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哮喘大鼠气道平滑肌细胞ERK信号通路调控Smad6/7的研究 被引量:7
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作者 卢虹蓓 张维溪 李昌崇 《医学研究杂志》 2012年第10期42-46,共5页
目的探讨在哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中ERK信号通路对Smad6/7蛋白的调控。方法复制哮喘大鼠模型,原代培养ASMC,实验设未干预组(A组)、细胞外调节激酶(ERK)阻断剂(U0126)组(B组)、血小板源性生长因子(PDGF)组(C组)、PDGF+ERK阻断剂... 目的探讨在哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中ERK信号通路对Smad6/7蛋白的调控。方法复制哮喘大鼠模型,原代培养ASMC,实验设未干预组(A组)、细胞外调节激酶(ERK)阻断剂(U0126)组(B组)、血小板源性生长因子(PDGF)组(C组)、PDGF+ERK阻断剂组(D组)。免疫组化法测定Smad6/7蛋白的表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定Smad6/7 mRNA表达。结果哮喘大鼠ASMC中Smad 6/7蛋白B组显著高于A组(P<0.01),C组显著低于A组(P<0.01),D组与A组比较无统计学差异(P>0.05);各组哮喘大鼠ASMC中Smad6/7 mRNA表达无统计学差异。结论哮喘大鼠ASMC中ERK信号通路调控Smad6/7的作用发生在蛋白水平,不发生于基因水平。 展开更多
关键词 哮喘 气道平滑肌细胞 细胞外调节激酶 SMAD
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ERK1/2通路在哮喘大鼠的表达和作用 被引量:4
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作者 孙萍 吴颖 石岩 《江西医药》 CAS 2014年第3期211-213,共3页
目的探讨哮喘大鼠肺组织中磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的表达情况,以及其与肺组织炎性评分之间的相关性。方法清洁级雄性SD大鼠20只,随机分为正常对照组和哮喘组,每组10只。HE染色,半定量评定大鼠肺组织炎症程度;用免疫组织化学染色法观察... 目的探讨哮喘大鼠肺组织中磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)的表达情况,以及其与肺组织炎性评分之间的相关性。方法清洁级雄性SD大鼠20只,随机分为正常对照组和哮喘组,每组10只。HE染色,半定量评定大鼠肺组织炎症程度;用免疫组织化学染色法观察p-ERK1/2在哮喘大鼠肺组织的表达。结果哮喘组大鼠肺组织炎性评分及p-ERK1/2表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),p-ERK1/2主要表达于气道周围,两者呈显著正相关(r=0.779,P<0.01)。结论哮喘大鼠的肺组织p-ERK1/2表达水平显著增加,提示p-ERK1/2可能参与了哮喘的发病过程,且与肺部炎症有一定关系。 展开更多
关键词 哮喘 大鼠 细胞外信号调节激酶1 2 炎症
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ERK信号转导途径在哮喘大鼠气道重塑中作用的初步探讨 被引量:20
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作者 管小俊 张维溪 +7 位作者 苏苗赏 王宗敏 李昌崇 叶乐平 张海邻 林剑 周晓聪 施灵敏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1026-1030,共5页
目的:研究支气管哮喘不同时期细胞外信号调节激酶(External signal regulated kinase,ERK)的磷酸化与c-Fos表达,以探讨ERK信号转导途径在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法:复制大鼠哮喘模型,随机分为对照组(包括4周、8周及12周对照组)... 目的:研究支气管哮喘不同时期细胞外信号调节激酶(External signal regulated kinase,ERK)的磷酸化与c-Fos表达,以探讨ERK信号转导途径在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法:复制大鼠哮喘模型,随机分为对照组(包括4周、8周及12周对照组)、哮喘组(包括4周、8周及12周哮喘组),图像分析软件测定支气管壁厚度(Wat)和平滑肌厚度(Wam),免疫组化测定肺组织磷酸化的ERK(Phospho-ERK,P-ERK)与c-Fos表达,免疫印迹法测定磷酸化的ERK水平,直线相关分析法显示Wat和Wam与P-ERK的相关性。结果:各哮喘组Wat和Wam,P-ERK和c-Fos的平均吸光度均显著高于相应对照组(P均<0.01);各哮喘组磷酸化的ERK水平均显著高于相应对照组(其中A12也与C8组比)(P<0.01);Wat、Wam与P-ERK平均吸光度均呈显著正相关性(P<0.01)。结论:ERK磷酸化水平和c-Fos在哮喘大鼠均增加,ERK信号转导途径在支气管哮喘气道重塑中起重要作用。 展开更多
关键词 哮喘 气道重塑 细胞外信号调节激酶 信号转导 C-FOS
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脾虚胃溃疡大鼠分裂原激活的蛋白激酶信号传递分子的研究 被引量:2
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作者 杜鹃 王秀琴 +3 位作者 季凤清 李宝红 曾晓蓓 孙海梅 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期558-562,共5页
