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SNF2家族新成员Ercc6l的cDNA克隆与表达分析(英文) 被引量：6
1
作者 陈祥贵 李勇 +3 位作者 臧明玺 裴新荣 许雅君 高丽芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期443-448,共6页
SNF2家族蛋白在基因组复制、修复与表达中具有重要作用 .报道了SNF2家族新成员Ercc6l (excisionrepaircross complementingrodentrepairdeficiency,complementationgroup 6 like)的cDNA克隆、特性与表达分析 .通过表达序列标签 (EST)... SNF2家族蛋白在基因组复制、修复与表达中具有重要作用 .报道了SNF2家族新成员Ercc6l (excisionrepaircross complementingrodentrepairdeficiency,complementationgroup 6 like)的cDNA克隆、特性与表达分析 .通过表达序列标签 (EST)搜索和组装 ,获得了cDNA全长 4 0 0 2bp的新基因Ercc6l (GenBankAcc .NoAY172 6 88) ,然后通过RT PCR在小鼠胚胎心脏成功克隆了该基因 .Ercc6l在小鼠基因组中由两个外显子和一个内含子组成 ,定位于X染色体 ,最大开放阅读框 (ORF)编码一个含 12 4 0个氨基酸的假定蛋白质 .该假定蛋白质含有SNF2蛋白的 8个保守基序 (SNF2结构域 ) .通过与SNF2家族各亚家族的成员进行多重比对 ,初步确认Ercc6l属于ERCC6亚家族成员 .将Ercc6l编码区克隆到pEGFP C3然后转染HeLa ,3T3和B16细胞 ,融合蛋白主要定位于胞浆 .BLAST搜索检索出 6 9条小鼠EST与Ercc6l同源 ,这些EST主要来自胚胎和肿瘤组织 .对小鼠不同发育时期的多种组织进行RT PCR ,发现Ercc6l在胚胎期强表达 ,出生产后表达显著下调 . 展开更多
关键词 ercc6l 基因克隆 SNF2蛋白 表达谱 亚细胞定位
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发育相关基因Ercc6l的分子克隆与表达分析及其在酒精致畸中的作用 被引量：6
2
作者 许雅君 陈祥贵 李勇 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2004年第2期65-73,F003,共10页
背景与目的 :在GeneBank中筛选新的小鼠发育相关基因 ,研究其在酒精致畸中的作用。材料与方法 :利用EST介导的基因克隆和表达谱分析进行新基因克隆、表达和同源性分析 ;利用RT-PCR、绿色荧光蛋白标记基因转染、全胚胎原位杂交、石蜡切... 背景与目的 :在GeneBank中筛选新的小鼠发育相关基因 ,研究其在酒精致畸中的作用。材料与方法 :利用EST介导的基因克隆和表达谱分析进行新基因克隆、表达和同源性分析 ;利用RT-PCR、绿色荧光蛋白标记基因转染、全胚胎原位杂交、石蜡切片原位杂交和Northern杂交进行新基因的验证、亚细胞和组织定位及其在酒精致畸中的表达变化研究。结果 :成功克隆小鼠基因Ercc6l,其在胚胎期正常组织中强表达 ,在新生鼠表达明显减弱 ,在成年鼠几乎不表达。酒精染毒体内、外实验均显示畸变胚胎Ercc6l的表达显著降低。结论 :Ercc6l是小鼠胚胎发育相关基因 ,同时是酒精致畸作用的分子靶点。 展开更多
关键词 ercc6l 基因克隆 SNF2蛋白 酒精
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ERCC6L蛋白在胃癌组织中的表达变化及其与临床病理特征和预后的关系分析
3
作者 王鹏飞 施磊健 +1 位作者 周骁宇 张洁 《安徽医药》 CAS 2024年第10期1994-1997,I0006,共5页
