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石榴F3'H全基因组分析及其在籽粒花色苷合成中的作用
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作者 陈延惠 曹新悦 +8 位作者 冯志良 谭彬 胡悦 张海朋 简在海 孟海军 冯建灿 万然 胡青霞 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1064-1077,共14页
【目的】对石榴PgF3’H进行全基因组鉴定,了解其成员大小、位置、结构、系统发育关系及顺式作用元件等相关信息,分析PgF3’H在石榴籽粒花色苷合成中的作用。【方法】通过生物信息学分析结合转录组数据了解石榴PgF3’H基因家族成员,分析... 【目的】对石榴PgF3’H进行全基因组鉴定,了解其成员大小、位置、结构、系统发育关系及顺式作用元件等相关信息,分析PgF3’H在石榴籽粒花色苷合成中的作用。【方法】通过生物信息学分析结合转录组数据了解石榴PgF3’H基因家族成员,分析其在不同品种石榴籽粒中随发育期的表达情况,并通过农杆菌介导拟南芥异源转化试验验证PgF3’H3的功能。【结果】鉴定到的3个PgF3’H成员均含有保守结构域CYP75B,具有比较保守的基因结构;对它们的顺式作用元件和表达情况进行分析,表明PgF3’H2和PgF3’H可能受光和激素调节,由MYB转录调控其表达,在石榴籽粒花色苷合成中发挥重要作用;初步验证了PgF3’H3的功能。【结论】鉴定了石榴3个PgF3’H基因成员,明确了PgF3’H2和PgF3’H3是与籽粒着色有关的重要候选基因,验证了PgF3’H3调控花色苷合成的功能。 展开更多
关键词 石榴 f3h 籽粒 花色苷 颜色
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淹水胁迫对杭菊F3’H基因表达及其下游产物含量的影响 被引量:5
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作者 邹庆军 汪涛 +2 位作者 郭巧生 肖有梅 武立伟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期52-57,共6页
为探究淹水胁迫对杭菊黄酮合成途径中的关键基因类黄酮3'-羟化酶基因(F3'H)的表达和活性成分的影响,该实验克隆了杭菊F3'H基因(暂命名CmF3'H),并进行生物信息学分析;同时在杭菊花芽分化期进行淹水胁迫,以β-actin为内参基因,使... 为探究淹水胁迫对杭菊黄酮合成途径中的关键基因类黄酮3'-羟化酶基因(F3'H)的表达和活性成分的影响,该实验克隆了杭菊F3'H基因(暂命名CmF3'H),并进行生物信息学分析;同时在杭菊花芽分化期进行淹水胁迫,以β-actin为内参基因,使用Real-time PCR检测CmF3'H的相对表达量;然后使用HPLC测定杭菊CmF3'H下游产物及其他指标成分含量。通过研究得到1条总长1 562 bp的CmF3'H基因,其中开放阅读框长1 527 bp,编码508个氨基酸,构建进化树发现CmF3'H与菊科其他种植物同源性很高;Real-time PCR结果表明CmF3'H对淹水胁迫有明显响应,在淹水24 h后表达量最高,约为对照组的9倍,解除胁迫12 d后恢复正常水平;HPLC结果显示淹水处理后的杭菊F3'H所催化形成的下游产物木犀草素和木犀草苷含量均显著高于对照组,同时发现其他2种指标成分绿原酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量也显著高于对照组。因此,杭菊在淹水胁迫下可以通过调节CmF3'H的表达来调控下游产物的合成,从而对淹水胁迫做出应答,而且花芽分化期进行淹水胁迫可以显著增强杭菊活性成分的积累。 展开更多
关键词 杭菊 f3'h 基因克隆 淹水胁迫 黄酮 活性成分
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芒果(Mangifera indica)F3’H基因的克隆及其表达分析 被引量:3
3
作者 赵志常 高爱平 +3 位作者 黄建峰 党志国 罗睿雄 陈业渊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第4期903-908,共6页
花色素苷的合成是红色芒果果实着色的主要代谢途径,而类黄酮3’羟化酶(F3’H)基因是花色素苷合成的一个关键酶,其参与决定了花色、果实颜色、种皮颜色、茎叶表面等花色素苷的生物合成。本研究根据已经报道的F3’H基因的序列设计兼并引物... 花色素苷的合成是红色芒果果实着色的主要代谢途径,而类黄酮3’羟化酶(F3’H)基因是花色素苷合成的一个关键酶,其参与决定了花色、果实颜色、种皮颜色、茎叶表面等花色素苷的生物合成。本研究根据已经报道的F3’H基因的序列设计兼并引物,采用3’RACE和5’RACE方法,克隆得到了芒果果实F3’H基因的全长c DNA序列为1782 bp。该基因开放阅读框为1548 bp,编码515个氨基酸,分子重量为57.44 k D。通过系统发育分析发现该基因编码的蛋白与西洋梨、草莓、大豆等具有较近的亲缘关系。对不同芒果品种的F3’H基因的表达进行分析发现:红色的贵妃品种中表达量较高,而黄色的金煌品种中表达量较低。 展开更多
