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食管癌细胞中fascin基因启动子区的克隆与初步鉴定
1
作者 杨章民 郭张燕 +3 位作者 许丽艳 高书颖 谢剑君 李恩民 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第19期1738-1741,共4页
目的:对食管癌细胞中fascin基因启动子区进行克隆鉴定.方法:应用PCR技术从食管癌细胞系EC109中扩增出fascin基因5′侧翼区5段不同长度的片段,并将其克隆至萤火虫荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic(pGLB)中,然后将这些质粒与对照质粒p... 目的:对食管癌细胞中fascin基因启动子区进行克隆鉴定.方法:应用PCR技术从食管癌细胞系EC109中扩增出fascin基因5′侧翼区5段不同长度的片段,并将其克隆至萤火虫荧光素酶报告基因表达载体pGL3-Basic(pGLB)中,然后将这些质粒与对照质粒pGLB、内参照质粒pRL-TK共转染EC109细胞,48h后用双荧光素酶检测系统分析这些重组子报告基因转染细胞的相对荧光强度,并结合生物信息学分析,以判断fascin基因启动子区所在位置.结果:用DNA重组技术成功构建了5个系列缺失重组荧光素酶报告基因表达载体.相对荧光素酶活性检测表明,与对照组相比,上述一系列重组质粒转染细胞均显示出较高的荧光素酶活性.生物信息学分析发现,在启动子区(-436^+1)有标志性调控元件TATA盒(-34^-29).结论:在食管癌细胞中fascin基因的启动子区可能位于转录起始位点上游约436bp的区段内. 展开更多
关键词 fascin基因 食管肿瘤 启动子 荧光素酶类 报告基因
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结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA的表达变化 被引量：3
2
作者 张井松 李亚晨 戚峰 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第27期42-43,共2页
目的观察结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA的表达变化。方法结直肠癌患者81例,术中留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用real-time PCR法检测Twist、Fascin mRNA,分析二者表达与结直肠癌临床病理参数的关系。结果结直肠癌组织中Twist、Fasc... 目的观察结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA的表达变化。方法结直肠癌患者81例,术中留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用real-time PCR法检测Twist、Fascin mRNA,分析二者表达与结直肠癌临床病理参数的关系。结果结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA相对表达量分别为0.003 6±0.000 7、0.026 5±0.005 9,正常结直肠组织中分别为0.000 9±0.000 1、0.007 3±0.001 6,两组相比,P均<0.05。不同淋巴结转移情况、TNM分期的结直肠癌患者肿瘤组织中Twist、Fascin mRNA相对表达量相比,P均<0.05。结直肠癌组织中Twist mRNA与Fascin mRNA的表达水平呈正相关关系(r=0.753,P=0.000)。结论结直肠癌组织中Twist、Fascin mRNA表达上调,且二者表达水平存在相关性,可能协同参与了结直肠癌的发生发展。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 大肠癌 结直肠癌 TWIST基因 fascin基因
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RNAi沉默Fascin基因表达对HEp2细胞株生物学特性的影响
3
作者 孔静萍 顾栋桦 《浙江医学》 CAS 2013年第10期895-897,901,共4页
目的通过RNA干扰HEp2细胞,研究Fascin基因表达对鳞癌细胞生物学特性的影响。方法用脂质体转染法把特异针对HEp2基因的双链小RNA干扰片段导入HEp2细胞中,Fascin mRNA及蛋白水平分别用RT-PCR和免疫印迹法检测,细胞增殖活性采用MTT法检测,... 目的通过RNA干扰HEp2细胞,研究Fascin基因表达对鳞癌细胞生物学特性的影响。方法用脂质体转染法把特异针对HEp2基因的双链小RNA干扰片段导入HEp2细胞中,Fascin mRNA及蛋白水平分别用RT-PCR和免疫印迹法检测,细胞增殖活性采用MTT法检测,细胞周期和凋亡水平采用流式细胞仪检测,肿瘤细胞的侵袭能力采用Matrigel体外细胞侵袭实验进行检测。结果 RNA干扰能显著抑制Fascin mRNA及蛋白表达水平;RNA干扰Fascin基因的表达能使HEp2细胞增殖活性明显减低,更多的HEp2细胞处于G_0/G_1静止期,细胞凋亡明显增加,同时抑制了肿瘤细胞的侵袭能力。结论 Fascin基因沉默能抑制HEp2细胞的生长和侵袭能力,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 鳞癌 fascin基因 RNA干扰
