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胶原酶消化结合组织块培养法分离纯化兔肺成纤维细胞
被引量:
6
1
作者
罗涛
杨亚冬
+1 位作者
唐靓
张文元
《现代医药卫生》
2017年第17期2584-2587,共4页
目的探讨胶原酶消化组织块结合法分离纯化新生兔肺成纤维细胞。方法取新生兔肺,剪成组织块,用Ⅳ型胶原酶轻度消化后,进行组织块贴壁培养,分离纯化肺成纤维细胞,然后进行原代、传代培养,用MTT法测定细胞生长曲线。结果组织块贴壁培养2 d...
目的探讨胶原酶消化组织块结合法分离纯化新生兔肺成纤维细胞。方法取新生兔肺,剪成组织块,用Ⅳ型胶原酶轻度消化后,进行组织块贴壁培养,分离纯化肺成纤维细胞,然后进行原代、传代培养,用MTT法测定细胞生长曲线。结果组织块贴壁培养2 d,镜下可见组织块周边有少量长梭形细胞逸出,4 d时组织块周围有大量细胞爬出,生长迅速,7 d时接近融合,9 d时高度融合。传代2次后杂细胞基本去除,细胞活性状态较好的为1~4代。5~6代后细胞的增殖能力逐渐下降,细胞出现逐渐老化现象。结论Ⅳ型胶原酶轻度消化后结合组织块贴壁法是一种较为可靠快速的肺成纤维细胞分离纯化培养方法,使用该法可获得具有典型形态特征及活性较好的肺成纤维细胞。
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关键词
成纤维细胞/肺
微生物胶原酶
培养技术
细胞培养技术
共同培养技术
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职称材料
大黄素对肺成纤维细胞增殖及细胞周期的影响
被引量:
6
2
作者
屈云
姚平
李廷谦
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期74-76,共3页
目的 探讨大黄素对体外培养肺成纤维细胞 (L F)增殖的作用。方法 采用体外细胞培养、透射电镜、流式细胞仪和同位素检测等技术 ,比较了在大黄素作用下 L F的增殖 ,并检测大黄素作用下 L F的细胞增殖周期和电镜下的形态学特征。结果 ...
目的 探讨大黄素对体外培养肺成纤维细胞 (L F)增殖的作用。方法 采用体外细胞培养、透射电镜、流式细胞仪和同位素检测等技术 ,比较了在大黄素作用下 L F的增殖 ,并检测大黄素作用下 L F的细胞增殖周期和电镜下的形态学特征。结果 大黄素能够抑制体外培养 L F的增殖 (P<0 .0 1) ,并随着剂量增加抑制效应增强 ,大黄素可以提高 L F细胞周期中 G1 期细胞的比例 (P<0 .0 1) ,减少 S期和 G2 期细胞的比例 (P<0 .0 1)。同时 ,发现大黄素作用组的 L F形态上与对照组无明显差异。结论 大黄素具有抑制 L F增殖和阻止 L F由 G1 期进入 S期和 G2期的作用 ,同时 ,本研究的最大剂量大黄素 (10 0 μg/ ml)对 L F细胞形态无明显损伤。
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关键词
成纤维细胞
肺纤维化
大黄素
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职称材料
鹿血清对体外培养二倍体细胞的抗老化实验研究
被引量:
9
3
作者
王淑兰
李淑莲
+1 位作者
董崇田
肖雪媛
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1989年第2期126-128,219,共3页
实验用体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞,从35代开始在培养液中加入鹿血清为实验组,不加鹿血清为对照组。我们观察了鹿血清对细胞的生长和增殖的影响,以及一般光镜、荧光显微镜下的细胞形态与组化变化。结果表明实验组的细胞形态、生长...