关键词 芒果 花色素苷 f3h 基因克隆
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松果菊F3'H基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 吴红松 秋田祐介 《生物化工》 2022年第3期84-86,共3页
松果菊是世界上最著名的药用植物之一,但关于松果菊花青素生物合成的基因研究鲜有报道。本文对松果菊花青素合成的关键酶——类黄酮3'-羟化酶(F3'H)的基因进行了克隆和表达分析,以期为松果菊花色多样性研究奠定基础。利用3'... 松果菊是世界上最著名的药用植物之一,但关于松果菊花青素生物合成的基因研究鲜有报道。本文对松果菊花青素合成的关键酶——类黄酮3'-羟化酶(F3'H)的基因进行了克隆和表达分析,以期为松果菊花色多样性研究奠定基础。利用3'-RACE和5'-RACE方法克隆得到了松果菊F3'H基因(EpF3'H)的全长cDNA,其开放阅读框为1533 bp,编码510个氨基酸,分子量56.49 kD。对25种植物的F3'H基因进行系统进化树分析,发现EpF3'H基因与非洲菊杂交种(DQ218417)和菊花(AB523844)具有高度同源性。qRT-PCR结果显示,该基因在松果菊不同时期的花和叶中均能表达。以上结果表明,EpF3'H为F3'H家族成员,其可能参与了松果菊花青素的合成。 展开更多
关键词 松果菊 花青素 f3'h 基因表达
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芜菁的类黄酮3'羟化酶基因克隆和UV-A诱导表达特性 被引量:10
5
作者 许志茹 崔国新 +2 位作者 李春雷 孙燕 李玉花 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期931-935,共5页
用UV-A处理‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁块根24h后提取总RNA,以RT-PCR方法分别克隆到BrF3'H1和BrF3'H2基因。BrF3'H1和BrF3'H2的开放读码框为1536bp,均编码511个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrF3'H1和BrF3'H2与... 用UV-A处理‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁块根24h后提取总RNA,以RT-PCR方法分别克隆到BrF3'H1和BrF3'H2基因。BrF3'H1和BrF3'H2的开放读码框为1536bp,均编码511个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrF3'H1和BrF3'H2与甘蓝型油菜F3'H的同源性达99%,在第45~476的肽段含有细胞色素P450家族基因的结构域。BrF3'H1和BrF3'H2基因有高度同源性,核苷酸序列的17个位点处有差异,推导的氨基酸序列在5个位点处有差异。Northern杂交结果显示,UV-A可以诱导BrF3'H1表达,基因的表达量与UV-A处理时间呈相关,UV-A不能诱导BrF3'H2基因表达。 展开更多
关键词 芜菁 类黄酮3’羟化酶基因 基因克隆 序列分析 基因表达
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比利时杜鹃花类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因克隆及功能分析
6
作者 吴泽航 杨中义 +3 位作者 鄢毅铖 贾永红 吴月燕 谢晓鸿 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期251-259,共9页
【目的】类黄酮3’-羟化酶(flavanone 3’-hydroxylase,F3’H)是植物花青素合成过程中的关键酶,探究比利时杜鹃花(Rhododendron hybridum Hort)F3’H基因的功能及表达特性。【方法】以比利时杜鹃花不同发育时期的花瓣及盛花期的根、茎... 【目的】类黄酮3’-羟化酶(flavanone 3’-hydroxylase,F3’H)是植物花青素合成过程中的关键酶,探究比利时杜鹃花(Rhododendron hybridum Hort)F3’H基因的功能及表达特性。【方法】以比利时杜鹃花不同发育时期的花瓣及盛花期的根、茎、叶为实验材料,从比利时杜鹃花转录本数据库中筛选类黄酮生物合成通路关键酶类黄酮3’-羟化酶基因序列信息并进行生物信息学分析,利用反转录(RT-PCR)技术克隆RhF3’H基因;利用紫外分光光度计测定了比利时杜鹃花花瓣不同时期的花青素含量,利用RT-qPCR技术对不同发育时期花瓣和成熟期的不同组织进行RhF3’H基因表达量分析;采用Gateway技术构建过表达载体35S:RhF3’H-GFP重组载体进行亚细胞定位验证;构建p1302-RhF3’H过表达载体对比利时杜鹃花花瓣进行侵染。