目的探究ERCC6L蛋白在胃癌组织中的表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取南通大学附属启东医院2015年4月至2017年5月行手术治疗的150例胃癌病人为研究对象,收集胃癌组织及癌旁非肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qP... 目的探究ERCC6L蛋白在胃癌组织中的表达变化及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取南通大学附属启东医院2015年4月至2017年5月行手术治疗的150例胃癌病人为研究对象,收集胃癌组织及癌旁非肿瘤组织,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)及免疫组织化学法检测ERCC6L mRNA及蛋白表达水平,分析其与临床病理特征关系;采用Kaplan-Meier法分析ERCC6L蛋白表达与病人预后的关系;采用Cox回归分析影响胃癌病人预后的相关因素。结果胃癌组织中ERCC6L mRNA的相对表达量1.60±0.53显著高于癌旁非肿瘤组织1.01±0.12(t=13.30,P<0.001)、ERCC6L蛋白阳性表达率均显著高于癌旁非肿瘤组织(P<0.05)。ERCC6L蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤浸润深度、TNM分期、远处转移、分化程度有关(P<0.05)。胃癌组织ERCC6L阳性表达病人5年总生存率(19.57%)显著低于ERCC6L阴性表达病人(60.34%,P<0.05)。ER⁃CC6L阳性表达、淋巴结转移、TNMⅢ~TNMⅣ和低分化均是影响胃癌病人不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论ERCC6L在胃癌组织中高表达,与分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、远处转移及预后密切相关,是影响胃癌病人预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 胃肿瘤 ercc6l 临床病理特征 淋巴结转移 预后
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ERCC6L在肿瘤中的表达和作用
4
作者 陈宗裕 杨萌 +3 位作者 吕涵 文周 向阳 朱建国 《现代医学》 2024年第2期286-291,共6页
ERCC6L是一种新发现的DNA解旋酶,也被称为PLK1相互作用检查点解旋酶(PICH)。它最初在小鼠组织中被鉴定,并属于SNF2蛋白家族的成员之一。作为PLK1的底物,ERCC6L在控制细胞有丝分裂中扮演重要角色。很多研究报道了ERCC6L在肿瘤细胞中异常... ERCC6L是一种新发现的DNA解旋酶,也被称为PLK1相互作用检查点解旋酶(PICH)。它最初在小鼠组织中被鉴定,并属于SNF2蛋白家族的成员之一。作为PLK1的底物,ERCC6L在控制细胞有丝分裂中扮演重要角色。很多研究报道了ERCC6L在肿瘤细胞中异常表达的情况。ERCC6L的异常表达可以通过促凋亡因子抑制细胞增殖或诱导凋亡。然而,由于肿瘤环境的差异和不同肿瘤复杂的调控机制,ERCC6L对不同肿瘤的进展影响也不尽相同。在某些肿瘤中,高表达的ERCC6L可能促进肿瘤的转移,而在其他肿瘤中,高表达的ERCC6L则可能抑制肿瘤的侵袭和转移。越来越多的证据表明,在不同的肿瘤环境中,ERCC6L通过多种复杂的调控机制,在肿瘤的发生、发展和转移过程中发挥着复杂而不同的作用。因此,ERCC6L不仅可能成为一种有用的转移生物标志物,还可能成为研究肿瘤细胞代谢机制和治疗多种类型肿瘤的靶点。本文作者综述了ERCC6L在不同肿瘤中的表达、机制和功能的研究进展,并对ERCC6L在不同肿瘤中的表达情况进行了进一步的分析,为深入理解ERCC6L在肿瘤中的作用机制提供重要的参考。 展开更多
关键词 ercc6l 肿瘤机制 转移 生物标志物 体外 体内 综述
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干扰ERCC6L增强非小细胞肺癌细胞放疗敏感性
5
作者 林凤莲 刘婷婷 +1 位作者 陈延治 韩阳 《解剖科学进展》 CAS 2022年第4期433-436,441,共5页
