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驴FBXL蛋白家族的氨基酸特征分析
1
作者 刘亚星 李超程 +4 位作者 李健 王丽 董红 贾斌 张永生 《中国畜禽种业》 2024年第9期24-29,共6页
FBXL蛋白家族的重要性在于其作为E3泛素连接酶的关键组分,在调控细胞周期、蛋白降解、信号传导等关键生物过程中发挥核心作用,对维持生物体的正常生理功能和健康状态至关重要。该研究通过梳理FBXL蛋白家族18个成员,搜集驴FBXL蛋白家族序... FBXL蛋白家族的重要性在于其作为E3泛素连接酶的关键组分,在调控细胞周期、蛋白降解、信号传导等关键生物过程中发挥核心作用,对维持生物体的正常生理功能和健康状态至关重要。该研究通过梳理FBXL蛋白家族18个成员,搜集驴FBXL蛋白家族序列,寻找已知的结构域,分析蛋白质的理化性质、酶解位点、初级结构和三级结构,预测蛋白质的翻译后修饰,为探讨FBXL家族参与的泛素化蛋白降解途径及其在动物繁殖和发育中的生物学功能提供理论基础。通过分析发现:FBXL3、FBXL13、FBXL21等蛋白都与节律钟基因有关,因此,可以进一步对这些基因展开研究,其很有可能影响驴的繁殖周期调控。 展开更多
关键词 fbxl 翻译后修饰
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结直肠腺癌发病基因fbxl20和E—cadherin的相关性研究 被引量:1
2
作者 朱晓华 邓世山 +4 位作者 谢兴国 许仕全 冉茂成 谢少利 朱剑军 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2013年第6期509-515,共7页
目的研究fbxl20与E—cadherin基因与结直肠癌临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性。方法收集50例结直肠腺癌组织及对照癌旁组织,用半定量PCR技术检测fbxl20及E—cad.herin基因的表达水平并进行相关性分析。结果fbxl20基因在结... 目的研究fbxl20与E—cadherin基因与结直肠癌临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性。方法收集50例结直肠腺癌组织及对照癌旁组织,用半定量PCR技术检测fbxl20及E—cad.herin基因的表达水平并进行相关性分析。结果fbxl20基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(0.479±0.141 vs.0.296±0.121,P=0.001);E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(0.440±0.026vs.0.741±0.059,P=0.000);fbxl20与E—cadherin基因在本研究50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性(r=-0.165,P=0.251)。但是,在低分化和高分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中,fbxl20与E—cadherin基因的表达水平呈负相关(r=-0.600,P=0.008;r=-0.784,P=0.017;r=-0.643,P=0.032)。结论E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的低表达可能与fbxl20基因的高表达有关,且结直肠腺癌晚期肿瘤的高迁移性及高侵袭性可能与E—cadherin有关。 展开更多
关键词 fbxl 20 E—cadherin 结直肠腺癌 相关性分析
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昼夜节律生理机制最新国际研究动态 被引量:26
3
作者 崔哲 郝洛西 林怡 《照明工程学报》 2014年第3期4-12,共9页
分析总结了国内外关于昼夜节律生理机制的最新研究动态。以昼夜节律生理机制为切入点,针对影响昼夜节律的不同因素进行了综合论述。特别在昼夜节律与光照刺激的相互关系方面,分别对光照刺激强度、时刻、非视觉通路的作用光谱与昼夜节律... 分析总结了国内外关于昼夜节律生理机制的最新研究动态。以昼夜节律生理机制为切入点,针对影响昼夜节律的不同因素进行了综合论述。特别在昼夜节律与光照刺激的相互关系方面,分别对光照刺激强度、时刻、非视觉通路的作用光谱与昼夜节律相位的关系进行了深入阐述。此外,还探讨了自然光季节变动以及极地地区季节变动与昼夜节律之间的关系。最后,通过介绍泛素化修饰酶FBXL21在细胞昼夜节律中的作用,总结了关于分子层面昼夜节律研究的国际最新动态。 展开更多
关键词 昼夜节律 相位反应 非视觉通路 褪黑激素 fbxl3 fbxl21
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槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究 被引量:13
4