实验用体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞,从35代开始在培养液中加入鹿血清为实验组,不加鹿血清为对照组。我们观察了鹿血清对细胞的生长和增殖的影响,以及一般光镜、荧光显微镜下的细胞形态与组化变化。结果表明实验组的细胞形态、生长和增殖均比同代对照组良好。实验证明5%鹿血清对体外培养的人胚肺二倍体细胞有抗老化作用。
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关键词
二倍体细胞
血清
胚肺
鹿抗老化
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职称材料
硒抑瘤作用的实验研究
被引量:
11
4
作者
谢根法
张强
+2 位作者
王惠
张大锤
李风琴
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1992年第1期40-43,共4页
亚硒酸钠对胃癌细胞系SGC—7901有54%的杀伤能力,对人早幼粒白血病细胞(HL—60)生长有明显抑制作用。单独用于治疗小鼠移植性肿瘤S_(180)无效,联合大蒜治疗有较好效果。有可能硒是通过诱导癌细胞(如HL—60细胞)的成熟分化和阻断某些致...
亚硒酸钠对胃癌细胞系SGC—7901有54%的杀伤能力,对人早幼粒白血病细胞(HL—60)生长有明显抑制作用。单独用于治疗小鼠移植性肿瘤S_(180)无效,联合大蒜治疗有较好效果。有可能硒是通过诱导癌细胞(如HL—60细胞)的成熟分化和阻断某些致癌物质(如MNNG)对正常细胞恶性转化,它能否起防癌作用值得进一步研究。
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关键词
肿瘤
实验
白血病
亚硒酸钠
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职称材料
壮龄剂对人胚肺二倍体细胞的抗老化实验研究
5
作者
王淑兰
李淑连
+1 位作者
董崇田
崔丽
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1991年第2期112-115,211,共4页
本研究用体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞作为壮龄剂抗老化研究的细胞模型,从35代开始,于培养液中加入壮龄剂者为实验组,不加药为对照组。现察了壮龄剂对二倍体细胞的形态结构、生长速度和增殖的影响。结果是实验组细胞的传代寿命为68代...
本研究用体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞作为壮龄剂抗老化研究的细胞模型,从35代开始,于培养液中加入壮龄剂者为实验组,不加药为对照组。现察了壮龄剂对二倍体细胞的形态结构、生长速度和增殖的影响。结果是实验组细胞的传代寿命为68代,对照组为51代,实验组比对照组多传17代,能延长细胞寿命33.3%代。实验组细胞的生长状态,速度和酸性磷酸酶活性变化均比同代对照组细胞好。这些结果证明了壮龄剂有促进细胞生长增殖和抗老化作用。
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关键词
壮龄剂
人胚肺二倍体细胞
抗老化
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职称材料
逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞
6
作者
宋诗铎
郑东钧
+5 位作者
祁伟
隋志芳
李为
方晖
何屏
魏殿军
《天津医药》
CAS
北大核心
2002年第2期94-97,共4页
目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达。方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLG-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒。应...
目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达。方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLG-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒。应用脂质体方法转染重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3/bGH和2BS/bGH。结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现。RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达。结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高。
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关键词
逆转录病毒载体转移系统
生长激素
成纤维细胞
基因转染
NIH3T3细胞
