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荧光定量PCR检测脊柱结核伴截瘫患者手术前后外周血结核杆菌DNA含量及临床意义 被引量:14
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作者 张宏其 肖勋刚 +2 位作者 刘少华 陈凌强 郭超峰 《中国医学工程》 2007年第7期548-551,554,共5页
目的探讨脊柱结核并截瘫患者提早手术的安全性。方法应用荧光定量聚合酶链反应技术,对22例一般情况稳定,术前抗痨治疗小于2周,红细胞沉降率(ESR)未降至正常且伴有截瘫或截瘫呈进行性加重的脊柱结核患者,分别在手术前1 d及术后第2天采集... 目的探讨脊柱结核并截瘫患者提早手术的安全性。方法应用荧光定量聚合酶链反应技术,对22例一般情况稳定,术前抗痨治疗小于2周,红细胞沉降率(ESR)未降至正常且伴有截瘫或截瘫呈进行性加重的脊柱结核患者,分别在手术前1 d及术后第2天采集外周血标本。通过提取DNA、PCR扩增,进行结核分支杆菌的DNA荧光定量检测。结果该组脊柱结核手术患者术前的外周血中结核分支杆菌DNA阳性率为9/22(40.9%),术后患者的外周血中结核分支杆菌DNA阳性率分别为10/22(45.4%)。对该组手术患者手术前、后外周血结核分支杆菌DNA含量进行统计学分析,t=0.702,P=0.494,按α=0.05水准,结果无统计学意义,提示该组手术患者手术前、后外周血结核分支杆菌DNA含量无差别(P>0.05)。结论手术对这类脊柱结核患者结核杆菌在体内播散的程度没有明显影响;对于这类脊柱结核患者,尽管术前ESR未降至正常,且抗痨时间小于2周,在完善相关术前准备、无其他手术禁忌的情况下,提早手术治疗,是安全、可行的。 展开更多
关键词 脊柱结核 荧光定量聚合酶链反应 DNA
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荧光定量PCR方法的原理及其在研究病毒在动物体内分布规律的应用 被引量:10
2
作者 高均伟 郭延锋 +4 位作者 王三虎 潘耀谦 王丽荣 朱国坡 刘兴友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期63-65,共3页
研究病毒在动物体内的分布情况,主要是为了掌握病毒在动物体内的生长繁殖规律,找到病毒的靶细胞和靶器官,为进一步研究其致病机理和防制技术提供试验依据。荧光定量PCR法具有定量准确、特异性强、自动化程度高等特点,是研究病毒分布规... 研究病毒在动物体内的分布情况,主要是为了掌握病毒在动物体内的生长繁殖规律,找到病毒的靶细胞和靶器官,为进一步研究其致病机理和防制技术提供试验依据。荧光定量PCR法具有定量准确、特异性强、自动化程度高等特点,是研究病毒分布规律的主要方法之一,作者综述了此方法的原理及应用。 展开更多
关键词 荧光定量pcr 病毒 分布规律 原理 应用
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515例妇女高危型HPV感染检测结果分析 被引量:12
3
作者 李世霞 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期954-956,共3页
目的:了解高危型人乳头瘤病毒(HPV)在妇女中的感染情况方法:将健康体检妇女以年龄40岁为界分为2个实验组:低年龄组(<40岁)和高年龄组(≥40岁),应用高危型人乳头瘤病毒多重核酸扩增荧光定量检测技术对5 1 5例健康体检妇女进行高危型HP... 目的:了解高危型人乳头瘤病毒(HPV)在妇女中的感染情况方法:将健康体检妇女以年龄40岁为界分为2个实验组:低年龄组(<40岁)和高年龄组(≥40岁),应用高危型人乳头瘤病毒多重核酸扩增荧光定量检测技术对5 1 5例健康体检妇女进行高危型HPV感染检测,比较低年龄组和高年龄组之间高危型HPV感染情况,对结果进行统计学分析。结果:515例健康体检妇女中,高危型HPV感染总阳性率为8.54%(44/515),低年龄组和高年龄组高危型HPV感染率分别为3.45%(3/87)和9.58%(41/428),高年龄组高危型HPV感染阳性率高于低年龄组(P<0.05),高危型HPV感染阳性率在40岁以上妇女感染率较高结论:40岁以上妇女为高危型HPV感染高发人群,加强高危型HPV检测对降低该人群宫颈癌的发生率和致死率至关重要。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 荧光定量pcr 感染 年龄
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牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:11
4
作者 李建 高航飞 +7 位作者 安维雪 牛同州 赵永春 遇培之 满都拉图 乌力吉那仁 王建国 申之义 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1059-1064,共6页