作者 金浩 余佳 +4 位作者 王梓瑜 乔鸥 王军 韩江 李兆连 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期4440-4447,共8页
探讨槐角黄酮对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响并分析其对长链非编码RNA FBXL19-AS1(LncRNA FBXL19-AS1)/微小RNA-342-3p(miR-342-3p)通路的调控机制。采用甲基噻唑基四唑(MTT)法与平板克隆试验检测不同质量浓度(1,5,10 mg·mL-1)... 探讨槐角黄酮对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响并分析其对长链非编码RNA FBXL19-AS1(LncRNA FBXL19-AS1)/微小RNA-342-3p(miR-342-3p)通路的调控机制。采用甲基噻唑基四唑(MTT)法与平板克隆试验检测不同质量浓度(1,5,10 mg·mL-1)的槐角黄酮对肝癌Huh7细胞增殖能力的影响;Transwell小室试验检测槐角黄酮对Huh7细胞迁移及侵袭能力的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测槐角黄酮对Huh7细胞中FBXL19-AS1和miR-342-3p表达水平的影响;双荧光素酶报告试验检测FBXL19-AS1是否靶向miR-342-3p;采用上述方法检测抑制FBXL19-AS1表达或FBXL19-AS1过表达后对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白1(cyclinD1),p21,MMP-2,MMP-9蛋白表达量。槐角黄酮可明显抑制Huh7细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05),促进p21蛋白表达(P<0.05),抑制cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达(P<0.05),并可降低MMP-2和MMP-9活性(P<0.05);槐角黄酮处理后Huh7细胞中FBXL19-AS1的表达水平显著降低(P<0.05),miR-342-3p的表达水平显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告试验结果证实FBXL19-AS1靶向抑制miR-342-3p的表达;抑制FBXL19-AS1表达后细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞克隆形成数显著减少(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达水平显著降低(P<0.05),MMP-2和MMP-9活性显著降低(P<0.05),p21蛋白表达水平显著升高(P<0.05);FBXL19-AS1过表达可逆转槐角黄酮对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 槐角黄酮 LncRNA fbxl19-AS1 miR-342-3p 肝癌 增殖 迁移 侵袭
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靶向FBXL20基因的siRNA片段的筛选及其验证 被引量:6
5
作者 朱剑军 蒋琴 +1 位作者 袁粒星 陈尧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期237-243,共7页
在人结肠腺癌SW480细胞株及口腔鳞癌HSC3细胞株中,筛选有效干扰fbxl 20的siRNA片段.设计合成3对靶向fbxl 20 mRNA的小干扰RNA片段,通过阳离子脂质体介导转染SW480细胞和HSC3细胞.结果发现siRNA-1,siRNA-2,siRNA-3均能抑制SW480细胞和HSC... 在人结肠腺癌SW480细胞株及口腔鳞癌HSC3细胞株中,筛选有效干扰fbxl 20的siRNA片段.设计合成3对靶向fbxl 20 mRNA的小干扰RNA片段,通过阳离子脂质体介导转染SW480细胞和HSC3细胞.结果发现siRNA-1,siRNA-2,siRNA-3均能抑制SW480细胞和HSC3细胞fbxl20 mRNA的表达,siRNA-2抑制作用最明显,抑制率分别为86.8%和100%.MTT试验显示:siRNA-2转染SW480细胞和HSC3细胞后,细胞增殖能力明显降低,细胞增殖抑制率分别为29.5%和43.4%.Transwell小室迁移实验表明,HSC3细胞在转染24 h后,细胞迁移能力明显减弱,迁移抑制率高达72.4%.流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:转染36 h后,SW480细胞实验组细胞凋亡率为21.9%;转染24 h后,HSC3细胞实验组细胞凋亡率为44.7%.本实验成功的筛选出了特异性的抑制fbxl 20基因的siRNA片段,并初步鉴定了fbxl 20基因的功能. 展开更多
关键词 fbxl20 RNA干扰 SW480细胞 HSC3细胞
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siRNA靶向沉默fbxl20基因对肝癌SMMC-7721细胞生物学行为的影响 被引量:8
