期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到241篇文章
< 1 2 … 13 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
骨髓基质细胞修复猪膝关节非负重区软骨与骨复合缺损的实验研究 被引量：48
1
作者 周广东 王晓云 +6 位作者 苗春雷 刘天一 祝联 刘德莉 崔磊 刘伟 曹谊林 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期925-931,共7页
目的　探讨猪骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells ,BMSC)复合聚羟基乙酸 /聚乳酸(PGA/PLA)支架修复关节软骨与骨复合缺损的可行性。方法　杂交猪 18只 ,抽取股骨骨髓 ,体外培养、扩增BMSC并分别经地塞米松诱导 (A组 )或地塞米松与转... 目的　探讨猪骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcells ,BMSC)复合聚羟基乙酸 /聚乳酸(PGA/PLA)支架修复关节软骨与骨复合缺损的可行性。方法　杂交猪 18只 ,抽取股骨骨髓 ,体外培养、扩增BMSC并分别经地塞米松诱导 (A组 )或地塞米松与转化生长因子 β1(TGFβ1)联合诱导 (B组 ) ,以免疫组织化学、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测其软骨分化表型。其中有 2只猪部分BMSC经绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染标记。诱导后的细胞分别接种到PGA/PLA支架 ,体外培养 1周后植入猪自体股骨下端非负重面软骨及骨复合缺损处 ,单纯支架植入 (C组 )及空白不处理 (D组 )作为对照。上述动物分别于 3( 6只 )、6 ( 10只 )个月时取材 ,进行大体观察、修复结果分级、组织学检查、葡糖氨基聚糖 (GAG)含量测定及生物力学测定。含GFP标记细胞的 2只猪 7个月时取材 ,共聚焦显微镜观察植入细胞的分布。结果　诱导后BMSC均能表达软骨特征性的Ⅱ型胶原与聚集蛋白聚糖 (aggrecan) ,两组细胞均与支架材料黏附良好。术后大体观察与组织学检查显示 :A组缺损以不完全修复为主 ,多数缺损软骨修复不良 ,而骨缺损基本修复 ,组织学主要为纤维性软骨及松质骨 ;B组缺损以完全修复为主 ,组织学表现为透明软骨及松质骨 ,少部分标本修复组织中含有纤维? 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 细胞修复 猪 膝关节 非负重区 软骨 骨复合缺损 BMSC 荧光抗体技术
原文传递
肾小球免疫荧光IgG亚型在特发性膜性肾病和继发性膜性肾病中的不同表现 被引量：35
2
作者 管音 李航 +5 位作者 罗娜 李超 段琳 李艳 文煜冰 李学旺 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期85-91,共7页
目的探讨特发性膜性肾病（IMN）和继发性膜性。肾病（SMN）。肾小球免疫荧光IgG亚型的不同表现，评价免疫荧光法IgG亚型在鉴别特发性膜性肾病和膜性狼疮性肾炎（MLN）中的价值。方法本研究总结了2011年10月至2012年12月于北京协和医院... 目的探讨特发性膜性肾病（IMN）和继发性膜性。肾病（SMN）。肾小球免疫荧光IgG亚型的不同表现，评价免疫荧光法IgG亚型在鉴别特发性膜性肾病和膜性狼疮性肾炎（MLN）中的价值。方法本研究总结了2011年10月至2012年12月于北京协和医院住院行肾脏穿刺活检术、病理改变符合膜性肾病特点并行免疫荧光IgG亚型染色的病例，对其病理类型及肾小球免疫荧光IgG亚型进行统计，同时就诊断为IMN和MLN的病例进行回顾性分析，比较两组在临床表现和肾小球免疫荧光IgG亚型及补体沉积方面的特点，并从中筛选出不同病理指标，对它们的诊断价值进行评价和比较。结果（1）共收集病例214例，其中IMN占81％，MLN占14％，后者在SMN中居首位。（2）IMN组IgG1、IgG3和IgG4强度较高，其中IgG4的强度高于其他IgG亚型，且其强度显著高于MLN组（P〈0．01）；MLN组IgGl和IgG3强度较高，IgG3强度高于其他IgG亚型，但与IMN组差异无统计学意义。（3）肾小球免疫荧光IgG4的受试者特征工作曲线（ROC）的曲线下面积（AUC）为0．814，以强度1为界值诊断灵敏度为91．8％，特异度为46．7％，以强度2为界值诊断灵敏度为84．2％，特异度为70．0％。IgG4与IgG3强度差值的AUC为0．793，以0为界值诊断灵敏度为91．8％，特异度为66．7％。IgC．d．阳性且IgG4≥IgG3的诊断灵敏度为88．9％，特异度为70．0％。补体C1q的AUC为0．979，以强度1为界值诊断灵敏度为93．3％，特异度为94．2％。IgG4阳性且C1q阴性的诊断灵敏度为87．7％，特异度为93．3％。结论（1）经免疫荧光法测定，IMN肾小球以IgG4沉积为主，而MLN以IgG3为主。（2）IgG4强度、IgG4与IgG3强度差值及C1q强度具有较高诊断准确性，IgG4强度还可分别与后两者联合使用，以帮助鉴别IMN与MLN。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 膜性 狼疮肾炎 荧光抗体技术 IGG亚型
