一个遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系凝血因子Ⅻ基因分析 被引量：9

1

作者 谢海啸 王明山 +4 位作者 谢耀盛 周武 杨丽红 金艳慧 潘荣杰 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期300-304,共5页

目的对一个遗传性FⅫ缺陷症家系进行FⅫ基因突变检测，探讨其参与的分子发病机制。方法通过活化aPTT、FⅫ：C和FⅫ：Ag等测定进行表型诊断；用PCR技术对先证者及其家系成员FⅫ基因的14个外显子及其侧翼序列进行扩增，PCR产物纯化后，由... 目的对一个遗传性FⅫ缺陷症家系进行FⅫ基因突变检测，探讨其参与的分子发病机制。方法通过活化aPTT、FⅫ：C和FⅫ：Ag等测定进行表型诊断；用PCR技术对先证者及其家系成员FⅫ基因的14个外显子及其侧翼序列进行扩增，PCR产物纯化后，由DNA测序仪进行测序，发现突变位点则反向测序以证实。选择100名健康体检者作对照。结果先证者及胞弟aPTT明显延长，分别为aPTT79．1s／35s、am84．6s／35s，大儿子aPTT稍高，为42．1s／35S，家系其他成员aPTT正常范围。先证者及胞弟FⅫ：C极度降低，分别为2％、3％，其FⅫ：Ag水平均〈1％；胞兄、大儿子和小儿子FⅫ：C明显下降，分别为39％、29％、34％，FⅫ：Ag水平分别为32％、30％、37％。先证者及胞弟FⅫ1号外显子启动子区46位表现为46T／T型；5号外显子发现5741delC，5742delA，读码框移位，导致Ser400Pro；10号外显子发现7142insertC，使得Lys346Gln终止密码子提前出现，产生截短蛋白。此外，家系其他成员：胞兄、大儿子及小儿子发现46T／T和7142insertC；小孙女发现46T／T；侄女、大孙女、二孙女发现46C／T。结论在该遗传性FⅫ缺陷症家系发现常见的46C／T多态性及exon5区5741delC，5742delA与exon10区7142insertC。5741delC，5742delA及7142insertC与FⅫ水平的降低有关。 展开更多

关键词 因子ⅻ缺乏 因子ⅻ 系谱 突变 聚合酶链反应

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抗磷脂抗体及凝血因子Ⅻ缺乏与视网膜静脉阻塞的相关研究 被引量：10

2

作者 孙红晶 李毓敏 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第11期1019-1022,共4页

目的观察抗磷脂抗体(APA)及凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺乏在视网膜静脉阻塞(RVO)发病中的作用。方法对RVO患者33例(33眼)及正常对照组30例(30眼),采用ELISA法检测抗心磷脂抗体(ACA)(IgG、IgM、IgA);APTT法检测LA;一期法测定FⅫ活性。采用Fisher... 目的观察抗磷脂抗体(APA)及凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺乏在视网膜静脉阻塞(RVO)发病中的作用。方法对RVO患者33例(33眼)及正常对照组30例(30眼),采用ELISA法检测抗心磷脂抗体(ACA)(IgG、IgM、IgA);APTT法检测LA;一期法测定FⅫ活性。采用Fisher检验进行统计学分析。结果RVO组APAs总阳性率24.24%(8/33)与对照组6.67%(2/30)比较差异无统计学意义(P=0.085)。RVO组ACA阳性率18.18%(6/33)与对照组(0/30)比较差异有统计学意义(P=0.025)。≤50岁组及>50岁组RVO患者LA总阳性率与同年龄对照组相比差异均无统计学意义(P=0.160,P=0.206)。RVO组FⅫ缺乏率42.42%(14/33)与对照组13.33%(4/30)比较差异有统计学意义(P=0.013)。≤50岁组及>50岁组RVO患者FⅫ缺乏与同年龄对照组比较差异无统计学意义(P=0.206,P=0.052)。结论研究表明ACA阳性及FⅫ缺乏引起的凝血障碍与RVO发病相关。 展开更多

关键词 视网膜静脉阻塞 抗磷脂抗体 抗心磷脂抗体 凝血因子ⅻ缺乏

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两个遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系临床表型和基因型变化的分析 被引量：8

