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固定化粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的制备
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作者 张怡婷 张柏超 +4 位作者 钱梦瑶 徐婷婷 倪楠 周芝兰 陈玮 《中国科技论文》 CAS 北大核心 2014年第12期1430-1432,共3页
粪产碱杆菌来源的青霉素G酰化酶通过共价结合在环氧型载体Eupergit C上,通过对酶质量浓度、固定化反应时间、pH值以及反应温度等条件的考察,确定了最优固定化条件:375mg比活力5 000U/g的重组粪产碱杆菌青霉素G酰化酶蛋白对应1g载体,最适... 粪产碱杆菌来源的青霉素G酰化酶通过共价结合在环氧型载体Eupergit C上,通过对酶质量浓度、固定化反应时间、pH值以及反应温度等条件的考察,确定了最优固定化条件:375mg比活力5 000U/g的重组粪产碱杆菌青霉素G酰化酶蛋白对应1g载体,最适pH 8.0,反应温度30℃。反应120h后制得固定化青霉素G酰化酶活力达到220U/g,固定化酶效率为10.7%。该固定化酶可在含饱和乙酸丁酯磷酸缓冲液中彻底水解青霉素G钾盐。经过15批连续水解反应,固定化酶仍保持95%的活力,展现出良好的稳定性。 展开更多
关键词 固定化酶 粪产碱杆菌 青霉素G酰化酶 eupergitc
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固定化γ-谷氨酰转肽酶的催化特性研究 被引量：3
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作者 肖彦羚 周治 +2 位作者 姚忠 徐虹 韦萍 《现代化工》 CAS CSCD 北大核心 2009年第S2期147-149,151,共4页
B.subtilisNX-2产γ-谷氨酰转肽酶(GGT)经纯化后,以Eupergit C250 L为载体进行了共价固定化,固定化酶活回收率为17.59%,蛋白回收率为32.74%;活性位点滴定的结果表明固定化后,GGT活性位点浓度为游离酶的79.8%。固定化酶的最适pH和温度分... B.subtilisNX-2产γ-谷氨酰转肽酶(GGT)经纯化后,以Eupergit C250 L为载体进行了共价固定化,固定化酶活回收率为17.59%,蛋白回收率为32.74%;活性位点滴定的结果表明固定化后,GGT活性位点浓度为游离酶的79.8%。固定化酶的最适pH和温度分别为9.5和50℃,且温度和pH适用范围均有所扩大。测定得到了固定化GGT对供体(γGPNA)的米氏常数为Km=2.7463 mmol.L-1,谷氨酰基化反应催化常数为Kcat=2 670.01 min-1,较游离酶有所降低。固定化酶的温度及pH稳定性均较游离酶有大幅度提高,经50 d贮藏(4℃)和25个批次转化后,固定化GGT的残余活力仍可达初始值的79%。 展开更多
关键词 固定化 Γ-谷氨酰转肽酶 eupergitc250L 活性位点滴定
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