原文传递
新布尼亚病毒IgG抗体间接免疫荧光检测方法的建立 被引量：30
3
作者 黄学勇 杜燕华 +7 位作者 李幸乐 马宏 满瑞琴 康锴 唐晓燕 陈豪敏 刘国华 许汴利 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期165-168,共4页
目的建立检测新布尼亚病毒IgG抗体的间接免疫荧光（IFA）方法。方法用分离到的5株新布尼亚病毒株感染非洲绿猴肾（Vero）细胞，制备抗原片，优化IFA工作条件，进行IFA法的特异度和敏感度评价，应用建立的IFA方法对2007—2011年在河南省... 目的建立检测新布尼亚病毒IgG抗体的间接免疫荧光（IFA）方法。方法用分离到的5株新布尼亚病毒株感染非洲绿猴肾（Vero）细胞，制备抗原片，优化IFA工作条件，进行IFA法的特异度和敏感度评价，应用建立的IFA方法对2007—2011年在河南省信阳地区采集的126例发热伴血小板减少综合征患者急性期和恢复期双份血清标本进行检测，并与RT—PCR方法的检测结果进行比较。结果筛选出免疫荧光反应特异、稳定性较好的WZ69毒株作为建立新布尼亚病毒IFA检测方法的抗原种子株。IFA方法的最佳工作条件：一抗（患者血清）最适稀释度为1：40；二抗（异硫氰酸荧光素标记的羊抗人IgG抗体）最适稀释度为1：150；二抗中伊文思蓝最适稀释度为1：20000。在126例患者中，新布尼亚病毒IgG抗体阳性者96例，阴性者30例，抗体阳性率为76．19％，与RT—PCR的检测阳性率[72．22％（91／126）]差异无统计学意义（P〉0．05）。结论建立的新布尼亚病毒IgG抗体IFA检测方法敏感性高，特异性强，操作简单，可用于新布尼亚病毒致发热伴血小板减少综合征患者的实验室检测。 展开更多
关键词 荧光抗体技术 间接 抗体 发热 血小板减少 综合征 新布尼亚病毒
原文传递
抗核抗体HEp-2细胞间接免疫荧光模型及其结果报告方式国际共识解读 被引量：26
4
作者 胡朝军 周仁芳 +11 位作者 张蜀澜 秦晓松 武永康 牛家峰 杨再兴 何敏 王春燕 罗静 黄清水 李唏 张铁汉 李永哲 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期804-810,共7页
抗核抗体（ANA）是多种自身免疫病（AID）特别是ANA相关的风湿性疾病（AARD）诊断的重要血清标志物。以HEp-2细胞为基质的间接免疫荧光（IIF）法是ANA检测的重要方法，被美国风湿病学会（ACR）、欧洲自身免疫标准化促进会（EASI）等专... 抗核抗体（ANA）是多种自身免疫病（AID）特别是ANA相关的风湿性疾病（AARD）诊断的重要血清标志物。以HEp-2细胞为基质的间接免疫荧光（IIF）法是ANA检测的重要方法，被美国风湿病学会（ACR）、欧洲自身免疫标准化促进会（EASI）等专业学会推荐为ANA检测的参考方法。2014年8月28日在巴西圣保罗举行的ANA荧光模型国际共识第一次会议上，来自15个国家的66位专家研讨形成ANAHEp-2细胞间接免疫荧光染色模型命名标准化国际共识。2015年9月22日在德国德累斯顿召开的ANA荧光模型国际共识第二次会议上形成了ANA结果报告方式国际共识。认真解读和推广ANAHEp-2细胞间接免疫荧光模型及其结果报告标准化国际共识有助于提高我国ANA检测质量和充分发挥ANA在AID临床诊疗中的价值。 展开更多
关键词 抗体 抗核 细胞系 荧光抗体技术 间接 模型 生物学
原文传递
慢性前列腺炎患者沙眼衣原体和解脲支原体感染的实验室诊断 被引量：23
5
作者 余平 扈风平 +3 位作者 石歆莹 王芙艳 舒明星 毛学政 《湖南医科大学学报》 CSCD 1998年第6期537-539,共3页
对１０３８例慢性前列腺炎患者应用单克隆抗体免疫荧光法和分离培养法检测其前列腺液中沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲支原体（ＵＵ）。结果表明：患者前列腺液ＣＴ检测阳性率为２８．４％，ＵＵ阳性率为３３％，均为非细菌性前列腺炎。对照... 对１０３８例慢性前列腺炎患者应用单克隆抗体免疫荧光法和分离培养法检测其前列腺液中沙眼衣原体（ＣＴ）和解脲支原体（ＵＵ）。结果表明：患者前列腺液ＣＴ检测阳性率为２８．４％，ＵＵ阳性率为３３％，均为非细菌性前列腺炎。对照组前列腺液中ＣＴ和ＵＵ检测均为阴性。结果提示。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 前列腺炎 解脲支原体 诊断
