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Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的制备
1
作者 李晴 陈剑晖 李晓帆 《福建医药杂志》 CAS 2016年第1期46-49,共4页
目的研究Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的制备及单抗的特性。方法利用杂交瘤细胞株扩增,使用体外培养法制备Fc受体结合型CD3单抗,利用动物体内诱生法制备非Fc受体结合型CD3单抗。使用亲和层析法纯化抗体并与市售的CD3单抗比较,... 目的研究Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的制备及单抗的特性。方法利用杂交瘤细胞株扩增,使用体外培养法制备Fc受体结合型CD3单抗,利用动物体内诱生法制备非Fc受体结合型CD3单抗。使用亲和层析法纯化抗体并与市售的CD3单抗比较,行淋巴细胞培养、流式细胞术等了解Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的特性。结果使用体外培养法制备蛋白G琼脂糖纯化了Fc受体结合型CD3单抗;使用动物体内诱生法制备A蛋白亲和层析法纯化了非Fc受体结合型CD3单抗;CD3单抗与市售的CD3单抗一致;Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的增殖及T细胞受体内化效应和文献报道一致。结论利用杂交瘤细胞株扩增并成功制备了Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗,并为后续工作的进行奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 fc受体结合型 非fc受体结合型 CD3单抗 T细胞受体 细胞因子风暴
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静注人免疫球蛋白中IgG二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响
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作者 雷婷婷 张巍 +3 位作者 李长清 叶生亮 杜晞 马莉 《中国输血杂志》 CAS 2023年第2期125-129,共5页
目的研究静注人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响。方法利用蛋白纯化技术和高效液相色谱(HPLC)技术,制备不同浓度的IgG二聚体,... 目的研究静注人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响。方法利用蛋白纯化技术和高效液相色谱(HPLC)技术,制备不同浓度的IgG二聚体,然后采用直接添加的方式,制备得到含有不同浓度IgG二聚体的IVIG。最后利用本实验室已建立的IgG Fc段与THP-1细胞表面Fc段受体结合能力的检测方法,考察IgG二聚体含量对IgG Fc段与细胞表面受体结合能力的影响。结果当IVIG中IgG二聚体含量为1.11%~10.30%时,其与THP-1细胞表面Fc段受体的结合能力为97.67%~135.33%,且这种结合能力与IgG二聚体的含量呈正相关。当IgG二聚体含量超过13.22%时,IgG Fc段与THP-1细胞表面受体的结合能力与IgG二聚体含量则没有相关性。结论一定浓度的IgG二聚体对IVIG中IgG Fc段与THP-1细胞表面受体的结合能力具有促进作用,但尚需动物实验和临床数据进一步验证。 展开更多
关键词 静注人免疫球蛋白(IVIG) IgG二聚体 IgG fc段 THP-1细胞 受体结合能力
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新型冠状病毒受体结合域-Fc融合蛋白表达及小鼠免疫原性
3
作者 高飞霞 范蒋锋 +4 位作者 刘雪颖 张敏 郑眉 丁亚红 罗剑 《国际生物制品学杂志》 CAS 2023年第1期1-6,共6页
目的表达制备新型冠状病毒刺突蛋白的受体结合域(receptor binding domain, RBD)-Fc融合蛋白, 并评价其在小鼠模型中的免疫原性。方法将新型冠状病毒RBD与小鼠免疫球蛋白Fc段融合基因在中国仓鼠卵巢细胞中表达并制备融合蛋白。将不同剂... 目的表达制备新型冠状病毒刺突蛋白的受体结合域(receptor binding domain, RBD)-Fc融合蛋白, 并评价其在小鼠模型中的免疫原性。方法将新型冠状病毒RBD与小鼠免疫球蛋白Fc段融合基因在中国仓鼠卵巢细胞中表达并制备融合蛋白。将不同剂量的RBD-Fc融合蛋白分别单独或辅以氢氧化铝佐剂免疫小鼠, 通过ELISA、假病毒中和试验、酶联免疫斑点试验检测诱导产生的体液和细胞免疫应答。结果 10 μg RBD-Fc融合蛋白辅以氢氧化铝佐剂能有效诱导小鼠产生良好的RBD特异性IgG抗体应答, 该抗体可阻断病毒RBD与细胞表面病毒受体的结合, 进一步研究表明该重组蛋白还诱导产生了针对原始毒株、Beta变异株和Delta变异株假病毒的中和抗体, 中和抗体滴度分别为1 566、336和270。结论制备的RBD-Fc融合蛋白具有较好的免疫原性, 可为开发COVID-19重组蛋白疫苗提供参考。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 受体结合域 免疫球蛋白fc片段 氢氧化铝佐剂 免疫原性 中和抗体 变异株
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重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白受体结合活性检测方法的改进 被引量：1
4
作者 毕华 高凯 +4 位作者 范文红 陶磊 丁有学 史新昌 饶春明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第9期1207-1210,共4页
目的对重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体(Tumor necrosis factor receptor,TNFR)-抗体融合蛋白的受体结合活性检测方法进行改进。方法采用夹心ELISA法对系列稀释的重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白供试品和参比品进行检测,通过四参数方程拟合,计... 目的对重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体(Tumor necrosis factor receptor,TNFR)-抗体融合蛋白的受体结合活性检测方法进行改进。方法采用夹心ELISA法对系列稀释的重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白供试品和参比品进行检测,通过四参数方程拟合,计算二者的半数有效浓度(EC50),分析其受体结合活性。对改进的方法进行精密性和准确性验证,并与原方法进行比较。结果重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白供试品和参比品均存在量效关系,符合四参数方程y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D;3批重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白经3次测定,受体结合活性分别为(133±8)、(114±4)和(138±9)BU,符合其质量标准中受体结合活性65～135 BU的规定,变异系数分别为6.02%、3.51%和6.52%;1批供试品经3次重复测定,回收率为(107.67±7.50)%;3批供试品采用原方法和改进方法分别重复测定3次,受体结合活性差异均无统计学意义(P>0.05)。结论改进的方法精密性好,准确性高,可作为重组人Ⅱ型TNFR-抗体融合蛋白受体结合活性的常规检测方法。 展开更多
关键词 重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白 受体结合活性
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