6
作者 牛静静 苗风济 《川北医学院学报》 CAS 2012年第3期221-225,共5页
目的:通过沉默fbxl20基因,以观察基因沉默后对SMMC-7721细胞的增殖、迁移和周期分布的影响。方法:通过脂质体Lipofectamine2000介导转染SMMC-7721细胞,靶向fbxl20基因的siRNA片段阻低肝癌SMMC-7721细胞株fbxl20 mR-NA表达。结果:siRNA... 目的:通过沉默fbxl20基因,以观察基因沉默后对SMMC-7721细胞的增殖、迁移和周期分布的影响。方法:通过脂质体Lipofectamine2000介导转染SMMC-7721细胞,靶向fbxl20基因的siRNA片段阻低肝癌SMMC-7721细胞株fbxl20 mR-NA表达。结果:siRNA能有效沉默SMMC-7721细胞fbxl20 mRNA的表达,沉默效率为71.49%。MTT试验实验显示:siRNA转染SMMC-7721细胞后,细胞增殖能力显著降低。Transwell小室和划痕愈合实验表明,fbxl20基因被沉默后,SMMC-7721细胞在迁移能力明显减弱,迁移抑制率高达62.03%。流式细胞术检测细胞周期结果显示:转染48 h后,SMMC-7721实验组细胞G1/G0期比率(81.21%)显著高于阴性对照组(71.49%)和空白对照组(67.90%)。结论:本实验运用RNA干扰技术成功抑制了SMMC-7721细胞中fbxl20基因的表达,并且发现fbxl20基因可能与肝癌细胞的增值和迁移相关。 展开更多
关键词 fbxl20 SMMC-7721 RNA干扰 流式细胞术
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肿瘤相关成纤维细胞上调hsa-miR-18b-5p靶向FBXL3促进前列腺癌的增殖及转移
7
作者 骆金光 陶怀祥 +3 位作者 闻志远 陈龙 胡昊 关翰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1284-1296,共13页
目的探讨受肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)调控的hsa-miR-18b-5p在前列腺癌(PCa)中的表达水平及作用,并研究对其在PCa发生发展过程中的分子机制。方法利用生物信息学技术分析在PCa中高表达的miRNA,构建肿瘤相关成纤维细胞并与PCa细胞系共培养... 目的探讨受肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)调控的hsa-miR-18b-5p在前列腺癌(PCa)中的表达水平及作用,并研究对其在PCa发生发展过程中的分子机制。方法利用生物信息学技术分析在PCa中高表达的miRNA,构建肿瘤相关成纤维细胞并与PCa细胞系共培养,验证CAFs对PCa细胞增殖和迁移的影响及对hsa-miR-18b-5p的调控作用;RT-qPCR验证20例患者癌组织及癌旁正常组织、前列腺正常上皮增生细胞及PCa各细胞系中hsa-miR-18b-5p的表达水平;通过脂质体法将阴性对照及hsamiR-18b-5p抑制物分别转染入PCa细胞C4-2、LNCAP中,分为NC inhibitor组和hsa-miR-18b-5p inhibitor组;采用细胞集落形成、CCK-8实验、划痕愈合、Transwell、IC_(50)实验、流式细胞术分别检测C4-2、LNCAP细胞增殖、迁移、侵袭、耐药能力、凋亡和周期;建立PCa裸鼠移植瘤模型,定期测量移植瘤的质量和体积,Kaplan-Meier生存曲线分析裸鼠生存情况;利用靶基因预测分析网站(Targetscan、Mirtarbase、miRDB、miRDIP)预测has-miR-18b-5p的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证hsa-miR-18b-5p与靶基因的靶向关系,RT-qPCR、Western blotting检测各组细胞靶基因的表达水平。结果生物信息学分析结果显示,在PCa中高表达的miRNA有17个,结合差异表达程度以及相关文献筛选出拟研究的基因:miR-148a、miR-17、miR-18b-5p、miR-770、miR-297-3p。CAFs与PCa细胞系共培养后hsa-miR-18b-5p的表达水平升高(P<0.01),且促进PCa细胞的增殖与迁移(P<0.01),敲除has-miR-18b-5p可抵消CAFs对PCa细胞增殖及迁移的影响,确定has-miR-18b-5p为研究基因。与正常前列腺上皮细胞或肿瘤旁组织相比,PCa细胞或肿瘤组织中hsa-miR-18b-5p的表达升高(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制C4-2、LNCAP细胞的增殖、迁移、侵袭以及耐药(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制裸鼠移植瘤质量和体积的增长,增加裸鼠的生存时间(P<0.05)。靶基因预测分析网站显示,FBXL3是 展开更多
关键词 hsa-miR-18b-5p 肿瘤相关成纤维细胞 fbxl3 前列腺癌 促癌
