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流式细胞术检测表达FoxP3的CD4^+CD25^+调节性T细胞 被引量:24
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作者 焦志军 尤海燕 +3 位作者 陈蕾 汪毅 王文红 邵启祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期161-163,共3页
目的探讨转录因子FoxP3在外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)内的表达特性。方法取正常人外周血单个核细胞(PBMC),经固定/透膜处理进行细胞内染色,用流式细胞术(FCM)检测T细胞内FoxP3。以抗人CD3/CD28诱导T细胞活化,再用定量PCR及FCM术... 目的探讨转录因子FoxP3在外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)内的表达特性。方法取正常人外周血单个核细胞(PBMC),经固定/透膜处理进行细胞内染色,用流式细胞术(FCM)检测T细胞内FoxP3。以抗人CD3/CD28诱导T细胞活化,再用定量PCR及FCM术分别检测FoxP3mRNA及蛋白质表达水平。结果FoxP3主要表达于CD4+T细胞,尤其是CD25高表达的CD4+T细胞,达97%左右;中等程度表达CD25的细胞中也含有少量FoxP3阳性细胞。T细胞活化后,表达FoxP3的CD4+CD25+T细胞比例显著增高,FCM检测结果与定量PCR结果一致。结论FoxP3不仅参与维持Treg细胞的功能,也与T细胞的活化有关。FCM检测细胞核内表达的FoxP3分子为研究Treg细胞提供了一种快速、简便的方法。 展开更多
关键词 FOXP3 调节性T细胞 流式细胞术
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外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用 被引量:13
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作者 姜艳丽 刘磊 +1 位作者 王雪野 刘龑航 《中国实验诊断学》 2015年第7期1117-1120,共4页
目的观察恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(CD4+CD25+CD127lowTreg)的数量变化,探讨外周血CD4+CD25+CD127lowTreg检测在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用。方法以35例正常人作为对照组,采用流式细胞术检测74例肿瘤患者... 目的观察恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(CD4+CD25+CD127lowTreg)的数量变化,探讨外周血CD4+CD25+CD127lowTreg检测在恶性肿瘤患者免疫功能评估中的作用。方法以35例正常人作为对照组,采用流式细胞术检测74例肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg在CD4+T细胞的比例,分析不同TNM分期恶性肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的百分比,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测PBMC转录因子Foxp3表达水平。结果肿瘤患者外周血中CD4+CD25+CD127low Treg占CD4+T细胞百分比为(6.19±1.82)%,明显高于对照组(3.12±1.16)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅲ、Ⅳ期患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg百分比分别为(6.08±2.14)%、(6.88±2.65)%,明显高于Ⅰ-Ⅱ期患者(5.65±1.86)%,P<0.05;病理分型为低分化者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.72±2.60)%,明显高于高分化者(5.94±2.11)%,P<0.05;有淋巴结转移者CD4+CD25+CD127lowTreg百分比为(6.95±3.12)%,明显高于无淋巴结转移者(5.02±2.09)%,P<0.05。结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T细胞的比例明显升高,监测CD4+CD25+CD127lowTreg有利于评估肿瘤患者的免疫功能和辅助判断肿瘤患者的病情进展及预后。 展开更多
关键词 肿瘤 CD4^+CD25^+CD127^low调节性T细胞 流式细胞术
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逆转录病毒载体介导的猪瘟病毒E2基因的真核表达 被引量:8
3
作者 刘建玲 张彦明 +1 位作者 苏正元 许信刚 《中国病毒学》 CSCD 2006年第3期249-252,共4页