3

作者 金佩佩 姜文理 沈立松 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期378-382,共5页

目的对两个遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系进行临床特性分析和基因突变检测,探讨其参与的分子发病机制.方法2014年10月至2015年3月于上海新华医院收治2例遗传性FⅫ缺陷症患者.经用活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）... 目的对两个遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系进行临床特性分析和基因突变检测,探讨其参与的分子发病机制.方法2014年10月至2015年3月于上海新华医院收治2例遗传性FⅫ缺陷症患者.经用活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）及FⅫ促凝活性（FⅫ：C）和FⅫ抗原（FⅫ：Ag）测定进行表型诊断;用PCR法对2例先证者的F12基因14个外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变.突变位点经直接测序排除多态性,103名健康人做对照.结果2例先证者,分别是34岁男性（先证者-1）和76岁女性（先证者-2）,在术前检查时发现凝血时间延长,前者APTT是101s,PT是11.6s,FⅫ：C2％,FⅫ：Ag6％;后者APTT是143s,PT是11.5s,FⅫ：C0.4％,FⅫ：Ag4％;2例先证者的FⅧ：C、FⅨ：C、FⅪ：C和纤维蛋白原（Fg）均在正常范围内,狼疮抗凝物（LAC）检测为阴性;对先证者-1进行F12基因进行检测,发现c.1285C〉T（p.Q429stop）的基因纯合突变.家系分析表明该男性的母亲、父亲和儿子在该位点是杂合突变.对先证者-2进行F12基因进行检测,发现c.1556T〉C（p.L519P）的纯合错义突变,其2位儿子在该位点为杂合突变.2例家系均发现F1246C/T和619G/C多态性.结论c.1285C〉T（p.Q429stop）和c.1556T〉C（p.L519P）是导致遗传性FⅫ缺陷症先证者FⅫ缺乏的原因. 展开更多

关键词 因子ⅻ缺乏 因子ⅻ 突变 表型 基因型 系谱

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杂合突变导致遗传性FⅫ缺陷症一家系 被引量：8

4

作者 杨丽红 郝秀萍 +4 位作者 王莹宇 谢海啸 金艳慧 朱丽青 王明山 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期343-347,共5页

目的 对1个遗传性凝血因子Ⅻ（coagulation factorⅫ,FⅫ）缺陷症家系进行基因突变检测,了解其分子发病机制.方法 检测先证者及其家系成员的活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）、血浆FⅫ活性（FⅫacti... 目的 对1个遗传性凝血因子Ⅻ（coagulation factorⅫ,FⅫ）缺陷症家系进行基因突变检测,了解其分子发病机制.方法 检测先证者及其家系成员的活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）、血浆FⅫ活性（FⅫactivity,FⅫ∶C）和血浆FⅫ抗原（FⅫantigen,FⅫ∶Ag）含量等表型指标;用DNA测序法检测先证者FⅫ基因的全部14个外显子及侧翼序列,发现突变位点则予反向测序证实;针对先证者的突变位点,对该家系成员进行相应的基因突变检测.结果 先证者和其儿子APTT、FⅫ∶C和FⅫ∶Ag明显异常,分别为121.5 s、5％、6.8％和98.5s、9％、12.2％,同时纤溶酶原活性（plasminogen activity,PLG∶A）均略高于正常参考值范围;其他家系成员中,除其小女儿和外孙的FⅫ∶C略低外（分别为64％和60％）,其他成员FⅫ∶C均在正常参考值范围（72％～113％）内.先证者和其儿子的FⅫ基因第13外显子发生了g.8597G＞A杂合突变,导致p.Asp538Asn错义突变,FⅫ启动子区46C/T多态性均为TT基因型;其他4名家系成员中均未见g.8597G＞A杂合突变,有3名成员启动子区为46C/T位点为CT基因型和1名成员为TT基因型.结论 该家系中发现的FⅫ基因第13外显子g.8597G＞A突变为一种新突变.此杂合突变导致的p.Asp538Asn错义突变是该家系遗传性FⅫ缺陷症的分子发病机制;p.Asp538Asn和46TT基因型与家系成员的FⅫ水平明显降低有关. 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺陷症 基因突变 多态性 家系

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不孕合并凝血因子Ⅺ、Ⅻ缺乏症病人行体外受精-胚胎移植后妊娠2例及文献复习

5

作者 王丽萍 王峥 +3 位作者 张琪琪 刘学杰 张桐 姜爱芳 《安徽医药》 CAS 2024年第5期977-980,共4页

目的分析行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕病人合并凝血因子Ⅺ、Ⅻ缺乏症的临床表现、实验室检查及治疗。方法通过分析2020―2021年潍坊医学院附属医院生殖医学中心收治的2例不孕合并凝血因子Ⅺ、Ⅻ缺乏症病人的临床资料,结合文献复... 目的分析行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的不孕病人合并凝血因子Ⅺ、Ⅻ缺乏症的临床表现、实验室检查及治疗。方法通过分析2020―2021年潍坊医学院附属医院生殖医学中心收治的2例不孕合并凝血因子Ⅺ、Ⅻ缺乏症病人的临床资料,结合文献复习进行回顾性分析。结果2例病人均无出血史及血液系统疾病史,既往无月经过多;实验室检查结果均为活化部分凝血酶原时间(APTT)延长,血浆凝血酶原时间(PT)正常,凝血酶时间(TT)正常,凝血因子Ⅺ、Ⅻ减少;1例病人在严密监测下未出现取卵术中、术后出血,1例病人预防性输注新鲜冷冻血浆(FFP)后未出现术中、术后出血;2例病人分娩前均未预防性输注FFP,分娩过程顺利,未发生产后出血。结论凝血因子Ⅺ、Ⅻ缺乏症病人自发性出血少见,无出血症状或出血轻微;APTT、PT、TT是该疾病的常规检查,凝血因子Ⅺ、Ⅻ活性与出血量无相关性,血栓动力学(TD)可对该疾病进行出血预测,目前缺乏大量前瞻性研究;术前充分评估可有效降低出血风险。 展开更多