【结果】成功获得比利时杜鹃花RhF3’H基因长度为1557 bp,编码518个氨基酸,具有保守的F3’H结构域,属于P450超家族;系统进化树分析显示,比利时杜鹃花RhF3’H与龙眼和荔枝F3’H蛋白亲缘关系最近;RT-qPCR结果显示,RhF3’H在比利时杜鹃花不同花瓣时期和根、茎、叶组织中均有表达,在不同花瓣发育时期中,盛开期和衰败期中RhF3’H基因的表达量较高,与花青素含量结果相一致;亚细胞定位分析显示,RhF3’H主要存在于细胞膜上;成功构建P1302-RhF3’H瞬时过表达载体,相较于CK和p1302,p1302-RhF3’H在杜鹃花花瓣中显著高表达,其花青素含量也显著增加。【结论】RhF3’H基因在花瓣细胞膜中表达,表达模式与花青素积累趋势一致;过表达RhF3’H基因促进了花青素的合成。 展开更多
关键词 比利时杜鹃花 类黄酮3’-羟化酶(f3h) 花青素 亚细胞定位 瞬时表达
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CAS FGOALS-f3-H and CAS FGOALS-f3-L outputs for the high-resolution model intercomparison project simulation of CMIP6 被引量:3
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作者 BAO Qing LIU Yimin +8 位作者 WU Guoxiong HE Bian LI Jinxiao WANG Lei WU Xiaofei CHEN Kangjun WANG Xiaocong YANG Jing ZHANG Xiaoqi 《Atmospheric and Oceanic Science Letters》 CSCD 2020年第6期576-581,共6页
The High Resolution Model Intercomparison Project(HighResMIP)is a unique model intercomparison project in phase 6 of the Coupled Model Intercomparison Project(CMIP6),which is focused on the impact of horizontal resolu... The High Resolution Model Intercomparison Project(HighResMIP)is a unique model intercomparison project in phase 6 of the Coupled Model Intercomparison Project(CMIP6),which is focused on the impact of horizontal resolutions.The outputs of the high-and low-resolution versions of CAS FGOALS-f3-H and CAS FGOALS-f3-L for the experiments of the HighResMIP simulations in CMIP6 are described in this paper.The models and their configurations,experimental settings,and postprocessing methods are all introduced.CAS FGOALS-f3-H,with a 0.25°horizontal resolution,and CAS FGOALS-f3-L,with a 1°horizontal resolution,were forced by the standard external conditions,and two coordinated sets of simulations were conducted for 1950–2014 and 2015–50 with the Experiment IDs of‘highresSST-present’and‘highresSST-future’,respectively.The model outputs contain multiple time scales including the required hourly mean,three-hourly mean,six-hourly transient,daily mean,and monthly mean datasets.It is reported that the 0.25°CAS FGOALS-f3-H successfully simulates some of the key challenges in climate modeling,including the average lifetime of tropical cyclones,particularly in the western parts of the northern Pacific Ocean,and the diurnal cycle of hourly precipitation.These datasets will contribute to the benchmarking of current models for CMIP,and studies of the impacts of horizontal resolutions on climate modeling issues. 展开更多