利用DNA重组技术将猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆... 利用DNA重组技术将猪瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感染PK-15细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞技术(FACS)分析,结果表明CSFVE2基因在PK-15细胞膜上成功表达。将表达E2蛋白的PK-15细胞腹腔免疫Balb/c小鼠,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2囊膜蛋白 逆转录病毒载体 facs
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树突状细胞的制备及生物学特性的研究 被引量:8
4
作者 任颖 银平章 +1 位作者 孔令非 唐华 《实用诊断与治疗杂志》 2004年第3期183-185,共3页
目的 :建立树突状细胞的体外扩增方法并研究树突状细胞的功能。方法 :根据细胞的黏附性不同 ,建立了一整套简便的树突状细胞的体外扩增方法 ,并利用HE染色和FACS研究了其生物学特征。结果 :体外培养 3d后 ,可见增殖性细胞集落 ,体外培养... 目的 :建立树突状细胞的体外扩增方法并研究树突状细胞的功能。方法 :根据细胞的黏附性不同 ,建立了一整套简便的树突状细胞的体外扩增方法 ,并利用HE染色和FACS研究了其生物学特征。结果 :体外培养 3d后 ,可见增殖性细胞集落 ,体外培养第 7d ,收集悬浮细胞即为DC。倒置显微镜下见 :细胞呈树突状、伪足状突起 ,HE染色核偏位 ,嗜碱性。流式细胞鉴定为髓系DC(CD11c+ ) ,高表达MHCⅡ类分子 (Ia)及共刺激分子 (CD40 ,CD80 ,CD86)。结论 :此实验制备的树突状细胞具有髓系树突状细胞的生物学特性 。 展开更多
关键词 树突状细胞 体外培养 HE染色 流式细胞仪
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Feature Representation for Facial Expression Recognition Based on FACS and LBP 被引量:9
5
作者 Li Wang Rui-Feng Li +1 位作者 Ke Wang Jian Chen 《International Journal of Automation and computing》 EI CSCD 2014年第5期459-468,共10页
In expression recognition, feature representation is critical for successful recognition since it contains distinctive information of expressions. In this paper, a new approach for representing facial expression featu... In expression recognition, feature representation is critical for successful recognition since it contains distinctive information of expressions. In this paper, a new approach for representing facial expression features is proposed with its objective to describe features in an effective and efficient way in order to improve the recognition performance. The method combines the facial action coding system(FACS) and 'uniform' local binary patterns(LBP) to represent facial expression features from coarse to fine. The facial feature regions are extracted by active shape models(ASM) based on FACS to obtain the gray-level texture. Then, LBP is used to represent expression features for enhancing the discriminant. A facial expression recognition system is developed based on this feature extraction method by using K nearest neighborhood(K-NN) classifier to recognize facial expressions. Finally, experiments are carried out to evaluate this feature extraction method. The significance of removing the unrelated facial regions and enhancing the discrimination ability of expression features in the recognition process is indicated by the results, in addition to its convenience. 展开更多
关键词 Local binary patterns (LBP) facial expression recognition active shape models (ASM) facial action coding system (facs) feature representation
