重组FAS分子的表达、纯化及抗体制备 被引量：3

1

作者 罗振革 孔祥英 +2 位作者 彭虹 张明 高杰英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第2期200-204,共5页

用ＰＣＲ法扩增出编码人ＦＡＳ分子胞外区的ｃＤＮＡ片段，直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上，经ＤＮＡ序列测定后，再插入到谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－ＫＧ的ＥｃｏＲⅠ和ＳａｌⅠ位点之间，构成重组质粒ｐＫＧ... 用ＰＣＲ法扩增出编码人ＦＡＳ分子胞外区的ｃＤＮＡ片段，直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上，经ＤＮＡ序列测定后，再插入到谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－ＫＧ的ＥｃｏＲⅠ和ＳａｌⅠ位点之间，构成重组质粒ｐＫＧ－ｈＦＡＳ，将此质粒导入大肠杆菌，经ＩＰＴＧ诱导后获得ＧＳＴ－ｈＦＡＳ重组融合蛋白的表达，用谷胱甘肽偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ经亲合层析获得纯化的ＧＳＴ－ｈＦＡＳ蛋白，经凝血酶酶切和二次亲合层析去除ＧＳＴ部分，得到纯化的ＦＡＳ蛋白．用纯化的ＦＡＳ抗原免疫家兔制备了抗ＦＡＳ抗体。 展开更多

关键词 fas分子 GST融合蛋白 亲合层析 纯化 抗体 重组

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T细胞表达Fas用于评价系统性红斑狼疮活动性和疗效的价值

2

作者 高双全 李富荣 +3 位作者 齐辉 肖学吕 任莉莉 王新根 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1159-1162,共4页

目的:流式细胞术检测系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞表面Fas表达水平,探讨其用于评价疾病活动指数和疗效的价值。方法:对36例活动期SLE患者和18名正常人群,通过流式细胞仪检测T细胞Fas表达和凋亡率。对SLE患者分别给予泼尼松、甲泼尼龙... 目的:流式细胞术检测系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞表面Fas表达水平,探讨其用于评价疾病活动指数和疗效的价值。方法:对36例活动期SLE患者和18名正常人群,通过流式细胞仪检测T细胞Fas表达和凋亡率。对SLE患者分别给予泼尼松、甲泼尼龙、环磷酰胺冲击治疗,在入院3d内、出院时(平均住院天数为22·6d)、出院后4周分别检测T细胞Fas表达(Fas+T)。结果:活动期SLE患者T细胞表面Fas表达与T细胞凋亡率和SLEDAI之间,具有明显正相关(P<0·01),皮质类固醇或免疫抑制剂治疗活动期SLE患者后,出院时T细胞表面Fas表达(Fas+T)明显升高;出院后4周复诊时呈下降趋势。结论:SLE患者T细胞表面Fas表达上调,由Fas介导的T细胞凋亡增强,刺激机体产生抗dsDNA等多种自身抗体,可能是SLE免疫功能紊乱的主要原因。T细胞表面Fas密度可能是评价SLE疾病活动性和临床疗效的主要参数。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 fas分子 T细胞 细胞凋亡

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肺腺癌患者外周血及肿瘤浸润性淋巴细胞中Fas分子的表达及意义

3

作者 楚广民 马艳英 《中国实用医刊》 2010年第2期30-32,共3页

目的 检测Fas分子在肺腺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)和外周血淋巴细胞(PBLs)中的表达,探讨Fas/FasL在肿瘤局部与全身免疫反应中的作用及临床意义.方法 用流式细胞术(FCM)对50例肺腺癌患者PBLs及TILs中Fas的表达进行定性定量分析,以48... 目的 检测Fas分子在肺腺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)和外周血淋巴细胞(PBLs)中的表达,探讨Fas/FasL在肿瘤局部与全身免疫反应中的作用及临床意义.方法 用流式细胞术(FCM)对50例肺腺癌患者PBLs及TILs中Fas的表达进行定性定量分析,以48例正常人的PBLs为对照组.结果 Fas分子在肺腺癌患者TILs和PBLs中的表达率分别为16.8%和8.0%,对照组PBLs为12.6%,前者表达率明显高于后两者(P<0.05);而肺腺癌患者PBLs的Fas分子表达率明显低于对照组PBLs(P<0.05).结论 Fas分子在肺腺癌患者PBLs与TILs及其亚群中的表达不同,Fas/FasL在机体肿瘤局部及全身水平的免疫反应中起着重要作用. 展开更多

