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基于网络药理学的土鳖虫破血逐瘀作用机制研究 被引量:24
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作者 王少平 赵一慕 +4 位作者 李盼盼 宋书祎 韩菲 张加余 代龙 《中国现代中药》 CAS 2021年第3期457-463,469,共8页
目的:基于网络药理学分析土鳖虫对破血逐瘀相关疾病的作用机制。方法:经文献查阅并结合PubChem、SwissADME、SwissTargetPrediction和TCMSP等数据库对土鳖虫已知成分及其对应靶点进行搜集,并与经GeneCards、OMIM、TTD、HPO数据库搜索得... 目的:基于网络药理学分析土鳖虫对破血逐瘀相关疾病的作用机制。方法:经文献查阅并结合PubChem、SwissADME、SwissTargetPrediction和TCMSP等数据库对土鳖虫已知成分及其对应靶点进行搜集,并与经GeneCards、OMIM、TTD、HPO数据库搜索得到的“破血逐瘀”相关靶点进行交互分析得到共同靶点;通过蛋白-蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析、基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,构建土鳖虫“成分-靶点-疾病”网络,探讨土鳖虫破血逐瘀功效的作用机制。同时采用体外纤溶实验评价土鳖虫水溶性蛋白质与其他成分的活性差异。结果:筛选得到土鳖虫活性化合物54个,共对应靶点653个;与血瘀相关的17种疾病的16141个作用靶点经交互分析得出两者共有靶点26个。GO和KEGG分析结果表明,土鳖虫已知成分主要涉及嘌呤代谢通路、细胞能量代谢通路、环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路、Toll样受体信号通路、醛固酮合成代谢通路、三酰甘油合成通路等13条信号通路,通过干预DNA转录、细胞能量代谢等生物功能发挥药效。同时体外纤溶实验得出土鳖虫水溶性蛋白质较其他成分表现出更强的纤溶活性。结论:土鳖虫已知活性成分并不能很好的证明其对破血逐瘀相关疾病的治疗有显著的效果。结合土鳖虫水溶性蛋白质促纤溶作用,为下一步土鳖虫纤溶物质基础的研究提供参考。 展开更多
关键词 土鳖虫 网络药理学 破血逐瘀 心血管疾病 靶点 纤溶
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土鳖虫活性肽DP17对高脂血症大鼠的降脂作用机制研究 被引量:24
2
作者 姜珊 董萍萍 +7 位作者 李浩然 徐静 李华健 于盈盈 代龙 高鹏 王少平 张加余 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期5265-5272,共8页
研究土鳖虫活性肽DP17治疗高脂血症大鼠的作用机制。运用HPLC和MADIL-TOF/TOF-MS对经仿生酶解、分离纯化得到的土鳖虫活性肽组分进行氨基酸序列分析并对其进行固相合成。采用高脂饲料诱导建立高脂血症SD大鼠模型。造模20 d后,灌胃给药,... 研究土鳖虫活性肽DP17治疗高脂血症大鼠的作用机制。运用HPLC和MADIL-TOF/TOF-MS对经仿生酶解、分离纯化得到的土鳖虫活性肽组分进行氨基酸序列分析并对其进行固相合成。采用高脂饲料诱导建立高脂血症SD大鼠模型。造模20 d后,灌胃给药,空白组与模型组给予生理盐水,其余组给予相应药物。给药4周后,检测大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)的含量,肝脏组织匀浆液TG、TC、一磷酸腺苷(AMP)和三磷酸腺苷(ATP)含量以及粪便TG含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病理变化;采用实时荧光定量PCR法检测肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和羧甲戊二酸辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA表达情况;Western blot法检测肝脏腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)蛋白的表达。