关键词 遗传性联合凝血因子缺乏症 因子Ⅺ缺乏 经阴道取卵 因子ⅻ缺乏 病例报告 文献复习

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新的纯合子Leu519Arg导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析 被引量：7

6

作者 戴利亚 张德亭 +4 位作者 林杰 王莹宇 童郁 李君 王明山 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期466-469,共4页

目的对一个遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系进行FⅫ基因突变的分析和家系调查，探讨其分子发病机制。方法检测先证者及其家系成员活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血因子Ⅷ活性（FⅧ：C）、凝血因子Ⅸ活性（FⅨ... 目的对一个遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系进行FⅫ基因突变的分析和家系调查，探讨其分子发病机制。方法检测先证者及其家系成员活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血因子Ⅷ活性（FⅧ：C）、凝血因子Ⅸ活性（FⅨ：C）、FⅪ活性（FⅪ：C）、凝血因子Ⅻ活性（FⅫ：C）和FⅫ抗原（FⅫ：Ag）含量等进行表型诊断；用DNA直接测序法分析先证者FⅫ基因所有14个外显子、侧翼、5′和3′非翻译区及家系成员相应的突变位点区域，用反向测序证实所发生的突变。选择100名健康体检者作对照。结果先证者APTT明显延长为106．4S，先证者二女儿和外孙女APTT略延长，分别为42．8s和43．6s，家系其他成员APTT无明显延长；先证者及其儿子、大女儿、二女儿、外孙女的FⅫ：c明显减低，分别为2．0％、23．0％、23．0％、24．0％和23．0％，FⅫ：Ag含量分别为1．0％、21．0％、23．0％、23．0％和23．0％，表现为交叉反应物质（CRM）阴性。基因测序发现先证者FⅫ基因启动子区为46T／T型及13号外显子存在c．1556T〉C纯合突变，导致Leu519Arg；先证者儿子、大女儿、二女儿及外孙女为46C／T型，并且发现存在c．1556T〉G杂合突变；先证者妻子启动子区C／C型，且无上述基因突变。结论该家系发现的FⅫ基因13号外显子区c．1556T〉G尚未见报道。c．1556T〉G影响了FⅫ催化功能，与FⅫ水平的降低有关。 展开更多

关键词 因子ⅻ缺乏 系谱 纯合子 突变

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A novel mutation in a patient with congenital coagulation factor Ⅻ deficiency 被引量：6

7

作者 FENG Ying YE Xu +3 位作者 PANG Ying DAI Jing WANG Xue-feng ZHOU Xu-hong 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2008年第13期1241-1244,共4页

Human coagulation factor Ⅻ （FⅫ）, also called Hageman factor, is a plasma plycoprotein that is functionally deficient in individuals with Hageman trait; which is an inherited trait discovered by chance during preop... Human coagulation factor Ⅻ （FⅫ）, also called Hageman factor, is a plasma plycoprotein that is functionally deficient in individuals with Hageman trait; which is an inherited trait discovered by chance during preoperative blood coagulation screening tests. FⅫ is a single-chain 596-amino-acid zymogen of a serine protease with an approximate molecular weight of 80 000 FⅫ appears to play an important role in blood coagulation, 展开更多

关键词 factor ⅻ deficiency INHERITED MUTATION THROMBOSIS

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凝血因子Ⅻ缺乏症患者F12基因的变异分析及分子机制探讨

8

作者 房帅 杨嘉 +2 位作者 张夏林 杨林花 王刚 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2023年第4期429-434,共6页

目的对20例凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺乏症患者进行F12基因的测序分析并探讨其分子机制。方法选择2020年7月至2022年1月期间就诊于山西医科大学第二医院门诊部的20例FⅫ缺乏症患者作为研究对象。采用一期法检测其凝血因子Ⅷ(FⅧ:C)、Ⅸ(FⅨ:C)、... 目的对20例凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺乏症患者进行F12基因的测序分析并探讨其分子机制。方法选择2020年7月至2022年1月期间就诊于山西医科大学第二医院门诊部的20例FⅫ缺乏症患者作为研究对象。采用一期法检测其凝血因子Ⅷ(FⅧ:C)、Ⅸ(FⅨ:C)、Ⅺ(FⅪ:C)和Ⅻ(FⅫ:C)的活性。用Sanger测序对其F12基因的14个外显子以及5′和3′非翻译区进行分析,确定其变异位点。用生物信息学软件预测变异的致病性、分析氨基酸的保守性并模拟变异蛋白的模型。结果20例患者的FⅫ:C介于0.07%~20.10%之间,远低于正常参考值,其他凝血指标则均未见异常。Sanger测序共发现10人携带F12基因的变异,具体包括4例错义变异[c.820C>T(p.Arg274Cys)、c.1561G>A(p.Glu521Lys)、c.181T>C(p.Cys61Arg)和c.566.G>C(p.Cys189Ser)],4例缺失变异c.303_304delCA(p.His101GlnfsX36),1例插入变异c.1093_1094insC(p.Lys365GlnfsX69)以及1例无义变异c.1763C>A(p.Ser588*)。其余10人仅检测出46C/T变异。其中,c.820C>T(p.Arg274Cys)杂合错义变异以及c.1763C>A(p.Ser588*)纯合无义变异未见临床遗传变异数据库和人类基因突变数据库收录。生物信息学分析提示,p.Arg274Cys与p.Ser588*均为致病变异,相关的氨基酸位点在不同物种中高度保守。蛋白预测模型提示,p.Arg274Cys破坏了原有氢键作用力,同时侧链变短,可影响FⅫ蛋白二级结构的稳定性,使关键的结构域发生变化。p.Ser588*导致FⅫ蛋白C端截短,改变了蛋白质结构的空间构象,可能影响丝氨酸蛋白酶的切割位点,导致FⅫ:C极度降低。结论在一期法检出的FⅫ:C偏低的患者中,50%携带F12基因的变异,其中c.820C>T错义变异和c.1763C>A无义变异是导致凝血因子Ⅻ减低的新的变异。 展开更多