目的探讨脾虚证时分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路中信号分子表皮生长因子(EGF)、胞外信号调节激酶(ERK)的变化及加味四君子汤治疗脾虚证的机理。方法HE染色、免疫组织化学反应、免疫印迹法。结果脾虚胃溃疡大鼠下颌下腺颗粒曲... 目的探讨脾虚证时分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路中信号分子表皮生长因子(EGF)、胞外信号调节激酶(ERK)的变化及加味四君子汤治疗脾虚证的机理。方法HE染色、免疫组织化学反应、免疫印迹法。结果脾虚胃溃疡大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞内EGF阳性反应产物的含量增加,胃黏膜磷酸化的ERK减少,胃溃疡愈合延迟;经过加味四君子汤治疗后,上述异常变化得到纠正。结论EGF信号传递分子表达的变化可能是脾虚胃溃疡的发病机理之一,加味四君子汤能通过纠正这些变化而发挥治疗作用。 展开更多
关键词 脾虚胃溃疡 表皮生长因子 胞外信号调节激酶 免疫组织化学 免疫印迹 四君子汤 大鼠
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小鼠子宫平滑肌中h1 calponin、ERK1/2在不同妊娠阶段及临产时的表达与意义
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作者 李乐赛 马敬 周昌菊 《湖南师范大学学报(医学版)》 2011年第3期21-25,共5页
目的:探讨h1 CaP(h1 calponin,碱性调宁蛋白)及ERK1/2(external signal regulated kinase1/2,细胞外信号调节激酶1/2)在妊娠小鼠子宫平滑肌细胞中总蛋白和磷酸化蛋白的表达变化及与分娩的关系。方法:按妊娠阶段的不同,将小鼠分为未孕组... 目的:探讨h1 CaP(h1 calponin,碱性调宁蛋白)及ERK1/2(external signal regulated kinase1/2,细胞外信号调节激酶1/2)在妊娠小鼠子宫平滑肌细胞中总蛋白和磷酸化蛋白的表达变化及与分娩的关系。方法:按妊娠阶段的不同,将小鼠分为未孕组、孕7天组、孕12天组、孕17天组、孕18天组、孕19天组、产时组。应用Western blot检测子宫平滑肌中h1 CaP、磷酸化h1 CaP(ph1 CaP)、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p ERK1/2)的蛋白表达。结果:产时组h1 CaP蛋白表达显著高于未孕、孕7天、孕12天、孕17天组(P<0.01),与孕18天、孕19天组比较差异无统计学意义(P>0.05);ERK1总蛋白表达量产时组与其他各组比较差异无统计学意义(P>0.05);ERK2总蛋白表达量产时组与其他各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ph1 CaP/h1 CaP的比值为产时组显著高于未孕组、孕7天、孕12天、孕17天、孕18天、孕19天组(P<0.01),;pERK1/ERK1的比值产时组与其他各组比较差异无统计学意义(P>0.05);pERK2/ERK2的比值产时组显著高于未孕组、孕7天、孕12天、孕17天、孕18天、孕19天组(P<0.01)。结论:子宫平滑肌细胞中h1 CaP蛋白表达在临产前达高峰,ph1 CaP及p ERK2水平在临产时达最高峰。h1 CaP可通过促进ERK2磷酸化参与分娩发动;h1 CaP对分娩发动的影响不通过ERK1途径。 展开更多
关键词 碱性调宁蛋白 细胞外信号调节激酶1/2 分娩启动 子宫平滑肌
原文传递
PDGF对哮喘大鼠气道平滑肌细胞中ERK通路的影响研究
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作者 卢虹蓓 张维溪 李昌崇 《浙江医学》 CAS 2013年第22期1978-1981,共4页
目的研究血小板源性生长因子(PDGF)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中ERK信号通路的调控作用。方法建立哮喘大鼠模型,原代分离培养ASMC,设未干预组(A组)、ERK阻断剂组(B组)、PDGF组(C组)和PDGF+ERK阻断剂组(D组)。A组不加干预;B组又分... 目的研究血小板源性生长因子(PDGF)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中ERK信号通路的调控作用。方法建立哮喘大鼠模型,原代分离培养ASMC,设未干预组(A组)、ERK阻断剂组(B组)、PDGF组(C组)和PDGF+ERK阻断剂组(D组)。A组不加干预;B组又分为B1、B2、B3、B4组,分别加入浓度为0.1、1、5、10μmol/L的ERK阻断剂U0126;C组又分为C1、C2、C3、C4组,分别加入浓度为1、10、25、50μg/L的PDGF同二聚体PDGF-BB;D组加入10μmol/L的U0126和50μg/L的PDGF-BB。以RT-PCR法检测各组ERK1和TGF-β1的mRNA表达,免疫组化法检测A、B4、C4和D组中以上蛋白的表达。结果 RT-PCR提示B1、B2、B3、B4组ERK1 mRNA表达均显著低于A组(均P<0.01),U0126以浓度依赖的方式抑制PDGF诱导的ASMC中ERK的活化,C1、C2、C3、C4组ERK1 mRNA表达均显著高于A组(均P<0.01),ERK1 mRNA的表达与PDGF-BB存在明显的浓度依赖关系,D组与A组比较无统计学差异(P>0.05)。免疫组化提示B4组ASMC中ERK1蛋白表达显著低于A组,C4组显著高于A组(均P<0.01),D组与A组相比无统计学差异(P>0.05);B4组TGF-β1蛋白表达显著低于A组,C4组显著高于A组,同时C4组显著高于B4组(均P<0.01),D组与A组相比无统计学差异(P>0.05)。结论 PDGF可剂量依赖性激活哮喘大鼠ASMC内的ERK通路,同时伴随TGF-β1信号通路的活化。ERK通路参与了ASMC增殖的细胞内信号转导过程,PDGF可能经ERK环节促进TGF-β1通路活化。 展开更多
