参芪蛭龙汤对膜性肾病模型小鼠肾组织中FcγRⅠ、FcγRⅡB、FcγRⅢA表达的影响

1

作者 薛丕良 王向伟 +3 位作者 李星宇 王文文 王顺 刘星 《中国医药导报》 CAS 2023年第35期24-30,共7页

目的 探讨参芪蛭龙汤对膜性肾病(MN)模型小鼠肾组织中FcγRⅠ、FcγRⅡB、FcγRⅢA表达的影响。方法 60只SPF级ICR小鼠,6周龄,体重(23±4)g,雌雄各半,按照随机数字表法分为空白组(10只)和造模组(50只)。造模组小鼠注射阳离子化牛血... 目的 探讨参芪蛭龙汤对膜性肾病(MN)模型小鼠肾组织中FcγRⅠ、FcγRⅡB、FcγRⅢA表达的影响。方法 60只SPF级ICR小鼠,6周龄,体重(23±4)g,雌雄各半,按照随机数字表法分为空白组(10只)和造模组(50只)。造模组小鼠注射阳离子化牛血清白蛋白,复制MN小鼠模型。取其中造模成功的40只小鼠按照随机数字表法分为模型组,参芪蛭龙汤高、低剂量组(24、12 g/kg)和雷公藤多苷片组(14 mg/kg),每组10只。给药4周后,处死小鼠。HE、Masson染色观察肾脏组织病理变化;免疫荧光法观察肾组织中FcγRⅠ、FcγRⅡB、FcγRⅢA蛋白荧光强度;Western blot检测肾脏组织内FcγRⅠ、FcγRⅡB、FcγRⅢA蛋白表达;RT-PCR检测肾脏组织中FcγRⅠ、FcγRⅡB、FcγRⅢA mRNA表达。结果 HE染色显示空白组小鼠上皮细胞、基底膜、肾小管及肾间质形态结构均未见明显异常。模型组小鼠肾小球体积增大,肾小球毛细血管袢扩张,血细胞溢出,肾小球系膜增厚,肾小囊腔增大,局部肾小囊腔壁上皮严重破损。与模型组比较,参芪蛭龙汤高剂量组小鼠可见肾小球体积减小,基底膜增厚减轻,肾小囊壁上皮未破损或局部破损。Masson染色显示空白组小鼠肾小球基底膜正常。模型组小鼠上皮下大量嗜复红蛋白沉积,可见基底膜基质反应,肾小管空泡样脂肪变性,肾间质淋巴大量增生。与模型组比较,各给药组小鼠病变减轻,以参芪蛭龙汤高剂量组改善更加明显。与空白组比较,模型组FcγRⅠ、FcγRⅢA蛋白荧光增强,FcγRⅡB蛋白荧光减弱(P<0.05);与模型组比较,参芪蛭龙汤高剂量组FcγRⅠ、FcγRⅢA蛋白荧光减弱(P<0.05),参芪蛭龙汤高、低剂量组FcγRⅡB蛋白荧光增强(P<0.05);与参芪蛭龙汤低剂量组比较,参芪蛭龙汤高剂量组FcγRⅠ、FcγRⅢA蛋白荧光减弱,FcγRⅡB蛋白荧光增强(P<0.05)。与空白组比较,模型组FcγRⅠ、FcγRⅢA蛋白表达升高,FcγRⅡB蛋白表达降低( 展开更多

关键词 膜性肾病 参芪蛭龙汤 阳离子牛血清白蛋白 fcγrⅰ fcγrⅡB fcγrⅢA

下载PDF 职称材料

静脉注射免疫球蛋白对神经病理性疼痛大鼠的治疗作用 被引量：3

2

作者 王立凤 张志宇 +1 位作者 李真真 梁映霞 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第8期849-853,共5页