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猪瘟病毒E2基因在真核细胞中表达及抗E2蛋白单克隆抗体的制备 被引量:7
6
作者 许信刚 胡建和 +2 位作者 张彦明 张海棠 陈永耀 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1318-1322,共5页
利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法转入293T细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感... 利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法转入293T细胞中包装逆转录病毒假病毒。用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞术(FACS)分析,结果表明CSFV E2基因在SP2/0细胞膜上成功表达。将表达E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BALB/c小鼠,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体。取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经克隆和筛选获得了4株稳定分泌抗猪瘟病毒E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗可与CSFV产生特异性反应并具有中和活性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2囊膜蛋白 逆转录病毒载体 假病毒 facs 单克隆抗体
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双价志贺菌苗滴鼻免疫对小鼠NALT、GALT和脾淋巴细胞的影响 被引量:9
7
作者 舒翠莉 高杰英 +3 位作者 彭虹 徐辉 邢丽 石辛甫 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期199-203,共5页
本文是探讨滴鼻免疫对NALT、GALT和脾淋巴细胞中特异性抗体分泌细胞及淋巴细胞表型变化的影响。将Balb/c小鼠随机分为 3组 ,每组 2 0只。FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d活杀 ,分离N... 本文是探讨滴鼻免疫对NALT、GALT和脾淋巴细胞中特异性抗体分泌细胞及淋巴细胞表型变化的影响。将Balb/c小鼠随机分为 3组 ,每组 2 0只。FSM 2 117或FS 5 416 4× 10 7CFU/只经滴鼻途径免疫小鼠 ,间隔 2周 ,3次免疫后 7d活杀 ,分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP及MLN淋巴细胞 ,采用BA ELISPOT法检测其中特异性抗福氏、宋内LPSIgA和IgG分泌细胞 ;采用流式细胞术检测其淋巴细胞表型的变化。结果是两株菌苗经鼻内免疫都诱发了NALT、NP、GALT内 (PP、MLN、LPL )以及代表系统免疫反应的脾淋巴细胞中特异性抗福氏、宋内LPSIgA、IgG ASC的显著增加 (P <0 0 1) ;NALT、NP和PP淋巴细胞中CD3+T细胞显著增加 ,其中以CD4+T细胞增加为主 ;FSM 2 117免疫组的脾细胞中B2 2 0 +细胞显著增加 (P <0 0 1) ,而FS 5 416免疫组的脾细胞中CD3+T细胞显著增加 (P <0 0 1)。说明两株菌苗经鼻粘膜免疫均可诱导鼻粘膜局部、GALT及系统免疫反应的发生 。 展开更多
关键词 双价志贺菌苗 滴鼻免疫 NALT GALT 脾淋巴细胞
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小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体PF18-3的特性研究 被引量:8
8
作者 张国荣 肖士云 +2 位作者 张平夏 田兰 陈慰峰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期264-268,共5页
用免疫组织化学及流式细胞计(FACS)对抗小鼠胸腺基质细胞(Thymic stromal cells,TSC)的单克隆抗体PF18-3进行了系统研究。免疫组织化学结果:PF18-3与小鼠胸腺髓质TSC和皮质胸腺细胞呈阳性反应;FACS分析显示,在活细胞染色时,PF18-3不能... 用免疫组织化学及流式细胞计(FACS)对抗小鼠胸腺基质细胞(Thymic stromal cells,TSC)的单克隆抗体PF18-3进行了系统研究。免疫组织化学结果:PF18-3与小鼠胸腺髓质TSC和皮质胸腺细胞呈阳性反应;FACS分析显示,在活细胞染色时,PF18-3不能与膜表面分子结合,经甲醛固定丙酮增加细胞膜通透性后才能使各免疫细胞亚群呈阳性反应,固定后细胞染色结果为:胸腺细胞中,PF18-3^+细胞为84.4%;在分离的CD4^-8^-、CD4^+8^-、CD4^-8^+胸腺细胞中,PF18-3^+细胞分别为2%,69.3%,62%;在脾、颌下淋巴结、外周血淋巴细胞中,PF18-3^+细胞分别为37.9%,51.5%,26.7%;PF18-3^+CD3^+双阳性细胞在总T淋巴细胞中分别占54.6%,59.8%,20.2%;PF18-3^+B220^+细胞在总B细胞中分别占35.1%,38.1%,37.6%;PF18-3对大部分巨噬细胞(71.6%)和极少数粒细胞(6.1%)也呈阳性反应。以上结果说明PF18-3识别的抗原主要分布于胸腺基质细胞膜表面和胸腺及外周免疫细胞的胞浆。提示它可能介导了TSC诱导的T细胞发育;可能也参与了免疫反应中不同种类细胞间的相互作用。 展开更多
