织比较,癌组织中miR-365的表达降低。以上结果表明,miR-365可通过靶向结合FoxO1的3´-UTR抑制FoxO1蛋白表达,进而抑制胃癌细胞的增殖。
关键词
miR-365
胃癌
细胞增殖
foxo
1
蛋白
细胞周期相关
蛋白
质
Keywords
miR-365
gastric cancer
cell proliferation
foxo
1
cell cycle related proteins
分类号
Q25 [生物学—细胞生物学]
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应中的作用及机制
被引量：
1
3
作者
孙雪皎
陈琳
陈慧
黄尤
刘琼霞
宁宇
机构
柳州市人民医院呼吸与危重症医学科
出处
《吉林医学》
CAS
2022年第3期587-588,共2页
基金
柳州市科技计划项目[项目编号:2018BJ10507]。
文摘
目的:通过应用PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002及FoxO1-siRNA的作用,明确PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞细胞株炎性反应中的重要作用及机制。方法:以U937细胞为研究对象,分为对照组、烟草烟雾提取物(CSE)组、PI3K抑制剂组。应用Brdu法确定实验中CSE的合适浓度。PI3K抑制剂组的细胞给予LY294002预孵育2 h后给予CSE刺激过夜,之后给予TNF-α刺激过夜;CSE组不应用LY294002,其余同抑制剂组;对照组仅给予肿瘤坏死因子(TNF)-α。应用ELISA检测细胞培养上清液中IL-8的水平,应用Western印迹检测PI3K/Akt通路关键蛋白Akt、p-Akt蛋白以及FoxO1及p-FoxO1蛋白的表达。结果:CSE组的IL-8水平明显高于PI3K抑制剂组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PI3K抑制剂组的p-Akt表达较CSE组减弱,但较对照组增强,p-FoxO1表达较CSE组增强,但较对照组减弱,差异有统计学意义(P<0.05),Akt及FoxO1表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PI3K抑制剂LY294002可明显减弱通路关键蛋白p-Akt的表达,增强p-FoxO1的表达,进而明显减弱烟草烟雾暴露下单核细胞的炎性反应,PI3K/Akt信号通路活性及其下游FoxO1蛋白的表达与烟草烟雾暴露的单核细胞炎性反应表达有关。
关键词
PI3K/AKT抑制剂
foxo
1
蛋白
烟草烟雾提取物
炎性反应
慢性阻塞性肺疾病
分类号
R563.9 [医药卫生—呼吸系统]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
磷酸化FOXO1对高糖刺激的人肾小管上皮细胞脂质沉积的影响
朱琳
刘青娟
徐宁
要红叶
邢玲玲
李凡
刘淑霞
郝军
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
3
下载PDF
职称材料
2
miR-365通过靶向FoxO1抑制胃癌细胞的增殖
陈路
胡爽
张慧敏
王君
黄凤
王志文
《生命科学研究》
CAS
CSCD
2021
1
下载PDF
职称材料
3
PI3K/Akt-FoxO1信号通路在烟草烟雾暴露下单核细胞炎性反应中的作用及机制
孙雪皎
陈琳
陈慧
黄尤
刘琼霞
宁宇
《吉林医学》
CAS
2022
1
下载PDF
职称材料
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