关键词 ⅻ因子缺乏 ⅻ因子 F12基因 基因变异

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2例遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症分子发病机制研究 被引量：4

9

作者 邢志芳 戴菁 +5 位作者 陆晔玲 许冠群 丁秋兰 王学锋 奚晓东 王鸿利 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期367-371,共5页

目的探讨遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症的分子发病机制。方法对2例遗传性FⅫ家系作临床表型检测及基因诊断:采用凝固法及ELISA法分别检测先证者及其家系成员血浆FⅫ促凝活性(FⅫ∶C)和抗原含量(FⅫ∶Ag);直接测序法作基因序列分析,针对... 目的探讨遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症的分子发病机制。方法对2例遗传性FⅫ家系作临床表型检测及基因诊断:采用凝固法及ELISA法分别检测先证者及其家系成员血浆FⅫ促凝活性(FⅫ∶C)和抗原含量(FⅫ∶Ag);直接测序法作基因序列分析,针对先证者的突变位点,检测其家系成员相应的基因突变;采用凝血酶生成试验,检测患者凝血功能的变化;在野生型pIRES2-EGFP/FⅫ表达质粒基础上,定点突变法构建突变型FⅫ表达质粒,以Polyfect转染试剂介导瞬时转染293T细胞,分别测定细胞裂解液及培养上清液中FⅫ∶Ag,测定上清液中FⅫ∶C。结果 2个遗传性FⅫ缺陷症家系的先证者的FⅫ:C分别为4.68%和12.08%,FⅫ∶Ag分别为4.6%和2.2%;先证者1的F12基因第13、14号外显子分别发现了(G8489A、Glu502Lys)和(C8833A、Tyr586Stop)2种复合杂合突变;先证者2的F12的第13号外显子发现(G8489A;Glu502Lys)纯合突变,其家系部分成员检测到相应的杂合突变。2名遗传性FⅫ缺陷症患者的凝血酶生成潜力与正常人比较无明显差异。瞬时转染结果显示,FⅫ突变蛋白E502K上清液中FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的27.2%和14.4%;细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的36.7%。结论体外表达的实验进一步证实了突变蛋白E502K合成和分泌障碍导致FⅫ明显降低。先证者1由罹病F12基因(Glu502Lys;Tyr586Stop)双杂合突变所致;先证者2为G8489A纯合突变(Glu502Lys)所致遗传性FⅫ缺陷症;E502K和Y586Stop 2种突变均为国际首次报道。 展开更多

关键词 凝血因子 Fⅻ缺陷症 遗传性 基因突变 分子机制

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纯合子Gly542Ser导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析 被引量：5

10

作者 戴利亚 许锴 +4 位作者 赵秘胜 程晓丽 童郁 李君 王明山 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期214-218,共5页

目的探讨姨表近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系的发病机制。方法家系调查。2015年2月于温州医科大学温州市第三临床学院收治1例遗传性FⅫ缺陷症患者。经用活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血因子Ⅷ活... 目的探讨姨表近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系的发病机制。方法家系调查。2015年2月于温州医科大学温州市第三临床学院收治1例遗传性FⅫ缺陷症患者。经用活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血因子Ⅷ活性（FⅧ：C）、凝血因子Ⅸ活性（FⅨ：C）、凝血因子Ⅺ活性（FⅪ：C）、FⅫ活性（FⅫ：C）和FⅫ抗原（FⅫ：Ag）测定进行表型诊断。用DNA直接测序法分析先证者F12基因所有14个外显子、侧翼、5′和3′非翻译区及家系成员相应的突变位点区域，用反向测序证实所发生的突变。采用ClustalX－2.1－win软件分析突变氨基酸的保守性，同时采用四个生物信息学评分软件（PolyPhen－2，PROVEAN，SIFT和MutationTaster）分析突变对蛋白质功能的影响。结果先证者及其弟弟APTT明显延长，分别为116.4 s和101.3 s；先证者父亲APTT略延长，为48.8 s，家系其他成员APTT无明显延长；先证者及其弟弟、父亲的FⅫ：C明显减低，分别为2.0%、2.0%和18.0%，FⅫ：Ag含量分别为1.0%、1.0%、和13.0%，表现为交叉反应物质（CRM）阴性。基因测序发现先证者及其弟弟的F12基因启动子区为46T/T型及14号外显子存在c.1681G〉A（p.Gly542Ser）纯合突变；先证者父亲、母亲及儿子均存在c.1681G〉A杂合突变，其中先证者父亲表现为46T/T型，其余二者均为46C/T型；先证者丈夫启动子区为C/C型，且无上述基因突变。ClustalX－2.1－win软件保守性分析结果表明，Gly542在同源物种间高度保守。四个生物信息学软件对该突变的预测结果一致：Polyphen－2评分（1.000分）、PROVEAN评分（－4.975分）均预示为有害突变；SIFT评分（0.00分）预示可影响蛋白质功能；Mutation Taster评分（0.999分）预示可引起相应疾病。结论c．1681G〉A（p.Gly542Ser）和46T/T与该遗传性FⅫ缺陷症家系FⅫ水平明显降低有关� 展开更多