关键词 胸腺基质细胞 单克隆抗体 免疫组织化学
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FACS Aria流式细胞分选仪质量控制体系的优化 被引量:8
9
作者 张晖 周春保 《中国医疗器械杂志》 CAS 2009年第3期225-227,共3页
FACSAria是BD公司2003年推出的世界首款台式高速多荧光检测和分选的流式细胞仪,其主要特点是将所研究或调查的靶细胞快速从细胞群体中分选出来,还可以将单个或指定个数的细胞分选到特定的培养孔或板上进行下一步的功能实验,同时借助... FACSAria是BD公司2003年推出的世界首款台式高速多荧光检测和分选的流式细胞仪,其主要特点是将所研究或调查的靶细胞快速从细胞群体中分选出来,还可以将单个或指定个数的细胞分选到特定的培养孔或板上进行下一步的功能实验,同时借助全新的光学装置和收集系统等可大大提高样本获取细胞信息时的数量和质量。 展开更多
关键词 流式细胞分选 质量控制体系 facs 优化 流式细胞仪 荧光检测 细胞群体 功能实验
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hB7-1重组腺病毒感染的肿瘤细胞的生物学特性 被引量:4
10
作者 田长富 李殿俊 +2 位作者 刘旭 李大林 解丽华 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2001年第3期157-160,F003,共5页
目的 在完成hB7 1cDNA克隆并成功构建包含hB7 1基因的重组腺病毒rAdexl B7 1的基础上 ,对经rA dexl B7 1感染的B16细胞的体外生物学特性进行了研究。方法 以FACS、电镜等方法观察病毒感染前后B16细胞的变化。结果 ①重组腺病毒经HEK2... 目的 在完成hB7 1cDNA克隆并成功构建包含hB7 1基因的重组腺病毒rAdexl B7 1的基础上 ,对经rA dexl B7 1感染的B16细胞的体外生物学特性进行了研究。方法 以FACS、电镜等方法观察病毒感染前后B16细胞的变化。结果 ①重组腺病毒经HEK2 93细胞扩增、CsCl纯化后滴度可达 10 1 0 PFU ml,且 2 0MOI的病毒可使 95 %以上的B16细胞被感染。②细胞动力学研究显示 ,rAdexl B7 1对B16的生长及集落形成能力无影响。③FACS结果表明 ,rAdexl B7 1对B16细胞的增殖周期无影响。④扫描电镜及透射电镜结果表明 ,经rAdexl B7 1感染的B16细胞在表面形态及超微结构上出现变化。结论 重组腺病毒rAdexl B7 1对B16细胞的生长动力学无影响 ,对形态学有轻微影响。 展开更多
关键词 肿瘤 基因治疗 重组腺病毒 共刺激分子 hB7-1(CD80) facs
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碧迪FACS CantoⅡ流式细胞仪性能评价及实验室应用 被引量:5
11
作者 方佩琪 孙林 +4 位作者 顾梅秀 吴蕙 潘柏申 郭玮 王蓓丽 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第2期94-99,共6页
目的评估碧迪FACS CantoⅡ(BD FACS CantoⅡ)流式细胞仪的性能及实验室应用。方法依据中华人民共和国医药行业新版标准《YY/T0588-2017流式细胞仪》^([1])对BD FACS CantoⅡ流式细胞仪进行性能评价,评价内容包括:荧光检出限、荧光线性... 目的评估碧迪FACS CantoⅡ(BD FACS CantoⅡ)流式细胞仪的性能及实验室应用。方法依据中华人民共和国医药行业新版标准《YY/T0588-2017流式细胞仪》^([1])对BD FACS CantoⅡ流式细胞仪进行性能评价,评价内容包括:荧光检出限、荧光线性、前向角散射光(forward scatter resolution,FSC)检出限、仪器分辨率、FSC分辨率、侧向角散射光(side scattering resolution,SSC)分辨率、倍体分析线性、表面标志物检测的准确度、表面标志物检测的重复性、携带污染率和仪器稳定性。完成性能评价后,分别用BD FACS CantoⅡ流式细胞仪及其配套的BD六色淋巴细胞亚群试剂盒和BD FACS Calibur流式细胞仪及其配套的BD四色淋巴细胞亚群试剂盒分别检测20份全血标本,比较两台仪器在标本前处理、上机检测、分析结果所用时间和结果比较的差异。结果该流式细胞仪对异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)通道荧光检出限为40.18等量可溶性荧光分子数(molecules equiva-lent soluble fluorochrome,MESF),对藻红蛋白(P-phycoerythrin,PE)通道荧光检出限为23.77 MESF,两者的决定系数(R square,r)均为0.999 9;FSC最小可检测0.22μm微球;仪器分辨率FSC,FITC和PE荧光通道的变异系数(coeffivirnt of cariation,CV)分别为2.3%,2.4%和2.4%;FSC/SSC散点图可明显区分外周血中红细胞和血小板,同时能区分白细胞中的淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞;倍体分析线性中G_2/M期(四倍体细胞峰)与G_0/G_1期(二倍体细胞峰)的平均荧光强度比值为1.98;表面标志物检测值的平均值均在质控品说明书给定的靶值参考范围内;表面标志物检测重复性CV分别为CD3:2.75%,CD4:1.86%,CD8:5.14%,CD16/CD56:7.33%和CD19:11.26%;携带污染率最大为0.05%;该仪器开机8 h检测FSC及各荧光通道峰值荧光道数偏差值(B)分别为-0.40%,-0.55%,1.57%,1.88%,1.66%,7.44%,7.23%,6.63%和6.21%;BD FACS CantoⅡ流式细胞仪及其配套试剂盒较BD FACS Ca 展开更多