本研究旨在建立一种快速检测牛支原体(Mycoplasma bovis)的实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中收录的牛支原体OPPD/F基因序列(登录号:AF130119),利用Primer 5.0软件设计特异性引物与TaqMan探针,以重组质粒作为绝对定量模板,构建检... 本研究旨在建立一种快速检测牛支原体(Mycoplasma bovis)的实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中收录的牛支原体OPPD/F基因序列(登录号:AF130119),利用Primer 5.0软件设计特异性引物与TaqMan探针,以重组质粒作为绝对定量模板,构建检测牛支原体的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。结果显示该检测方法线性关系良好,标准曲线的相关系数R2=0.994,扩增效率E=1.280。荧光定量PCR法检测的敏感性是常规PCR的10倍;特异性良好,检测9种相关细菌和病毒均为阴性;重复性好,组内及组间样本检测Ct值均小于2%。牛支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法较之于常规PCR方法有快速、特异性强、敏感性高、稳定性好的优点。 展开更多
关键词 牛支原体 0PPD/F基因 荧光定量pcr
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RCS大鼠自然病程中视网膜边缘生发区细胞增殖及Shh/Ptc信号途径改变的观察 被引量:9
5
作者 蹇骞 徐海伟 +1 位作者 谢汉平 阴正勤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期997-1001,共5页
目的观察遗传性视网膜色素变性RCS大鼠病程发展中视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径改变及其与该区细胞增殖能力变化的关系。方法RCS大鼠按出生后病程变化分为15、30、60、90 d 4组(免疫组化每组4只,PCR每组3只),以同龄含色素的正常大鼠(... 目的观察遗传性视网膜色素变性RCS大鼠病程发展中视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径改变及其与该区细胞增殖能力变化的关系。方法RCS大鼠按出生后病程变化分为15、30、60、90 d 4组(免疫组化每组4只,PCR每组3只),以同龄含色素的正常大鼠(Long-Evan’s大鼠)作为正常对照。视网膜组织切片DAPI荧光染色观察外核层(outernuclear layer,ONL)厚度的变化;视网膜细胞增殖标记Ki67免疫荧光染色观察视网膜边缘生发区细胞增殖能力的变化;荧光定量PCR检测视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径中关键分子Shh、Ptc1、Smo和Gli1 mRNA表达水平。结果①RCS大鼠从第15天开始,随着年龄的增加视网膜ONL逐渐变薄,第90天ONL几乎消失。②正常对照组大鼠视网膜边缘生发区Ki67阳性细胞较少,与同龄正常对照组大鼠相比,出生30、60 d组大鼠Ki67阳性细胞数均显著增多(P<0.05);大鼠各年龄组间比较,60 d组Ki67阳性细胞数明显增多(P<0.01)。③60 d组大鼠视网膜边缘生发区Shh、Ptc1、Smo和Gli1mRNA表达水平明显上调。结论出生后60 d RCS大鼠视网膜边缘生发区Shh/Ptc信号途径的激活,可能刺激了该部位细胞短期的增殖。 展开更多
关键词 视网膜色素变性 视网膜干细胞 细胞增殖 shh/Ptc信号途径 荧光定量pcr
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外周血表皮生长因子受体和LUNXmRNA表达对肺癌微转移诊断的价值 被引量:8
6
作者 宋萍 李坚 +1 位作者 郑金旭 殷凯生 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期173-176,共4页