关键词 因子ⅻ缺乏 系谱 纯合子 突变

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1例复合杂合突变所致的凝血因子Ⅻ缺乏症家系分析

11

作者 邹安庆 王明山 +3 位作者 金艳慧 夏虹 刘斯奇 陈怡 《临床检验杂志》 CAS 2021年第2期110-114,共5页

目的分析1个遗传性凝血因子Ⅻ缺乏症家系表型及基因突变情况,探讨其分子致病机制。方法对先证者及其家系进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅻ活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ:Ag)测定。用... 目的分析1个遗传性凝血因子Ⅻ缺乏症家系表型及基因突变情况,探讨其分子致病机制。方法对先证者及其家系进行活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血因子Ⅻ活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ:Ag)测定。用DNA直接测序法进行FⅫ基因突变检测。采用ClustalX-2.1-win软件分析突变氨基酸的保守性,用4个生物信息学评分软件分析突变对蛋白质功能的影响。结果先证者APTT结果明显延长,达179.2 s,先证者父亲、长子及女儿APTT略延长。先证者FⅫ:C及FⅫ:Ag明显减低,均为1%;其父亲、长子、女儿及次子FⅫ:C及FⅫ:Ag减低,约为50%。基因测序发现先证者FⅫ基因存在复合杂合突变,包括第1外显子启动子区为46T/T型,第9外显子存在c.797G>A(Cys247Tyr)及第14外显子存在c.1681G>A(Gly542Ser)。先证者父亲及长子表现为c.797G>A杂合突变,女儿及次子表现为c.1681G>A杂合突变。ClustalX-2.1-win软件保守性分析表明Cys247和Gly542在同源物种间高度保守。生物信息学评分软件分析结果表明突变可能影响蛋白质的功能。结论先证者FⅫ基因46T/T,c.797G>A和c.1681 G>A复合杂合变异导致其凝血因子Ⅻ水平极度减低。c.797G>A为首次报道,丰富了人类基因突变数据库(HGMD)。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺乏 基因突变 复合杂合 生物信息学分析

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一个复合杂合变异导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析 被引量：9

12

作者 谢海啸 张海月 +5 位作者 许梦洁 邹安庆 金艳慧 杨丽红 潘景业 王明山 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2020年第5期519-522,共4页

目的检测1个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factorⅫ,FⅫ)缺陷症家系的基因变异,探讨其分子致病机制。方法用DNA直接测序法对F12基因进行变异分析;在野生型pIRES2-EGFP/FⅫ表达质粒基础上,构建变异型FⅫ表达质粒,Polyfect转染试剂瞬时转... 目的检测1个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factorⅫ,FⅫ)缺陷症家系的基因变异,探讨其分子致病机制。方法用DNA直接测序法对F12基因进行变异分析;在野生型pIRES2-EGFP/FⅫ表达质粒基础上,构建变异型FⅫ表达质粒,Polyfect转染试剂瞬时转染293T细胞,分别测定上清液中FⅫ活性(FⅫactivity,FⅫ∶C)和FⅫ抗原(FⅫantigen,FⅫ∶Ag),测定细胞裂解液中FⅫ∶Ag,并用Western印迹进行验证。结果先证者F12基因第1外显子启动子区为46TT基因型,在第13和14外显子存在g.8489G>A(p.Glu502Lys)和g.8699G>C(p.Gly542Ser)复合杂合变异。瞬时转染结果显示,FⅫp.Glu502Lys变异体蛋白上清液中FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的28%和24%,细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的39%;FⅫp.Gly542Ser变异体蛋白上清液中的FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别为野生型的32%和17%,细胞裂解液中FⅫ∶Ag为野生型的59%。结论先证者F12基因型46TT,p.Glu502Lys和p.Gly542Ser复合杂合变异导致其FⅫ水平极度降低;体外表达实验证实变异蛋白p.Glu502Lys和p.Gly542Ser存在合成和分泌障碍。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺陷症 F12基因 基因变异 凝血因子ⅻ水平

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四个遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系基因分析 被引量：9

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作者 谢海啸 吕美艳 +5 位作者 杨小丽 王明山 张扬 朱丽青 金艳慧 杨丽红 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期200-204,共5页