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E3泛素连接酶FBXL8对A亚群禽白血病病毒复制的影响
8
作者 郑诗龄 陈雪阳 +3 位作者 刘晶 方春 梁雄燕 杨玉莹 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1696-1705,共10页
【目的】制备鸡E3泛素连接酶FBXL8多克隆抗体,探究鸡源FBXL8对A亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)在鸡胚成纤维细胞(DF-1)内复制的影响。【方法】以DF-1细胞cDNA为模板,通过PCR扩增FBXL 8基因,构建鸡源FBXL8原... 【目的】制备鸡E3泛素连接酶FBXL8多克隆抗体,探究鸡源FBXL8对A亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A)在鸡胚成纤维细胞(DF-1)内复制的影响。【方法】以DF-1细胞cDNA为模板,通过PCR扩增FBXL 8基因,构建鸡源FBXL8原核表达重组质粒pET-28a-FBXL8,将其转化大肠杆菌表达菌株RIL进行诱导表达及纯化,将表达产物His-FBXL8免疫10月龄新西兰大白兔制备多克隆抗体,利用Western blotting和间接ELISA分别检测抗体特异性及效价;针对已公布的FBXL 8基因序列设计过表达引物及靶向FBXL 8基因的干扰序列,构建过表达质粒psi-flag-FBXL8及干扰质粒pLKO.1-FBXL8-shRNA,使用Western blotting检测其表达效果。将构建成功的过表达质粒和干扰质粒转染DF-1细胞,24 h后感染ALV-A,通过半定量PCR、Western blotting分别检测ALV-A的结构蛋白P27、GP85表达水平。【结果】PCR成功扩增出大小为1182 bp的FBXL 8基因片段,并成功构建FBXL8原核表达重组质粒pET-28a-FBXL8,诱导表达的融合蛋白His-FBXL8大小为43 ku。Western blotting和间接ELISA结果显示,制备的FBXL8兔多克隆抗体可特异性识别外源蛋白,且抗体效价为1∶64000。成功构建了FBXL8过表达质粒和干扰质粒,其在DF-1细胞中能够实现对FBXL8的过表达和敲低。半定量PCR和Western blotting检测结果显示,过表达FBXL8可抑制ALV-A复制,而敲低FBXL8则促进其复制。【结论】本研究制备的FBXL8多克隆抗体具有良好特异性及反应性;在DF-1细胞中,FBXL8负向调控ALV-A复制,研究结果为进一步深入探究FBXL8生物学特性提供了重要参考,并为揭示FBXL8抗ALV-A感染分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 fbxl8 A亚群禽白血病病毒(ALV-A) 多克隆抗体 病毒复制
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FBXL20对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响 被引量:4
9
作者 张博瀚 吴庆琛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期795-800,共6页
目的观察FBXL20(F-box and leucine rich repeat protein 20)对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响并初步探究其机制。方法采用慢病毒感染A549细胞,构建对照组(FBXL20-vector组)及干扰组(FBXL20-RNAi组),通过Western blot验证慢病毒敲减... 目的观察FBXL20(F-box and leucine rich repeat protein 20)对人非小细胞肺癌A549细胞生长的影响并初步探究其机制。方法采用慢病毒感染A549细胞,构建对照组(FBXL20-vector组)及干扰组(FBXL20-RNAi组),通过Western blot验证慢病毒敲减效率。利用CCK-8及集落形成实验观察FBXL20的下调对A549细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化,Western blot分析周期蛋白的改变,基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)探究FBXL20可能参与的生物学过程。结果干扰组FBXL20的蛋白表达(0.36±0.02)显著低于对照组(0.58±0.01)(P<0.01)。与对照组相比,干扰组的增殖能力增强(P<0.05),形成的集落数目也显著增加(100±20 vs 53±6)(P<0.05),且停留在G_2/M期的细胞比例明显降低(5.65±1.35 vs 9.94±1.44)(P<0.05)。Western blot结果显示Cyclin D1、ERK1/2蛋白表达无明显变化(P>0.05),CDK2、Cyclin E、CDK1、Cyclin A、Cyclin B1蛋白表达显著增加,而p-ERK1/2则显著降低(P<0.05)。GSEA结果显示FBXL20的低表达与G_2/M检查点呈正相关(P<0.01)。结论下调FBXL20可以加快A549细胞G_2/M期的进程,提高其生长能力。其机制可能是通过抑制p-ERK的激活,使得其下游周期蛋白CDK1、Cyclin A、Cyclin B1表达增加而实现的。 展开更多