关键词 BD facs CantoⅡ 流式细胞仪 性能评价
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FACSAria流式细胞仪无菌操作分选高纯度细胞亚群 被引量:7
12
作者 刘锡娟 丁慧荣 +2 位作者 田志华 韩海勃 张宏 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第12期1811-1815,共5页
BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和... BGC823细胞瞬时转染绿色荧光蛋白(GFP)质粒2 d后,用FACSAria流式细胞仪分选GFP阳性和阴性BGC823细胞亚群,检测其分选纯度并培养分选后细胞,观察其无菌生长状态;商品化FITC直标抗体孵育SMMC7721细胞后,FACSAria流式细胞仪分选FITC阳性和阴性细胞亚群。将所有分选的细胞进行培养检测无菌状态,并观察细胞生长情况。FACSAria流式细胞仪分选得到的GFP阳性细胞群的分选纯度达99.6%,GFP阴性细胞群的分选纯度达98.8%,同时激光共聚焦荧光显微镜显示分选后的GFP阳性细胞明显富集;分选后的BGC823细胞和SMMC7721细胞常规培养,细胞均无污染且生长状态良好。 展开更多
关键词 流式细胞仪 无菌分选 高纯度
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治疗性HBV DNA疫苗诱导健康Balb/c小鼠细胞免疫应答的实验研究 被引量:6
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作者 刘惠萍 杨富强 +2 位作者 饶桂容 莫国玉 陈光明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期612-614,共3页
目的探讨治疗性HBVDNA疫苗对健康Balb/c小鼠表达Th1类细胞免疫应答的影响。方法治疗性HBVDNA疫苗(pS2·S+pFP)以剂量(50μg+50μg)/只对Balb/c小鼠进行接种,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)、流式细胞术(FACS)分析特异性分泌IFN-γ阳性T... 目的探讨治疗性HBVDNA疫苗对健康Balb/c小鼠表达Th1类细胞免疫应答的影响。方法治疗性HBVDNA疫苗(pS2·S+pFP)以剂量(50μg+50μg)/只对Balb/c小鼠进行接种,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)、流式细胞术(FACS)分析特异性分泌IFN-γ阳性T细胞的免疫效果。结果免疫6周时,实验组用HBsAg刺激后其诱生的IFN-γ细胞频数(34±15.3)较不用HBsAg组(4±4.4)高(P<0.05,t=5.65),也较同期空载体免疫对照组(3±3.6)高(P<0.05,t=5.21);治疗性HBVDNA疫苗诱导小鼠CD4+T细胞表达IFN-γ的百分比实验组[(0.28±0.17)%]与对照组[(0.20±0.03)%]比较,无显著性差异(P>0.05,t=0.21);而诱导CD8+T细胞表达IFN-γ的百分比实验组[(0.69±0.08)%]与对照组[(0.24±0.12)%]比较,具显著性差异(P<0.05,t=4.167)。结论治疗性HBVDNA疫苗能有效诱导T细胞分泌HBsAg特异性IFN-γ因子,并以CD8+T细胞分泌占优而发挥细胞免疫应答的优势。 展开更多
关键词 HBV DNA疫苗 酶联免疫斑点法 流式细胞术 Γ干扰素
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BiOBr/BiOI-FACs催化剂的组装与光催化性能 被引量:7
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作者 林立 袁点 +2 位作者 邓怡玄 桂训政 王丽丽 《硅酸盐通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期3581-3585,共5页
以Bi(NO_3)3·5H_2O、KBr和KI为原料,以粉煤灰漂珠(FACs)为载体,通过中和水解制备了BiOBr/BiOIFACs复合光催化剂。以50W蓝光灯为光源,罗丹明B为目标物,考察了制备过程的pH值、保温处理温度和保温处理时间对可见光光催化性能的影响... 以Bi(NO_3)3·5H_2O、KBr和KI为原料,以粉煤灰漂珠(FACs)为载体,通过中和水解制备了BiOBr/BiOIFACs复合光催化剂。以50W蓝光灯为光源,罗丹明B为目标物,考察了制备过程的pH值、保温处理温度和保温处理时间对可见光光催化性能的影响。结果表明,BiOBr/BiOI-FACs复合光催化剂的最佳组装条件为:pH值8.0,保温处理温度160℃,保温处理时间12h。 展开更多