目的探讨4个遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系基因突变及分子发病机制。方法检测凝血酶原时间（PT）、APTT、FⅫ促凝活性（FXII：C）和FⅫ抗原（FⅫ：Ag）等凝血指标；PCR扩增FⅫ基因的全部外显子及侧翼序列，PCR产物纯化后测序；在... 目的探讨4个遗传性凝血因子Ⅻ（FⅫ）缺陷症家系基因突变及分子发病机制。方法检测凝血酶原时间（PT）、APTT、FⅫ促凝活性（FXII：C）和FⅫ抗原（FⅫ：Ag）等凝血指标；PCR扩增FⅫ基因的全部外显子及侧翼序列，PCR产物纯化后测序；在野生型pIRES2-EGFPFⅫ表达质粒上构建突变体FⅫ表达质粒，瞬时转染COS7细胞，测定细胞裂解液和培养上清中FXII：Ag水平和FⅫ：C。结果4例先证者APW均明显延长，FⅫ：C均〈2％，FⅫ：Ag亦同步下降至1％。4个家系均检出常见的FXI146C／T多态性。家系A先证者检出5741-5742delCA（Hisl01Gin）及7142insertC（Lys346Gin）双重杂合突变；家系B先证者检出6800-6808del9bp杂合缺失突变。FⅫ6800-6808delgbp瞬时转染结果显示，在细胞裂解液中突变体FⅫ：Ag为野生型的85．6％；在细胞培养上清中突变体FⅫ：Ag为野生型的51．9％，FⅫ：C为野生型的56．4％；家系c先证者检出8699G〉A（Gly542Ser）杂合突变；家系D先证者检出8699G〉A（Gly542Ser）纯合突变（其父母为近亲结婚）。结论4个遗传性FXD缺陷症家系除有46C／T多态性外，共发现g．5741—5742delCA、g．7142insertC、g．6800-6808delgbp、g．8699G〉A4种基因突变。其中g．5741-5742delCA和g．6800-6808del9bp为两种新的突变。FⅫ6800-6808del9bp体外表达显示，FXD6800-6808del9bp突变蛋白合成基本正常，但存在蛋白分泌障碍。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺陷症 家系 聚合酶链反应 DNA突变分析

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两个遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系的表型及基因分析 被引量：6

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作者 李姗姗 沈晨芳 +7 位作者 舒旷怡 柳洁 王晓欧 李帆帆 杨啸 章赵华 陈碧 江明华 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期800-803,共4页

目的分析两个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factor Ⅻ,FⅫ)缺陷症家系的表型及基因突变,探讨其分子发病机制。方法一期凝固法检测血浆凝血酶原时间,活化部分凝血活酶时间(activatedpartial thromboplastin time,APTT),纤维蛋白原,凝血... 目的分析两个遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factor Ⅻ,FⅫ)缺陷症家系的表型及基因突变,探讨其分子发病机制。方法一期凝固法检测血浆凝血酶原时间,活化部分凝血活酶时间(activatedpartial thromboplastin time,APTT),纤维蛋白原,凝血酶时间,凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ的促凝活性(FⅧ:C、FIX:C、FⅪ:C、FⅫ:C);ELISA法检测FⅫ抗原(FⅫ:Ag);DNA测序分析患者F/2基因的14个外显子及其侧翼序列;MegAlign、PYMOL等平台或软件分析基因突变位点物种保守性和蛋白质构象改变。结果两家系先证者均表现为APTT明显延长,FⅫ:C、FⅫ:Ag明显降低,分别为126.3s、2%、10%和122.0S、1%、11%。对两个家系的成员进行基因分析,共发现4种突变,其中3种为未报道的突变,包括第5内含子3’端的g.5972G>A(IVS5-1G>A)剪接突变、第14外显子g.8810_8814del GTCTA的小片段缺失、以及第7外显子g.6259G>A(p.Pro182Leu)。此外IVS13-1G>A为已报道突变。结论两个家系成员中发现4种基因突变,可能与这两个家系FⅫ缺陷有关,其中3种(g.5972G>A、g.8810_8814 del GTCTA及g.6259G>A)为尚未见报道的突变。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺乏症 杂合子 突变

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F12基因复合变异导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症一个家系的分析

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作者 程晓丽 杨婷 +4 位作者 杨柳 辛毅娟 朱琳 何睦 刘家云 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2023年第12期1512-1516,共5页