下载PDF
应用荧光抗体技术检测牙鲆体内的河流弧菌 被引量：22
6
作者 鄢庆枇 邹文政 +2 位作者 纪荣兴 庄峙厦 王小如 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期16-19,共4页
用灭活的河流弧菌(Vibrio fluvialis)抗原,注射免疫实验兔,制得凝集价为1∶5 120的抗血清。用试管凝集法检测了抗血清的特异性,再用免疫吸附法去除交叉反应,从而得到高效价、高特异性的抗河流弧菌血清。用所制备的抗血清在实验室中建立... 用灭活的河流弧菌(Vibrio fluvialis)抗原,注射免疫实验兔,制得凝集价为1∶5 120的抗血清。用试管凝集法检测了抗血清的特异性,再用免疫吸附法去除交叉反应,从而得到高效价、高特异性的抗河流弧菌血清。用所制备的抗血清在实验室中建立起河流弧菌荧光抗体检测技术(FAT),在荧光显微镜下可清楚地看到被标记的病原菌,整个检测过程只需3h。用河流弧菌感染牙鲆(Paralichthys olivaceus),24 h后,用FAT测定牙鲆的血液、肾脏和肝脏中的河流弧菌,在血液中河流弧菌的检出率最高,其次是肾脏,肝脏的检出率最低。以上结果表明:荧光抗体技术可以快速、灵敏、准确地检测出牙鲆体内的河流弧菌。 展开更多
关键词 荧光抗体检测技术 牙鲆(Paralichthys olivaceus) 河流弧菌(Vibrio fluvialis)
下载PDF
南京地区住院儿童副流感病毒感染监测 被引量：22
7
作者 赵艳丰 雷忠英 +4 位作者 王琳 吕泰霞 曾智凤 陈炜钢 张益红 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期52-54,共3页
目的监测南京地区儿童急性呼吸道副流感病毒感染的特征,了解副流感病毒流行情况,为临床诊治提供依据。方法采集2009年3月至2012年2月住院的急性呼吸道感染患儿7830例鼻咽分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒,包括副流感病毒1、2及3... 目的监测南京地区儿童急性呼吸道副流感病毒感染的特征,了解副流感病毒流行情况,为临床诊治提供依据。方法采集2009年3月至2012年2月住院的急性呼吸道感染患儿7830例鼻咽分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒,包括副流感病毒1、2及3型抗原(HPIV1、2、3)等。结果 7830份标本中呼吸道病毒检出最高为呼吸道合胞病毒(RSV),达2 527例(占32.27%)。副流感病毒病原检测阳性776例(总阳性率为9.91%),其中以副流感病毒3型为主,达504例,占副流感病毒检测阳性的64.95%;副流感病毒2型感染最少,仅44例占5.67%。副流感病毒检出率在婴儿组和幼儿组较高,分别为366例(46.86%)和249例(31.88%);春季检出率最高;所致疾病中以支气管肺炎最为多见。结论南京地区住院儿童副流感病毒感染以HPIV3为主,婴儿感染率较高,儿童HPIV1、HPIV3病毒感染好发于春夏季节,HPIV2散发感染。 展开更多
关键词 副流感病毒 直接免疫荧光 儿童
下载PDF
被动凝集法、间接免疫荧光法和胶体金法联合检测肺炎支原体抗体对儿童肺炎支原体感染的诊断价值 被引量：21
8
作者 王居鹏 朱黎娜 +3 位作者 马明坤 陈慧 郭素香 任丽 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第4期418-423,共6页
目的分析被动凝集法(PA)、间接免疫荧光法(IFA)和胶体金法(GICT)联合检测对儿童肺炎支原体(MP)感染的诊断价值。方法选取进行MP抗体检测的患儿617例,以临床诊断为判断标准,分为MP感染组(345例)和非MP感染组(272例)。所有患儿均经PA检测M... 目的分析被动凝集法(PA)、间接免疫荧光法(IFA)和胶体金法(GICT)联合检测对儿童肺炎支原体(MP)感染的诊断价值。方法选取进行MP抗体检测的患儿617例,以临床诊断为判断标准,分为MP感染组(345例)和非MP感染组(272例)。所有患儿均经PA检测MP总抗体,经IFA和GICT检测MP-IgM抗体。分析PA、IFA和GICT这3种方法单独检测及两两联合检测与临床诊断的一致性,受试者工作特征(ROC)曲线评价其对MP感染的诊断价值,分析PA联合IFA检测2组患儿抗体情况。结果MP感染组PA检测MP总抗体、IFA和GICT检测MP-IgM抗体的阳性率较非MP感染组高(P<0.01)。PA检测MP总抗体的阳性检出率高于IFA和GICT检测MP-IgM抗体的阳性检出率(P<0.01)。PA联合IFA与临床诊断为中度一致(Kappa值=0.41,P<0.05)。3种方法单独检测和两两组合检测中PA联合IFA的曲线下面积、敏感度、总符合率、阴性预测值最高,阴性似然比最低。GICT单独检测特异度最高。IFA单独检测阳性预测值和阳性似然比最高。当MP-IgM抗体阳性时,MP感染组23.44%的患儿总抗体滴度<1︰160,非MP感染组47.22%的患儿总抗体滴度≥1︰160。当MP-IgM抗体阴性时,MP感染组91.91%的患儿MP总抗体滴度≥1︰160,非MP感染组有73.50%的患儿总抗体滴度<1︰160。结论PA和IFA联合检测可为临床诊断儿童MP感染提供更客观、准确的检测结果。 展开更多