目的:观察静脉注射免疫球蛋白对神经病理性疼痛大鼠的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法:雄性Wistar大鼠104只,随机分成4组:假手术组(S组,n=8),假手术+静脉注射免疫球蛋白组(SI组,n=32),坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction i... 目的:观察静脉注射免疫球蛋白对神经病理性疼痛大鼠的治疗作用,初步探讨其作用机制。方法:雄性Wistar大鼠104只,随机分成4组:假手术组(S组,n=8),假手术+静脉注射免疫球蛋白组(SI组,n=32),坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury of the sciatic nerve,CCI)模型组(NP组,n=32),CCI模型+静脉注射免疫球蛋白组(NI组,n=32)。S组只分离暴露坐骨神经不结扎,NP组分离并结扎坐骨神经,SI组和NI组分别在手术后静脉注射免疫球蛋白。分别于术前、术后3、7、14、21 d测定各组大鼠热/机械痛阈。RT-PCR检测术后3、7、14、21 d时脊髓腰膨大部位和背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)中Fc gamma RI(Fc RⅠ)mRNA的表达。结果:与S组相比,NP组术后3、7、14、21 d大鼠热/机械痛阈显著降低(P<0.05),SI组术后3、7、14、21 d大鼠热/机械痛阈显著升高(P<0.05);与NP组相比,NI组给药后3、7、14、21 d大鼠的热/机械痛阈值显著升高(P<0.05)。与S组比较,NP组和SI组大鼠脊髓和DRG中FcγRⅠmRNA表达明显上调(P<0.05);与NP组相比,NI组大鼠脊髓和DRG中FcγRⅠmRNA明显上调(P<0.05)。结论:静脉注射免疫球蛋白可以缓解神经病理性疼痛大鼠的疼痛程度,脊髓中的FcγRⅠ在免疫球蛋白的镇痛作用中发挥作用。 展开更多

关键词 fcγrⅰ 神经病理性疼痛 脊髓 背根神经节 静脉注射免疫球蛋白

下载PDF 职称材料

电化学发光免疫分析法在评价治疗性单抗与FcγRⅠ结合活性中的应用 被引量：3

3

作者 徐刚领 郭莎 +3 位作者 张峰 于传飞 王文波 王兰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期39-44,共6页

目的:建立电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)测定贝伐珠单抗与免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ)结合活性的方法,并评价贝伐珠单抗生物类似药(similar biotherapeutic products,SBP)候选物和其原研药(refer... 目的:建立电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence immunoassay,ECLI)测定贝伐珠单抗与免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ)结合活性的方法,并评价贝伐珠单抗生物类似药(similar biotherapeutic products,SBP)候选物和其原研药(reference biotherapeutic product,RBP)与FcγRⅠ结合活性的相似性。方法:先使用封闭液对链霉亲和素(streptavidin,SA)预包被的96孔MSD板进行封闭,再将生物素(biotin)标记的FcγRⅠ与之结合,之后加入不同稀释倍数的贝伐珠单抗,最后加入SULFO-TAG(Ru(bpy)_3^(2+))标记的羊抗人检测抗体上机读数。按照试验设计分别对FcγRⅠ浓度、单抗样品初始浓度、倍比稀释倍数、检测抗体浓度等试验参数进行优化,并对优化后方法的准确性和精密性进行初步验证,还将建立的方法用于评价贝伐珠单抗SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性。结果:采用优化后的方法检测,贝伐珠单抗与FcγRⅠ的结合呈现良好的剂量效应曲线,R^2>0.99。该方法具有较好的准确性和精密性,靶值为50%～150%样品的回收率在95.2%～103.7%之间;RSD均小于10%。贝伐珠单抗SBP候选药与FcγRⅠ的相对结合活性均在为RBP相对结合活性均值±3SD之间。结论:电化学发光免疫分析法能够用于评价抗体与FcγRⅠ的结合活性,并可应用于对SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性分析。该方法的灵敏度和准确性较好,为评价抗体与FcγRⅠ的结合提供了新的技术手段。 展开更多