关键词 癌患者 外周血淋巴细胞 肿瘤浸润性淋巴细胞 fas分子 表达率 lung ADENOCARCINOMA peripheral blood TILs fas/fasL tumor infiltrating LYMPHOCYTES pulmonary ADENOCARCINOMA clinical significance 对照组 肿瘤浸润淋巴细胞 全身免疫反应 systemic IMMUNE IMMUNE system 定性定量分析 流式细胞术 临床意义

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用可溶型Fas分子防止Fas─介导的循序细胞死亡

4

作者 周本正 陈丽 《湖北预防医学杂志》 1996年第1期44-45,10,共3页

用可溶型Ｆａｓ分子防止Ｆａｓ─介导的循序细胞死亡Ｆａｓ是一种指令循序细胞死亡的受体分子，它位于多种细胞的表面。分子克隆和核苷酸序列分析发现人Ｆａｓ信使ＲＮＡ变异体能编码一种无跨膜区的可溶Ｆａｓ分子，因为这种可溶Ｆａｓ... 用可溶型Ｆａｓ分子防止Ｆａｓ─介导的循序细胞死亡Ｆａｓ是一种指令循序细胞死亡的受体分子，它位于多种细胞的表面。分子克隆和核苷酸序列分析发现人Ｆａｓ信使ＲＮＡ变异体能编码一种无跨膜区的可溶Ｆａｓ分子，因为这种可溶Ｆａｓ分子编码该区的一种外显子缺失。可溶... 展开更多

关键词 可溶型 fas分子 循序细胞死亡 自身免疫

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凋亡蛋白Fas、FasL及Caspase3在血清和胎膜组织中的变化与羊水过少的

5

作者 相关性研究 黄丽华 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2019年第3期213-214,共2页

研究凋亡蛋白Fas、FasL及Caspase3在血清和胎膜组织中的变化与羊水过少的相关性。方法:此次研究于汕头潮南民生医院选取2017年2月~2018年7月收治的100例足月分娩羊水过少患者和同期100例正常妊娠产妇作为研究对象,将其分别设为实验组和... 研究凋亡蛋白Fas、FasL及Caspase3在血清和胎膜组织中的变化与羊水过少的相关性。方法:此次研究于汕头潮南民生医院选取2017年2月~2018年7月收治的100例足月分娩羊水过少患者和同期100例正常妊娠产妇作为研究对象,将其分别设为实验组和对照组,使用酶联免疫吸附和免疫组化方法,分别检测两组患者外周血和胎膜组织中Fas、FasL及Caspase3量,对比两组患者的外周血和胎膜组织中Fas、FasL及Caspase3的表达。结果:实验组患者外周血中Fas、FasL及Caspase3表达显著高于对照组(P<0.05);实验组患者胎膜组织中Fas、Caspase3的阳性表达显著高于对照组,FasL表达显著低于对照组(P<0.05)。结论:凋亡蛋白Fas、FasL及Caspase3在血清和胎膜组织中的异常变化与羊水过少具有密切相关性,产妇凋亡蛋白表达异常极有可能是导致羊水过少的原因,对相关病症进行治疗时要注意从病因角度出发,评估疾病影响因素,从而制定和实施针对性治疗方法。 展开更多

关键词 凋亡蛋白 fas分子 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 血清细胞 胎膜组织 羊水过少