关键词 肺炎支原体 儿童 胶体金 免疫球蛋白M 荧光抗体技术 间接 被动凝集法 间接免疫荧光法
下载PDF
9项呼吸道病原体检测在呼吸道感染病因分析中的应用 被引量：22
9
作者 胡伟 代琼 +1 位作者 胡孝彬 陈江 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第23期3158-3159,3161,共3页
目的探讨呼吸道感染的常见病因,为临床提供早期诊断依据。方法选择呼吸道感染患者3 514例,空腹采集静脉血,采用间接免疫荧光法进行呼吸道嗜肺军团菌1型(LP1)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道... 目的探讨呼吸道感染的常见病因,为临床提供早期诊断依据。方法选择呼吸道感染患者3 514例,空腹采集静脉血,采用间接免疫荧光法进行呼吸道嗜肺军团菌1型(LP1)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)、副流感病毒(PIV)9项病原体的联合检测。结果 3 514例患者血清IgM总阳性率为35.00%(1 230/3 514),IFB阳性率最高,为26.01%;其次为MP,阳性率为16.28%;PIV、ADV、RSV阳性率分别为0.03%、2.27%、0.65%。病原体合并感染413例,阳性率为11.75%(413/3 514)。结论呼吸道感染的病原体主要为病毒和MP。 展开更多
关键词 呼吸道感染 病原体 荧光抗体技术 间接 免疫球蛋白M
下载PDF
骨髓间充质干细胞在激光损伤大鼠视网膜下分化的观察 被引量：13
10
作者 张杰 单清 +6 位作者 马萍 姜严明 陈鹏 温静霞 周游 钱焕文 裴雪涛 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第22期1993-1998,共6页
目的　鉴定骨髓间充质干细胞 (MSC)在体外不诱导的条件下移植于掺钕钇铝石榴石(Nd :YAG)激光损伤大鼠视网膜后的定位以及蛋白表达情况。方法　体外培养大鼠MSCs ,用荧光染料 4′ ,6 二脒 2 苯基吲哚 (DAPI)标记MSCs,视网膜下移植后分... 目的　鉴定骨髓间充质干细胞 (MSC)在体外不诱导的条件下移植于掺钕钇铝石榴石(Nd :YAG)激光损伤大鼠视网膜后的定位以及蛋白表达情况。方法　体外培养大鼠MSCs ,用荧光染料 4′ ,6 二脒 2 苯基吲哚 (DAPI)标记MSCs,视网膜下移植后分别于 10、2 0、35和 5 0d处死动物 ,做DAPI荧光观察 ,并在阳性的连续切片上作神经元核 (NeuN) ,神经元特异性烯醇化酶 (NSE) ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和角蛋白 (CK)免疫组化染色及HE染色。分别于损伤前及损伤后即刻、1～ 7周检测损伤移植组、损伤组和损伤注射生理盐水组的视网膜电图 (ERG)b波分析。结果　培养的MSC集落生长迅速 ,均一性好 ;DAPI染色观察表明 ,10d时移植细胞多集中于移植部位周围 ,但分布散乱 ;2 0d时可见阳性细胞分布范围扩大 ,分布于视网膜视锥、视干细胞层、双极细胞层及节细胞层 ;到35d阳性细胞范围进一步扩大 ,且细胞向损伤部位迁移 ;5 0d观察损伤范围与 35d相比扩大不明显。免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞在NeuN、NSE、GFAP和CK的表达有不均一性。检测到的阳性区域视网膜未见到玫瑰花结样结构 ,但某些区域的细胞排列不整齐 ,在某些部位有细胞层增生。HE染色表明移植组损伤的恢复好于损伤对照组 ,ERGb波检测表明 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 激光损伤 大鼠 视网膜 荧光抗体技术
原文传递
阴道加德纳菌和细菌性阴道病相关性研究 被引量：17
11
作者 吴爱武 曹锦洪 刘岩平 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期324-325,共2页
