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山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制研究 被引量:4
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作者 宓伟 赵倩 +3 位作者 练武 石塔拉 韩文婷 衣卫杰 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期389-392,398,共5页
目的探讨山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制。方法常规培养食管癌Eca109细胞系并分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和不同浓度的山楂原花青素实验组;细胞活性(cell counting kit-8,CCK-8)法检测山楂原花青素对Eca109细胞的抑制... 目的探讨山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制。方法常规培养食管癌Eca109细胞系并分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和不同浓度的山楂原花青素实验组;细胞活性(cell counting kit-8,CCK-8)法检测山楂原花青素对Eca109细胞的抑制率;荧光共振能量转移(FRET)法观察山楂原花青素与细胞表面受体形成的异源二聚体的数量;Western blot法分别检测ERK5磷酸化程度和Bax、caspase-3蛋白表达水平;Annexin V-FITC/PI法检测食管癌细胞凋亡率。结果不同浓度的山楂原花青素培养Eca109细胞72h时,IC50约为275μg/ml,因此选用275μg/ml作为实验剂量;山楂原花青素与细胞表面受体形成的异源二聚体的数量呈时间依赖性,24h数量明显增多(P<0.05);ERK5磷酸化程度随着时间的延长逐渐增强(P<0.05),于36h和48h活性明显增强(P<0.01);Eca109细胞的凋亡率随着时间的推移越来越高,72 h已达48.1%(P<0.05);Bax和caspase-3蛋白表达在山楂原花青素的作用下,于48h表达最强(P<0.01)。结论山楂原花青素可促进食管癌Eca109细胞的凋亡进程。 展开更多
关键词 山楂原花青素 食管癌eca109细胞 凋亡
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circ_0044516靶向miR-1281促进食管癌细胞增殖、抑制细胞凋亡
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作者 徐灵 艾明华 +1 位作者 张庆 彭小春 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期2828-2833,共6页
目的:探索circ_0044516是否通过靶向miR-1281影响食管癌Eca109细胞增殖和凋亡。方法:将食管癌Eca109细胞分为si-NC组、si-circ_0044516组、miR-NC组、miR-1281组、si-circ_0044516+anti-miR-NC组和si-circ_0044516+antimiR-1281组。采... 目的:探索circ_0044516是否通过靶向miR-1281影响食管癌Eca109细胞增殖和凋亡。方法:将食管癌Eca109细胞分为si-NC组、si-circ_0044516组、miR-NC组、miR-1281组、si-circ_0044516+anti-miR-NC组和si-circ_0044516+antimiR-1281组。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定食管癌组织及Eca109细胞中circ_0044516和miR-1281表达。运用CCK-8法检测Eca109细胞增殖能力,克隆形成实验测定克隆形成,Western blot测定活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)3蛋白和cleaved-caspase9蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡。采用荧光素酶报告实验分析circ_0044516与miR-1281的靶向结合。结果:食管癌组织中circ_0044516表达量比相匹配的癌旁组织增加2.70倍左右,miR-1281表达量较癌旁组织显著减少(P<0.05)。食管癌Eca109细胞中干扰circ_0044516表达或miR-1281过表达可使cleaved-caspase3蛋白、cleaved-caspase9蛋白表达量和凋亡率升高,细胞增殖能力降低,克隆形成数减少(P<0.05)。circ_0044516靶向调控miR-1281的表达。干扰circ_0044516表达对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的作用被下调miR-1281表达所逆转。结论:食管癌Eca109细胞中干扰circ_0044516表达通过靶向miR-1281抑制细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 食管癌eca109细胞 circ_0044516 miR-1281 增殖 凋亡
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NGF中和抗体、DAPT对食管癌Eca109细胞p75^(NTR) 核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响