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多发性硬化患者外周血T淋巴细胞Fas分子的观察

6

作者 熊英琼 柳喆 +2 位作者 吴晓牧 张昆南 程绍民 《实用临床医学（江西）》 CAS 2007年第8期12-13,共2页

目的:探讨多发性硬化患者外周血Fas分子与T淋巴细胞亚群的关系。方法:采用流式细胞术对30例多发性硬化患者与30例正常体检者的外周血T淋巴细胞亚群及Fas分子(CD95)进行检测对比。结果:多发性硬化组较对照组外周血总T细胞明显下降,Fas分... 目的:探讨多发性硬化患者外周血Fas分子与T淋巴细胞亚群的关系。方法:采用流式细胞术对30例多发性硬化患者与30例正常体检者的外周血T淋巴细胞亚群及Fas分子(CD95)进行检测对比。结果:多发性硬化组较对照组外周血总T细胞明显下降,Fas分子的表达明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。且Fas分子的表达以CD4+细胞为主,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多发性硬化患者Fas表达增强,并以介导CD4+T细胞凋亡为主。 展开更多

关键词 多发性硬化 T淋巴细胞 fas分子

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促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性纯红细胞再生障碍性贫血的疗效及相关机制 被引量：6

7

作者 王丽丽 韩明明 《检验医学与临床》 CAS 2021年第10期1462-1464,共3页

目的探讨促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的疗效及相关机制。方法选取2018年1月至2020年4月该院收治的老年获得性PRCA患者80例作为研究对象,采用信封密封法随机分为对照组(给予环孢素A治疗)和研究... 目的探讨促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的疗效及相关机制。方法选取2018年1月至2020年4月该院收治的老年获得性PRCA患者80例作为研究对象,采用信封密封法随机分为对照组(给予环孢素A治疗)和研究组(给予促红细胞生成素联合环孢素A治疗),每组各40例。比较两组患者临床疗效、T淋巴细胞亚群、可溶性Fas分子(sFas)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)水平。结果研究组患者治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者治疗前CD4^(+)、CD25^(+)、CD4^(+)CD25^(+)、CD4^(+)CD25^(+)/CD4^(+)水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后sFas、TNF-α、IL-2水平均较治疗前降低,且研究组均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论促红细胞生成素联合环孢素A治疗老年获得性PRCA效果佳,治疗有效率高,能有效调节患者免疫功能,改善造血障碍,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 促红细胞生成素 获得性纯红细胞再生障碍性贫血 可溶性fas分子 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-2

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慢性阻塞性肺疾病患者血清sFas与TNF-α水平的检测和意义 被引量：3

8

作者 王迪 姜莉 《中国实用医药》 2010年第4期25-27,共3页

目的探讨血清可溶性Fas蛋白(sFas)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用及临床意义。方法符合COPD诊断标准的急性加重期与稳定期患者各68例,健康对照组20例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清sFas与TNF-... 目的探讨血清可溶性Fas蛋白(sFas)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用及临床意义。方法符合COPD诊断标准的急性加重期与稳定期患者各68例,健康对照组20例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清sFas与TNF-α的水平。结果①COPD急性加重期血清sFas及TNF-α水平与稳定期及对照组比较显著升高(P<0.01);②急性加重期重度COPD血清sFas及TNF-α水平较中度COPD显著升高(P<0.05);③COPD急性加重期血清sFas及TNF-α水平与气流受限指标第一秒用力呼气容积(FEV1)呈负相关(r值分别是-0.256、-0.364,P均<0.05)。结论sFas及TNF-α通过抑制细胞凋亡参与COPD病理损伤,sFas及TNF-α可作为判定COPD严重程度的参考指标。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 可溶性fas分子(sfas) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 凋亡

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扩张型心肌病的心肌损伤与细胞凋亡 被引量：6

9

作者 伍伟锋 刘唐威 +1 位作者 陶新智 冯震博 《医学研究杂志》 2006年第3期34-34,共1页

关键词 细胞凋亡 扩张型心肌病 肿瘤坏死因子(TNF) 心肌损伤 心血管系统疾病 fasL 自身免疫疾病 神经系统疾病 fas分子 基因调控

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人类白细胞抗原G分子、凋亡相关因子及FAS配体分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中表达的研究 被引量：1