为了解阴道加德纳菌（ Gardnerella vaginalis,Gv)与细菌性阴道病（ Bv）的相关性，采用荧光标记抗体染色技术对 150例临床诊断为细菌性阴道病的患者分泌物涂片和 100例正常对照者的分泌物涂片进行 Gv的检出；结果显示，患病组 Gv检出率... 为了解阴道加德纳菌（ Gardnerella vaginalis,Gv)与细菌性阴道病（ Bv）的相关性，采用荧光标记抗体染色技术对 150例临床诊断为细菌性阴道病的患者分泌物涂片和 100例正常对照者的分泌物涂片进行 Gv的检出；结果显示，患病组 Gv检出率（ 59％）明显高于对照组（ 25％）， P< 0.01；患病组分泌物湿片“线索细胞”阳性的涂片（ 140例）中， 96％（ 135/140）的“线索细胞”周围显示吸附的细菌是 Gv，提示 Gv和 Bv之间有密切的联系， Cv是 Bv的病原菌之一。 展开更多
关键词 阴道加德纳菌 荧光抗体技术 细菌性阴道病
下载PDF
狂犬病毒核蛋白单抗和荧光抗体中和试验的建立与应用 被引量：18
12
作者 张守峰 曹亮 +3 位作者 张菲 李海涛 李清竹 扈荣良 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期554-557,共4页
目的建立狂犬病毒血清中和抗体效价的快速检测方法,以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价,指导高危人群及动物种群的免疫预防。方法采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗狂犬病毒核蛋白单抗,以亲和层析法进行纯化,异硫氰酸荧光黄标记制备... 目的建立狂犬病毒血清中和抗体效价的快速检测方法,以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价,指导高危人群及动物种群的免疫预防。方法采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗狂犬病毒核蛋白单抗,以亲和层析法进行纯化,异硫氰酸荧光黄标记制备荧光抗体;以BHK-21细胞系培养狂犬病毒细胞适应株CVS-11,以染毒细胞测定荧光抗体的工作浓度后,通过荧光抗体染色法测定CVS-11细胞半数感染量(TCID50);利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清,并以国际兽疫局标准品进行标定;参考世界卫生组织及国际兽疫局推荐方法,确定中和试验程序,对51份样品血清进行测定,并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较,评价其精确及可靠程度。以Kaber法公式和MicrosoftExcel软件为基础,设计被测样品中和效价计算方法。结果制备的抗狂犬病毒核蛋白单抗的亚型为IgG2a;纯化、标记后的荧光抗体工作浓度为1∶400;CVS-11株的使用量为每孔100TCID50;本研究建立的检测程序对51份人及犬血清测得的中和效价结果与国际参考实验室的测定结果一致;自行设计的计算方法操作简便,计算快捷。结论成功建立了与国际标准相当的狂犬病毒中和抗体效价测定和计算方法。 展开更多
关键词 狂犬病毒 杂交瘤 荧光抗体技术 中和试验
原文传递
绿色荧光蛋白基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的实验研究 被引量：16
13
作者 李志勇 刘磊 +3 位作者 田卫东 陈希哲 阎征斌 林云锋 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期150-153,共4页
目的　体外研究绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染骨髓间充质干细胞 (MSCs)的方法,并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能。方法　体外分离培养大鼠MSCs,用重组GFP的腺病毒载体Ad GFP及脂质体介导质粒pEGFP C1两种方法转染GFP,流式细胞... 目的　体外研究绿色荧光蛋白 (GFP)基因转染骨髓间充质干细胞 (MSCs)的方法,并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能。方法　体外分离培养大鼠MSCs,用重组GFP的腺病毒载体Ad GFP及脂质体介导质粒pEGFP C1两种方法转染GFP,流式细胞术观察比较基因转染和表达结果;将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后,检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况。结果　重组Ad GFP对细胞的感染率达(41 3±1 4)%,感染 6周后仍有表达;脂质体组转染效率最高为 12 5%。病毒感染组阳性细胞与未感染组细胞经成骨诱导分化后碱性磷酸酶表达均逐渐增高;诱导 3周后茜素红钙盐染色均为阳性。结论　重组GFP的腺病毒载体Ad GFP可高效感染MSCs,基因转染后细胞的增殖分化能力与未转染细胞差异无统计学意义(P>0 05),可以作为一种高效的大鼠MSCs的标记方法。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 基因转染大鼠 骨髓间充质干细胞 实验研究