关键词 BiOBr/BiOI 粉煤灰漂珠 光催化 罗丹明B
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Dynamic analysis of lymphocyte subsets of peripheral blood in patients with acute self-limited hepatitis B 被引量:4
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作者 Bo Liu Jun Li +4 位作者 Yaping Han Yuan Liu Lianhua Kong Yang Cao Zuhu Huang 《Health》 2010年第7期736-741,共6页
Purpose: To investigate dynamic changes and significance of lymphocyte subsets (T lymphocytes, B lymphocytes, NK cells and T cell subsets) of peripheral blood in patients with acute self-limited hepatitis B (AHB). Met... Purpose: To investigate dynamic changes and significance of lymphocyte subsets (T lymphocytes, B lymphocytes, NK cells and T cell subsets) of peripheral blood in patients with acute self-limited hepatitis B (AHB). Methods: Immune cells of peripheral blood were compared among 17 cases of self-limited acute hepatitis B patients, 36 patients with chronic hepatitis B (CHB) and 32 healthy controls by flow cytometry (FCM). CD4+/CD8+ was monitored dynamically, meanwhile relations between T lymphocyte subsets and ALT and clearance of HBV DNA were explored. Results: Dynamic changes of lymphocyte subsets were found in AHB, the level of CD3+T cells was significantly higher compared to CHB group and healthy control group. Frequencies of CD3+CD4+ T cells in the third and fourth week and CD4+/CD8+ in the second week were higher compared to other groups. Frequ- ency of NK cells was low and was significantly lower compared to other groups in the third week specially. It was showed that CD4+/CD8+ was low followed by high abnormal ALT during early stage by dynamic monitoring of CD4+/CD8+, and CD4+/CD8+ was increasing accompanied by normal ALT set by set, but CD4+/CD8+ had no significant relation to ALT and HBV DNA. Conclusion: Immune status of AHB, compared to CHB and healthy controls, was significantly different and dynamic changes of lymphocyte sub- sets may be related to progress of disease. 展开更多
关键词 ACUTE Hbv Self-Limited Lymphocyte SUBSETS facs
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利用CFSE标记检测CD8^+淋巴细胞增殖 被引量:4
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作者 王玲 王宏 +3 位作者 刘越坚 吴泰华 王丽颖 于永利 《大连医科大学学报》 CAS 2004年第4期262-264,共3页