关键词 CMIP6 highResMIP fGOALS-f3-h fGOALS-f3-L tropical cyclone diurnal cycle hourly precipitation
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擎天凤梨花色素合成关键基因CHS、F3'H和DFR的克隆及表达分析 被引量:5
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作者 刘建新 丁华侨 +1 位作者 葛亚英 王炜勇 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期805-813,共9页
擎天凤梨‘Ostsra’是一种观赏红色苞片为主的高档盆栽花卉。一般认为植物苞片的呈色物质除叶绿素外多来源于花色素,而CHS、F3'H和DFR是在花色素的合成过程中的关键酶。本研究采用采用简并引物及同源克隆法获得了881 bp的CHS基因,编... 擎天凤梨‘Ostsra’是一种观赏红色苞片为主的高档盆栽花卉。一般认为植物苞片的呈色物质除叶绿素外多来源于花色素,而CHS、F3'H和DFR是在花色素的合成过程中的关键酶。本研究采用采用简并引物及同源克隆法获得了881 bp的CHS基因,编码276个氨基酸的序列,GenBank登录号为KX364270;采用cDNA全长文库构建、EST批量测序及目标单克隆序列测通法,获得了F3'H和DFR基因。F3'H基因长1 176 bp,可编码325个氨基酸序列,GenBank登录号为KX364271;DFR基因长1 209 bp,可编码167个氨基酸的序列,GenBank登录号为KX364272。采用实时定量PCR法检测CHS、F3'H和DFR在‘Ostsra’苞片呈色过程中的表达变化,结果表明,3个基因在苞片变色过程中(绿苞-半红苞-全红苞)都呈现出递增的趋势,即随着苞片颜色的变深,3基因的表达量逐渐增加,全红状态时,表达量最高,而作为对照的绿叶,表达水平都是最低的。 展开更多
关键词 擎天凤梨 查儿酮合成酶基因 黄烷酮3-beta-羟化酶基因 二氢黄酮醇4-还原酶基因 表达分析
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橄榄类黄酮3'-羟化酶CaF3'H基因的克隆及其表达特性分析 被引量:5
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作者 黄敏杰 文志丰 +2 位作者 池毓斌 彭真汾 陈清西 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期839-847,共9页
以‘清榄一号’橄榄(Canarium album)果肉为材料,通过RACE技术克隆得到橄榄类黄酮3'-羟化酶(F3'H)cDNA序列全长,命名为CaF3'H(GenBank登录号KY189088.1)。CaF3'H全长为1 649 bp,包含一个1 554 bp开放阅读框(ORF),编码51... 以‘清榄一号’橄榄(Canarium album)果肉为材料,通过RACE技术克隆得到橄榄类黄酮3'-羟化酶(F3'H)cDNA序列全长,命名为CaF3'H(GenBank登录号KY189088.1)。CaF3'H全长为1 649 bp,包含一个1 554 bp开放阅读框(ORF),编码517个氨基酸,5'和3'非编码区(UTR)长度分别为40 bp和55 bp,编码的氨基酸序列含有P450结构域和半胱氨酸亚铁血红素结合域保守区。氨基酸多重比较分析表明:橄榄和芒果的氨基酸序列相似性为78.89%,较之于其他物种相对最高。蛋白结构预测结果显示,CaF3'H蛋白呈弱亲水性,存在跨膜结构域,没有信号肽。实时荧光定量PCR分析显示,CaF3'H在‘清榄一号’和‘檀香’2个橄榄栽培品种的表达量在花后50 d达到最大值,此后其表达量随果实的成熟呈现出波动,总体表达量比花后50 d都低,这与橄榄生长发育时期多酚含量的变化趋势相符,推测CaF3'H基因在调控果实多酚含量过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 橄榄 类黄酮3'-羟化酶(f3'h) 基因克隆 实时荧光定量PCR
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芸薹属类黄酮3′-羟化酶基因家族RNA干扰载体的构建 被引量:4
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作者 陈倩 闫楠 +1 位作者 马丽娟 柴友荣 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期8-11,共4页