原文传递
1503例9种呼吸道感染病原体检测结果分析 被引量：18
14
作者 林传俊 左芳 汪宏良 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第10期1254-1255,共2页
目的探讨婴幼儿呼吸道感染的病原体流行情况。方法采用间接免疫荧光法(IFA)检测1 503例住院婴幼儿患者血清中嗜肺军团菌血清Ⅰ型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病... 目的探讨婴幼儿呼吸道感染的病原体流行情况。方法采用间接免疫荧光法(IFA)检测1 503例住院婴幼儿患者血清中嗜肺军团菌血清Ⅰ型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型等9种呼吸道感染病原体的IgM抗体。结果在1 503例样本中,共检测出IgM抗体阳性病例499例,阳性检出率为33.20%,其中肺炎支原体387例(25.75%),肺炎支原体合并呼吸道合胞病毒5例(0.33%),肺炎支原体合并腺病毒4例(0.27%),单纯呼吸道合胞病毒34例(2.26%),副流感病毒1、2和3型30例(2.00%),单纯腺病毒19例(1.26%)、乙型流感病毒13例(0.86%)和甲型流感病毒7例(0.47%),未检出Q热立克次体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌血清Ⅰ型。结论采用间接免疫荧光法快速检测人血清中9种呼吸道感染主要病原体的IgM抗体,可为临床的诊断和治疗提供重要的参考依据,避免抗生素的滥用。 展开更多
关键词 呼吸道感染 病原体 荧光抗体技术 间接
下载PDF
检测抗核抗体谱在系统性红斑狼疮诊治中的意义 被引量：18
15
作者 程玉萍 李丽 《解放军医药杂志》 CAS 2013年第1期63-66,共4页
目的探讨抗核抗体谱(ANAs)检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊治中的应用价值。方法对102例SLE(SLE组)、32例其他风湿性疾病(疾病对照组)及30名健康体检者(正常对照组),分别采用间接免疫荧光法、免疫印记法测定血清中抗核抗体(ANA)和ANAs中15... 目的探讨抗核抗体谱(ANAs)检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊治中的应用价值。方法对102例SLE(SLE组)、32例其他风湿性疾病(疾病对照组)及30名健康体检者(正常对照组),分别采用间接免疫荧光法、免疫印记法测定血清中抗核抗体(ANA)和ANAs中15种抗体的水平。结果 SLE组ANA和ANAs中抗nRNP/Sm抗体、抗Sm抗体、抗双链DNA抗体、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体及抗核糖体P蛋白抗体阳性率与疾病对照组和正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。SLE组2项及以上抗体阳性者占93.1%。ANA、抗Sm抗体、抗双链DNA抗体及抗核小体抗体同时阳性且资料完整的20例SLE住院患者治疗后上述抗体均有不同程度的转阴和(或)滴度下降。结论联合检测动态观察ANAs对SLE的诊断及治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 抗核抗体谱 红斑狼疮 系统性 荧光抗体技术 间接 免疫印记法
下载PDF
先天性大疱性表皮松解症诊断及治疗进展 被引量：18
16
作者 于灵 冯素英 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期516-519,共4页
先天性大疱性表皮松解症是一组以皮肤脆性增加、轻微摩擦或外伤即可导致皮肤或黏膜水疱、糜烂为共同特点的遗传性皮肤病。目前该病可分为4型，即单纯型、交界型、营养不良型和Kindler综合征型。诊断方面，提倡“洋葱皮诊断方法”，即先... 先天性大疱性表皮松解症是一组以皮肤脆性增加、轻微摩擦或外伤即可导致皮肤或黏膜水疱、糜烂为共同特点的遗传性皮肤病。目前该病可分为4型，即单纯型、交界型、营养不良型和Kindler综合征型。诊断方面，提倡“洋葱皮诊断方法”，即先进行免疫荧光定位，而后针对性进行基因检测明确致病基因位点。治疗上要加强护理，药物、手术对症治疗可缓解不适症状。细胞、蛋白、基因治疗等方面研究不断深入有望为患者带来希望，及时进行产前诊断，避免不良后果的发生。 展开更多
