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硫酸镉对FL/P4501A1细胞中人肺癌易感基因P4501A1的影响 被引量：1
1
作者 陆敦 印木泉 《中华劳动卫生职业病杂志》 CSCD 2000年第4期201-203,共3页
目的　观察重金属化合物硫酸镉 (CdSO4 )在体外对人羊膜FL/P45 0 1A1细胞内P45 01A1DNA序列的改变作用 ,了解镉化合物对肺癌易感基因的影响。方法　利用不同剂量的CdSO4 处理FL/P45 0 1A1细胞 ,其半数抑制浓度 (IC50 )为 2 4.5 5mg/ml。... 目的　观察重金属化合物硫酸镉 (CdSO4 )在体外对人羊膜FL/P45 0 1A1细胞内P45 01A1DNA序列的改变作用 ,了解镉化合物对肺癌易感基因的影响。方法　利用不同剂量的CdSO4 处理FL/P45 0 1A1细胞 ,其半数抑制浓度 (IC50 )为 2 4.5 5mg/ml。以 1/ 4IC50 终浓度CdSO4 处理FL/P45 0 1A1细胞 48h后提取细胞pREP 9/P45 0 1A1质粒。由于 pREP 9缺少通用序列 ,BamHI酶切 ,低熔点琼脂糖电泳分离P45 0 1A1cDNA片段。BamHI酶切 pGEM～ 3Zf(+ ) ,CIP处理 ,并与 2倍摩尔P45 0 1A1cDNA片段混合 ,乙醇沉淀 ,沉淀物加入 18μlTE ,加 2 μl 10倍连接酶缓冲液 ,混匀 ,加10UT4DNA连接酶 ,混匀 ,12℃保温 16～ 2 0h。凝胶电泳分析连接结果。鉴定合格连接物转化DH5α菌 ,X gal喷洒对重组子进行蓝 /白颜色筛选。选择含重组子的宿主菌进行P45 0 1A1cDNA测序。结果　在体外 ,CdSO4 未引起FL/P45 0 1A1cDNA序列改变。结论　CdSO4 对FL/P45 0 1A1细胞中肺癌易感基因P45 0 展开更多
关键词 硫酸镉 fl/p4501A1细胞 肺癌易感基因
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