关键词 fbxl20 非小细胞肺癌 增殖 细胞周期
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驴FBXL3基因在发情期和乏情期各组织表达谱差异及氨基酸特征分析
10
作者 刘亚星 冯玉龙 +7 位作者 李健 李超程 张亚茹 王慧 王丽 董红 贾斌 张永生 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第23期116-120,129,共6页
为了探究FBXL3基因在驴卵巢、卵泡液和乳腺的表达水平与驴发情期和乏情期之间的关系,试验以德州毛驴为研究对象,利用qPCR方法分析FBXL3基因在发情期和乏情期不同组织中的表达情况,利用生物信息学方法预测FBXL3蛋白质的理化性质、跨膜结... 为了探究FBXL3基因在驴卵巢、卵泡液和乳腺的表达水平与驴发情期和乏情期之间的关系,试验以德州毛驴为研究对象,利用qPCR方法分析FBXL3基因在发情期和乏情期不同组织中的表达情况,利用生物信息学方法预测FBXL3蛋白质的理化性质、跨膜结构域、亚细胞定位、蛋白质相互作用情况、二级结构和三级结构。结果表明:FBXL3基因在发情期卵巢和卵泡液中的相对表达量极显著高于乏情期(P<0.01),乳腺中的相对表达量显著高于乏情期(P<0.05)。FBXL3蛋白有37个酶解位点,属于亲水性蛋白,无跨膜结构域,主要分布在线粒体上,为酸性、不稳定蛋白质;FBXL3蛋白中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲和延伸链分别占49.30%、2.57%、35.98%和12.15%,与三级结构预测结果一致;SKP1、FBXL13、CRY1、CRY2、PER1、PER2等蛋白与FBXL3蛋白存在相互作用。说明FBXL3基因在发情期和乏情期的表达具有组织特异性。 展开更多
关键词 fbxl3基因 表达分析 生物信息学 季节性发情 组织表达谱
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FBXL3和FBXL21基因表达与苏尼特羊季节性发情关系初探 被引量:3
11
作者 钟英杰 向光明 +5 位作者 贺小云 刘树军 张效生 张金龙 储明星 刘秋月 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期40-44,共5页
为探究下丘脑中FBXL3和FBXL21基因的表达水平与绵羊季节性发情之间的关系,本研究以季节性发情的苏尼特羊为实验动物,通过实时荧光定量PCR(qPCR)研究苏尼特羊由短光照(发情期,SP)转长光照(非发情期,LP)这个过程中下丘脑FBXL3和FBXL21基... 为探究下丘脑中FBXL3和FBXL21基因的表达水平与绵羊季节性发情之间的关系,本研究以季节性发情的苏尼特羊为实验动物,通过实时荧光定量PCR(qPCR)研究苏尼特羊由短光照(发情期,SP)转长光照(非发情期,LP)这个过程中下丘脑FBXL3和FBXL21基因表达情况,以及短光照转长光照不同时间点(SP21、LP3、LP15、LP21、LP42和LP49)对FBXL3和FBXL21基因表达的影响。结果表明:由短光照转长光照过程后,苏尼特羊下丘脑中FBXL3基因的表达量显著升高;且由短光照SP21转长光照LP21时,FBXL3基因表达量从LP3、LP15、LP21依次显著增高,LP21时达到峰值,LP21到LP49时又显著降低。而在短光照转长光照过程中,FBXL21基因的表达量显著降低,由短光照SP21转到长光照LP3、LP15时,表达量显著降低,LP15表达量相对最低,在LP21时FBXL21基因表达量达到最高,在LP42时又显著降低,LP49又升高。综上,FBXL3基因的表达量与由短光照和长光照季节性发情调控关键分子(EYA3和TSHb等)和催乳素的表达趋势相似,推测FBXL3基因可能通过调控下丘脑核心生物钟从而在绵羊季节性发情调控通路上游发挥重要作用,FBXL21基因在这个调控过程中也发挥着重要作用。 展开更多
关键词 fbxl3基因 fbxl21基因 苏尼特羊 季节性发情 长光照 短光照
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组蛋白去甲基化酶FBXL11抑制牙髓干细胞成骨和成牙本质分化 被引量:3
12
作者 付晓茹 杜娟 范志朋 《北京口腔医学》 CAS 2013年第5期241-244,共4页