目的:构建芸薹属类黄酮3′羟化酶(F3′H)基因家族的RNAi载体。方法:采用PCR克隆了607bp的芸薹属F3’H基因家族的RNAi片段,将其反义片段、正义片段分别采用NcoⅠ+AatⅡ、BamHⅠ+XbaⅠ插入到改进型植物RNAi基础载体pF-GC5941M的启动子与... 目的:构建芸薹属类黄酮3′羟化酶(F3′H)基因家族的RNAi载体。方法:采用PCR克隆了607bp的芸薹属F3’H基因家族的RNAi片段,将其反义片段、正义片段分别采用NcoⅠ+AatⅡ、BamHⅠ+XbaⅠ插入到改进型植物RNAi基础载体pF-GC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成11366bp的重组载体pFGC5941M-BF3′HI(简称为pBF3′HI),复合PCR鉴定后转化根癌农杆菌,获得工程菌株。结果:载体构建成功。结论:构建了RNAi载体pBF3′HI,可用于芸薹属植物花色、种皮色泽、茎叶色彩等性状的机理研究和遗传修饰。 展开更多
关键词 芸薹属 类黄酮3′-羟化酶(f3h) RNAI 载体
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大豆F3’H基因植物表达载体的构建及拟南芥的遗传转化 被引量:2
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作者 马键 宋雯雯 +3 位作者 张颖 韩雪 田俊 王继安 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期58-62,共5页
通过RT-PCR方法扩增了大豆F3’H基因并构建含大豆荚皮绒毛色基因的重组质粒pBI121/F3’H的植物表达载体,转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株,通过根癌农杆菌介导的方法转化拟南芥。为进一步研究大豆荚皮绒毛色基因(F3’H)作为... 通过RT-PCR方法扩增了大豆F3’H基因并构建含大豆荚皮绒毛色基因的重组质粒pBI121/F3’H的植物表达载体,转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株,通过根癌农杆菌介导的方法转化拟南芥。为进一步研究大豆荚皮绒毛色基因(F3’H)作为植物基因工程的报告基因的可能性奠定基础。 展开更多
关键词 大豆 根癌农杆菌 f3h基因 植物表达载体
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根癌农杆菌介导反义F3'H基因对矮牵牛的遗传转化 被引量:2
12
作者 刘南南 王宝琴 管宇 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期147-149,共3页
以矮牵牛无菌苗叶片作为转化受体材料,建立并优化了农杆菌介导的矮牵牛遗传转化体系。通过农杆菌介导法将水稻反义类黄酮3'-羟化酶基因(F3'H)转入矮牵牛中,抗性植株经PCR检测均为阳性植株,初步表明反义F3'H基因已整合到矮... 以矮牵牛无菌苗叶片作为转化受体材料,建立并优化了农杆菌介导的矮牵牛遗传转化体系。通过农杆菌介导法将水稻反义类黄酮3'-羟化酶基因(F3'H)转入矮牵牛中,抗性植株经PCR检测均为阳性植株,初步表明反义F3'H基因已整合到矮牵牛基因组中;对阳性植株进行半定量RT-PCR检测,与非转基因植株相比,阳性植株中F3'H基因的表达减弱,表明导入的反义F3'H基因抑制了内源基因的表达。 展开更多
关键词 矮牵牛 f3h基因 根癌农杆菌 遗传转化
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菊花CgF3′H基因克隆及表达特性分析 被引量:2
13
作者 陈素梅 吕国胜 +5 位作者 朱喜荣 刘兆磊 管志勇 章镇 陈发棣 王丽君 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第5期623-628,共6页
根据菊花花器官表达序列标签序列设计引物,采用PCR和5'-RACE技术对类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因进行全长cDNA克隆。克隆获得F3'HcDNA全长为1760bp,其开放阅读框(ORF)为1524bp,编码一条包含508个氨基酸残基的多肽,GenBank... 根据菊花花器官表达序列标签序列设计引物,采用PCR和5'-RACE技术对类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因进行全长cDNA克隆。克隆获得F3'HcDNA全长为1760bp,其开放阅读框(ORF)为1524bp,编码一条包含508个氨基酸残基的多肽,GenBank登录号为AB523844。预测该基因编码的蛋白分子式为C2535H4022N684O707S18,分子量为55.97kD,理论等电点pI为7.23。其氨基酸序列与蓝眼菊属(ABB29899.1)、紫茎泽兰(ABM46853.1)、欧亚种葡萄(ACN38268.1)和高粱(ABG54320.1)等植物的F3'H氨基酸序列的同源性分别为83.27%、80.51%、75.05%和59.96%。系统进化分析表明其与蓝眼菊属的亲缘关系最近。荧光定量PCR分析发现F3'H基因在切花菊‘H5’各个器官中均有表达,花托中表达量最高,而叶片中表达量最低。 展开更多