基因治疗
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职称材料
题名
胶原酶消化结合组织块培养法分离纯化兔肺成纤维细胞
被引量:
6
1
作者
罗涛
杨亚冬
唐靓
张文元
机构
浙江省医学科学院生物工程研究所
浙江省医学科学院保健食品研究所
出处
《现代医药卫生》
2017年第17期2584-2587,共4页
基金
浙江省医药卫生科技计划项目(2015ZDA011
2015KYB092
+1 种基金
2016KYB071)
浙江省科技计划公益技术研究项目(2015C33109)
文摘
目的探讨胶原酶消化组织块结合法分离纯化新生兔肺成纤维细胞。方法取新生兔肺,剪成组织块,用Ⅳ型胶原酶轻度消化后,进行组织块贴壁培养,分离纯化肺成纤维细胞,然后进行原代、传代培养,用MTT法测定细胞生长曲线。结果组织块贴壁培养2 d,镜下可见组织块周边有少量长梭形细胞逸出,4 d时组织块周围有大量细胞爬出,生长迅速,7 d时接近融合,9 d时高度融合。传代2次后杂细胞基本去除,细胞活性状态较好的为1~4代。5~6代后细胞的增殖能力逐渐下降,细胞出现逐渐老化现象。结论Ⅳ型胶原酶轻度消化后结合组织块贴壁法是一种较为可靠快速的肺成纤维细胞分离纯化培养方法,使用该法可获得具有典型形态特征及活性较好的肺成纤维细胞。
关键词
成纤维细胞/肺
微生物胶原酶
培养技术
细胞培养技术
共同培养技术
Keywords
fibroblasts
/
lung
Microbial collagenase
Culture technique
Cell culture techniques
Coculture techniques
分类号
R135.2 [医药卫生—劳动卫生]
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职称材料
题名
大黄素对肺成纤维细胞增殖及细胞周期的影响
被引量:
6
2
作者
屈云
姚平
李廷谦
机构
四川大学华西医院康复科
解放军
四川大学华西医院中医科
出处
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期74-76,共3页
文摘
目的 探讨大黄素对体外培养肺成纤维细胞 (L F)增殖的作用。方法 采用体外细胞培养、透射电镜、流式细胞仪和同位素检测等技术 ,比较了在大黄素作用下 L F的增殖 ,并检测大黄素作用下 L F的细胞增殖周期和电镜下的形态学特征。结果 大黄素能够抑制体外培养 L F的增殖 (P<0 .0 1) ,并随着剂量增加抑制效应增强 ,大黄素可以提高 L F细胞周期中 G1 期细胞的比例 (P<0 .0 1) ,减少 S期和 G2 期细胞的比例 (P<0 .0 1)。同时 ,发现大黄素作用组的 L F形态上与对照组无明显差异。结论 大黄素具有抑制 L F增殖和阻止 L F由 G1 期进入 S期和 G2期的作用 ,同时 ,本研究的最大剂量大黄素 (10 0 μg/ ml)对 L F细胞形态无明显损伤。
关键词
成纤维细胞
肺纤维化
大黄素
Keywords
fibroblasts
lung
fibrosis Emodin
分类号
R285 [医药卫生—中药学]
下载PDF
职称材料
题名
鹿血清对体外培养二倍体细胞的抗老化实验研究
被引量:
9
3
作者
王淑兰
李淑莲
董崇田
肖雪媛
机构
白求恩医科大学组织胚胎教研室
出处
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1989年第2期126-128,219,共3页
文摘
实验用体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞,从35代开始在培养液中加入鹿血清为实验组,不加鹿血清为对照组。我们观察了鹿血清对细胞的生长和增殖的影响,以及一般光镜、荧光显微镜下的细胞形态与组化变化。结果表明实验组的细胞形态、生长和增殖均比同代对照组良好。实验证明5%鹿血清对体外培养的人胚肺二倍体细胞有抗老化作用。
关键词
二倍体细胞
血清
胚肺
鹿抗老化
Keywords
Deer serum Anti-aging action
fibroblasts
lung
Embryo Human
分类号
R977.9 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
硒抑瘤作用的实验研究
被引量:
11
4
作者
谢根法
张强
王惠
张大锤
李风琴
机构
山东省医科院药物研究所
出处
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1992年第1期40-43,共4页
文摘
亚硒酸钠对胃癌细胞系SGC—7901有54%的杀伤能力,对人早幼粒白血病细胞(HL—60)生长有明显抑制作用。单独用于治疗小鼠移植性肿瘤S_(180)无效,联合大蒜治疗有较好效果。有可能硒是通过诱导癌细胞(如HL—60细胞)的成熟分化和阻断某些致癌物质(如MNNG)对正常细胞恶性转化,它能否起防癌作用值得进一步研究。
关键词
肿瘤
实验
白血病
亚硒酸钠
Keywords
Sodium Selenite Human Promyelocytic Leukemia Cell Line HL-60 Transformation of Human
fibroblast
of
lung
Embryo.