[目的 ]介绍一种新的检测淋巴细胞增殖的方法。 [方法 ]用本室构建的重组蛋白疫苗hsp6 5-CAP3对C5 7小鼠进行 3次免疫后 ,分离小鼠的脾细胞 ,以照射灭活的CAP3转基因细胞为刺激细胞 ,在体外刺激淋巴细胞的增殖反应。淋巴细胞在与刺激细... [目的 ]介绍一种新的检测淋巴细胞增殖的方法。 [方法 ]用本室构建的重组蛋白疫苗hsp6 5-CAP3对C5 7小鼠进行 3次免疫后 ,分离小鼠的脾细胞 ,以照射灭活的CAP3转基因细胞为刺激细胞 ,在体外刺激淋巴细胞的增殖反应。淋巴细胞在与刺激细胞共培养之前用绿色荧光染料羧乙基锗倍半氧化物 (CFSE)进行标记。在共培养 72h后 ,用PE标记的抗鼠CD8分子的单抗标记淋巴细胞。收集细胞进行FACS检测 ,出现在二维点图左上象限的细胞代表CFSE含量减少的CD8+淋巴细胞 (CD8+CFSElow)即增殖的CD8+淋巴细胞 ,利用流式细胞仪记数左上象限CD8+CFSElow细胞的比例。 [结果 ]经体外刺激的脾淋巴细胞中 ,实验组CD8+CFSElow的平均百分比值为 (16 .4 7± 2 .10 ) % ,对照组CD8+CFSElow 的平均百分比值为 (7.6 9± 1.6 5 ) % (P <0 .0 5 )。 [结论 ]通过FACS结果判定CD8+淋巴细胞发生了特异性的增殖。CFSE标记是一种有效的检测淋巴细胞增殖的方法。 展开更多
关键词 CFSE 淋巴细胞增殖实验 facs
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Glow in the Dark: Fluorescent Proteins as Cell and Tissue-Specific Markers in Plants 被引量:3
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作者 Wenzislava Ckurshumova Adriana E. Caragea Rochelle S. Goldstein Thomas Berleth 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2011年第5期794-804,共11页
Since the hallmark discovery of Aequorea victoria's Green Fluorescent Protein (GFP) and its adaptation for efficient use in plants, fluorescent protein tags marking expression profiles or genuine proteins of intere... Since the hallmark discovery of Aequorea victoria's Green Fluorescent Protein (GFP) and its adaptation for efficient use in plants, fluorescent protein tags marking expression profiles or genuine proteins of interest have been used to recognize plant tissues and cell types, to monitor dynamic cell fate selection processes, and to obtain cell type-specific transcriptomes. Fluorescent tagging enabled visualization in living tissues and the precise recordings of dy- namic expression pattern changes. The resulting accurate recording of cell fate acquisition kinetics in space and time has strongly stimulated mathematical modeling of self-organizing feedback mechanisms. In developmental studies, the use of fluorescent proteins has become critical, where morphological markers of tissues, cell types, or differentiation stages are either not known or not easily recognizable. In this review, we focus on the use of fluorescent markers to identify and illuminate otherwise invisible cell states in plant development. 展开更多
关键词 Arabidopsis auxin transport enhancer trap facs fluorescent proteins GFP gene expression markers live imaging mathematical modeling MERISTEM vascular development.
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烹调烟雾职业暴露人群免疫功能的调查分析 被引量:5
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作者 张晖 汪国雄 +3 位作者 沈传来 项龙生 赵力 唐震 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2001年第5期9-11,共3页
