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链球菌gordonii FSS2 N-乙酰氨基葡糖苷酶基因的克隆和表达
1
作者
陈一峰
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2002年第5期313-315,共3页
目的 :N -乙酰氨基葡糖苷酶 (N -acetylglucosaminidase)是链球菌gordonii六种胞外糖苷酶之一。为研究该酶 ,克隆和表达该基因片段。方法 :将链球菌gordoniiFSS2染色体DNA分离提纯 ,用限制性内切酶Sau 3AI不完全酶切 ,产生长度不等的随...
目的 :N -乙酰氨基葡糖苷酶 (N -acetylglucosaminidase)是链球菌gordonii六种胞外糖苷酶之一。为研究该酶 ,克隆和表达该基因片段。方法 :将链球菌gordoniiFSS2染色体DNA分离提纯 ,用限制性内切酶Sau 3AI不完全酶切 ,产生长度不等的随机片段 ,琼脂糖凝胶电泳分离和回收 2 - 8kpb的随机片段 ,然后与BamHI线性化及 5’端脱磷处理的载体pUC 18连接 ,转化大肠杆菌XL1-Blue;β—半乳糖苷酶筛选系统及酶切 ,检测插入片段。根据N -乙酰氨基葡糖苷酶与特异人工底物X -GlucNac反应 ,有色物质X被释放原理 ,筛选表达克隆。结果 :共有 6×10 6个转化子 ,约 5 0 %转化子含有插入片段 ;检测到 8个N—乙酰氨基葡糖苷酶表达克隆。结论 :所构建的基因组文库具有完整性 ,该基因在大肠杆菌XL1-Blue中成功表达。
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关键词
克隆
表达
链球菌
gordonii
fss
2
N-乙酰氨基葡糖苷酶
基因文库
口腔
龋损部位
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职称材料
题名
链球菌gordonii FSS2 N-乙酰氨基葡糖苷酶基因的克隆和表达
1
作者
陈一峰
机构
武汉大学口腔医学院
出处
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2002年第5期313-315,共3页
文摘
目的 :N -乙酰氨基葡糖苷酶 (N -acetylglucosaminidase)是链球菌gordonii六种胞外糖苷酶之一。为研究该酶 ,克隆和表达该基因片段。方法 :将链球菌gordoniiFSS2染色体DNA分离提纯 ,用限制性内切酶Sau 3AI不完全酶切 ,产生长度不等的随机片段 ,琼脂糖凝胶电泳分离和回收 2 - 8kpb的随机片段 ,然后与BamHI线性化及 5’端脱磷处理的载体pUC 18连接 ,转化大肠杆菌XL1-Blue;β—半乳糖苷酶筛选系统及酶切 ,检测插入片段。根据N -乙酰氨基葡糖苷酶与特异人工底物X -GlucNac反应 ,有色物质X被释放原理 ,筛选表达克隆。结果 :共有 6×10 6个转化子 ,约 5 0 %转化子含有插入片段 ;检测到 8个N—乙酰氨基葡糖苷酶表达克隆。结论 :所构建的基因组文库具有完整性 ,该基因在大肠杆菌XL1-Blue中成功表达。
关键词
克隆
表达
链球菌
gordonii
fss
2
N-乙酰氨基葡糖苷酶
基因文库
口腔
龋损部位
Keywords
Streptococcus gordonii
fss
2
N-acetylglucosaminidase Genomic library
分类号
R781.1 [医药卫生—口腔医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
链球菌gordonii FSS2 N-乙酰氨基葡糖苷酶基因的克隆和表达
陈一峰
《口腔医学研究》
CAS
CSCD
2002
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