目的研究组蛋白去甲基化酶FBXL11对牙髓干细胞定向分化能力的影响。方法成骨分化诱导培养基诱导牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化。逆转录病毒转染构建过表达FBXL11的牙髓干细胞稳定转染细胞,进行FBXL11获得性功能研究。碱性磷酸酶活性... 目的研究组蛋白去甲基化酶FBXL11对牙髓干细胞定向分化能力的影响。方法成骨分化诱导培养基诱导牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化。逆转录病毒转染构建过表达FBXL11的牙髓干细胞稳定转染细胞,进行FBXL11获得性功能研究。碱性磷酸酶活性实验及碱性磷酸酶染色检测成骨/成牙本质分化早期分化指标-碱性磷酸酶活性。茜素红染色及钙离子定量分析检测牙髓干细胞体外成骨/成牙本质分化能力。实时定量RTPCR检测FBXL11及成骨/成牙本质分化相关基因-骨涎蛋白、骨桥蛋白和骨钙素的表达。结果成骨诱导牙髓干细胞抑制FBXL11的表达。过表达FBXL11明显抑制牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性、牙髓干细胞体外矿化能力以及骨涎蛋白和骨桥蛋白的表达。结论组蛋白去甲基化酶FBXL11具有抑制牙髓干细胞成骨和成牙本质分化的潜能。 展开更多
关键词 组蛋白去甲基化酶 牙髓干细胞 成骨 成牙本质分化 fbxl11
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FBXL20在颞叶癫痫患者及癫痫大鼠模型中的表达变化 被引量:3
13
作者 伏鹏飞 温跃桃 +4 位作者 王刚 高超 谢延风 詹彦 石全红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1257-1262,共6页
目的通过研究E3泛素连接酶FBXL20及其下游蛋白-神经元突触膜胞外分泌调节蛋白1(regulating synaptic membrane exocytosis 1,RIM1)在颞叶癫痫患者皮质及匹鲁卡品癫痫大鼠模型皮质、海马组织中的表达变化,探讨FBXL20在癫痫形成中的作用... 目的通过研究E3泛素连接酶FBXL20及其下游蛋白-神经元突触膜胞外分泌调节蛋白1(regulating synaptic membrane exocytosis 1,RIM1)在颞叶癫痫患者皮质及匹鲁卡品癫痫大鼠模型皮质、海马组织中的表达变化,探讨FBXL20在癫痫形成中的作用。方法以颞叶癫痫患者手术切除病灶标本(n=25)为癫痫组,以脑外伤减压手术所切皮质标本(n=10)为对照组。另取40只健康雄性SD大鼠腹腔注射氯化锂(127 mg/kg),20 h后腹腔注射匹鲁卡品(50 mg/kg),每30分钟重复给予1次匹鲁卡品(10 mg/kg),直到大鼠癫痫发作。2周后出现癫痫自发性发作的大鼠纳入癫痫组;2个月后仍未出现癫痫自发性发作的大鼠纳入对照组。采用免疫荧光对FBXL20的表达进行定位;免疫组化检测FBXL20的表达水平;Western blot检测FBXL20、RIM1的表达水平。结果免疫荧光检测结果显示FBXL20主要表达于神经元;免疫组化及Western blot检测结果均显示癫痫患者皮质、癫痫大鼠模型皮质与海马中FBXL20表达较对照组明显下降(P<0.05);同时Western blot检测结果显示RIM1表达较对照组明显升高(P<0.05)。结论 FBXL20在癫痫患者及大鼠模型中的表达水平明显降低,RIM1表达明显升高,提示FBXL20可能通过调控RIM1参与了癫痫的形成。 展开更多
关键词 fbxl20 RIM1 颞叶癫痫 泛素化 突触重塑 突触囊泡
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构建逆转录病毒pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及稳定转染细胞 被引量:2
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作者 马玉实 范志朋 《口腔生物医学》 2012年第3期113-116,共4页
目的:构建pQCXIH-HA-FBXL11逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11的稳定转染细胞。方法:以牙髓干细胞的cDNA为模板,利用PCR方法扩增目的基因FBXL11,PCR产物纯化回收、连接、酶切、测序鉴定,构建pQCXIH-HA-FB... 目的:构建pQCXIH-HA-FBXL11逆转录病毒表达质粒,鉴定表达,在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11的稳定转染细胞。方法:以牙髓干细胞的cDNA为模板,利用PCR方法扩增目的基因FBXL11,PCR产物纯化回收、连接、酶切、测序鉴定,构建pQCXIH-HA-FBXL11质粒。利用FuGENE6转染293T细胞,蛋白质免疫印迹法和实时荧光定量PCR法在蛋白及mRNA水平检测HA-FBXL11的表达。利用逆转录病毒感染牙髓间充质干细胞。结果:成功构建了逆转录病毒表达质粒pQCXIH-HA-FBXL11,蛋白及mRNA水平检测证实其在293T细胞可以有效的表达。成功建立了过表达HA-FBXL11的牙髓间充质干细胞稳定转染细胞。结论:通过构建pQCXIH-HA-FBXL11表达质粒及在牙髓间充质干细胞建立过表达FBXL11稳定转染细胞,为进一步研究FBXL11对间充质干细胞的功能调控奠定了基础。 展开更多
关键词 克隆构建 fbxl11 逆转录病毒 间充质干细胞
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FBXL20在喉癌组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 温蓓 何刚 《成都医学院学报》 CAS 2016年第6期706-708,共3页