目的探讨切除修复交叉互补酶6L(ERCC6L)在非小细胞肺癌中的表达及其与放射敏感性的关系。方法Western blot和免疫荧光验证ERCC6L在肺癌细胞系中的表达水平及亚细胞定位;Western blot检测16对癌组织及癌旁组织中ERCC6L的表达;免疫组化的... 目的探讨切除修复交叉互补酶6L(ERCC6L)在非小细胞肺癌中的表达及其与放射敏感性的关系。方法Western blot和免疫荧光验证ERCC6L在肺癌细胞系中的表达水平及亚细胞定位;Western blot检测16对癌组织及癌旁组织中ERCC6L的表达;免疫组化的方法检测肺癌和X射线照射后肺癌组织中ERCC6L的表达;用ERCC6L特异性siRNA干扰其在A549细胞中的表达,用磷酸化-γH2AX荧光焦点检测DNA双链断裂损伤的修复情况。结果ERCC6L在肺癌组织的中表达水平高于癌旁组织,在A549细胞中干扰ERCC6L并经过X射线照射后,抑制DNA双链断裂损伤的修复能力。结论干扰ERCC6L可以增强非小细胞肺癌的放射敏感性。 展开更多
关键词 ercc6l 非小细胞肺癌 X射线 放射敏感性
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1pcDNA3.1-Ercc6l真核表达载体的构建及在P19细胞内的表达
6
作者 张庆 陈祥贵 《泰山医学院学报》 CAS 2008年第3期164-168,共5页
目的构建Ercc6l的正、反义真核表达载体,并在P19胚胎癌细胞内瞬时表达,在细胞学水平对基因功能进行初步研究。方法KpnⅠ/XhoⅠ双酶切pGEM-T-Ercc6l获得目的基因Ercc6l,将其克隆到同样经过双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(-)M... 目的构建Ercc6l的正、反义真核表达载体,并在P19胚胎癌细胞内瞬时表达,在细胞学水平对基因功能进行初步研究。方法KpnⅠ/XhoⅠ双酶切pGEM-T-Ercc6l获得目的基因Ercc6l,将其克隆到同样经过双酶切的真核表达载体pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(-)Myc His6,重组质粒pcDNA3.1(+/-)-Ercc6l经菌落PCR和双酶切鉴定;脂质体介导法体外瞬时转染正义载体至P19细胞,RT-PCR检测基因在细胞内的表达活性情况。结果重组质粒经菌落PCR和KpnⅠ/XhoⅠ双酶切鉴定,表明真核表达载体构建正确;脂质体介导法瞬时转染正义载体至P19细胞后,检测表明转染细胞能够表达Ercc6l。结论成功构建了Ercc6l正、反义真核表达载体,其正义载体转染真核细胞后能在其中表达。 展开更多
关键词 ercc6l 真核表达 P19胚胎癌细胞 RT-PCR
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ERCC6L在结直肠肿瘤中的表达及其对结直肠肿瘤细胞增殖和侵袭的影响
7
作者 谢扬 张竞 +2 位作者 喻军 王凤 齐健 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第5期508-513,共6页
目的探讨DNA解旋酶ERCC6L在结直肠肿瘤中的表达及其对结直肠肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法利用GEPIA和UALCAN数据库分析ERCC6L在结直肠肿瘤组织中的表达情况;通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹(Western blotting)和免疫... 目的探讨DNA解旋酶ERCC6L在结直肠肿瘤中的表达及其对结直肠肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法利用GEPIA和UALCAN数据库分析ERCC6L在结直肠肿瘤组织中的表达情况;通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹(Western blotting)和免疫组织化学检测ERCC6L在结直肠肿瘤组织和细胞中的表达;分别用CCK8和侵袭实验检测ERCC6L对结直肠肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。结果 ERCC6L在结直肠肿瘤组织和细胞系中高表达(P<0.05);用siRNA干扰ERCC6L表达后,结直肠肿瘤细胞的增殖和侵袭能力被显著抑制。结论 ERCC6L促进了结直肠肿瘤细胞的增殖和侵袭,有可能成为癌症治疗的潜在新靶点。 展开更多
关键词 ercc6l 结直肠肿瘤 增殖 侵袭
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