关键词 菊花 类黄酮3'-羟化酶(f3'h) 克隆 表达
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CAS FGOALS-f3-H Dataset for the High-Resolution Model Intercomparison Project(HighResMIP)Tier 2 被引量:1
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作者 Bo AN Yongqiang YU +5 位作者 Qing BAO Bian HE Jinxiao LI Yihua LUAN Kangjun CHEN Weipeng ZHENG 《Advances in Atmospheric Sciences》 SCIE CAS CSCD 2022年第11期1873-1884,共12页
Following the High-Resolution Model Intercomparison Project(HighResMIP)Tier 2 protocol under the Coupled Model Intercomparison Project Phase 6(CMIP6),three numerical experiments are conducted with the Chinese Academy ... Following the High-Resolution Model Intercomparison Project(HighResMIP)Tier 2 protocol under the Coupled Model Intercomparison Project Phase 6(CMIP6),three numerical experiments are conducted with the Chinese Academy of Sciences Flexible Global Ocean-Atmosphere-Land System Model,version f3-H(CAS FGOALS-f3-H),and a 101-year(1950–2050)global high-resolution simulation dataset is presented in this study.The basic configuration of the FGOALSf3-H model and numerical experiments design are briefly described,and then the historical simulation is validated.Forced by observed radiative agents from 1950 to 2014,the coupled model essentially reproduces the observed long-term trends of temperature,precipitation,and sea ice extent,as well as the large-scale pattern of temperature and precipitation.With an approximate 0.25°horizontal resolution in the atmosphere and 0.1°in the ocean,the coupled models also simulate energetic western boundary currents and the Antarctic Circulation Current(ACC),reasonable characteristics of extreme precipitation,and realistic frontal scale air-sea interaction.The dataset and supporting detailed information have been published in the Earth System Grid Federation. 展开更多
关键词 highResMIP fGOALS-f3-h coupled model data description CMIP6
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大叶蛇葡萄类黄酮-3'-羟化酶基因(F3'H)的克隆及生物信息学分析 被引量:2
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作者 李永华 蒲天珍 +3 位作者 周佩娜 方佳慧 张秀桥 龚玲 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第18期5984-5993,共10页