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作者 邓江华 李秋实 +2 位作者 朱兵兵 陈晶晶 慕晓玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第10期1536-1541,共6页
目的探究神经生长因子(NGF)中和抗体、γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对食管癌Eca109细胞p75神经营养因子受体(p75^(NTR))核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法采用免疫荧光细胞化学技术,检测NG... 目的探究神经生长因子(NGF)中和抗体、γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对食管癌Eca109细胞p75神经营养因子受体(p75^(NTR))核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法采用免疫荧光细胞化学技术,检测NGF中和抗体、DAPT处理Eca109细胞前后p75^(NTR)、Ki67的表达变化;分别采用CCK-8法和Transwell细胞侵袭实验,检测NGF中和抗体、DAPT单独或联合处理Eca109细胞前后其增殖能力及侵袭能力的变化。结果免疫荧光细胞化学技术检测结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后,p75^(NTR)核表达的细胞数量均减少,且NGF中和抗体和DAPT联合处理细胞后,p75^(NTR)核表达的细胞数量最少,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8法及Transwell细胞侵袭实验结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后,细胞增殖、侵袭能力较处理前均相应减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NGF中和抗体、DAPT抑制p75^(NTR)的核转移,降低p75^(NTR)的核表达率,减弱细胞增殖、侵袭能力。 展开更多
关键词 食管癌eca109细胞 NGF中和抗体 γ-分泌酶抑制剂DAPT p75^(NTR)
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shRNA沉默HMGA2对食管癌ECA109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 郭小琦 梁英平 +2 位作者 薛锋 王鹏国 陈伟 《癌症进展》 2017年第11期1269-1272,1281,共5页
目的探讨sh RNA沉默HMGA2对食管癌ECA109细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探究所涉及的相关机制。方法构建针对人HMGA2基因的sh RNA表达载体,瞬时转染至人食管癌细胞系ECA109中,24 h后应用蛋白免疫印迹法(WB)检测转染效率;应用MTT... 目的探讨sh RNA沉默HMGA2对食管癌ECA109细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并探究所涉及的相关机制。方法构建针对人HMGA2基因的sh RNA表达载体,瞬时转染至人食管癌细胞系ECA109中,24 h后应用蛋白免疫印迹法(WB)检测转染效率;应用MTT法比较转染后sh-HMGA2组与sh-NC组细胞增殖情况;应用流式细胞术检测HMGA2沉默对细胞凋亡的影响;应用Transwell测定评估HMGA2沉默对细胞迁移和侵袭能力的影响;应用WB检测HMGA2沉默对ECA109细胞内HMGA2、TGF-βRⅡ、Vimentin、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2/3、E-cadherin、N-cadherin、Bax、Bcl-xl、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果与sh-NC组相比,sh-HMGA2组中HMGA2的蛋白表达水平降低(P﹤0.05)。MTT结果显示,与sh-NC组相比,sh-HMGA2组细胞增殖率明显降低(P﹤0.01)。流式细胞术结果显示,与sh-NC组相比,sh-HMGA2组细胞凋亡率增加(P﹤0.05)。Transwell测定结果显示,与sh-NC组相比,sh-HMGA2组中ECA109细胞迁移和侵袭数量均减少(P﹤0.05)。WB结果显示,与sh-NC组相比,sh-HMGA2组细胞内Bax和E-cadherin表达水平增加,而Bcl-xl、Vimentin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、TGF-β、Smad2、Smad3、p-Smad2/3蛋白表达水平均降低(P﹤0.05)。结论 sh RNA沉默HMGA2基因通过下调Bcl-xl表达、上调Bax表达水平来抑制食管癌细胞系ECA109细胞增殖并促进细胞凋亡,并通过抑制MMP及上皮间质转化来抑制细胞迁移和侵袭,这一过程涉及TGF-β/Smad信号通路。 展开更多
关键词 shRNA沉默HMGA2 食管癌eca109细胞 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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夏枯草提取物对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:9
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作者 郑学芝 郑学海 +3 位作者 李佳 郭冉 徐秋玲 李丽 《中国食物与营养》 2012年第11期74-76,共3页