经分析,土鳖虫活性肽单体氨基酸序列为DAVPGAGPAGCHPGAGP(DP17)。药理实验结果表明,DP17给药后,大鼠血清TG,TC和LDL含量以及肝脏组织匀浆液TG和TC含量均显著下降(P<0.05);肝脏组织匀浆液AMP,ATP含量和粪便TG含量显著升高(P<0.05);大鼠肝脏脂肪变性明显减轻;肝脏ACC和HMGCR mRNA表达以及mTORC1蛋白表达显著降低,AMPK磷酸化蛋白表达显著上升(P<0.05)。土鳖虫活性肽DP17可明显抑制大鼠肝脏脂肪堆积现象,主要通过调控机体内能量代谢平衡并激活AMPK/mTOR信号通路来发挥降血脂的作用。 展开更多
关键词 土鳖虫 活性肽 高脂血症 AMPK mTORC1
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动物药中黄曲霉毒素B1的定量风险评估探索 被引量:16
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作者 左甜甜 刘丽娜 +4 位作者 孙磊 张磊 李静 金红宇 马双成 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1267-1271,共5页
目的:通过对动物药黄曲霉毒素B1的定量风险评估,为完善动物药中黄曲霉素的限量标准,保证动物药的用药安全,提供参考依据。方法:根据风险评估的4个基本步骤,通过考察动物药中黄曲霉毒素B,的日暴露量以及超额风险,实现动物药中黄曲霉毒素B... 目的:通过对动物药黄曲霉毒素B1的定量风险评估,为完善动物药中黄曲霉素的限量标准,保证动物药的用药安全,提供参考依据。方法:根据风险评估的4个基本步骤,通过考察动物药中黄曲霉毒素B,的日暴露量以及超额风险,实现动物药中黄曲霉毒素B1的定量风险评估。结果:在土鳖虫、蜂房、九香虫、水蛭中分别检出黄曲霉毒素B1。其中土鳖虫、九香虫、蜂房的最大检出值分别为28.81、336.69和602.35μg·kg^-1,分别超出限量标准数倍、数十倍和百倍。风险评估的结果表明,动物药的日暴露量为0.010~4.323ng·kg^-1。蜂房的超额风险为每年1.297例癌症病例每100万人,风险应予以关注。其他动物药的超额风险均小于1,风险可控。结论:本文尝试对动物药中黄曲霉毒素B1进行定量风险评估,为中药材及制剂中黄曲霉毒素的风险评估打开新的思路。建议进一步完善动物药中黄曲霉素等真菌毒素的风险评估技术手段,为动物药的科学监管以及黄曲霉毒素标准的制修订提供技术支撑。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 动物药 土鳖虫 蜂房 九香虫 水蛭 风险评估 致癌作用强度 暴露量 超额风险
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免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法同时测定土鳖虫中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1,M2 被引量:13
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作者 于鹏浩 张磊 +3 位作者 秦家安 王建华 杨世海 杨美华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期5083-5087,共5页
通过建立免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法测定土鳖虫中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1,M2的污染情况。采用Cloversil C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以甲醇-乙腈-水(20∶20∶60)为流动相,等度洗脱,荧光检测... 通过建立免疫亲和柱净化光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法测定土鳖虫中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1,M2的污染情况。