目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者和肺良性病变患者外周血表皮生长因子受体(EGFR) mRNA和LUNX mRNA表达情况,探讨其在肺癌微转移诊断中的价值。方法:采用荧光定量PCR方法检测42例肺癌患者和18例肺良性疾病患者外周血EGFR mRNA和LUNX m... 目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者和肺良性病变患者外周血表皮生长因子受体(EGFR) mRNA和LUNX mRNA表达情况,探讨其在肺癌微转移诊断中的价值。方法:采用荧光定量PCR方法检测42例肺癌患者和18例肺良性疾病患者外周血EGFR mRNA和LUNX mRNA表达。结果:42例NSCLC患者EGFR mRNA表达的阳性率为45.2%(19/42),LUNX mRNA表达的阳性率为40.5%(17/42),两者联合检测阳性率可提高到64.3%。良性肺部疾病患者均为阴性。结论:EGFR mRNA和LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的分子标志物,联合检测可提高外周血癌细胞的检出率。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 LUNX 非小细胞肺癌 微转移 荧光定量pcr
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真菌免疫调节蛋白基因LZ-8过表达载体的构建及转化灵芝原生质体的研究 被引量:7
7
作者 孙墨可 张曼 +3 位作者 田娟 李晓薇 李海燕 李玉 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1625-1631,共7页
灵芝Ganoderma lingzhi是我国著名的药用真菌。但是,作为一种营养和保健价值都非常高的大型担子菌,灵芝还缺乏完善的转基因方法和安全转基因体系。本研究建立了免疫调节蛋白基因的过表达系统,并利用真菌特异性启动子GPD、终止子NOS和目... 灵芝Ganoderma lingzhi是我国著名的药用真菌。但是,作为一种营养和保健价值都非常高的大型担子菌,灵芝还缺乏完善的转基因方法和安全转基因体系。本研究建立了免疫调节蛋白基因的过表达系统,并利用真菌特异性启动子GPD、终止子NOS和目的基因LZ-8构建真菌特异性双T-DNA表达载体p SB130NG-LZ8;利用溶壁酶提取灵芝原生质体,并用FDA染色法检测灵芝原生质体活性,原生质体成活率约为80%。通过PEG转化法对灵芝原生质体成功进行了转化,转化得到的原生质体在带有潮霉素抗性平板上长出,转化率为3–4/μgpSB130NG-LZ8+107个原生质体。转化子通过PCR检测和荧光定量PCR检测,获得LZ-8在灵芝中的过表达。 展开更多
关键词 灵芝 双T-DNA载体 目的基因LZ-8 PEG转化法 荧光定量pcr
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阴道加德纳菌、Uu、Mh、CT在BV感染进程及诊断价值 被引量:7
8
作者 李桂军 姚莉 +2 位作者 张红霞 刘霞 周建娟 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第9期2105-2107,共3页
目的:探讨阴道加德纳菌、Uu、Mh、CT在引起和加速BV感染中的作用及其与Am sel结合Nugent法诊断BV一致性。方法:Am sel、Nugent、培养及PCR方法,对102例BV患者及125例对照组阴道分泌物阴道加德纳菌、Uu、Mh、CT及线索细胞阳性比率测定,... 目的:探讨阴道加德纳菌、Uu、Mh、CT在引起和加速BV感染中的作用及其与Am sel结合Nugent法诊断BV一致性。方法:Am sel、Nugent、培养及PCR方法,对102例BV患者及125例对照组阴道分泌物阴道加德纳菌、Uu、Mh、CT及线索细胞阳性比率测定,统计学方法对结果进行分析。结果:阴道加德纳菌、Uu、Mh、CT在BV组和对照组间检出率存在差异。Uu、Mh、阴道加德纳菌是引起和加速BV感染进程的重要因素。CT在过渡态时感染机会增加。线索细胞阳性比率随BV感染加重而相应升高。阴道加德纳菌对BV诊断的灵敏度较低,但阴道加德纳菌+Mh、线索细胞阳性比率具有较好的灵敏度。结论:阴道加德纳菌、Uu、Mh在引起和加速BV进程中起到重要作用。线索细胞阳性比率是评价BV严重程度的较好指标。阴道加德纳菌+Mh、线索细胞阳性比率与Am sel结合Nugent法诊断BV具有高度一致性,对于经Am sel检测阴性但有临床症状的患者的BV诊断和严重程度评估是一个有益的补充。 展开更多
关键词 细菌性阴道病 阴道加德纳菌 人型支原体 荧光定量pcr
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615例门诊就诊者HPV基因检测结果分析 被引量:6
9
作者 林丽华 钟娜 +1 位作者 乔凤 张丽芬 《海南医学》 CAS 2015年第18期2723-2724,共2页