类黄酮-3’-羟化酶(F3’H)是黄酮化合物生物合成过程中的关键酶之一,本研究从大叶蛇葡萄转录组数据库中筛选出类黄酮-3’-羟化酶基因(F3’H),利用RT-PCR等技术克隆了其全长序列,并分析F3’H基因编码蛋白的理化性质和结构特征。结果表明... 类黄酮-3’-羟化酶(F3’H)是黄酮化合物生物合成过程中的关键酶之一,本研究从大叶蛇葡萄转录组数据库中筛选出类黄酮-3’-羟化酶基因(F3’H),利用RT-PCR等技术克隆了其全长序列,并分析F3’H基因编码蛋白的理化性质和结构特征。结果表明,该序列全长为1718 bp,开放阅读框(ORF)长度为1530 bp,相对分子质量为55.89 kD,编码509个氨基酸,等电点为7.3,分子式为C2(513)H3974N696O705S21,不稳定指数为38.26,为稳定蛋白;脂肪族指数为96.42,总平均疏水性为-0.004,为亲水性蛋白;具有多个磷酸化位点,有信号肽,存在一个跨膜区,亚细胞定位于内质网膜,二级结构以α-螺旋为主。系统进化分析和多重序列比对表明该序列与藤茶的亲缘关系最近。密码子偏性分析表明该基因以G/C结尾的密码子使用频率较高,最适合该基因的异源表达宿主是大肠杆菌。本研究结果为进一步研究大叶蛇葡萄F3’H蛋白功能,以及揭示该植物中具生物活性的黄酮类成分的生物合成机制提供了一定的基础。 展开更多
关键词 大叶蛇葡萄(Ampelopsis megalophylla) 类黄酮-3’-羟化酶基因(f3h) 基因克隆 生物信息学分析
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水稻类黄酮3'-羟化酶基因克隆及植物表达载体的构建 被引量:1
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作者 刘南南 王宝琴 +2 位作者 李敏 刘雪红 管宇 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期149-151,共3页
参考GenBank中发布的水稻品种日本晴位于10号染色体的F3'H基因序列设计特异引物,用PCR方法从水稻基因组中克隆F3'H基因片段,并将该片段克隆到pMD18-T载体进行测序和序列分析。结果表明,克隆的F3'H基因全长1 789 bp,GenBank... 参考GenBank中发布的水稻品种日本晴位于10号染色体的F3'H基因序列设计特异引物,用PCR方法从水稻基因组中克隆F3'H基因片段,并将该片段克隆到pMD18-T载体进行测序和序列分析。结果表明,克隆的F3'H基因全长1 789 bp,GenBank登录号为HQ876708,该基因与日本晴基因组序列同源性为100%。分别将F3'H基因插入植物双元表达载体pPZP2Ha3(-)和pPZP2Ha3(+)中,获得F3'H基因正义和反义植物表达载体,同时转入根癌农杆菌中。该研究为利用农杆菌介导法转化F3'H基因,进一步研究F3'H基因功能奠定基础。 展开更多
关键词 水稻 类黄酮3'-羟化酶(f3'h)基因 PCR扩增 载体构建
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滁菊类黄酮3′-羟化酶基因的克隆及分子特性 被引量:1
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作者 蔡华 许雪峰 +3 位作者 诸立新 孙艳辉 代洪亮 崔勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第17期145-149,共5页
以安徽滁州地区特有的药食两用植物资源——滁菊(Dendranthema morifolium‘chuju’)为试材,采用同源基因克隆方法克隆滁菊类黄酮3′-羟化酶基因(flavonoid 3′-hydroxylase,f3′h),NCBI注册号HQ256697。结果表明:采自不同地点的滁菊样... 以安徽滁州地区特有的药食两用植物资源——滁菊(Dendranthema morifolium‘chuju’)为试材,采用同源基因克隆方法克隆滁菊类黄酮3′-羟化酶基因(flavonoid 3′-hydroxylase,f3′h),NCBI注册号HQ256697。结果表明:采自不同地点的滁菊样品均能扩增出一条长381bp的f3′h基因片段,该片段与探针序列GU249553第3外显子对应区域的核苷酸序列同源性达98.69%,同源区域内有5个单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNP),其中3个SNPs导致氨基酸编码序列的改变。滁菊与葡萄属(Vitis vinifera)、高粱属(Sorghum bicolor)、芸苔属(Brassica napus)、牵牛属(Ipomoea nil Magenta)、苹果属(Malus×domestica)、番薯属(Ipomoea purpurea)等物种f3′h基因的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在60%~98%和68%~97%之间。不同植物f3′h基因的分类与物种间的亲缘关系存在明显的相关性,菊属植物f3′h基因在系统进化中处于较高位置。 展开更多