采用Cloversil C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm)进行分离,以甲醇-乙腈-水(20∶20∶60)为流动相,等度洗脱,荧光检测器激发波长360 nm,发射波长450 nm,流速0. 8 m L·min-1,色谱柱温度30℃。样品通过免疫亲和柱净化后,在上述色谱条件下,呈现良好的回收率,回收率为75. 47%~101. 8%,RSD均低于6. 7%。共检测土鳖虫样品20批次,根据《中国药典》2015年版一部中黄曲霉毒素B1限量小于5μg·kg^-1,黄曲霉毒素总量(黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2)不超过10μg·kg^-1作为参考,有10批次样品检出为阳性,检出率为50. 0%,7批次样品超标,超标样品占阳性样品的比率高达70. 0%。其中有3批次样品同时检出含有黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1,M2(SD-1,AH-1,AH-3),有1批次检出含有黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,M1(AH-7)。实验结果表明,此方法适用于土鳖虫中6种黄曲霉毒素的同时检测,且提示对于其易污染黄曲霉毒素情况应高度重视。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 土鳖虫 免疫亲和柱 高效液相色谱 荧光检测器
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土鳖虫药材高效毛细管电泳指纹图谱鉴别研究 被引量:12
5
作者 李峰 王成芳 包永睿 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1471-1473,共3页
目的:建立土鳖虫药材HPCE指纹图谱鉴别方法。方法:采用高效毛细管电泳法,未涂层石英毛细管柱(40 cm×75μm),20 mmol.L-1硼砂(pH 9.44)缓冲液、柱温25℃、分离电压13 kV、检测波长265 nm。结果:通过中药色指纹图谱相似度评价系统,确... 目的:建立土鳖虫药材HPCE指纹图谱鉴别方法。方法:采用高效毛细管电泳法,未涂层石英毛细管柱(40 cm×75μm),20 mmol.L-1硼砂(pH 9.44)缓冲液、柱温25℃、分离电压13 kV、检测波长265 nm。结果:通过中药色指纹图谱相似度评价系统,确定6个共有峰构成土鳖虫药材指纹图谱的特征峰。结论:本方法为土鳖虫药材品种鉴定与质量控制提供了依据。 展开更多
关键词 土鳖虫 高效毛细管电泳 指纹图谱
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QuEChERS结合UHPLC-MS同时测定土鳖虫及其成方制剂中9种真菌毒素含量 被引量:9
6
作者 李媛 张楠 +3 位作者 张亚锋 孙晓 张苗苗 谢志民 《中国现代中药》 CAS 2022年第1期142-146,共5页
目的:建立QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS)同时测定6种含土鳖虫的成方制剂中9种真菌毒素的方法。方法:样品用QuEChERS方法进行前处理,经10%甲酸乙腈提取,用N-丙基-乙二胺硅烷和无水硫酸镁进行净化,采用UHPLC-MS在多反... 目的:建立QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS)同时测定6种含土鳖虫的成方制剂中9种真菌毒素的方法。方法:样品用QuEChERS方法进行前处理,经10%甲酸乙腈提取,用N-丙基-乙二胺硅烷和无水硫酸镁进行净化,采用UHPLC-MS在多反应监测模式下进行测定,外标法定量。结果:9种真菌毒素的含量在各自质量浓度范围内具有较好的线性关系(r≥0.9956),目标化合物在低、中、高3个质量浓度下的平均回收率为70.42%~101.28%,RSD<12%,定量限(LOQ)为1.2~18.6μg·kg^(–1)。结论:该方法灵敏度高、准确性好,适合于土鳖虫及其成方制剂中9种真菌毒素的测定。 展开更多
关键词 QUECHERS 土鳖虫 真菌毒素 超高效液相色谱-串联质谱法