关键词 哮喘 气道平滑肌细胞 细胞外调节激酶 气道重塑 转化生长因子-β1
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FGF信号持续增强对体外培养小鼠骺板的影响
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作者 尹良军 沈岳 +4 位作者 邓忠良 卢先红 晏铮剑 聂茂 陈林 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期953-957,共5页
目的不同强度和持续时间下FGF信号的生物效应可能不同,探讨FGF信号持续增强对体外培养小鼠骺板生长的影响及可能机制。方法取胚胎期15d的C57BL/6J小鼠掌骨建立体外培养模型,分为3组(各40只掌骨)。对照组加入0.1%DMSO,bFGF组加入100μg/L... 目的不同强度和持续时间下FGF信号的生物效应可能不同,探讨FGF信号持续增强对体外培养小鼠骺板生长的影响及可能机制。方法取胚胎期15d的C57BL/6J小鼠掌骨建立体外培养模型,分为3组(各40只掌骨)。对照组加入0.1%DMSO,bFGF组加入100μg/L bFGF和0.1%DMSO,PD98059组加入100μg/L bFGF和50μmol/L PD98059(含0.1%DMSO)。培养6d后用Calcein溶液对掌骨的钙化组织染色,测量其总长度(total length,TL)和钙化组织长度(ossifi ed tissue length,OSL)的增加百分率。培养7d提取骺板软骨细胞的RNA,实时荧光定量PCR仪检测Ⅱ型胶原(collagen typeⅡ,ColⅡ)、ColⅩ、Ihh(Indian hedgehog)基因表达的变化。结果胚胎小鼠的掌骨在体外培养条件下继续生长发育。培养6d后,bFGF组掌骨TL增加百分率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),OSL增加百分率显著小于对照组(P<0.05);PD98059组掌骨TL增加百分率和OSL增加百分率与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),但均较bFGF组显著提高(P<0.05)。培养7d,bFGF组Ihh、ColⅡ和ColⅩ基因表达的相对含量均较对照组显著降低(P<0.05);PD98059组ColⅡ和ColⅩ基因表达的相对含量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于bFGF组(P<0.05),Ihh基因表达的相对含量均显著高于对照组和bFGF组(P<0.05)。结论持续的FGF信号增强可能通过Ihh下调来影响ColⅡ和ColⅩ表达,使体外培养的骺板生长迟滞。细胞外信号调节激酶信号通路可能在上述机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 BFGF 骺板 体外培养 细胞外信号调节激酶信号通路 小鼠
原文传递
维生素K3诱导氧化应激经ERK信号途径介导HeLa细胞发生自噬 被引量:6
8
作者 于春艳 刘希 +4 位作者 于春荣 张钰 苏静 刘玉和 李洪岩 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期229-232,共4页
目的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用。方法:将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、VK3组(30μmol·L-1)、U0126组(10μmol·L-1)和VK3(30μmol·... 目的:利用维生素K3(VK3)复制HeLa细胞氧化应激模型,探讨细胞外信号调节激酶(ERK)途径在氧化应激诱导自噬过程中的作用。方法:将人宫颈癌HeLa细胞随机分为对照组、VK3组(30μmol·L-1)、U0126组(10μmol·L-1)和VK3(30μmol·L-1)+U0126(10μmol·L-1)组。MTT法检测各组细胞生存率;Western blotting法检测HeLa细胞中ERK1/2、磷酸化ERK1/2(Phospho-ERK1/2)、自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、凋亡相关蛋白caspase-3及其活化片段cleaved caspase-3的表达水平;Hoechest 33342染色激光共聚焦观察凋亡细胞核形态和细胞凋亡率。结果:与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞生存率降低(P<0.05)。VK3组作用2、4和8hHeLa细胞中Phospho-ERK1/2表达水平增加(P<0.05)。与对照组比较,VK3组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平增加(P<0.05);与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞中LC3-Ⅱ蛋白表达水平降低(P<0.05),cleaved caspase-3蛋白表达水平增加(P<0.05)。与VK3组比较,VK3+U0126组HeLa细胞呈现凋亡细胞核形态,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:氧化应激通过ERK信号途径诱导HeLa细胞发生自噬,被激活的细胞自噬能抑制VK3诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多
关键词 氧化应激 细胞外信号调节激酶 自噬 HELA细胞
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