关键词 滁菊:类黄酮 类黄酮3’.羟化酶基因 外显子3 序列分析
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滁菊f3'h基因启动子的克隆及分析
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作者 赵维萍 陆李昌 +3 位作者 刘洋 徐媛媛 翟璐 蔡华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第S1期63-67,共5页
为探明滁菊类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因在类黄酮物质合成过程中的作用,基于本实验室已经获得滁菊f3'h编码基因的基础上,采用Genome Walking技术,克隆了1 348 bp的启动子,序列分析表明,该启动子片段除含有真核生物启动子核心... 为探明滁菊类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因在类黄酮物质合成过程中的作用,基于本实验室已经获得滁菊f3'h编码基因的基础上,采用Genome Walking技术,克隆了1 348 bp的启动子,序列分析表明,该启动子片段除含有真核生物启动子核心元件TATA-Box等外,还含有参与脱落酸响应(ABRE)元件以及G-Box等参与光响应单元、植物激素响应单元件植物防御和逆境胁迫应答元件、以及环境因素等多个顺式调控元件。该基因启动子的克隆及其初步分析将为深入研究f3'h基因在滁菊类黄酮合成中的分子机制提供参考、为开发滁菊分子育种提供有效基因原件,以及为今后利用生物技术手段提高滁菊黄酮含量奠定基础。 展开更多
关键词 滁菊 启动子 GENOME WALKING 类黄酮 f3h基因
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石榴F3’H基因PCR反应体系的研究
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作者 陶吉寒 招雪晴 +2 位作者 苑兆和 尹燕雷 冯立娟 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第9期2168-2170,共3页
从石榴(Punica granatum L.)泰山红品种的花瓣中提取总RNA并反转录得到cDNA。设计简并引物对石榴类黄酮3’-羟化酶(F3’H)基因进行PCR扩增,筛选合适的引物及退火温度。结果表明,适合石榴F3’H基因扩增的正反向引物分别为5′-CGTNGAYGTBG... 从石榴(Punica granatum L.)泰山红品种的花瓣中提取总RNA并反转录得到cDNA。设计简并引物对石榴类黄酮3’-羟化酶(F3’H)基因进行PCR扩增,筛选合适的引物及退火温度。结果表明,适合石榴F3’H基因扩增的正反向引物分别为5′-CGTNGAYGTBGTBGTBGCSKCVTC-3′,5′-TCHCCDGCWATG-GCCCAHAYRTT-3′。PCR反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性40 s,54℃退火45 s,72℃延伸60 s,共35个循环;72℃保温10 min。 展开更多
关键词 石榴(Punica granatum L ) f3h基因 PCR
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甘蓝型油菜F3’H基因反义植物表达载体的构建
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作者 许本波 谢伶俐 +2 位作者 田志宏 柴友荣 李加纳 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2007年第3期77-79,83,共4页
类黄酮3’-羟化酶(F3’H)是类黄酮途径中的一个关键酶,对种皮色泽和花色的形成具有重要作用。通过PCR法扩增了甘蓝型油菜(Brassica napus L.)F3’H基因的一段特异保守片段F3’HA,并将其亚克隆到中间载体pCAMBIA2301G中,构建了F3’H反义... 类黄酮3’-羟化酶(F3’H)是类黄酮途径中的一个关键酶,对种皮色泽和花色的形成具有重要作用。通过PCR法扩增了甘蓝型油菜(Brassica napus L.)F3’H基因的一段特异保守片段F3’HA,并将其亚克隆到中间载体pCAMBIA2301G中,构建了F3’H反义植物表达载体pCAMBIA2301-F3’HA,通过PCR鉴定和酶切鉴定证实载体构建成功,并转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌株。为进一步研究F3’H基因在甘蓝型油菜种皮色素合成途径中的分子生物学机理和该基因的代谢调控网络奠定基础。 展开更多
关键词 类黄酮3’-羟化酶 反义表达载体 甘蓝型油菜(Brassica NAPUS L.)
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