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3种虫类药材蛋白指纹图谱的建立 被引量:8
7
作者 范玮 余伯阳 刘吉华 《药物生物技术》 CAS 2014年第6期511-514,共4页
考察土鳖虫、僵蚕、蜈蚣电泳样品的制备方法、上样量、分离胶浓度及染色方法,建立3种虫类药SDS-PAGE蛋白指纹图谱。结果显示,3种虫类药的优化样品制备方法为以Tris-HCl缓冲液提取,上样量均为18μg,优选12.5%浓度的分离胶,银染法显色可... 考察土鳖虫、僵蚕、蜈蚣电泳样品的制备方法、上样量、分离胶浓度及染色方法,建立3种虫类药SDS-PAGE蛋白指纹图谱。结果显示,3种虫类药的优化样品制备方法为以Tris-HCl缓冲液提取,上样量均为18μg,优选12.5%浓度的分离胶,银染法显色可获得清晰的鉴别电泳图谱。该研究首次建立了土鳖虫、僵蚕、蜈蚣的SDS-PAGE蛋白指纹图谱,且方法可靠、操作简便、重现性好,可用于上述3种虫类药原药材,特别是粉碎药材的定性鉴别,也可为其他动物类中药材的鉴别提供方法学借鉴。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 土鳖虫 僵蚕 蜈蚣 鉴别 蛋白指纹图谱
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基于COⅠ基因对中成药中土鳖虫的分子鉴别研究 被引量:3
8
作者 刘晶晶 杨晶凡 +4 位作者 姚令文 康帅 王峰 戴忠 马双成 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期880-888,共9页
目的:建立基于线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的分子标记技术,对中成药中土鳖虫(地鳖、冀地鳖)及其伪品进行分子鉴定的方法。方法:收集不同地区土鳖虫正品及其伪品,对所有样品进行DNA的提取,通过对土鳖虫及其伪品DNA条形码COⅠ... 目的:建立基于线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的分子标记技术,对中成药中土鳖虫(地鳖、冀地鳖)及其伪品进行分子鉴定的方法。方法:收集不同地区土鳖虫正品及其伪品,对所有样品进行DNA的提取,通过对土鳖虫及其伪品DNA条形码COⅠ基因进行对比分析,设计药用土鳖虫的鉴别引物,引物序列为DBI-F(5’-GGCGTTGGCACAGGTTGGACT-3’)和DBI-R(5’-ATTTGTTCAGGTTTTATGTTG-3’)。采用两步法进行特异性聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR反应体系和反应程序影响因素进行考察,从而建立特异性PCR技术对宫瘤消胶囊等11个中成药中土鳖虫的真伪进行鉴别。结果:建立了土鳖虫快速特异性PCR反应程序,引物体系只针对土鳖虫成分DNA进行扩增,与中成药中其他药味的DNA均无交叉扩增。将其应用于11个品种13批次样品的检测,以1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,含正品土鳖虫的批次在250 bp附近处有一清晰条带,而阴性样品无条带。结论:通过特异性引物PCR扩增、电泳检测和克隆测序的方法,可以有效鉴别宫瘤消胶囊等11个中成药中的土鳖虫成分真伪。该方法具有快速、特异、灵敏的优点,为中成药中土鳖虫掺伪鉴定提供了分子生物学方法。 展开更多
关键词 土鳖虫 中成药 COⅠ基因 DNA提取 特异性扩增
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顶空固相微萃取-GC-MS结合气味活度值分析土鳖虫关键腥臭气成分
9
作者 马鸿雁 范红 +6 位作者 刘倩 李雪 叶慧 张定堃 管咏梅 杨明 夏厚林 《中国现代应用药学》 CSCD 北大核心 2024年第1期88-96,共9页
