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15-羟廿碳四烯酸对脑动脉平滑肌细胞ERK信号传导通路影响 被引量:2
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作者 陈岩 朱雨岚 +3 位作者 朱延梅 孙威 贺嘉 勾海燕 《临床军医杂志》 CAS 2018年第8期882-885,共4页
目的探讨缺氧时15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对细胞外信号调节激酶(ERK)1/2及ERK5通路的影响以及ERK1/2及ERK5通路在缺血缺氧性脑动脉收缩中的作用。方法将大鼠脑动脉平滑肌细胞随机分为正常对照组、缺氧组、缺氧+去甲二氢愈创木酸(NDGA)... 目的探讨缺氧时15-羟廿碳四烯酸(15-HETE)对细胞外信号调节激酶(ERK)1/2及ERK5通路的影响以及ERK1/2及ERK5通路在缺血缺氧性脑动脉收缩中的作用。方法将大鼠脑动脉平滑肌细胞随机分为正常对照组、缺氧组、缺氧+去甲二氢愈创木酸(NDGA)组、缺氧+NDGA+15-HETE组、缺氧+NDGA+15-HETE+ERK抑制剂组、缺氧+ERK抑制剂组。将细胞分别应用Western blot技术和Real-time PCR技术检测大鼠脑动脉平滑肌细胞中p-ERK、ERK、电压门控性钾离子通道(Kv)2.1蛋白及mRNA的表达。结果随着15-HETE作用时间延长,正常对照组中15-HETE活化ERK1/2以及ERK5作用降低;随着15-HETE浓度的升高,正常对照组中ERK1/2和ERK5的活性增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着15-HETE增多,p-ERK1/2表达增多,Kv2.1通道表达受抑制;加入ERK1/2抑制剂后,缺氧+NDGA+15-HETE+ERK1/2抑制剂组与缺氧+NDGA+15-HETE组相比较、缺氧+ERK1/2抑制剂组与缺氧组相比较,ERK1/2活性减弱的同时,Kv2.1通道表达增强,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着15-HETE的产生增多,ERK5表达减少,Kv2.1通道表达降低。缺氧+NDGA+15-HETE+ERK5抑制剂组和缺氧+ERK5抑制剂组,分别与缺氧+NDGA+15-HETE组和缺氧组相比较,ERK5活性明显受抑制,Kv2.1通道表达增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入ERK抑制剂后,ERK mRNA表达明显被抑制,缺氧+NDGA+15-HETE+ERK抑制剂组与缺氧+NDGA+15-HETE组相比较、缺氧+ERK抑制剂组与缺氧组比较,Kv2.1 mRNA均上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在缺氧条件下,脑动脉平滑肌细胞中15-HETE可能是通过上调ERK1/2信号传导通路的表达而抑制Kv2.1通道的表达,最终导致脑动脉收缩。 展开更多
关键词 缺氧 去甲二氢愈创木酸 15-羟基廿碳四烯酸 细胞外信号调节激酶1/2 细胞外信号调节激酶5
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葡萄籽原花青素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量:6
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作者 孙明 雷荣 黄偲璇 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2020年第4期313-317,322,共6页
目的探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)的保护作用及其机制。方法将120只大鼠分为假手术组(Sham组,灌胃生理盐水)、模型组(RIRI组... 目的探讨葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)的保护作用及其机制。方法将120只大鼠分为假手术组(Sham组,灌胃生理盐水)、模型组(RIRI组,眼内灌注加压法制备,灌胃生理盐水)及GSPE低、中、高剂量组(GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组,灌胃0.13 g·kg-1 GSPE、0.25 g·kg-1 GSPE、0.50 g·kg-1 GSPE)、阳性对照组(α-LA组,灌胃100 mg·kg-1α-硫酸锌)。采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠视网膜组织形态学变化情况;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、iNOS、白细胞介素-6(IL-6)水平,氮蓝四唑显色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性;双抗体夹心法检测血清丙二醛(MDA)水平,铁离子还原法检测活性氧(ROS)水平;TUNEL法检测各组大鼠视网膜组织神经细胞凋亡;免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜组织中核因子E2-相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、Caspase-3表达情况;Western blot法检测各组大鼠视网膜组织中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2表达情况。结果GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组、α-LA组、RIRI组和Sham组视网膜厚度分别为(139.31±11.43)μm、(127.05±12.73)μm、(113.16±13.25)μm、(110.58±13.47)μm、(161.48±10.26)μm、(92.35±16.54)μm,Nrf2蛋白阳性表达率分别为(29.93±4.21)%、(34.06±5.17)%、(43.12±7.23)%、(45.35±7.46)%、(11.86±3.19)%、(52.27±8.36)%,ERK1/2蛋白磷酸化水平分别为0.41±0.05、0.62±0.07、0.89±0.09、0.92±0.05、0.23±0.04、1.16±0.25,RIRI组与Sham组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),GSPE-L组、GSPE-M组、GSPE-H组、α-LA组与RIRI组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且GSPE表现出剂量依赖性。与Sham组相比,RIRI组神经细胞凋亡率、Caspase-3阳性表达率、TNF-α、IL-6、iNOS、MDA、ROS水平显著升高,HO-1阳性表达率、SOD水平显著降低(均为P<0.05);与RIRI组相比,GSPE-L组、 展开更多
关键词 葡萄籽原花青素 视网膜缺血-再灌注损伤 细胞外调节蛋白激酶 核因子E2-相关因子2 血红素加氧酶-1
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