目的了解海口地区人乳头瘤病毒(HPV)感染的情况,为HPV感染患者的治疗及监测提供科学依据。方法采用实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)对海口地区615例性病门诊就诊者泌尿系分泌物标本的HPV6,11型和HR-HPV(8个型)进行检测。结果 615例样本中检... 目的了解海口地区人乳头瘤病毒(HPV)感染的情况,为HPV感染患者的治疗及监测提供科学依据。方法采用实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)对海口地区615例性病门诊就诊者泌尿系分泌物标本的HPV6,11型和HR-HPV(8个型)进行检测。结果 615例样本中检出HPV阳性者302例,感染率为49.11%(302/615),其中HPV6,11-DNA阳性130例,阳性率为21.14%(130/615),HR-HPV-DNA阳性126例,阳性率为20.49%(126/615),HPV6,11型合并HR-HPV阳性46例,占7.48%(46/615)。HPV6,11低危型与HR-HPV混合高危型比较差异无统计学意义(P>0.05)。302例HPV感染者中尖锐湿疣(CA)患者187例,占61.92%(187/302),检出HPV6,11-DNA阳性126例,占67.38%(126/187),HR-HPV-DNA阳性19例,占10.16%(19/187),HPV6,11型和HR-HPV混合感染42例,占22.46%(42/187)。CA患者感染以HPV6,11低危型为主,HPV6,11/HR-HPV次之,少部分为高危混合型HR-HPV感染,各组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论尖锐湿疣主要的基因型感染是低危型HPV6,11,高危型HPV感染多以混合感染形式存在。荧光定量PCR方法检测尖锐湿疣患者HPV基因型具有快速、准确的优点,是临床HPV感染分型检测的有效方法。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 FQ-pcr 感染率 尖锐湿疣
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荧光定量PCR检测母脐血HBV-DNA与母婴传播的临床研究 被引量:5
10
作者 王小兰 胡美霞 周世琼 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2007年第12期1684-1685,共2页
目的探讨孕妇乙肝病毒含量与宫内感染的相关性及母乳喂养的临床指导。方法对我院分娩的120例HBV感染产妇,采用荧光定量PCR检测法分别检测其孕晚期的血清,产时的脐血及产后乳汁中HBV-DNA含量,同时采用酶联免疫法行脐血乙肝病毒标志物检... 目的探讨孕妇乙肝病毒含量与宫内感染的相关性及母乳喂养的临床指导。方法对我院分娩的120例HBV感染产妇,采用荧光定量PCR检测法分别检测其孕晚期的血清,产时的脐血及产后乳汁中HBV-DNA含量,同时采用酶联免疫法行脐血乙肝病毒标志物检测。结果脐血HBV-DNA含量与孕母血清HBV-DNA含量有相关性;乳汁中HBV-DNA含量与其血清中HBV-DNA含量相关,同时与血清HBeAg存在显著相关。结论宫内感染的发生率与孕妇血清HBV-DNA含量相关,孕晚期高病毒血症(>108cp/ml)与宫内感染显著相关;产妇血清高HBV-DNA含量,乳汁HBV-DNA异常(>103cp/ml)或HBeAg阳性者不适宜母乳喂养。 展开更多
关键词 荧光定量pcr HBV—DNA水平 母婴传播
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海口市STD患者6种病原体检测结果分析 被引量:5
11
作者 姚敏 阮国杰 《中国热带医学》 CAS 2005年第6期1318-1319,1362,共3页
姚敏,阮国杰摘要:目的了解海口市STD患者中6种病原体感染的情况、病种的分布及感染特点。方法对2001年5月~2004年7月7834例可疑STD患者采用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测NG、CT、UU、HPV、HSV-Ⅱ5种病原体的DNA;采用RPR、TPHA法检测梅... 姚敏,阮国杰摘要:目的了解海口市STD患者中6种病原体感染的情况、病种的分布及感染特点。方法对2001年5月~2004年7月7834例可疑STD患者采用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测NG、CT、UU、HPV、HSV-Ⅱ5种病原体的DNA;采用RPR、TPHA法检测梅毒螺旋体并对结果进行分析。结果检出STD病原体阳性者2477例,总检出率为31.62%(2477/7834);其中UU检出率20.42%(1600/7834);CT检出率2.95%(231/7834);HPV检出率3.17%(248/7834);HSV-Ⅱ1检出率1.71%(134/7834);TP检出率2.60%(204/7834);NG检出率0.77%(60/7834);UU和CT混合感染216例;UU、CT、HPV3种病原体混合感染28例。结论4年的检测结果显示,海口地区STD病原体检出率逐年上升,UU的检出率最高;20~40岁年龄段是STD发病的高危人群,应予以重点关注。 展开更多
关键词 性传播疾病 荧光定量pcr 感染