目的检测喉癌组织中FBXL20的表达,并探讨其与喉癌发生、发展的关系以及临床应用的潜在价值。方法用免疫组化SP法,检测30例喉癌组织和其对应的正常组织中FBXL20的表达情况。结果 FBXL20表达于正常组织和肿瘤组织的胞浆中,相对于肿瘤组织,... 目的检测喉癌组织中FBXL20的表达,并探讨其与喉癌发生、发展的关系以及临床应用的潜在价值。方法用免疫组化SP法,检测30例喉癌组织和其对应的正常组织中FBXL20的表达情况。结果 FBXL20表达于正常组织和肿瘤组织的胞浆中,相对于肿瘤组织,FBXL20在正常组织中表达较高(P=0.010);其表达在有无侵犯淋巴结中,差异有统计学意义(P=0.042);其表达在正常组织与低分化肿瘤中,差异有统计学意义(P=0.018)。结论 FBXL20在喉癌的发生中可能发挥着一定作用,并且可能是喉癌发生过程中的抑制因子。 展开更多
关键词 喉癌 fbxl20 免疫组化
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FBXL家族在哺乳动物生物节律中调控作用的研究进展 被引量:2
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作者 钟英杰 向光明 +4 位作者 狄冉 胡文萍 王翔宇 储明星 刘秋月 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期217-226,共10页
F-box富含亮氨酸重复蛋白3基因(F-box and leucine rich repeat protein 3,FBXL3)能编码含F-box结构域的蛋白,属于F-box蛋白家族成员,在细胞核中发挥功能。F-box富含亮氨酸重复蛋白21基因(F-box and leucine rich repeat protein 21,FBX... F-box富含亮氨酸重复蛋白3基因(F-box and leucine rich repeat protein 3,FBXL3)能编码含F-box结构域的蛋白,属于F-box蛋白家族成员,在细胞核中发挥功能。F-box富含亮氨酸重复蛋白21基因(F-box and leucine rich repeat protein 21,FBXL21)位于细胞质中,其功能与FBXL3基因功能存在拮抗作用。FBXL3与FBXL21蛋白在哺乳动物体内产生分子昼夜节律的负反馈循环中均都起重要作用。FBXL3通过形成SCF(SKP1-CUL1-F-box)复合物行使E3泛素连接酶功能,并通过泛素化促进隐花色素(Cryptochrome,CRY)蛋白的降解参与生物钟调控,FBXL21通过泛素化使CRY蛋白积累参与生物钟调控,两者对于CRY蛋白的拮抗作用能够稳定哺乳动物生物钟。本文首先介绍了生物节律以及生物钟分子的组成,然后综述了FBXL家族基因在昼夜节律循环中的调控作用及其突变后对季节性发情性状的影响,有助于后续探索FBXL家族基因突变后影响绵羊季节性发情性状的具体分子机制,为利用现代生物技术改变绵羊发情的季节性提供新思路。 展开更多
关键词 生物节律 F-box富含亮氨酸重复蛋白3基因 F-box和富含亮氨酸的重复蛋白21基因 季节性发情 分子机制 绵羊
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铁代谢与蛋白质泛素化-降解调控研究进展 被引量:1
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作者 沈佳 王福俤 胡荣贵 《生命科学》 CSCD 2012年第8期785-793,共9页
铁元素为几乎所有的生命体所必需,维持铁代谢稳态对机体的正常功能至关重要。铁代谢紊乱与人类多种疾病的发生和发展有关。已知铁代谢稳态受到一系列参与铁代谢环节的关键蛋白质,如IRP2等的精确调节。这些重要蛋白质的稳定性、生理活性... 铁元素为几乎所有的生命体所必需,维持铁代谢稳态对机体的正常功能至关重要。铁代谢紊乱与人类多种疾病的发生和发展有关。已知铁代谢稳态受到一系列参与铁代谢环节的关键蛋白质,如IRP2等的精确调节。这些重要蛋白质的稳定性、生理活性的动态变化及其协调作用是细胞维持铁代谢平衡的分子基础。除了转录和转录后水平的调控,泛素化等翻译后修饰方式和蛋白质降解是细胞精确调控参与铁代谢的蛋白质的水平及功能普遍而有效的方式之一;同时,细胞的铁代谢状态也影响细胞内参与泛素化等翻译后修饰途径的酶类的活性和稳定性,从而在铁代谢和蛋白质修饰-降解途径之间形成反馈机制,实时和动态地完成对细胞内铁代谢水平的精确调控。就相关领域的最新进展作简要综述。 展开更多
关键词 铁代谢稳态 IRP2 fbxl5 血红素 蛋白质降解系统
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猪泛素化因子的筛选及生物信息学分析
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作者 李健 刘亚星 +6 位作者 李超程 郭涛 韩雨松 张亚茹 王慧 张永生 贾斌 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期147-154,共8页
