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Fowlicidins及其功能研究 被引量：2
1
作者 史春林 石星明 +3 位作者 王云峰 王玫 孙妍 童光志 《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期54-59,共6页
Fowlicidins是鸡体内的一类新型的Cathelicidin抗菌肽,其前体分子的氨基端含有一个高度保守的cathelin前片段,而羧基端的氨基酸序列具有特异性。它们有广谱的抗菌活性,具有避免抗菌剂耐药性的潜能,是理想的候选抗菌药物。
关键词 CATHELICIDIN fowlicidin 抗菌活性 重组表达
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鸡源抗菌肽Fowlicidin-3表达条件的优化及生物学特性和体内疗效研究 被引量：11
2
作者 李荣荣 和祯泉 +2 位作者 吕英军 鲍恩东 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期113-118,共6页
对重组X-33毕赤酵母菌株表达的鸡源Fowlicidin-3抗菌肽的条件进行优化,并研究了表达产物的生物学活性。结果表明:当含有重组酵母菌的BMGY培养基A600值达到5～6时,转接pH 6.0的BMMY培养基,每24 h补加2%甲醇,29℃条件下培养72 h,重组鸡源F... 对重组X-33毕赤酵母菌株表达的鸡源Fowlicidin-3抗菌肽的条件进行优化,并研究了表达产物的生物学活性。结果表明:当含有重组酵母菌的BMGY培养基A600值达到5～6时,转接pH 6.0的BMMY培养基,每24 h补加2%甲醇,29℃条件下培养72 h,重组鸡源Fowlicidin-3抗菌肽获得高效表达,含量达到170 mg.L-1。采用琼脂孔扩散法对该抗菌肽的热稳定性、酸碱稳定性等特性进行分析,结果表明:鸡源Fowlicidin-3抗菌肽具有较强的热、酸稳定性;对致病性大肠杆菌K99、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌CowanⅠ的最小抑菌浓度分别为3.12、1.56和1.56μg.mL-1。在对大肠杆菌O1感染雏鸡的体内疗效试验中,鸡源Fowlicidin-3显示出了较好的预防和治疗效果。 展开更多
关键词 fowlicidin-3 表达优化 生物学特性 X-33 体内疗效
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鸡源抗菌肽Folicidin-3在毕赤酵母中的分泌表达及其生物学活性鉴定 被引量：7
3
作者 李荣荣 和祯泉 +1 位作者 鲍恩东 陈溥言 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期4529-4535,共7页
【目的】研究鸡源重组抗菌肽Fowlicidin-3的生物学特性,并为重组抗菌肽在临床上的应用奠定基础。【方法】根据抗菌肽数据库中Fowlicidin-3的氨基酸序列,选用毕赤酵母的偏嗜密码子,设计抗菌肽的基因,通过SOE法合成得到全长为114bp的Fowli... 【目的】研究鸡源重组抗菌肽Fowlicidin-3的生物学特性,并为重组抗菌肽在临床上的应用奠定基础。【方法】根据抗菌肽数据库中Fowlicidin-3的氨基酸序列,选用毕赤酵母的偏嗜密码子,设计抗菌肽的基因,通过SOE法合成得到全长为114bp的Fowlicidin-3基因。将Fowlicidin-3基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-F。将线性化重组表达载体pPICZα-A-F通过电击法转入毕赤酵母宿主菌X-33中,构建分泌型重组酵母表达菌株。【结果】获得分泌型重组酵母表达菌株,Fowlicidin-3多肽表达量达到170mg·L-1,对致病性大肠杆菌K99和鸡白痢沙门氏菌显示出较好的抑制活性,抑菌圈直径分别为1.9cm和2.2cm。优化表达条件结果显示,转接到BMMY培养基中(pH6.0),每24h补加2%甲醇,29℃培养72h后,Fowlicidin-3抗菌肽获得高效表达。【结论】成功构建分泌型重组酵母表达菌株,并获得了具备高效表达能力和较好生物学活性的抗菌肽。 展开更多
关键词 fowlicidin-3 抗菌肽 SOE法 毕赤酵母 抑菌试验
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抗菌肽Folicidin-3在大肠杆菌中融合表达及抑菌活性 被引量：6
4
作者 和祯泉 刘天健 +1 位作者 吕英军 鲍恩东 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期1-6,共6页