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不同检验方法用于丙型肝炎检验的临床对比分析 被引量:5
12
作者 吴小文 《临床医学工程》 2018年第1期69-70,共2页
目的探讨三种检验方法在丙型肝炎检验中的临床应用价值和效果。方法选取我院2015年1月至2017年6月收治的120例丙型肝炎患者,采集其血清标本,采用酶联免疫吸附法、电化学发光法、荧光定量PCR法进行分析。观察对比三种检验方法的检验结果... 目的探讨三种检验方法在丙型肝炎检验中的临床应用价值和效果。方法选取我院2015年1月至2017年6月收治的120例丙型肝炎患者,采集其血清标本,采用酶联免疫吸附法、电化学发光法、荧光定量PCR法进行分析。观察对比三种检验方法的检验结果。结果酶联免疫吸附法检测结果显示,丙型肝炎阳性率为73.33%(88例);电化学发光法检测结果显示,丙型肝炎阳性率为75.00%(90例);荧光定量PCR法检测结果显示,丙型肝炎阳性率为90.83%(109例)。酶联免疫吸附法与电化学发光法的阳性率比较无统计学差异(P>0.05),而荧光定量PCR法的阳性率明显高于酶联免疫吸附法与电化学发光法(P<0.05)。结论酶联免疫吸附法、电化学发光法、荧光定量PCR法均可应用于丙型肝炎的临床检验,但荧光定量PCR法的阳性率更高,检测结果更直观,可作为丙型肝炎的首选临床检测手段。 展开更多
关键词 丙型肝炎 酶联免疫吸附法 电化学发光法 荧光定量pcr
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HBV感染血清DNA、HBeAg、PreS1检测结果分析及意义 被引量:5
13
作者 陈黎亚 赵升 +1 位作者 王茂峰 万汝根 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期2250-2251,共2页
目的探讨分析HBV感染者血清HBV-DNA、HBeAg、PreS1检测结果及临床意义。方法用酶联免疫法(ELISA)对450例HBV感染者血清进行乙型肝炎5项标志物和PreS1检测,用荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果450例HBV感染者血清HBV-DNA、HBeAg及PreS1的... 目的探讨分析HBV感染者血清HBV-DNA、HBeAg、PreS1检测结果及临床意义。方法用酶联免疫法(ELISA)对450例HBV感染者血清进行乙型肝炎5项标志物和PreS1检测,用荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果450例HBV感染者血清HBV-DNA、HBeAg及PreS1的阳性率分别为74.4%、48.9%、63.3%;285例PreS1阳性标本中HBeAg、HBV-DNA的阳性数分别为190、270例,PreS1与HBeAg、HBV-DNA二者间差异有统计学意义(P<0.01),PreS1与HBV-DNA符合率较HBeAg高;220例HBeAg阳性标本中PreS1、HBV-DNA的阳性数分别为190、200例,PreS1、HBV-DNA与HBeAg呈正相关,三者差异无统计学意义(P>0.05)。结论PreS1与HBV-DNA比HBeAg更敏感,PreS1与HBV-DNA相关性较好,反映了HBV病毒感染及复制情况;三者联合检测在乙型肝炎诊断和治疗中具有重要的临床应用价值。 展开更多
关键词 HBV-DNA 荧光定量pcr 乙型肝炎E抗原 前S1蛋白 乙型肝炎病毒
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检测外周血表皮生长因子受体表达在诊断肺癌微转移中的临床意义 被引量:5
14
作者 宋萍 李坚 殷凯生 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2005年第5期398-400,403,共4页
目的:探讨外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达在诊断非小细胞肺癌(NSCLC)微转移中的临床意义.方法: 采用荧光定量PCR技术,检测42例NSCLC患者及18例良性肺部疾病患者外周血EGFRmRNA表达,比较两者的差异.结果: NSCLC患者外周血EGFRmRN... 目的:探讨外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达在诊断非小细胞肺癌(NSCLC)微转移中的临床意义.方法: 采用荧光定量PCR技术,检测42例NSCLC患者及18例良性肺部疾病患者外周血EGFRmRNA表达,比较两者的差异.结果: NSCLC患者外周血EGFRmRNA表达的阳性率为45.2%,而良性肺部疾病患者无1例外周血EGFRmRNA有阳性表达.Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ期NSCLC的阳性率分别为18.75%和58.82%.NSCLC患者外周血EGFRmRNA表达阳性率及表达量随临床分期升高而增高.结论: 检测外周血EGFRmRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移的一个指标. 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 非小细胞肺癌 微转移 荧光定量pcr