关键词 单克隆抗体 贝伐珠单抗 免疫球蛋白G fc段受体ⅰ(fcγrⅰ) 电化学发光免疫分析(ECLI) 结合活性

原文传递

敲除背根神经节Fcgr1减弱类风湿关节炎模型大鼠NF-κB/NLRP3通路活化 被引量：1

4

作者 刘帆 苏思 +2 位作者 王涛 袁勃 马超 《基础医学与临床》 2021年第7期963-969,共7页

目的探讨外周神经元FcγRⅠ调控类风湿关节炎疼痛的机制。方法利用野生型SD大鼠和条件敲除Fcgr1大鼠建立类风湿关节炎模型。设野生型大鼠对照组(control组)、野生型大鼠类风湿关节炎(RA)组和条件敲除Fcgr1大鼠类风湿关节炎(CKO+RA)组,每... 目的探讨外周神经元FcγRⅠ调控类风湿关节炎疼痛的机制。方法利用野生型SD大鼠和条件敲除Fcgr1大鼠建立类风湿关节炎模型。设野生型大鼠对照组(control组)、野生型大鼠类风湿关节炎(RA)组和条件敲除Fcgr1大鼠类风湿关节炎(CKO+RA)组,每组7只。用痛觉行为学检测各组大鼠建模前第3、1 d,建模后第3、5、7、9 d机械痛阈值和热痛阈值变化,用荧光原位杂交实验检测条件敲除Fcgr1大鼠背根神经节(DRG)中是否表达Fcgr1 mRNA,用免疫荧光实验检测大鼠DRG中pNF-κB(p65)、NLRP3、IL-1β和IL-18表达和脊髓背角(SDH)胶质细胞活化。结果与control组比较,RA组和(CKO+RA)组大鼠机械和热疼痛阈值均降低,(CKO+RA)组大鼠机械和热疼痛阈值比RA组大鼠明显提高(P<0.05);与RA组大鼠相比,(CKO+RA)组大鼠DRG中pNF-κB(p65)、NLRP3、IL-1β和IL-18表达明显下调(P<0.05);SDH中GFAP和Iba1表达降低(P<0.05)。结论DRG神经元FcγRⅠ可能通过NF-κB/NLRP3通路促进神经元炎性细胞因子IL-1β和IL-18合成释放,引起SDH胶质细胞活化,参与类风湿关节炎疼痛。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 疼痛 中枢敏化 fc-gamma receptorⅰ(fcγrⅰ) 免疫复合物

下载PDF 职称材料

牛FcγRⅠ(CD64)GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达 被引量：2

5

作者 张改平 乔松林 +5 位作者 李青梅 王丽 张红 郭军庆 王选年 夏春 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第6期79-82,共4页

采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgGFc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致。在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到GST融合蛋白表... 采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgGFc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致。在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX - 6P- 1,转化宿主菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导,SDS -PAGE分析表达了N端带有GST的融合蛋白,Western -blotting试验表明融合蛋白在变性条件下能和牛IgG结合。GST -FcγRⅠ融合蛋白的成功表达为研究牛IgG和受体的相互作用机制及其介导的免疫反应打下了基础。 展开更多

关键词 牛fcγrⅰ(CD64) GST融合蛋白 表达

下载PDF 职称材料

Fc-gammaⅠ型受体在阿尔茨海默病患者和模型小鼠脑皮质的表达

6

作者 孙健茹 仇文颖 +1 位作者 钱晓菁 马超 《基础医学与临床》 2022年第5期740-744,共5页

目的探讨高亲和力IgG受体Fc-gammaⅠ型(FcγRⅠ)在阿尔茨海默病(AD)脑皮层的表达变化。方法选用正常人脑组织样本和神经病理诊断为AD患者脑组织样本,6月龄野生型小鼠和APP/PS1小鼠。免疫荧光和免疫蛋白印迹检测脑皮层FcγRⅠ的细胞定位... 目的探讨高亲和力IgG受体Fc-gammaⅠ型(FcγRⅠ)在阿尔茨海默病(AD)脑皮层的表达变化。方法选用正常人脑组织样本和神经病理诊断为AD患者脑组织样本,6月龄野生型小鼠和APP/PS1小鼠。免疫荧光和免疫蛋白印迹检测脑皮层FcγRⅠ的细胞定位和表达。结果人和小鼠脑皮层的神经元均普遍表达FcγRⅠ。与健康人脑相比,AD患者脑皮层的FcγRⅠ表达显著降低(P<0.05)。与野生型小鼠脑相比,AD模型小鼠脑皮层的FcγRⅠ表达也呈现出显著降低(P<0.05)。结论IgG高亲和力受体FcγRⅠ在AD患者脑和AD模型小鼠脑皮层的表达显著下降,可能与AD的神经病理机制相关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病(AD) 神经元 免疫球蛋白G(IgG) fc-gammaⅰ型受体(fcγrⅰ)