目的对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行临床表型及基因变异分析。方法以2021年12月24日空军军医大学第一附属医院检验科发现的1个FⅫ缺陷症家系作为研究对象。用凝固法检测活化部分凝血活酶时间(APTT)与凝血因子Ⅻ的活性(FⅫ:C)... 目的对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行临床表型及基因变异分析。方法以2021年12月24日空军军医大学第一附属医院检验科发现的1个FⅫ缺陷症家系作为研究对象。用凝固法检测活化部分凝血活酶时间(APTT)与凝血因子Ⅻ的活性(FⅫ:C),用ELISA法检测FⅫ抗原(FⅫ:Ag)。提取基因组DNA,用Sanger法测定F12基因的所有外显子及其侧翼序列。用ClustalX-2.1-win、PROVEAN及Swiss-Pdb Viewer软件分析变异位点氨基酸的保守性、变异的有害性以及对蛋白质结构的影响。结果先证者APTT延长至70.2 s,FⅫ:C和FⅫ:Ag分别降低至12%和13%。基因测序发现先证者F12基因第5和13外显子分别存在c.346G>A(p.Gly97Ser)和c.1583C>A(p.Ser509Tyr)杂合错义变异;其父亲和姐姐均携带c.346G>A(p.Gly97Ser)杂合变异,母亲和哥哥均携带c.1583C>A(p.Ser509Tyr)杂合变异。结论c.346G>A(p.Gly97Ser)和c.1583C>A(p.Ser509Tyr)复合杂合变异很可能是该家系遗传性FⅫ缺陷症的遗传学病因。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ 错义变异 家系 遗传性Fⅻ缺陷症

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7例凝血因子Ⅻ缺乏症患者临床报道和文献复习 被引量：2

16

作者 古再丽努尔·吾甫尔 陶玲 +1 位作者 富玲 毛敏 《中国输血杂志》 CAS 2021年第7期779-781,共3页

目的回顾性分析2016年2月~2020年1月就诊于本院的凝血因子Ⅻ缺乏症7例病例患者临床表现、实验室特征,以提高对此类疾病诊治方法的认识。方法对7例病例凝血因子Ⅻ缺乏患者的临床资料进行分析,并复习相关文献。结果 7例患者均以APTT明显... 目的回顾性分析2016年2月~2020年1月就诊于本院的凝血因子Ⅻ缺乏症7例病例患者临床表现、实验室特征,以提高对此类疾病诊治方法的认识。方法对7例病例凝血因子Ⅻ缺乏患者的临床资料进行分析,并复习相关文献。结果 7例患者均以APTT明显延长为主要表现,无出血、血栓表现,有1例有阳性家族史,有1例为肿瘤继发的获得性凝血因子Ⅻ缺乏症。结论临床工作中APTT延长但无出血表现患者需全面筛查相关内外源凝血因子和获得性因素非常必要,以避免漏诊,误诊以及过度治疗。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺乏症 病因 临床特点 实验室特征 治疗

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原发性血小板增多症伴凝血因子Ⅻ缺乏症1例 被引量：1

17

作者 葛琼 宋军 +1 位作者 王麟辉 郭鹏翔 《中国医药》 2022年第9期1415-1417,共3页

1例男性患者以“血小板升高1年余,面色潮红5个月余”于贵州医科大学附属人民医院住院治疗,完善骨髓活检、免疫分型、基因二代测序等检查后,排除其他骨髓增殖性疾病,明确诊断为原发性血小板增多症(ET),并因入院期间发现凝血功能显著异常... 1例男性患者以“血小板升高1年余,面色潮红5个月余”于贵州医科大学附属人民医院住院治疗,完善骨髓活检、免疫分型、基因二代测序等检查后,排除其他骨髓增殖性疾病,明确诊断为原发性血小板增多症(ET),并因入院期间发现凝血功能显著异常,进一步完善相关检查提示凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺乏症。予羟基脲、干扰素降细胞,输注新鲜冰冻血浆改善凝血功能,阿司匹林抗凝等治疗病情好转后出院。少数ET可引起获得性凝血因子减少,但是合并FⅫ缺乏症较为罕见。对于同时存在ET和FⅫ缺乏症的患者,需警惕ET所引起的获得性FⅫ缺乏症,避免误诊和漏诊。 展开更多

关键词 原发性血小板增多症 凝血因子ⅻ缺乏症 出血 血栓形成

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复合杂合突变导致的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析 被引量：1

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作者 陈静 李云霞 +3 位作者 钟帆 李仁华 杨季云 周雯婧 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期571-576,共6页

目的:对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行临床表型及基因突变分析,探讨其分子致病机制。方法:检测先证者及其家系成员(共3代5人)血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、D-D二聚体(D-D)、凝血... 目的:对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行临床表型及基因突变分析,探讨其分子致病机制。方法:检测先证者及其家系成员(共3代5人)血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、D-D二聚体(D-D)、凝血因子Ⅻ促凝活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ:Ag)等凝血指标。采用高通量测序方法分析先证者F12基因所有的外显子编码区及外显子-内含子交界处的基因突变情况,对检出的可疑致病突变进行Sanger测序验证,并对家系成员的相应突变位点进行检测。采用AutoPVS1和Mutation Taster在线生物信息学软件预测突变位点对蛋白功能的影响。结果:先证者APTT结果为180.9 s,明显延长;FⅫ:C和FⅫ:Ag分别降低至0.8%和4.17%。全外显子组测序分析发现先证者F12基因存在复合杂合突变,即第11号外显子c.1261G>T杂合无义突变(p.Glu421*)和第4号外显子c.251dupG杂合移码突变(p.Trp85Metfs*53),均为功能缺失型突变,属于极强致病性级别。Sanger测序家系验证结果显示,先证者c.1261G>T杂合突变遗传自其母亲,其哥哥和女儿均为c.1261G>T杂合突变携带者。在此家系中基因检测结果与血液学检查结果相符,即基因型和表型共分离。结论:F12基因第11号外显子c.1261G>T杂合无义突变和第4号外显子c.251dupG杂合移码突变是本例家系遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症的分子发病机制,这两个突变均为国际上首次报道的新突变。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺陷症 F12基因 新突变