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三种乙肝病毒检测方法相互关系的研究 被引量:5
15
作者 韩梅 侯佩强 张雪峰 《医学检验与临床》 2008年第5期69-70,88,共3页
目的探讨乙肝五项指标不同模式在健康人群中的分布率;不同模式下前S1抗原的阳性率;乙肝核酸值;前S1抗原结果与HBV-DNA拷贝数的相关性。方法酶联免疫吸附试验法与荧光定量PCR方法。结果表面抗原阳性的模式中,HBV前S1抗原的检出率较高(72.... 目的探讨乙肝五项指标不同模式在健康人群中的分布率;不同模式下前S1抗原的阳性率;乙肝核酸值;前S1抗原结果与HBV-DNA拷贝数的相关性。方法酶联免疫吸附试验法与荧光定量PCR方法。结果表面抗原阳性的模式中,HBV前S1抗原的检出率较高(72.97%),e抗原阳性组最高(88.89%),乙肝病毒DNA的拷贝数也较高。乙肝病毒DNA的拷贝数与Pre-S1的酶免检测结果的吸光度值有正相关性(相关系数0.590)。结论乙肝病毒前S1抗原与乙肝五项指标有较好的互补性;利用Pre-S1的酶免检测结果结合e抗原可以了解乙肝病毒在体内的数量。 展开更多
关键词 乙型肝炎 乙肝五项 乙肝病毒前S1抗原 HBV-DNA 荧光定量pcr 酶联免疫吸附试验
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非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株三重荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量:3
16
作者 郭振华 邢广旭 +3 位作者 翁茂洋 金前跃 乔松林 张改平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期619-625,共7页
针对非洲猪瘟病毒B646L、MGF505-2R和CD2v基因分别设计了引物和探针,经过条件优化,建立了基于TaqMan探针技术的三重荧光定量PCR检测方法。结果显示,本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法与猪场常见病毒的核酸不发生交叉反应,具有良好的... 针对非洲猪瘟病毒B646L、MGF505-2R和CD2v基因分别设计了引物和探针,经过条件优化,建立了基于TaqMan探针技术的三重荧光定量PCR检测方法。结果显示,本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法与猪场常见病毒的核酸不发生交叉反应,具有良好的特异性;敏感性分析显示,针对B646L、MGF505-2R和CD2v基因的最低检测下限分别为6.5,8.0和14.0 copies/μL;并且该方法在10~10copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,组间变异系数为0.05%~2.68%,组内变异系数为0.10%~1.17%,稳定性良好。进一步针对临床核酸样品的检测显示,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的荧光定量PCR鉴别检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 荧光定量pcr B646L基因 MGF505-2R基因 CD2v基因
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检测外周血Lunx mRNA表达用于诊断肺癌微转移的临床价值 被引量:4
17
作者 宋萍 李坚 殷凯生 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2006年第4期304-306,共3页
目的:研究检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。方法:采用荧光定量RT-PCR技术,对42例NSCLC患者及18例良性肺部疾病患者外周血Lunx mRNA进行检测。结果:NSCLC患者外周血Lunx mRNA表达的... 目的:研究检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。方法:采用荧光定量RT-PCR技术,对42例NSCLC患者及18例良性肺部疾病患者外周血Lunx mRNA进行检测。结果:NSCLC患者外周血Lunx mRNA表达的阳性率为40.5%(17/42),Ⅰ-Ⅱ期NSCLC患者的阳性率为18.8%(3/16),Ⅲ期患者的阳性率为47.1%(8/17),Ⅳ期患者阳性率为66.7%(6/9),而肺部良性疾病患者外周血无1例阳性表达。结论:检测外周血Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移的一个参考指标。 展开更多