下载PDF 职称材料

吗啡对背根神经节FcγR Ⅰ受体介导神经病理痛的作用及机制

7

作者 宋阜彪 梁映霞 类维富 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第3期306-310,共5页

目的:探讨吗啡对背根神经节FcγRⅠ受体介导神经病理痛的作用及机制。方法:60只成年SD大鼠随机均分为模型组(肠线结扎法制作神经病理痛模型)和吗啡组(建神经病理痛模型后给予吗啡注射液干预1周),比较干预前及干预后第3、7及14天时两组... 目的:探讨吗啡对背根神经节FcγRⅠ受体介导神经病理痛的作用及机制。方法:60只成年SD大鼠随机均分为模型组(肠线结扎法制作神经病理痛模型)和吗啡组(建神经病理痛模型后给予吗啡注射液干预1周),比较干预前及干预后第3、7及14天时两组大鼠机械性缩足阈值(MWT)、右后爪热痛潜伏期(TWL),比较干预前及干预后第14天时两组大鼠脊髓组织FcγRⅠmRNA及蛋白表达、背根神经节中生长相关蛋白43(GAP-43)及神经生长因子(NGF)表达。结果:干预前,两组大鼠MWT及TWL数值、脊髓FcγRⅠmRNA及蛋白表达水平、GAP-43及NGF灰度值比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);干预后第3、7及14天时吗啡组MWT较模型组同时点显著升高、TWL较同时点模型组显著降低(P <0. 05),干预后第14天时吗啡组FcγRⅠmRNA及蛋白水平较模型组显著降低(P <0. 05)、吗啡组GAP-43、NGF灰度值显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:SD大鼠神经病理痛与背根神经节FcγRⅠ受体表达水平上调有关,吗啡可作为神经病理痛的有效镇痛药物,其机制可肯能为抑制背根神经节FcγRⅠ受体、下调背神经根神经节内GAP-43及NGF表达有关。 展开更多

关键词 fcγrⅰ受体 背根神经节 神经病理痛 吗啡 基因表达 生长相关蛋白43 神经生长因子

下载PDF 职称材料

猪FcγRⅠ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立

8

作者 史平玲 邬成业 +5 位作者 乔松林 张改平 王爱萍 肖治军 祁艳华 卜丹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期909-914,共6页

本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)... 本研究旨在建立稳定表达猪FcγRⅠ的Marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总RNA,应用RT-PCR技术获得猪FcγRⅠ和γ链cDNA,并分别构建PIREShyg3-γ和pcDNA3.1-FcγRⅠ真核表达质粒;用脂质体共转染Marc-145细胞,经潮霉素B(300μg.mL-1)和G418(400μg.mL-1)共筛选获得稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系;运用RT-PCR、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪FcγRⅠ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪FcγRⅠ的细胞系,且表达于转染细胞表面的poFcγRⅠ受体分子能与猪IgG特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪fcγrⅰ受体 共转染 MArC-145细胞

下载PDF 职称材料

人FcγRⅠ受体胞外区基因的克隆、原核表达及纯化 被引量：1

9

作者 苗现伟 刘玺 +5 位作者 张改平 席俊 张利娜 刘运超 游雷鸣 赵玉军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期178-180,共3页