目的 确定土鳖虫腥臭气的主要成分,为土鳖虫去腥除臭提供理论基础。方法 采用顶空固相微萃取-气质联用技术鉴定10批次的土鳖虫成分,结合面积归一化法和化学计量法分析不同批次腥臭气物质;采用气味活度值(odor activity value,OAV)评价... 目的 确定土鳖虫腥臭气的主要成分,为土鳖虫去腥除臭提供理论基础。方法 采用顶空固相微萃取-气质联用技术鉴定10批次的土鳖虫成分,结合面积归一化法和化学计量法分析不同批次腥臭气物质;采用气味活度值(odor activity value,OAV)评价气味成分贡献度,确定关键腥臭气味组分。结果 共鉴定出87种挥发性气味成分,关键性腥臭气成分(OAV≥1)为间甲基苯酚、二甲基三硫、4-甲基苯酚、2-甲基异冰片、2-茨醇、4-甲基戊酸、异戊酸等;修饰性腥臭气成分(0.1<OAV<1)为2-氯苯酚、邻甲酚、苯酚、2-莰酮、吲哚、正辛醇、二甲基二硫等。结论 土鳖虫腥臭气成分主要为酚类、羧酸类和硫化物,关键腥臭气成分为间甲基苯酚、二甲基三硫、4-甲基苯酚、4-甲基戊酸、异戊酸、丙酸、丁酸等物质。 展开更多
关键词 土鳖虫 顶空固相微萃取-气相色谱-质谱 腥臭气 气味活度值
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土鳖虫药材及其制剂特征离子鉴别研究 被引量:1
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作者 何嘉莹 胡绮萍 +5 位作者 童培珍 邱韵静 李国卫 陈向东 郭嘉亮 孙冬梅 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第12期2108-2116,2126,共10页
建立土鳖虫特征离子质谱测定方法,对土鳖虫及其制剂进行真伪鉴别和质量评价。使用超高效液相色谱-三重四级杆质谱,采用多反应监测模式,选择质荷比(m/z)415.72(双电荷)→406.72、415.72(双电荷)→667.34作为检测离子对,对土鳖虫药材及其... 建立土鳖虫特征离子质谱测定方法,对土鳖虫及其制剂进行真伪鉴别和质量评价。使用超高效液相色谱-三重四级杆质谱,采用多反应监测模式,选择质荷比(m/z)415.72(双电荷)→406.72、415.72(双电荷)→667.34作为检测离子对,对土鳖虫药材及其制剂进行检测。24批不同产地的土鳖虫药材、21批土鳖虫提取物、6批成方制剂均能检出该离子对色谱峰,6批不同动物药(地龙、龟甲、僵蚕、鸡内金、蝉蜕、水蛭)药材和3批土鳖虫混伪品(金边土鳖、金边龙虱、美洲大蠊)中均未检出相应的色谱峰。本研究建立的方法为有效补充土鳖虫药材及其饮片检验标准上的不足,提高其质量控制水平,及保证土鳖虫相关药品临床用药的安全性提供了参考依据。 展开更多
关键词 土鳖虫 特征离子 质谱 质量控制
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水蛭 茯苓等7种动物类及菌类药材商品电子交易规格等级标准 被引量:5
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作者 甘我挺 陈向阳 +5 位作者 郭宝林 王堂海 李文昌 邓严冰 赵茂 龙兴超 《中国现代中药》 CAS 2016年第11期1428-1435,共8页
本文介绍了水蛭、蜈蚣、土鳖虫、地龙、乌梢蛇、茯苓、猪苓等7中动物类和菌类药材的电子交易规格等级标准。
关键词 中药材电子交易规格等级标准 水蛭 蜈蚣 土鳖虫 地龙 乌梢蛇 茯苓 猪苓
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ICP-MS法测定土鳖虫中重金属含量
12
作者 刘延娟 毕天琛 +2 位作者 曲智雅 赵丹彤 王素香 《中国标准化》 2023年第9期207-209,233,共4页
采用ICP-MS法对不同产地土鳖虫中重金属及有害元素进行测定和分析,其中,射频功率:1550w,等离子体氩气流速:15.0 L/min,辅助气流量:1.0 L/min,雾化器氩气流速:0.8 L/min,雾化室温度:2℃,进样速度:0.1 r/s。测定结果为市场销售土鳖虫中铅... 采用ICP-MS法对不同产地土鳖虫中重金属及有害元素进行测定和分析,其中,射频功率:1550w,等离子体氩气流速:15.0 L/min,辅助气流量:1.0 L/min,雾化器氩气流速:0.8 L/min,雾化室温度:2℃,进样速度:0.1 r/s。测定结果为市场销售土鳖虫中铅、镉、砷、汞、铜、铬均有不同程度检出,含量范围分别为0.5~4.8 mg/kg、0.01~0.14 mg/kg、0.4~1.4mg/kg、0~0.08 mg/kg、15.3~42.7 mg/kg和1.7~25.3 mg/kg。ICP-MS法测定土鳖虫中重金属含量,方便快捷,方法准确度、精密度和线性良好,为进一步提高土鳖虫质量控制标准提供参考。 展开更多