关键词 大疱性表皮松解 荧光抗体技术 直接 免疫组织化学 基因检测 药物疗法 基因疗法
原文传递
原代沙鼠肾细胞流行性出血热双价疫苗临床观察与免疫学效果研究 被引量：17
17
作者 董关木 安祺 +10 位作者 朱智勇 刘光中 何雅慧 俞永新 丁晓航 宋斌 刘文雪 孙光 孔艳 朱凤才 王英军 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期453-456,共4页
目的对新近研制成功的沙鼠肾原代细胞培养的流行性出血热双价疫苗（汉滩型＋汉城型）进行Ⅱ期临床扩大观察，考核其对人体的安全性和中和抗体反应。方法将观察人群设在不同地区，分别选择中国南方和北方两个点，每个点接种５００人的双... 目的对新近研制成功的沙鼠肾原代细胞培养的流行性出血热双价疫苗（汉滩型＋汉城型）进行Ⅱ期临床扩大观察，考核其对人体的安全性和中和抗体反应。方法将观察人群设在不同地区，分别选择中国南方和北方两个点，每个点接种５００人的双价疫苗，同时接种２５０人的商品化单价疫苗（汉滩型）作对照，观察接种对象的副反应程度和采集其血清样品测定荧光抗体和以蚀斑减少中和法测定中和抗体，考核疫苗效果。结果观察结果显示，在观察的２８０人中分别有７人呈现轻度局部副反应和３７．５℃以下低热的全身反应，总反应率分别为２．５％。ＩＦＡ抗体阳转率１００％，ＧＭＴ１∶６７。中和抗体阳转率汉滩型为８７．６％，汉城型为９６．３％（ｎ＝８１）。如果以同一份血清中任何单一血清型阳转来计算，阳转率为１００％。以同一份血清两个血清型均需阳转来计算，则阳转率为７５．３％（６１／８１）。结论经过Ⅱ期临床人体观察结果显示，该双价疫苗仅有轻度局部反应和良好的中和抗体应答。证明该疫苗对人体安全。 展开更多
关键词 流行性出血热 荧光抗体 中和试验
原文传递
增强型绿色荧光蛋白基因转染及TGFβ_3诱导前软骨干细胞向成软骨方向分化 被引量：14
18
作者 游洪波 陈安民 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期65-69,共5页
目的　探讨增强型绿色荧光蛋白基因 (EGFP)转染前软骨干细胞 (PSCs)的效果及TGFβ3 诱导PSCs向成软骨方向定向分化的可行性。方法　利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(FGFR 3)表面标志的PSCs。采用脂质体介导法... 目的　探讨增强型绿色荧光蛋白基因 (EGFP)转染前软骨干细胞 (PSCs)的效果及TGFβ3 诱导PSCs向成软骨方向定向分化的可行性。方法　利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(FGFR 3)表面标志的PSCs。采用脂质体介导法将EGFP基因转染PSCs,G4 18筛选得到EGFP基因修饰PSCs。用免疫组化及免疫荧光检测EGFP基因修饰PSCs的FGFR 3表达。采用藻酸盐凝胶培养 ,以TGFβ3 诱导分离纯化的PSCs向成软骨方向定向分化。应用免疫组化、RT PCR检测PSCs向成软骨方向分化过程中特异性软骨基质成分的表达情况。结果　EGFP基因转染PSCs后 ,2 4hGFP开始表达 ,4 8～ 72hGFP表达最强。G4 18筛选后 ,EGFP基因修饰PSCs体外培养 6周仍有较强GFP表达。在含TGFβ3 的藻酸盐凝胶培养 7、14、2 1d均有II型胶原表达 ;诱导2 1d的PSCs免疫组化检测可见细胞及周围均有X型胶原、Aggrecan、COMP表达 ;RT PCR检测显示在培养早期 ( 8d内 )开始出现Aggrecan、X型胶原、COMP等的表达 ,中期 ( 8d后 )开始出现II型胶原表达。结论　EGFP基因修饰PSCs在体外能长期稳定表达GFP ,为应用组织工程技术修复骨骺损伤提供方便追踪观察的种子细胞。TGFβ3 能诱导PSCs向成软骨方向定向分化。 展开更多
关键词 干细胞 荧光抗体技术 软骨形成
原文传递
TLR4/NO通路在高危型HPV阳性的子宫颈癌组织和细胞中的表达及意义 被引量：16
19
作者 肖晶晶 郭奇桑 +3 位作者 王宪政 谢锋 张宏伟 隋龙 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期41-47,共7页