目的:探讨人FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白的原核表达纯化及其在体外与IgG的结合活性。方法:PCR方法从人的外周血白细胞中扩增出huFcγRⅠORF区全长基因并与T载体链接,从克隆载体huFcγRⅠ-T中扩增huFcγRⅠ胞外区基因,并将其装入原核... 目的:探讨人FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白的原核表达纯化及其在体外与IgG的结合活性。方法:PCR方法从人的外周血白细胞中扩增出huFcγRⅠORF区全长基因并与T载体链接,从克隆载体huFcγRⅠ-T中扩增huFcγRⅠ胞外区基因,并将其装入原核表达载体pGEX-6p-1。构建好的载体转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导重组蛋白表达,并利用SDS-PAGE和Western blot对表达的蛋白进行鉴定。结果:扩增到了huFcγRⅠ的胞外区基因,所构建的pGEXhuFcγRⅠ重组质粒经PCR和酶切鉴定与预期一致。IPTG诱导下目的蛋白的表达率约为30%。SDS-PAGE结果显示表达的目的相对分子质量(Mr)56 700与理论预期值一致。West-ern blot结果显示原核表达的huFcγRⅠ胞外区蛋白与人IgG特异亲和。结论:FcγRⅠ(huFcγRⅠ)胞外区蛋白在原核表达系统中得到有效的表达,复性蛋白在体外与人的IgG特异结合。 展开更多

关键词 fcγrⅰ重组蛋白 原核表达 纯化

下载PDF 职称材料

炎性指标对儿童发热性疾病诊断临床意义分析 被引量：15

10

作者 陈巧彬 陈琅 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期224-225,共2页

目的观察发热患儿血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)及CD64的水平,探讨其在儿童发热性疾病中的临床意义。方法以福建省立医院2010年9月至2011年9月住院的164例发热患儿为研究对象,采用回顾性分析方法,根据出院时的诊断分为细菌感染组... 目的观察发热患儿血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)及CD64的水平,探讨其在儿童发热性疾病中的临床意义。方法以福建省立医院2010年9月至2011年9月住院的164例发热患儿为研究对象,采用回顾性分析方法,根据出院时的诊断分为细菌感染组、非细菌感染组(包括病毒及支原体)和风湿性疾病组。检测其血清CD64、PCT及CRP,并与对照组35例健康儿童比较。结果细菌感染组、非细菌感染组、风湿性疾病组及对照组患儿CD64值(分子数/细胞)分别为(4322.15±1107.44)、(1138±423.24)、(1252±517.84)、(1042.88±398.76);PCT值(μg/L)分别为(3.87±0.89)、(0.06±0.01)、(0.81±0.12)、(0.09±0.02);CRP值(mg/L)分别为(26.28±4.33)、(1.42±0.04)、(94.94±13.11)、(1.38±0.04)。细菌感染组CD64、PCT及CRP均明显升高;非细菌感染组CD64、PCT及CRP均无明显升高;风湿性疾病组CRP升高极为显著,而PCT仅轻度升高,CD64无明显升高。结论炎性指标CD64、PCT及CRP的检测在儿童发热性疾病的鉴别诊断中有重要意义。 展开更多

关键词 降钙素原(PCT) C-反应蛋白(CrP) CD64(fcγ-rⅰ) 发热

原文传递

CD64对新生儿败血症早期诊断的评估 被引量：5

11

作者 张蓉 陈超 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期53-55,共3页

目的观察新生儿败血症时中性粒细胞表面CD64(Fcγ-RⅠ)表达水平,探讨CD64对新生儿败血症早期诊断的意义。方法将48例住院新生儿患儿分为败血症组,局部感染组和非感染组进行血CD64的检测,并与C反应蛋白(CRP)进行比较。结果发现败血症组C... 目的观察新生儿败血症时中性粒细胞表面CD64(Fcγ-RⅠ)表达水平,探讨CD64对新生儿败血症早期诊断的意义。方法将48例住院新生儿患儿分为败血症组,局部感染组和非感染组进行血CD64的检测,并与C反应蛋白(CRP)进行比较。结果发现败血症组CD64的水平较局部感染组和非感染组均有显著升高(P<0.001),而当CD64取临界值为4 504分子数/细胞,其诊断新生儿败血症的敏感度为90.1%,特异度为100%。结论新生儿败血症时血中性粒细胞表面CD64表达水平明显增加,可考虑作为新生儿败血症早期诊断指标。 展开更多

关键词 CD64(fcγ-rⅰ) 新生儿 败血症 感染

下载PDF 职称材料