为探究影响猪骨骼肌发育的泛素化因子,本研究通过前期已获得的猪骨骼肌组织的转录组数据,与UniProt蛋白质序列和功能注释数据库中的猪泛素化因子进行比对,成功筛选出FBXL3、FBXL4、FBXL5等泛素化因子。通过生物信息学在线软件对一些关... 为探究影响猪骨骼肌发育的泛素化因子,本研究通过前期已获得的猪骨骼肌组织的转录组数据,与UniProt蛋白质序列和功能注释数据库中的猪泛素化因子进行比对,成功筛选出FBXL3、FBXL4、FBXL5等泛素化因子。通过生物信息学在线软件对一些关键泛素化因子FBXL3、FBXL4和FBXL6进行分析,得到其空间结构和理化性质等参数。结果显示:FBXL3、FBXL4和FBXL6蛋白均为不稳定的亲水蛋白,均不存在跨膜区域,FBXL3、FBXL4蛋白分别有44个和7个磷酸化位点,FBXL6无磷酸化位点,二级结构中无规则卷曲分别占比36.60%、38.33%、41.08%,FBXL6蛋白与FBXL3、FBXL7、FBXL8、FBXL12等多个泛素化蛋白相互作用。本研究成功对猪的泛素化因子进行了筛选,同时进行了系统的生物信息学分析,为解析泛素化因子对骨骼肌的调控作用提供了基础资料。 展开更多
关键词 骨骼肌 fbxl家族 生物信息学分析
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FBXL5在结肠癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 王天鸣 李晓莉 +1 位作者 田寅 赵海丰 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第18期2934-2938,共5页
目的:通过研究E3泛素连接酶FBXL5在结肠癌组织中的表达情况,来确定和探讨其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测20例癌旁组织及60例结肠癌组织中E3泛素连接酶FBXL5的表达情况。结果:FBXL5在结肠癌和癌旁组织中表达差异有统计学意义(P&l... 目的:通过研究E3泛素连接酶FBXL5在结肠癌组织中的表达情况,来确定和探讨其临床意义。方法:采用免疫组化方法检测20例癌旁组织及60例结肠癌组织中E3泛素连接酶FBXL5的表达情况。结果:FBXL5在结肠癌和癌旁组织中表达差异有统计学意义(P<0.0 5),其阳性率分别为8 3.3%(5 0/6 0)、25.0%(5/20)。FBXL5的表达与结肠癌的淋巴结转移(P=0.027)和临床TNM分期(P=0.013)有关。FBXL5表达与术后5年生存率明显相关(P=0.016)。Cox多因素分析显示TNM分期为结肠癌的独立预后因素。结论:FBXL5促进了结肠癌的发生、发展、侵袭及转移,希望本次研究结果能对结肠癌的治疗及发生机制提供一个方向,为后续的生物学研究及临床治疗提供一个参考。 展开更多
关键词 结肠癌 E3泛素连接酶 fbxl5 上皮间质转化
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斑马鱼Fbxl5基因多克隆抗体的制备与检测 被引量:1
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作者 盛力翔 冯德峰 +3 位作者 罗世锋 吴秀山 戴国 莫小阳 《激光生物学报》 CAS CSCD 2013年第3期249-256,共8页
Fbxl5为F-box基因家族的一员,目前研究发现其与心脏的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。通过桥式PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Fbxl5基因片段,将其克隆入表达载体pET-28a,转化至大... Fbxl5为F-box基因家族的一员,目前研究发现其与心脏的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。通过桥式PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Fbxl5基因片段,将其克隆入表达载体pET-28a,转化至大肠杆菌Rosseta中。用IPTG诱导Fbxl5重组质粒得到His-Fbxl5的融合蛋白。这个融合蛋白用Ni-IDA凝胶柱亲和纯化,将纯化的His-Fbxl5融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。使用Western Blot检测,获得了Fbxl5原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Fbxl5多克隆抗体。随后检测了Fbxl5在斑马鱼胚胎和成体组织中蛋白的表达,通过基因芯片分析在Fbxl5-MO和Std胚胎样品的mRNA含量差异.所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Fbxl5多克隆抗体,为Fbxl5功能的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 fbxl5 融合蛋白 多克隆抗体 基因芯片
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