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猪瘟病毒C株E^(rns)/E2嵌合基因表达蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定
被引量：
3
1
作者
王丽
李学伍
+6 位作者
腾蔓
杨艳艳
李娅丽
李艳蕊
赵东
柴书军
张改平
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1126-1129,共4页
目的:制备抗猪瘟病毒(CSFV)C株Erns/E2嵌合基因表达蛋白的单克隆抗体(mAb),探讨Erns/E2蛋白的分子结构和生物学功能。方法:在大肠杆菌RosettaTM2(DE3)中表达了猪瘟病毒(CSFV)C株Erns、E2蛋白主要抗原域的嵌合基因CSFVErns/E2蛋白;以纯...
目的:制备抗猪瘟病毒(CSFV)C株Erns/E2嵌合基因表达蛋白的单克隆抗体(mAb),探讨Erns/E2蛋白的分子结构和生物学功能。方法:在大肠杆菌RosettaTM2(DE3)中表达了猪瘟病毒(CSFV)C株Erns、E2蛋白主要抗原域的嵌合基因CSFVErns/E2蛋白;以纯化复性后的CSFVErns/E2为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗CSFVErns/E2 mAb;利用间接ELISA、Western blot、Dotblot方法鉴定mAb生物学特性。结果:获得了1株稳定分泌抗CSFVErns/E2融合蛋白的单克隆杂交瘤细胞系C8株,该株mAb的细胞培养上清效价为1∶6400,小鼠腹水效价1∶2×105。其免疫球蛋白亚类为IgG1。间接ELISA和Western blot结果显示该株mAb不与猪瘟C株细胞毒、pET-32a标签蛋白反应,仅与融合表达的CSFVErns/E2蛋白存在特异性反应。Dot blot结果表明其识别的抗原表位为E2蛋白的RSGL-CPFDTSPV氨基酸序列。结论:获得了一株能特异识别E2蛋白抗原表位的mAb,为进一步研究CSFV的分子结构及功能奠定了物质基础。
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关键词
猪瘟病毒
CSFV
erns
/
e
2
嵌合基因
融合蛋白
单克隆杂交瘤细胞系
下载PDF
职称材料
基于Erns和E2基因的猪瘟标记疫苗研究概述
被引量：
6
2
作者
刘元杰
邹兴启
+4 位作者
徐璐
朱元源
张乾义
王琴
赵启祖
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期3038-3044,共7页
猪瘟(Classical swine fever,CSF)是猪的一种急性、热性和致死性传染病。该病流行范围很广,而且致死率极高,给世界养猪业造成严重危害。目前,猪瘟流行地区或国家仍然采用接种弱毒疫苗的方法作为预防猪瘟的主要策略,但接种弱毒疫苗的传...
猪瘟(Classical swine fever,CSF)是猪的一种急性、热性和致死性传染病。该病流行范围很广,而且致死率极高,给世界养猪业造成严重危害。目前,猪瘟流行地区或国家仍然采用接种弱毒疫苗的方法作为预防猪瘟的主要策略,但接种弱毒疫苗的传统预防控制方法无法区别猪瘟疫苗免疫抗体和野毒感染抗体。为了净化、消灭猪瘟,新型标记疫苗的研究已迫在眉睫。近些年,陆续有国内外研究者应用分子生物学和基因工程方法,对猪瘟野毒株或弱毒株进行基因修饰构建出新毒株,其中以Erns和E2为基础构建新毒株的方法占据着重要地位。部分候选疫苗具有较好的免疫效果,可用于区分免疫和自然感染动物,而且有望作为新一代疫苗来替代传统弱毒疫苗。
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关键词
猪瘟
标记疫苗
erns
和
e
2
基因突变
基因重组
原文传递
题名
猪瘟病毒C株E^(rns)/E2嵌合基因表达蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定
被引量：
3
1
作者
王丽
李学伍
腾蔓
杨艳艳
李娅丽
李艳蕊
赵东
柴书军
张改平
机构
河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室河南省动物免疫学重点实验室
河南科技学院
甘肃农业大学
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1126-1129,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2007AA100606)
国家"十一五"科技支撑计划项目(2006BAK02A21)
文摘
目的:制备抗猪瘟病毒(CSFV)C株Erns/E2嵌合基因表达蛋白的单克隆抗体(mAb),探讨Erns/E2蛋白的分子结构和生物学功能。方法:在大肠杆菌RosettaTM2(DE3)中表达了猪瘟病毒(CSFV)C株Erns、E2蛋白主要抗原域的嵌合基因CSFVErns/E2蛋白;以纯化复性后的CSFVErns/E2为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗CSFVErns/E2 mAb;利用间接ELISA、Western blot、Dotblot方法鉴定mAb生物学特性。结果:获得了1株稳定分泌抗CSFVErns/E2融合蛋白的单克隆杂交瘤细胞系C8株,该株mAb的细胞培养上清效价为1∶6400,小鼠腹水效价1∶2×105。其免疫球蛋白亚类为IgG1。间接ELISA和Western blot结果显示该株mAb不与猪瘟C株细胞毒、pET-32a标签蛋白反应,仅与融合表达的CSFVErns/E2蛋白存在特异性反应。Dot blot结果表明其识别的抗原表位为E2蛋白的RSGL-CPFDTSPV氨基酸序列。结论:获得了一株能特异识别E2蛋白抗原表位的mAb,为进一步研究CSFV的分子结构及功能奠定了物质基础。
关键词
猪瘟病毒
CSFV
erns
/
e
2
嵌合基因
融合蛋白
单克隆杂交瘤细胞系
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
基于Erns和E2基因的猪瘟标记疫苗研究概述
被引量：
6
2
作者
刘元杰
邹兴启
徐璐
朱元源
张乾义
王琴
赵启祖
机构
中国兽医药品监察所
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期3038-3044,共7页
基金
公益性行业(农业)科研专项经费资助(No.201303046)~~
文摘
猪瘟(Classical swine fever,CSF)是猪的一种急性、热性和致死性传染病。该病流行范围很广,而且致死率极高,给世界养猪业造成严重危害。目前,猪瘟流行地区或国家仍然采用接种弱毒疫苗的方法作为预防猪瘟的主要策略,但接种弱毒疫苗的传统预防控制方法无法区别猪瘟疫苗免疫抗体和野毒感染抗体。为了净化、消灭猪瘟,新型标记疫苗的研究已迫在眉睫。近些年,陆续有国内外研究者应用分子生物学和基因工程方法,对猪瘟野毒株或弱毒株进行基因修饰构建出新毒株,其中以Erns和E2为基础构建新毒株的方法占据着重要地位。部分候选疫苗具有较好的免疫效果,可用于区分免疫和自然感染动物,而且有望作为新一代疫苗来替代传统弱毒疫苗。
关键词
猪瘟
标记疫苗
erns
和
e
2
基因突变
基因重组
Keywords
CSF, Mark
e
r vaccin
e
,
e
ros and
e
2
, G
e
n
e
tic mutation, G
e
n
e
r
e
combination
分类号
S858.28 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪瘟病毒C株E^(rns)/E2嵌合基因表达蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定
王丽
李学伍
腾蔓
杨艳艳
李娅丽
李艳蕊
赵东
柴书军
张改平
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
下载PDF
职称材料
2
基于Erns和E2基因的猪瘟标记疫苗研究概述
刘元杰
邹兴启
徐璐
朱元源
张乾义
王琴
赵启祖
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
6
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