关键词 土鳖虫 ICP-MS法 重金属及有害元素
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响应面法优化土鳖虫水溶性蛋白质的提取条件 被引量:4
13
作者 王立娜 王颖 +4 位作者 邢佰颖 刘春雨 桑晓 王彦多 王集会 《食品与药品》 CAS 2017年第1期26-29,共4页
目的确定土鳖虫水溶性蛋白质提取最佳工艺条件。方法在单因素实验基础上,以土鳖虫蛋白质提取率(Y)为响应值,应用响应面法对土鳖虫蛋白质提取工艺进行优化。结果依据统计模型发现液料比、提取时间、提取液p H 3个要素均对土鳖虫蛋白质提... 目的确定土鳖虫水溶性蛋白质提取最佳工艺条件。方法在单因素实验基础上,以土鳖虫蛋白质提取率(Y)为响应值,应用响应面法对土鳖虫蛋白质提取工艺进行优化。结果依据统计模型发现液料比、提取时间、提取液p H 3个要素均对土鳖虫蛋白质提取率影响明显。由响应面三维图及等值图分析,得到土鳖虫蛋白质提取率较高的最佳方案为液料比40:1,提取时间20 min,提取液p H 9。结论验证实验所得蛋白质提取率为11.06%,与模型预测值十分接近,运用响应面法优化土鳖虫蛋白质提取条件切实可行。 展开更多
关键词 土鳖虫 水溶性蛋白质 响应面法 等高线图
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山东省市售土鳖虫质量分析与评价
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作者 刘延娟 毕天琛 +2 位作者 赵丹彤 牛忻 王素香 《山东化工》 CAS 2023年第12期121-124,共4页
目的:评价山东省市售土鳖虫质量状况。方法:收集山东省16地市市售土鳖虫样品28批,参照《中国药典》2020年版一部,分别对样品的性状、显微特征、薄层特征进行鉴别,对杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素和浸出物进行检查,对样... 目的:评价山东省市售土鳖虫质量状况。方法:收集山东省16地市市售土鳖虫样品28批,参照《中国药典》2020年版一部,分别对样品的性状、显微特征、薄层特征进行鉴别,对杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素和浸出物进行检查,对样品进行聚类及相关性分析,对重金属污染情况就行了探索研究。结果:土鳖虫的性状及显微特征均符合药典规定;薄层色谱中,供试品溶液在与对照药材色谱相应的位置上,分别显相同颜色的荧光斑点和斑点;杂质含量为0.08%~2%,水分含量为6.7%~9.4%,总灰分含量为7.7%~15.8%(合格率为96%),酸不溶性灰分含量为1.1%~9.2%(合格率为96%),28批样品中,有两批同厂家样品检出黄曲霉毒素(检出率7%),浸出物含量为25.6%~37.0%,通过聚类分析,可将样品分为三类。结论:山东省市售土鳖虫总体质量较好,现行质量标准基本能满足其质量控制,极少部分样品中发现总灰分、酸不溶性灰分以及黄曲霉毒素含量超标等问题,需要进一步加强炮制工艺优化、贮藏环境监控及质量控制和监管。 展开更多
关键词 土鳖虫 质量评价 聚类分析
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土鳖虫分子生药学研究进展 被引量:4
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作者 于春华 怀凤武 白秀娟 《经济动物学报》 CAS 2018年第2期118-121,124,共5页
分子生药学是一门新兴交叉学科,主要进行DNA及表达水平的生药的分子鉴定及药理机制研究。土鳖虫作为传统中药中的动物药,在传统研究方法基础上,国内外学者对其也开展了分子生药学研究,并取得了一定成果。文中综述了近年来采用分子生药... 分子生药学是一门新兴交叉学科,主要进行DNA及表达水平的生药的分子鉴定及药理机制研究。土鳖虫作为传统中药中的动物药,在传统研究方法基础上,国内外学者对其也开展了分子生药学研究,并取得了一定成果。文中综述了近年来采用分子生药学方法对土鳖虫相关研究,并对该领域进行了展望,以期为进一步推动土鳖虫资源的开发和利用提供参考。 展开更多