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胆管细胞癌中Fascin基因的表达及临床意义
4
作者 吴建红 朱清静 《数理医药学杂志》 2011年第4期404-405,共2页
目的：通过应用免疫组织化学方法探讨胆管细胞癌以及癌周围正常组织中Fascin基因的表达状况，探讨Fascin基因在胆管细胞癌的发生、发展过程中的作用机制。方法：收集武汉大学人民医院病理科2002-2008年胆管细胞癌存档蜡块40例，经病理... 目的：通过应用免疫组织化学方法探讨胆管细胞癌以及癌周围正常组织中Fascin基因的表达状况，探讨Fascin基因在胆管细胞癌的发生、发展过程中的作用机制。方法：收集武汉大学人民医院病理科2002-2008年胆管细胞癌存档蜡块40例，经病理切片确诊为胆管细胞癌，其中男性20例，女性20例。另取胆管细胞癌周围正常组织5例作对照。采用免疫组织化学sP法检测胆管细胞癌以及癌周围正常组织中Fascin基因的表达水平，采用HPIAS-1000图文报告管理系统对Fascin基因的表达进行定量分析，并用SPSSll．5软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK（q）检验。结果：胆管细胞癌中癌细胞胞浆内可见密集分布的棕黄色颗粒，Fascin基因呈高表达，对照组中胆管上皮细胞胞浆内可见少量的棕黄色颗粒，Fascin基因呈低表达。图像分析结果显示，胆管细胞癌组与对照组之间Fascin基因表达的平均光密度及阳性面积率有显著性差异（P〈0．05）。结论：Fascin基因在胆管细胞癌中的高表达与胆管细胞癌的发生及生物学行为有密切关系。 展开更多
关键词 胆管细胞癌 fascin基因 免疫组织化学
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Fascin基因在骨肉瘤中的表达及统计分析
5
作者 周雪松 张端莲 《数理医药学杂志》 2010年第5期558-560,共3页
目的:探讨Fascin基因在骨肉瘤组织中的表达及及统计分析。方法:收集武汉市四大三级甲医院的骨肉瘤20例及良性骨软骨瘤5例,将实验分为骨肉瘤组(n=20)和良性骨软骨瘤组(n=5),采用免疫组织化学方法检测各组组织中Fascin基因的表达水平,采用... 目的:探讨Fascin基因在骨肉瘤组织中的表达及及统计分析。方法:收集武汉市四大三级甲医院的骨肉瘤20例及良性骨软骨瘤5例,将实验分为骨肉瘤组(n=20)和良性骨软骨瘤组(n=5),采用免疫组织化学方法检测各组组织中Fascin基因的表达水平,采用HPIAS-1000图文报告管理系统对Fascin基因的表达进行定量分析,并用SPSS11.5软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验。结果:Fascin基因在骨肉瘤组织中呈高表达,Fascin基因在良性骨软骨瘤组织中呈低表达,Fascin基因在骨肉瘤组织中的表达与良性骨软骨瘤组织的表达比较差异有显著性(P<0.05)。结论:Fascin基因在肿瘤发生、生长、转移等过程中有促进作用,提示Fascin基因可能与骨肉瘤的发生、发展有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 fascin基因 免疫组织化学 图像分析 统计分析
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Fascin 1基因在永生化食管上皮细胞癌变中的表达 被引量：19
6
作者 荣举 许丽艳 +5 位作者 蔡唯佳 熊兴东 李劲涛 方王楷 沈忠英 李恩民 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第3期243-248,共6页
背景与目的:Fascin1蛋白为一种与F-肌动蛋白结合的55kDa细胞骨架蛋白,从人畸胎瘤中克隆fascin1基因。食管上皮细胞癌变机制至今不甚明了,为此,对永生化食管上皮细胞株SHEE(Shantouhumanembryonicesophagealepithelialcellline)和由SHEE... 背景与目的:Fascin1蛋白为一种与F-肌动蛋白结合的55kDa细胞骨架蛋白,从人畸胎瘤中克隆fascin1基因。食管上皮细胞癌变机制至今不甚明了,为此,对永生化食管上皮细胞株SHEE(Shantouhumanembryonicesophagealepithelialcellline)和由SHEE恶性转化而来的食管癌细胞株SHEEmt之间的差异表达基因在蛋白质和mRNA两个水平上进行检测分析,以期为揭示食管鳞状上皮细胞癌变机制提供新思路。方法:采用双向凝胶电泳技术分析SHEE与SHEEmt之间的蛋白质差异表达情况,以基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflyingmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)对部分差异表达蛋白质点进行鉴定,以逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptionploymerasechainreaction,RT-PCR)对目标基因进行mRNA转录水平上的检测,并对RT-PCR产物进行序列测定分析。结果:在SHEE向SHEEmt的恶性转化中有9个基因出现差异表达,其中fascin1基因在蛋白质水平升高3.64倍,mRNA水平升高16.17倍。结论:fascin1基因可能与SHEE向SHEEmt的恶性转化有关。 展开更多
关键词 fascin1基因 食管上皮细胞癌 基因表达 食管肿瘤
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