目的 通过对烹调烟雾职业暴露人群外周血T、B淋巴细胞亚群分析、自然杀伤细胞 (NK细胞 )自然杀伤活性测定来了解烹调烟雾对机体免疫功能的影响。方法 利用直接荧光法 ,通过流式细胞仪分析T细胞亚群、B淋巴细胞 ;采用MTT比色法检测NK... 目的 通过对烹调烟雾职业暴露人群外周血T、B淋巴细胞亚群分析、自然杀伤细胞 (NK细胞 )自然杀伤活性测定来了解烹调烟雾对机体免疫功能的影响。方法 利用直接荧光法 ,通过流式细胞仪分析T细胞亚群、B淋巴细胞 ;采用MTT比色法检测NK细胞杀伤活性。结果 经成组t检验 ,暴露组CD3 + 细胞百分率、NK细胞杀伤率明显低于对照组 ,工龄 7年以上被调查者中暴露组CD4+ CD8-T细胞百分率、CD4+ /CD8+ 细胞比值明显低于对照组 ,而CD19+ 细胞百分率两组间差异无统计学意义 ;多因素逐步回归分析表明 ,暴露与否是影响CD3 + 细胞百分率、NK细胞杀伤活性的主要因素 ,同时CD3 + 细胞数还与工龄有关。 展开更多
关键词 烹调烟雾 人外周血 淋巴细胞 流式细胞仪 MTT比色法
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不同诱导条件对人骨髓基质干细胞向内皮分化的影响 被引量:5
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作者 武晓静 黄岚 +3 位作者 周骐 崔斌 董红梅 周音频 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第4期393-396,共4页
目的探讨不同诱导条件对人骨髓基质干细胞向内皮分化的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养人骨髓基质干细胞,用荧光激活细胞分选法分析骨髓基质干细胞CD34、CD105和CD166的表达率;用免疫荧光细胞化学法观察骨髓基质干细胞在细胞因子... 目的探讨不同诱导条件对人骨髓基质干细胞向内皮分化的影响。方法采用密度梯度离心法分离培养人骨髓基质干细胞,用荧光激活细胞分选法分析骨髓基质干细胞CD34、CD105和CD166的表达率;用免疫荧光细胞化学法观察骨髓基质干细胞在细胞因子(50μgL血管内皮细胞生长因子、5μgL碱性成纤维细胞生长因子、100mgL内皮细胞生长补充因子)、内皮条件培养基或与成熟兔主动脉内皮共培养5天时vWF或和Flk1蛋白的表达。结果分离培养的骨髓基质干细胞CD34表达率为4.16%±0.16%,与阴性对照(4.06%±0.23%)相比无统计学差异,CD105表达率为90.20%±2.35%,CD166表达率为82.30%±3.22%,均明显高于阴性对照(P<0.05)。诱导前骨髓基质干细胞不表达vWF和Flk1蛋白,经血管内皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和内皮细胞生长补充因子等细胞因子联合诱导5天时,33.42%骨髓基质干细胞开始表达vWF蛋白;与成熟内皮共培养5天时,vWF染色仍为阴性,但25.71%骨髓基质干细胞开始表达Flk1;用内皮条件培养基培养5天时,骨髓基质干细胞vWF和Flk1染色均为阴性。结论细胞因子和成熟内皮细胞均能诱导骨髓基质干细胞向内皮分化,而内皮条件培养基不能诱导骨髓基质干细胞向内皮分化。 展开更多
关键词 细胞生物学 骨髓基质干细胞分化 免疫细胞化学 内皮细胞 细胞因子 细胞培养 诱导分化
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应用广谱抗体CK3-6H5检测细胞角蛋白在人类上皮组织来源的肿瘤细胞系中的表达 被引量:5
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作者 于鑫 魏玉华 +6 位作者 彭吉润 郭立民 赵丽君 公磊 王卉 李澍 冷希圣 《中国实验诊断学》 2007年第8期995-998,共4页
目的应用广谱抗细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)抗体CK3-6H5检测上皮组织来源的肿瘤细胞系中CK的表达,并研究应用此抗体检测血液循环中此类肿瘤细胞的敏感性。方法应用CK3-6H5标记QGY-7703等26种人类上皮组织来源的肿瘤细胞系、人Burkitt淋... 目的应用广谱抗细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)抗体CK3-6H5检测上皮组织来源的肿瘤细胞系中CK的表达,并研究应用此抗体检测血液循环中此类肿瘤细胞的敏感性。方法应用CK3-6H5标记QGY-7703等26种人类上皮组织来源的肿瘤细胞系、人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji、人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat以及健康志愿者外周血单个核细胞,通过免疫荧光显色和免疫细胞化学技术检测其中CK的表达情况;以表达CK的人肝癌细胞系QGY-7703作为靶细胞,以不同的比例分别掺入到健康志愿者PBMC中,以免疫磁珠去除CD45+的白细胞,对肿瘤细胞进行富集,流式细胞仪检测其中CK+CD45-肿瘤细胞数目,分析用CK3-6H5检测外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的敏感性。结果所有上皮组织来源肿瘤细胞系均表达CK,而健康志愿者和淋巴瘤细胞系Raji、T淋巴细胞白血病细胞株中未检测到CK表达。当向2×108个PBMC中掺入20个QGY-7703细胞时,经免疫磁珠富集后,行FACS分析,仍能检测到12个肿瘤细胞。结论CK3-6H5抗体复合物可以识别常见的上皮来源的肿瘤,应用CK3-6H5抗体标记肿瘤细胞,采用免疫磁珠富集技术以及流式细胞技术,可以用于有效检测外周血中上皮来源的肿瘤细胞。 展开更多
关键词 循环肿瘤细胞 细胞角蛋白 流式细胞技术
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