关键词 分子生药学 基因 土鳖虫 分子生物技术
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氨基酸分析仪法快速检测土鳖虫中谷氨酸含量 被引量:4
16
作者 张华丽 周洪亮 孙家昌 《山东科学》 CAS 2021年第3期26-32,共7页
采用氨基酸分析仪建立了土鳖虫中谷氨酸含量的检测方法,比较不同浓度的盐酸以及不同料液比、提取时间对土鳖虫中谷氨酸提取效果的影响。结果表明,土鳖虫中谷氨酸的最佳提取工艺为6 mol/L的盐酸消解,料液比1:1(mg/mL),水解时间22 h,建立... 采用氨基酸分析仪建立了土鳖虫中谷氨酸含量的检测方法,比较不同浓度的盐酸以及不同料液比、提取时间对土鳖虫中谷氨酸提取效果的影响。结果表明,土鳖虫中谷氨酸的最佳提取工艺为6 mol/L的盐酸消解,料液比1:1(mg/mL),水解时间22 h,建立的谷氨酸分析仪法回收率为99.2%,精密度试验相对标准偏差为0.19%,不同地区土鳖虫中谷氨酸质量分数存在较明显差异,范围为1.068%~1.149%。该方法重现性好、快速高效、操作简便,适用于土鳖虫中氨基酸含量的检测,可为其质量控制及资源深入开发提供技术支持。 展开更多
关键词 土鳖虫 氨基酸 提取方法 氨基酸分析仪
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土鳖虫抗兔高胆固醇血症模型内参基因的评估及应用 被引量:3
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作者 张震 姜恩泽 +2 位作者 宁方勇 杜智恒 白秀娟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期52-58,共7页
以60只雄性哈尔滨大白兔(Leporidae)制备土鳖虫(Eupolyphaga steleophaga)抗兔高胆固醇血症模型,使用GeNorm、BestKeeper、NormFinder、ΔCt和RefFinder算法综合评估9个常用内参基因(Actb、B2m、 Eef1a1、Gapdh、Hprt1、Ppia、 Rpl5、S... 以60只雄性哈尔滨大白兔(Leporidae)制备土鳖虫(Eupolyphaga steleophaga)抗兔高胆固醇血症模型,使用GeNorm、BestKeeper、NormFinder、ΔCt和RefFinder算法综合评估9个常用内参基因(Actb、B2m、 Eef1a1、Gapdh、Hprt1、Ppia、 Rpl5、Sdha、Ywhaz)模型肝脏表达稳定性,应用最稳定内参基因标准化肝Lxrα、Abca1和Cyp7a1基因在不同处理组mRNA表达。结果表明,哈白兔可制备土鳖虫抗兔高胆固醇血症模型,模型中2个最稳定内参基因为Gapdh和B2m;与高胆固醇血症组相比,各治疗组肝Lxrα、Abca1和Cyp7a1基因mRNA表达显著上调(P<0.05)。评估所获最稳定内参基因,为实时定量PCR技术研究该模型机制奠定基础;土鳖虫可降低高胆固醇血症兔胆固醇水平,上调Lxrα、Abca1和Cyp7a1基因表达。 展开更多
关键词 土鳖虫 高胆固醇血症 内参基因 LXRΑ ABCA1 CYP7A1
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土鳖虫活性肽组分对急性血瘀模型大鼠血液流变学、血脂四项指标及血液因子含量的影响 被引量:34
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作者 姜珊 王少平 +4 位作者 代龙 张加余 高鹏 刘子菡 王喻淇 《食品与机械》 北大核心 2020年第1期175-180,共6页