关键词 LUNX MRNA 非小细胞肺癌 微转移 荧光定量pcr
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非小细胞肺癌患者血浆EGFR突变表达检测及其临床意义 被引量:4
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作者 朱美琴 夏俊贤 +2 位作者 徐敏 陈亦欣 申维玺 《肿瘤基础与临床》 2015年第3期190-193,共4页
目的检测非小细胞肺癌患者血浆表皮生长因子受体(EGFR)基因突变表达情况,探讨其临床意义。方法采用荧光定量PCR法检测90例非小细胞肺癌患者组织及血浆EGFR的基因突变表达情况,分析两者的一致性,并分析血浆EGFR与患者预后的关系。结果非... 目的检测非小细胞肺癌患者血浆表皮生长因子受体(EGFR)基因突变表达情况,探讨其临床意义。方法采用荧光定量PCR法检测90例非小细胞肺癌患者组织及血浆EGFR的基因突变表达情况,分析两者的一致性,并分析血浆EGFR与患者预后的关系。结果非小细胞肺癌患者的血浆与肿瘤组织中EGFR突变表达是一致的,血浆EGFR突变表达与非小细胞肺癌的病理类型、肿瘤大小及淋巴结转移有关,但血浆EGFR突变表达与非小细胞肺癌患者的疾病进展时间、生存时间无关。结论非小细胞肺癌患者血浆EGFR的检测有可能替代肿瘤组织中EGFR的检测,为无法取得肿瘤组织或取得肿瘤组织困难的患者提供一种更快捷、简便的替代检测方法,但血浆EGFR尚不能确立为独立的预后指标。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 血浆 表皮生长因子受体 荧光定量pcr 预后
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内蒙古白绒山羊瘤胃中内纤毛虫及三种纤维分解菌的定量研究 被引量:3
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作者 马惠忠 孙海洲 《饲料工业》 2008年第23期45-48,共4页
试验采用荧光定量PCR技术,在不同精粗比日粮条件下对内蒙古白绒山羊瘤胃内容物中内纤毛虫和3种主要纤维分解菌进行定量研究。结果表明:日粮中粗料比例增加,内纤毛虫(Ento-dinium)的数量降低,组间差异不显著(P>0.05);日粮中粗料比例增... 试验采用荧光定量PCR技术,在不同精粗比日粮条件下对内蒙古白绒山羊瘤胃内容物中内纤毛虫和3种主要纤维分解菌进行定量研究。结果表明:日粮中粗料比例增加,内纤毛虫(Ento-dinium)的数量降低,组间差异不显著(P>0.05);日粮中粗料比例增加,产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)、黄色瘤胃球菌(Ruminococcus flavefaciens)和白色瘤胃球菌(Ruminococcus albus)的数量均增加,组间差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 白绒山羊 纤维分解菌 内纤毛虫 荧光定量pcr
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贝类中诺如病毒ELISA与荧光定量PCR检测技术的研究 被引量:3
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作者 吴斌 裴轶君 +1 位作者 王刚 李叶 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第12期2623-2624,共2页
目的:贝类中诺如病毒是世界范围内急性非细菌性流行性胃肠炎的重要病原。目前我国沿海地区也暴发了诺如病毒,为了更准确的检测,本文寻找和建立了贝类产品中诺如病毒的快速检测方法。方法:用荧光定量PCR和ELISA法对大连地区的贝类样品进... 目的:贝类中诺如病毒是世界范围内急性非细菌性流行性胃肠炎的重要病原。目前我国沿海地区也暴发了诺如病毒,为了更准确的检测,本文寻找和建立了贝类产品中诺如病毒的快速检测方法。方法:用荧光定量PCR和ELISA法对大连地区的贝类样品进行检测。结果:大连地区的贝类样品未检测出诺如病毒。结论:通过实验证明荧光定量PCR法和ELISA法都可用于快速检测诺如病毒,但ELISA法更适于检测诺如病毒含量低的样品。 展开更多
关键词 诺如病毒 荧光定量pcr ELISA
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