目的 初步探索Toll样受体（TLR）/NO通路在高危型HPV阳性的子宫颈癌组织和细胞中的表达及意义.方法 （1）选取2012年11月1日至2013年5月20日在复旦大学附属妇产科医院就诊的高危型HPV阳性的子宫颈鳞癌患者（宫颈癌组）及经病理检查诊断... 目的 初步探索Toll样受体（TLR）/NO通路在高危型HPV阳性的子宫颈癌组织和细胞中的表达及意义.方法 （1）选取2012年11月1日至2013年5月20日在复旦大学附属妇产科医院就诊的高危型HPV阳性的子宫颈鳞癌患者（宫颈癌组）及经病理检查诊断为正常子宫颈的高危型HPV阳性患者（对照组）各36例,Greiss法检测两组患者宫颈管NO含量;免疫组化SP法检测两组患者子宫颈组织中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达;激光显微切割（LCM）技术获取两组患者子宫颈组织中的鳞状上皮细胞,采用逆转录（RT）-PCR技术检测所获鳞状上皮细胞中TLR/NO通路中关键基因[包括TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9、核因子κB（NF-κB）p65、iNOS]mRNA的表达水平;将宫颈癌组和对照组中表达差异最为显著的TLR（为TLR4）用于后续研究.（2）选用子宫颈癌细胞系CaSki（HPV 16 阳性）、HeLa（HPV 18阳性）和C33a（HPV阴性）,采用RT-PCR技术和蛋白印迹法（western blot）分别检测CaSki、HeLa和C33a细胞中TLR4、NF-κBp65、iNOS mRNA和蛋白的表达,采用细胞免疫荧光法检测CaSki、HeLa和C33a细胞中TLR4蛋白的表达.结果 （1）宫颈癌组宫颈管NO含量为（42.92±0.36） μmol/L,对照组为（15.49±0.24） μmol/L,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.宫颈癌组和对照组子宫颈组织中iNOS蛋白的阳性表达率分别为75％（27/36）、6％ （2/36）,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;iNOS蛋白的表达与子宫颈鳞癌患者年龄、肿瘤大小和临床分期无关（P＞0.05）;而与有无淋巴结转移、淋巴血管浸润明显相关（P＜0.05）.宫颈癌组子宫颈组织鳞状上皮细胞中TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、NF-κBp65、iNOS mRNA的表达水平分别为4.80±0.32、7.41 ±0.39、2.90±0.14、2.02±0.26、3.09±0.16、2.88±0.17,对照组分别为1.21±0.12、1.86±0.21、1.25±0.11、1.22±0.14、0.48±0.15、0.27±0.11,宫颈癌组均高于对� 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 乳头状瘤病毒科 Toll样受体4 一氧化氮合酶 一氧化氮 荧光抗体技术 显微切割
原文传递
不同荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒检测中的应用评价 被引量：16
20
作者 朱明岩 叶英 《安徽医药》 CAS 2016年第9期1723-1726,共4页
目的评价普通荧光定量PCR技术与罗氏内标法荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒(HBV)检测中的意义。方法采集HBV患者的血清190份,分别用两种方法进行检测,通过相关性分析和Kappa检验评价两种试剂检测结果之间的差异性及一致性。结果 (1)190... 目的评价普通荧光定量PCR技术与罗氏内标法荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒(HBV)检测中的意义。方法采集HBV患者的血清190份,分别用两种方法进行检测,通过相关性分析和Kappa检验评价两种试剂检测结果之间的差异性及一致性。结果 (1)190份标本中,罗氏Cobas试剂与国产试剂检测结果呈线性相关(R2=0.670 7,P<0.05);(2)分成HBeAg(+)与HBeAg(-)两组比较,两组中Cobas试剂与国产试剂检测均呈线性相关(R2=0.586 4,P<0.05;R2=0.522 6,P<0.05);(3)根据不同HBeAg状态和抗病毒要求的DNA载量对标本进行一致性分析,HBeAg(+)组Kappa值为0.752;HBeAg(-)组Kappa值为0.381。结论对于HBeAg(+)患者,可以应用国产试剂检测患者的HBV-DNA水平,而对于HBeAg(-)患者,建议应用Cobas试剂检测其患者的HBV-DNA水平。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 多重聚合酶链式反应 荧光抗体技术
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 13 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部