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一个遗传性凝血因子ⅩⅢ缺陷症家系新的基因异常 被引量：1

19

作者 吴淑燕 王兆钺 +3 位作者 董宁征 张威 白霞 阮长耿 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期145-149,共5页

目的对1例遗传性凝血因子ⅩⅢ(ⅩⅢ)缺陷症家系进行基因分析,探讨其发病的分子机制。方法用尿素溶解法和 Berichrom kit 检测患者及其家系成员血浆 FⅩⅢ的活性,用火箭电泳和酶联免疫吸附试验测定 FⅩⅢ抗原含量。PCR 法扩增 FⅩⅢA 基... 目的对1例遗传性凝血因子ⅩⅢ(ⅩⅢ)缺陷症家系进行基因分析,探讨其发病的分子机制。方法用尿素溶解法和 Berichrom kit 检测患者及其家系成员血浆 FⅩⅢ的活性,用火箭电泳和酶联免疫吸附试验测定 FⅩⅢ抗原含量。PCR 法扩增 FⅩⅢA 基因的所有外显子和侧翼序列,DNA 测序分析基因异常,用直接测序法和限制性内切酶(SfaN Ⅰ、Nsp Ⅰ)分析80名正常人相应序列的 PCR 产物以排除基因多态性。应用生物信息学软件对所鉴定的突变进行分子模建,探讨其致病的分子机制。结果患者纤维蛋白凝块住5mol/L 尿素中30min 内完全溶解,加入正常人血浆后则24 h不溶解,患者血浆FⅩⅢ活性为0,FⅩⅢA 抗原含量<2%,FⅩⅢB 抗原含量在正常范围。家系成员中其父母和外祖母血浆 FⅩⅢ活性和 FⅩⅢA 抗原约为正常人一半。在患者 FⅩⅢA 因因外显子15中发脱两处杂合异常,分别位于177 246位碱基(C→T,导致 Arg703→Trp)和177 286位碱基(A→G,导致 His716→Arg),直接测序和酶切分析两种方法均排除了基因多态性。患者的母亲与外祖母为 Arg703→Trp 杂合子,患者的父亲为His716→Aug 杂合子。分子模建分析表明,Arg03和 His716两个位点突变后均可导致 barrel 2与 core结构域之间距离和结合能力的改变,使蛋白质发生错误折叠,稳定性降低。His716→Arg 还可能影响酶的催化活性基因的空间结构形成。结论 FⅩⅢA 基因外显子15上 Arg703→Trp、His716→Arg 复合杂合突变影响了蛋白质的正确折叠和稳定性,造成患者 FⅩⅢ抗原和活性的缺失。此复合杂合错义突变是一种未报道过的新的突变类型。 展开更多

关键词 凝血因子ⅻ缺陷症 遗传性 基因突变 分子模建

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复合杂合变异Lys365Glnfs*69和Glu521Lys引起的遗传性凝血因子Ⅻ缺陷症家系分析

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作者 李君 周李燕 易小庆 《中国优生与遗传杂志》 2021年第12期1725-1729,共5页

目的探讨复合杂合变异引起的一个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系成员的分子发病机制。方法测定先证者及家系成员(3代共6人)FⅫ活性(FⅫ:C)和活化部分凝血活酶时间(APTT)等多个凝血功能来明确临床表型;用DNA直接测序法解析先证者F12基... 目的探讨复合杂合变异引起的一个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系成员的分子发病机制。方法测定先证者及家系成员(3代共6人)FⅫ活性(FⅫ:C)和活化部分凝血活酶时间(APTT)等多个凝血功能来明确临床表型;用DNA直接测序法解析先证者F12基因所有外显子及侧翼序列,并用反向测序验证;采用ClustalX-2.1-win等软件分析氨基酸变异位点的保守性和危害性等。结果先证者常规凝血功能中APTT明显延长至129.8 s,FⅫ:C降低至1%。基因分析显示,先证者F12基因外显子10存在c.1092_1093insC(p.Lys365Glnfs*69)杂合插入变异和外显子13存在c.1561G>A(p.Glu521Lys)杂合错义变异;其母亲和女儿为c.1092_1093insC携带者,父亲和儿子为c.1561G>A携带者,妻子为野生型;F12基因第46位核苷酸C/T(C46T)等多态性显示其妻子为C/C型,其他5人均为C/T型。保守性分析显示,Lys365和Glu521均为高度保守位点。MutationTaster等在线生物信息学网站相关软件预测分析显示两个变异均为“有害”。蛋白质模型分析显示,这两个变异都可引起氢键数量的增加,导致蛋白质空间构象变化。结论该家系F12基因外显子10c.1092_1093insC杂合插入变异及外显子13c.1561G>A杂合错义变异,可能与该家系FⅫ水平降低有关。 展开更多

关键词 凝血ⅻ缺陷症 遗传性 复合杂合变异 生物信息学

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