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南极土壤嗜冷真菌Chrysosporium sp.C_(3438)活性代谢产物C_(3438)A的分离及结构鉴别 被引量：12
1
作者 鲁敏 王文翔 +1 位作者 王丽萍 胡继兰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期11-12,38,共3页
以对精原细胞法是否有活性作为筛选模型 ,对南极土壤嗜冷真菌 Chrysosporium sp. C3 4 3 8经低温发酵的活性产物进行了深入的化学研究 ,首次从南极土壤微生物代谢产物中分离得到
关键词 南极土壤嗜冷真菌Chrysosporiumsp C3438 ferrichrome 结构鉴别 精原细胞法 活性代谢产物
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化脓性链球菌脂蛋白FtsB的基因克隆、表达、纯化与功能研究 被引量：1
2
作者 李慧 吕洁 +5 位作者 王红翠 王南杰 李楠 詹胜 阳小燕 孙雪松 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1786-1792,共7页
体外克隆化脓性链球菌5005的ftsb基因,表达并纯化FtsB蛋白,并对其铁色素结合特性进行初步研究。首先通过PCR方法从基因组中扩增ftsb基因,将其连接到pGEX4T-1载体上,转入大肠杆菌DH5α中大量扩增,将测序正确的重组载体转化到表达宿主大... 体外克隆化脓性链球菌5005的ftsb基因,表达并纯化FtsB蛋白,并对其铁色素结合特性进行初步研究。首先通过PCR方法从基因组中扩增ftsb基因,将其连接到pGEX4T-1载体上,转入大肠杆菌DH5α中大量扩增,将测序正确的重组载体转化到表达宿主大肠杆菌BL21进行表达,优化诱导表达条件。利用亲和层析方法纯化表达产物,并对FtsB的铁色素结合特性进行研究,同时通过DEPC封闭组氨酸实验对其结合位点进行初步研究。成功构建原核表达载体pGEX-ftsb,获得分子量约33 kD的野生型FtsB蛋白,产率为30 mg/L。紫外-可见光谱研究表明FtsB和铁色素结合后在450 nm处出现紫外吸收峰,DEPC封闭组氨酸实验证明FtsB中组氨酸不参与铁色素的结合。对FtsB蛋白进行铁色素结合特性和结合位点进行研究,为进一步研究细菌中的铁色素转运机理及开发疫苗候选物和药靶奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 化脓性链球菌 FtsB蛋白 铁色素 DEPC
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肺炎链球菌R6中Spr0934蛋白与铁色素相互作用机制的研究
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作者 王若男 熊兴东 +1 位作者 刘新光 曹锟 《广东医科大学学报》 2022年第1期11-14,33,共5页
目的探究肺炎链球菌R6中未知蛋白Spr0934与其潜在配体铁色素相互作用的机制。方法基于Uniprot数据库对目标蛋白Spr0934进行同源序列比对,筛选出与其同源性较高的候选蛋白;利用Spr0934蛋白结构与铁色素配体进行分子对接;分子动力学模拟... 目的探究肺炎链球菌R6中未知蛋白Spr0934与其潜在配体铁色素相互作用的机制。方法基于Uniprot数据库对目标蛋白Spr0934进行同源序列比对,筛选出与其同源性较高的候选蛋白;利用Spr0934蛋白结构与铁色素配体进行分子对接;分子动力学模拟技术检测铁色素被靶标蛋白结合之后引起的结构变化,并分析二者的结合机理。结果Spr0934与多个细菌蛋白具有较高同源性,其中铁色素结合蛋白4HMQ的活性中心与该蛋白相似性最高;分子对接的结果显示,铁色素与Spr0934的结合能量稳定在-6.27 kcal/mol,表明铁色素为潜在的配体分子;分子动力学模拟的结果证实,与apoSpr0934相比,该配体分子能让蛋白结构趋于稳定,蛋白整体波动性、溶剂可及表面积、氨基酸残基的灵活性均降低,二级结构各组分的比例更为合理。结论在Spr0934与铁色素可能的相互作用机制中,直接相互作用的位点为Asn-83、Tyr-133、Tyr-225和Arg-231,而Ala-82、Tyr-84、Trp-158和Phe-255起辅助作用。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 分子动力学模拟 铁色素
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化脓链球菌中野生型和突变体FtsB蛋白的铁色素结合特性
4
作者 李慧 薛巍 孙雪松 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期32-38,共7页
目的:进一步比较化脓链球菌中野生型和Y137A、W204A突变型FtsB蛋白的铁色素结合特性,确定铁色素结合位点。方法:制备野生型和Y137A、W204A突变型FtsB蛋白,采用ICP-MS和ITC比较其铁色素结合能力;Na2SO4还原实验比较铁色素的还原速率;CD... 目的:进一步比较化脓链球菌中野生型和Y137A、W204A突变型FtsB蛋白的铁色素结合特性,确定铁色素结合位点。方法:制备野生型和Y137A、W204A突变型FtsB蛋白,采用ICP-MS和ITC比较其铁色素结合能力;Na2SO4还原实验比较铁色素的还原速率;CD热变性和盐酸胍化学变性实验比较其铁色素结合稳定性。结果:Y137A、W204A突变型FtsB蛋白的铁色素结合能力和结合稳定性均低于野生型蛋白,铁色素的还原速率均高于野生型蛋白,可见Tyr137和Trp204是FtsB蛋白重要的铁色素结合位点。结论:进一步确定了Tyr137和Trp204氨基酸残基在FtsB与铁色素结合中的重要作用,为深入研究细菌中的铁色素转运机理及开发疫苗候选物奠定了一定的理论基础。 展开更多
关键词 化脓链球菌 FtsB突变体蛋白 铁色素结合
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