分类号
R73-36 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
壮龄剂对人胚肺二倍体细胞的抗老化实验研究
5
作者
王淑兰
李淑连
董崇田
崔丽
机构
白求恩医科大学组织胚胎教研室
出处
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1991年第2期112-115,211,共4页
文摘
本研究用体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞作为壮龄剂抗老化研究的细胞模型,从35代开始,于培养液中加入壮龄剂者为实验组,不加药为对照组。现察了壮龄剂对二倍体细胞的形态结构、生长速度和增殖的影响。结果是实验组细胞的传代寿命为68代,对照组为51代,实验组比对照组多传17代,能延长细胞寿命33.3%代。实验组细胞的生长状态,速度和酸性磷酸酶活性变化均比同代对照组细胞好。这些结果证明了壮龄剂有促进细胞生长增殖和抗老化作用。
关键词
壮龄剂
人胚肺二倍体细胞
抗老化
Keywords
Zhuang Ling Agent Anti-aging action
fibroblasts
Human embryonic
lung
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞
6
作者
宋诗铎
郑东钧
祁伟
隋志芳
李为
方晖
何屏
魏殿军
机构
天津医科大学第二医院
天津医科大学泌尿研究所
出处
《天津医药》
CAS
北大核心
2002年第2期94-97,共4页
基金
天津市自然科学基金资助项目(项目编号:941409007)
文摘
目的:以牛生长激素(bGH)为模型,建立逆转录病毒载体转移系统,体外转染鼠成纤维细胞株NIH3T3和人胚肺成纤维细胞2BS,以获得bGH表达。方法:将PCR扩增的bGH基因片段插入逆转录病毒载体pSXLG-MDR相应酶切位点,获得的重组逆转录病毒质粒。应用脂质体方法转染重组质粒进入包装细胞PA317,筛选长春新碱抗性克隆株,收集上清液感染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞2BS,筛选携带bGH基因的成纤维细胞的克隆株3T3/bGH和2BS/bGH。结果:RT-PCR分析表明基因转染组的3T3/bGH细胞和2BS/bGH细胞在相当于680bp处有一清晰的条带,而空质粒对照组无相应条带出现。RIA分析表明转染基因细胞的培养液及胞浆蛋白有bGH蛋白表达,而作为对照的3T3/mdr细胞和NIH/3T3细胞均无此蛋白表达。结论:应用逆转录病毒IRBS载体系统转染bGH基因进入成纤维细胞,该系统易筛选,转染效率较高。
关键词
逆转录病毒载体转移系统
生长激素
成纤维细胞
基因转染
NIH3T3细胞
基因治疗
Keywords
retroviridae somat
fibroblasts
animals cattle anthropology
lung
embryology cytology
分类号
R459.9 [医药卫生—治疗学]
R392.28 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胶原酶消化结合组织块培养法分离纯化兔肺成纤维细胞
罗涛
杨亚冬
唐靓
张文元
《现代医药卫生》
2017
6
下载PDF
职称材料
2
大黄素对肺成纤维细胞增殖及细胞周期的影响
屈云
姚平
李廷谦
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
6
下载PDF
职称材料
3
鹿血清对体外培养二倍体细胞的抗老化实验研究
王淑兰
李淑莲
董崇田
肖雪媛
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1989
9
下载PDF
职称材料
4
硒抑瘤作用的实验研究
谢根法
张强
王惠
张大锤
李风琴
《癌症》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1992
11
下载PDF
职称材料
5
壮龄剂对人胚肺二倍体细胞的抗老化实验研究
王淑兰
李淑连
董崇田
崔丽
《白求恩医科大学学报》
CSCD
1991
0
下载PDF
职称材料
6
逆转录病毒介导的牛生长激素基因转染NIH3T3细胞和人胚肺成纤维细胞
宋诗铎
郑东钧
祁伟
隋志芳
李为
方晖
何屏
魏殿军
《天津医药》
CAS
北大核心
2002
0
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职称材料
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