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荧光共振能量转移-荧光寿命显微成像(FRET-FLIM)技术在生命科学研究中的应用进展 被引量:4
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作者 罗淋淋 牛敬敬 +2 位作者 莫蓓莘 林丹樱 刘琳 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1023-1031,共9页
细胞是动植物结构和生命活动的基本单位。细胞过程的一个重要特点就是其生化组分在时空调控上的相互作用关系。然而,利用传统的生化方法(如酵母双杂交系统、pull-down系统等)很难在空间上评估活细胞内分子间的相互作用。光学技术的快速... 细胞是动植物结构和生命活动的基本单位。细胞过程的一个重要特点就是其生化组分在时空调控上的相互作用关系。然而,利用传统的生化方法(如酵母双杂交系统、pull-down系统等)很难在空间上评估活细胞内分子间的相互作用。光学技术的快速发展,为研究活细胞中生物分子的时空动态提供了新的遗传研究工具,其中荧光共振能量转移-荧光寿命显微成像(FRET-FLIM)技术在实时探测分析活细胞中生物大分子构象变化和分子间动态相互作用过程具有独特的优势,如:实现对活细胞的实时“可视化”研究,同时具有高时空分辨率;检测更加灵敏、结果可信度高;且基于简易的数学运算完成简单快捷的分析程序。介绍FRET-FLIM技术的理论背景知识,对比了该技术与传统蛋白相互作用技术研究的利弊,同时归纳了其在蛋白相互作用、细胞生物学和疾病诊断等方面的最新应用研究进展,最后总结和讨论了FRET-FLIM技术的未来发展趋势,以期能够为揭示活细胞的结构和细胞过程相关研究提供新的见解。 展开更多
关键词 荧光共振能量转移 荧光寿命显微成像 蛋白相互作用 疾病诊断
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蟾酥灵诱导细胞内caspase-3活化特性荧光分析 被引量:3
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作者 屈军乐 潘文良 +3 位作者 赵伶羚 孙磊 王小平 陈同生 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2008年第3期244-247,共4页
采用多光子激发荧光光谱和寿命成像显微技术,在单个活细胞内实时检测蟾酥灵(bufalin,Bu)诱导人类肺腺癌(ASTC-a-1)细胞死亡过程中caspase-3的活化特性.利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测蟾酥灵对人类肺腺癌细胞活性的抑制效应.蟾酥灵... 采用多光子激发荧光光谱和寿命成像显微技术,在单个活细胞内实时检测蟾酥灵(bufalin,Bu)诱导人类肺腺癌(ASTC-a-1)细胞死亡过程中caspase-3的活化特性.利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测蟾酥灵对人类肺腺癌细胞活性的抑制效应.蟾酥灵处理稳定表达FRET质粒SCAT3的人类肺腺癌后,在不同时间点检测单个活细胞中SCAT3的多光子激发荧光光谱及其供体ECFP的荧光寿命,从而检测bufa-lin诱导细胞凋亡过程中caspase-3活化特性.实验结果表明:蟾酥灵以浓度依赖性的方式显著地抑制人类肺腺癌细胞的生长;蟾酥灵处理细胞24h后,细胞内SCAT3未被切割,而蟾酥灵作用细胞48h后SCAT3被切割.说明caspase-3参与调控蟾酥灵诱导人类肺腺癌细胞凋亡的过程. 展开更多
关键词 蟾酥灵 荧光光谱 荧光寿命成像 CASPASE-3 荧光共振能量转移
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