目的:观察夏枯草提取物对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响,探讨夏枯草抗肿瘤作用及机制。方法:不同浓度夏枯草作用于食管癌Eca-109细胞,利用MTT法检测细胞增殖抑制率,免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;Annexin-V-FITC/PI法检... 目的:观察夏枯草提取物对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响,探讨夏枯草抗肿瘤作用及机制。方法:不同浓度夏枯草作用于食管癌Eca-109细胞,利用MTT法检测细胞增殖抑制率,免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果:中高剂量夏枯草抑制食管癌Eca-109细胞增殖,并呈量效和时效关系;使细胞凋亡率增高,同时Bcl-2蛋白减少,Bax蛋白表达增加。结论:夏枯草提取物可抑制食管癌Eca-109细胞增殖,使Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加,细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 夏枯草 食管癌eca-109细胞 增殖 凋亡
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Fas、bcl-2和caspase8在去甲斑蝥素诱导食管癌细胞凋亡中的作用及机制 被引量:6
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作者 彭林涛 许欣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期398-401,共4页
目的探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡过程中Fas、bcl-2、caspase8凋亡调节基因的相互关系及可能的作用机制。方法流式细胞术分析去甲斑蝥素作用后细胞凋亡及增殖的变化,应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Fas、bc... 目的探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡过程中Fas、bcl-2、caspase8凋亡调节基因的相互关系及可能的作用机制。方法流式细胞术分析去甲斑蝥素作用后细胞凋亡及增殖的变化,应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Fas、bcl-2、caspase8表达的变化。结果去甲斑蝥素诱导的人食管癌Eca-109细胞发生形态改变。流式细胞仪分析结果发现,食管癌Eca-109细胞在DNA组方图上出现典型的亚二倍体峰即凋亡峰,在细胞周期中的分布也发生了明显的变化。免疫细胞化学结果显示,去甲斑蝥素作用后食管癌Eca-109细胞Fas、caspase8蛋白表达明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论去甲斑蝥素能抑制食管癌Eca-109细胞增殖并诱导凋亡,其作用可能与上调Fas、caspase8蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 去甲斑蝥素 食管癌eca-109细胞 凋亡 FAS BCL-2 CASPASE8
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至生胶囊对食管癌Eca-109细胞作用的体内外实验研究 被引量:1
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作者 王祥麒 杨峰 +1 位作者 蒋士卿 王一博 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2011年第3期231-233,共3页
目的探讨至生胶囊在体内、体外对食管癌Eca-109细胞的作用及作用机理。方法体内实验:将BALB/c裸鼠50只随机分为至生胶囊低、中、高剂量组、环磷酰胺注射液(CTX)组、空白组5组,每组10只。造模成功后,低、中、高剂量组分别灌服至生胶囊0.2... 目的探讨至生胶囊在体内、体外对食管癌Eca-109细胞的作用及作用机理。方法体内实验:将BALB/c裸鼠50只随机分为至生胶囊低、中、高剂量组、环磷酰胺注射液(CTX)组、空白组5组,每组10只。造模成功后,低、中、高剂量组分别灌服至生胶囊0.25g/kg、0.5g/kg、0.75g/kg;CTX组按40mg/kg给CTX;空白组给等容积生理盐水,各组均每日1次,连续10天,观察各组小鼠体重及瘤重的变化。体外实验:将日本大耳白兔10只随机分为至生胶囊低、中、高剂量组、CTX组及空白组5组,每组2只,制备含药血清,分别加入Eca-109细胞悬液中,培养72h,测OD值,显微镜下观察细胞的形态学及细胞数目改变。结果体内实验:至生胶囊低、中、高剂量减轻瘤重的作用随浓度的增加而增强(P<0.05),呈一定的量效关系,至生胶囊中剂量组在抑制肿瘤的同时能增加小鼠体重。体外实验:至生胶囊高剂量组对Eca-109细胞的抑制作用与CTX相当(P>0.05);至生胶囊对Eca-109细胞的抑制作用呈明显的量效关系(P<0.05);镜下观察,各至生胶囊组及CTX组见部分细胞出现皱缩、变小变圆、折光性降低、脱壁死亡等。结论至生胶囊在体内、体外实验中,均对人食管癌Eca-109细胞有明显的抑制作用,呈量效关系,其抗肿瘤作用可能与引起肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 至生胶囊 食管癌eca-109细胞 体内实验 体外实验 抑制率
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