用胃蛋白酶和胰蛋白酶复合酶系对土鳖虫药材进行仿生酶解,产物经除盐、超滤、纳滤、DA201-C型大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶G-25层析、反相高效液相色谱以及半制备液相色谱分离纯化,获得纤溶活力最强的土鳖虫活性肽组分。并研究其对急性血... 用胃蛋白酶和胰蛋白酶复合酶系对土鳖虫药材进行仿生酶解,产物经除盐、超滤、纳滤、DA201-C型大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶G-25层析、反相高效液相色谱以及半制备液相色谱分离纯化,获得纤溶活力最强的土鳖虫活性肽组分。并研究其对急性血瘀模型大鼠的血液流变学指标、血脂四项指标和血清内一氧化氮(NO)、超氧化歧化酶(SOD)、组织性纤溶酶原激活物(t-PA)和纤维蛋白(FIB)含量等的影响。结果表明:土鳖虫活性肽组分F2能显著降低血液黏度、红细胞压积、血小板计数(P<0.05);与模型组相比,土鳖虫活性肽组分F2能显著降低大鼠血液内甘油三脂(TG)、胆固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)的含量(P<0.05);大鼠血液中NO、SOD、t-PA含量较模型组明显升高,血清内FIB含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。土鳖虫经仿生酶解、分离纯化后制备的土鳖虫活性肽组分F2具有改善急性血瘀模型大鼠血液流变学指标,降低血脂四项指标和改变血液因子含量的作用。 展开更多
关键词 土鳖虫活性肽 急性血瘀模型 大鼠 血液流变学 血脂 血液因子
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土鳖虫及其混淆品HPLC指纹图谱分析 被引量:8
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作者 王欣丽 李清 +3 位作者 李博惠 回音 陈媛媛 毕开顺 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1780-1784,共5页
目的通过OPA-FMOC在线自动衍生化,建立土鳖虫的HPLC指纹图谱分析方法。方法色谱柱为Durashell-AA柱(150 mm×4.6 mm,3μm);流动相组成为A:0.01 mol/L磷酸氢二钠及四硼酸钠水溶液(盐酸调节p H值至8.2);流动相B:甲醇-乙腈-水(4... 目的通过OPA-FMOC在线自动衍生化,建立土鳖虫的HPLC指纹图谱分析方法。方法色谱柱为Durashell-AA柱(150 mm×4.6 mm,3μm);流动相组成为A:0.01 mol/L磷酸氢二钠及四硼酸钠水溶液(盐酸调节p H值至8.2);流动相B:甲醇-乙腈-水(45∶45∶10);体积流量1.6 mL/min;检测波长:0-24 min,338 nm;24-27 min,228 nm;柱温45℃;梯度洗脱。结果共得到28个共有峰,指认了其中15个化学成分,建立了土鳖虫及其混淆品HPLC指纹图谱并计算相似度,根据SPSS聚类分析结果,将其分为2类,第I类药材为地鳖或冀地鳖,第II类为金边地鳖。结论所建立的土鳖虫HPLC指纹图谱快速、准确、重复性好,为土鳖虫的质量控制提供科学依据。 展开更多
关键词 土鳖虫 在线自动衍生化 指纹图谱 HPLC 混淆品
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中药土鳖虫发酵前后活性成分的含量对比 被引量:8
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作者 王立娜 马明珠 +1 位作者 王颖 王集会 《湖南中医杂志》 2016年第8期200-202,共3页
目的:探究经球孢白僵菌发酵前后中药土鳖虫中蛋白质、多糖、核酸含量的差异。方法:利用改良Lowry法、苯酚-硫酸法、定磷法,分别测定蛋白质、多糖、核酸的含量,采用单因素方差分析和LSD-t检验方法,比较两者含量的差异。结果:土鳖虫发酵... 目的:探究经球孢白僵菌发酵前后中药土鳖虫中蛋白质、多糖、核酸含量的差异。方法:利用改良Lowry法、苯酚-硫酸法、定磷法,分别测定蛋白质、多糖、核酸的含量,采用单因素方差分析和LSD-t检验方法,比较两者含量的差异。结果:土鳖虫发酵前水溶性蛋白质含量为108.24mg/g,发酵后为152.33mg/g;发酵前多糖含量为41.76mg/g,发酵后为27.96mg/g;发酵前核酸含量为40.23mg/g,发酵后为42.58mg/g。结论:土鳖虫发酵后蛋白质含量较高,而发酵前多糖含量较高,且均有极显著差异,核酸发酵前后含量没有明显差异。 展开更多
关键词 中药土鳖虫 发酵 超声水提 活性物质
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