10

作者 汤军花 杨冬 +2 位作者 房臻 蒋红丽 刘陶 《中国医刊》 CAS 2012年第6期81-84,共4页

目的检测人类白细胞抗原-G分子(HLA-G)、FAS/FASL分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达情况。方法应用免疫组织化学方法检测18例宫颈鳞癌,40例宫颈上皮内瘤变(包括CINⅢ16例,CINⅡ12例,CINⅠ12例),18例正常宫颈组织中HLA-G分子、FAS... 目的检测人类白细胞抗原-G分子(HLA-G)、FAS/FASL分子在宫颈鳞癌及宫颈上皮内瘤变中的表达情况。方法应用免疫组织化学方法检测18例宫颈鳞癌,40例宫颈上皮内瘤变(包括CINⅢ16例,CINⅡ12例,CINⅠ12例),18例正常宫颈组织中HLA-G分子、FAS分子、FASL分子的表达,并分别比较各分子之间的相关性。结果宫颈鳞癌中HLA-G分子的表达水平显著高于正常宫颈组织,其FAS分子的表达水平显著低于正常宫颈组织。HLA-G与FAS分子在宫颈鳞癌与CINs中的表达水平无统计学差异性,在CINs组间以及CINs与正常组织中的表达无显著差异性。FASL分子在宫颈鳞癌和CINs及正常组织中的表达水平无明显差异性。HLA-C与FASL分子在各宫颈病变中表达均具有正相关性,其两者与FAS分子之间表达无相关性。结论宫颈鳞癌组织中HLA-G和FASL分子呈高表达,FAS分子呈低表达。HLA-G与FASL分子呈正相关。但HLA-G分子是否介导宫颈鳞癌的免疫耐受,以及FAS/FASL分子介导的细胞凋亡途径是否为其发生的途径之一尚需进一步研究。 展开更多

关键词 人类白细胞抗原G分子 凋亡相关因子 fas配体分子 宫颈鳞癌 宫颈上皮内瘤变 免疫逃逸

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Fas凋亡抑制分子FAIM 1表达缺失诱发单纯性肥胖的初步研究

11

作者 李艳伟 马义 +5 位作者 韩磊 肖兴 党诗莹 文涛 王得华 范志勇 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期37-42,共6页

利用肥胖患者血液和肥胖动物模型研究Fas凋亡抑制分子FAIM 1与单纯性肥胖的关系,为揭示单纯性肥胖发生的分子机理和诊治肥胖提供新的实验基础。检测40例单纯性肥胖患者和17例正常者血液白细胞的FAIM 1蛋白的表达量,分析FAIM 1与单纯性... 利用肥胖患者血液和肥胖动物模型研究Fas凋亡抑制分子FAIM 1与单纯性肥胖的关系,为揭示单纯性肥胖发生的分子机理和诊治肥胖提供新的实验基础。检测40例单纯性肥胖患者和17例正常者血液白细胞的FAIM 1蛋白的表达量,分析FAIM 1与单纯性肥胖的相关性。为进一步揭示FAIM 1与单纯性肥胖发生、发展的内在关系,利用高脂饲料建立肥胖模型,并测定肥胖组和对照组大鼠的体重和血糖水平;造模成功的肥胖组大鼠和对照组大鼠禁食12h,麻醉心脏取血,分析血脂中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)的变化;取肥胖组和对照组大鼠的附睾脂肪垫和肾周脂肪,分析重量变化;取肥胖组和对照组大鼠,利用Western-blot检测FAIM 1及胰岛素受体β(IRβ)的表达变化。实验结果表明:与正常者相比,单纯性肥胖患者血液白细胞的FAIM 1表达量平均减少36.4%;与对照组相比,肥胖组大鼠血清TC、TG和LDL-C分别增加37.1%、25.6%和39.1%,而HDL-C则降低33.3%;肥胖组大鼠附睾脂肪垫和肾周脂肪分别是对照组的1.85倍和2.24倍;与对照组相比,肥胖组大鼠肝脏FAIM 1、IRβ的表达量分别降低45.9%和32.6%,与临床血液样本的检测结果一致。研究表明,FAIM 1表达与单纯性肥胖发生具有显著的负相关性,FAIM 1可成为单纯性肥胖诊断和治疗的新靶点。 展开更多

关键词 fas凋亡抑制分子 肥胖 高脂饮食 临床血液 胰岛素受体β

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