根据抗菌肽Fowlicidin-3氨基酸序列,选用大肠杆菌(Escherichia coli)偏嗜密码子,设计合成117bp的Fowli-cidin-3a和102bp的Fowlicidin-3b基因。将这2个基因克隆到突变载体,构建出表达载体pET-32a-C-Fowlicidin-3a和pET-32a-Tev-C-Fowlici... 根据抗菌肽Fowlicidin-3氨基酸序列,选用大肠杆菌(Escherichia coli)偏嗜密码子,设计合成117bp的Fowli-cidin-3a和102bp的Fowlicidin-3b基因。将这2个基因克隆到突变载体,构建出表达载体pET-32a-C-Fowlicidin-3a和pET-32a-Tev-C-Fowlicidin-3b,分别转化至E.coli BL21Rosetta-2中,IPTG诱导表达融合蛋白Trx-Fowlicidin-3a和Trx-Fowlicidin-3b并进行纯化。结果表明:肠激酶裂解Trx-Fowlicidin-3a和Tev酶裂解Trx-Fowlicidin-3b效率都较高,获得的裂解液都对指示菌E.coli DH5α显示出抑菌活性。Fowlicidin-3a和Fowlicidin-3b对指示菌E.coli DH5α的最小抑菌浓度均为2μg.mL-1。 展开更多
关键词 fowlicidin-3 抗菌肽 融合表达 抑菌试验
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鸡源抗菌肽Fowlicidin-2在大肠杆菌中的重组表达及其生物学活性鉴定 被引量：1
5
作者 许文杉 冯兴军 +2 位作者 李晓冲 邢丽维 柳迪 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期775-782,共8页
【目的】对抗菌肽Fowlicidin-2基因进行克隆与表达,并鉴定其生物学活性。【方法】根据抗菌肽Fowlicidin-2氨基酸序列,依照大肠杆菌(E.coli)密码子的偏爱性,人工设计合成其编码基因。与质粒pET-32a连接,构建重组表达载体,转化表达宿主菌E... 【目的】对抗菌肽Fowlicidin-2基因进行克隆与表达,并鉴定其生物学活性。【方法】根据抗菌肽Fowlicidin-2氨基酸序列,依照大肠杆菌(E.coli)密码子的偏爱性,人工设计合成其编码基因。与质粒pET-32a连接,构建重组表达载体,转化表达宿主菌E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,融合蛋白经溴化氰裂解后进行纯化,测定重组抗菌肽的抑菌活性。【结果】Fowlicidin-2融合蛋白以包涵体形式表达,经溴化氰裂解后,成功释放出Fowlicidin-2,获得的重组Fowlicidin-2对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有明显的抑菌效果。【结论】实现了抗菌肽Fowlicidin-2的重组表达,为抗菌肽的重组量化制备提供了理论基础与技术手段。 展开更多
关键词 抗菌肽 fowlicidin-2 融合表达 抑菌活性
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抗菌肽Fowlicidin-3在枯草芽孢杆菌中的表达及活性研究 被引量：2
6
作者 曲小露 张福欣 +1 位作者 王述柏 刘晓东 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 北大核心 2017年第9期143-146,共4页
为了在枯草芽孢杆菌中表达具有生物活性的Fowlicidin-3,试验采用人工合成的方法合成小分子泛素样蛋白(SUMO)-Fowlicidin-3,将构建的表达质粒p HT01转化至枯草芽孢杆菌WB800N中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后得到高效表达,... 为了在枯草芽孢杆菌中表达具有生物活性的Fowlicidin-3,试验采用人工合成的方法合成小分子泛素样蛋白(SUMO)-Fowlicidin-3,将构建的表达质粒p HT01转化至枯草芽孢杆菌WB800N中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后得到高效表达,用Ni柱亲和层析纯化后,再经SUMO酶切割,通过蛋白质印迹(Western blot)检验Fowlicidin-3在枯草芽孢杆菌中的分泌表达及酶切情况;采用稀释法抗菌试验检测表达产物的抑菌活性。结果表明:重组Fowlicidin-3在枯草芽孢杆菌中得到高效表达,对6种临床分离菌株的最小抑菌浓度(MIC)在12~16μg/m L之间。说明Fowlicidin-3具有潜在利用价值,可为下一步临床试验提供理论基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗菌肽fowlicidin-3 融合蛋白 高效表达 分离纯化 活性鉴定
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