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PI3K/AKT信号通路轴在肿瘤上皮细胞间质转化中作用的研究进展 被引量:10
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作者 肖尤川 李云峰 杨之斌 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第9期2147-2150,共4页
肿瘤上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤耐药、侵袭、迁移、发生远处转移等生物学行为密切相关。肿瘤微环境中多种细胞因子及其激活的信号通路均参与细胞的EMT。近年来,越来越多的文献报道PI3K/AKT信号转导途... 肿瘤上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤耐药、侵袭、迁移、发生远处转移等生物学行为密切相关。肿瘤微环境中多种细胞因子及其激活的信号通路均参与细胞的EMT。近年来,越来越多的文献报道PI3K/AKT信号转导途径在肿瘤细胞发生EMT过程中的作用尤为重要。本文将重点讨论PI3K/AKT途径在对E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-Cad)的调控及其与其他信号通路协同诱发EMT过程中的作用,并对PI3K/AKT抑制剂在肿瘤治疗的研究进行回顾。 展开更多
关键词 PI3K AKT 上皮间质转化 肿瘤
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丹参酚酸B盐对TGF-β1诱导的HK-2上皮-间充质转分化的影响 被引量:8
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作者 周娟 王飞 +1 位作者 陆海英 张悦 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期89-93,共5页
目的:研究丹参酚酸B盐(salvianolic-acid B,SA-B)对转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human human renal proximal tubular cells)转分化的影响。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应用不... 目的:研究丹参酚酸B盐(salvianolic-acid B,SA-B)对转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human human renal proximal tubular cells)转分化的影响。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应用不同剂量的TGF-β1或同一剂量作用不同时间诱导HK2细胞发生上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT),同时给予骨形成蛋白7(BMP-7,阳性对照)(50μg.L-1)和SA-B(1×10-5mol.L-1)干预观察二者对EMT的影响。应用Western印迹法和免疫荧光法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin),α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。结果:BMP-7显著抑制了TGF-β1诱导的E-cadherin下调(P<0.05)和α-SMA上调(P<0.05);而SA-B显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA表达增加(P<0.05),未见其抑制TGF-β1诱导的E-钙黏蛋白下调。结论:SA-B和BMP-7能够抑制TGF-β1诱导的HK2上皮-间充质转分化,其共同的作用是抑制了TGF-β1诱导的α-SMA上调,而SA-B对E-钙黏蛋白的调控作用有待进一步的研究。 展开更多
关键词 上皮-间充质转分化 丹参酚酸B盐 转化生长因子β1 骨形成蛋白7 人肾小管上皮细胞
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Caveolin-1与胰腺癌上皮间质转化及转移关系的研究 被引量:7
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作者 黄陈 张坤东 +3 位作者 吴卫东 江弢 曹俊 裘正军 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第7期545-547,共3页
目的 研究细胞窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)在胰腺癌上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)和转移中的作用及其相关机制.方法 免疫荧光技术、Western blot检测Cav-1及EMT分子标志物E-cadherin,β-catenin,vimentin,N-c... 目的 研究细胞窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)在胰腺癌上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)和转移中的作用及其相关机制.方法 免疫荧光技术、Western blot检测Cav-1及EMT分子标志物E-cadherin,β-catenin,vimentin,N-cadherin在高转移胰腺癌细胞系(L3.7,Panc02-H7)及低转移胰腺癌细胞系(COLO357,Panc02)中的表达,倒置相差显微镜观察上述胰腺癌细胞形态.Cav-1及相应的空载体质粒转染COLO357细胞,检测Cav-1及EMT分子标志物的表达,并观察细胞形态变化.结果 高转移胰腺癌细胞(L3.7,Panc02-H7)Cav-1及间质细胞标志物高表达,上皮细胞标志物低表达,而低转移胰腺癌细胞(COLO357,Panc02)Cav-1及上皮细胞标志物高表达,间质细胞标志物低表达.Cav-1质粒转染COLO357细胞后,Cav-1表达上调,E-cadherin表达降低而vimentin表达升高,且COLO357细胞由上皮细胞形态向间质细胞形态转变.结论 胰腺癌细胞中Cav-1表达升高与胰腺癌EMT及转移密切相关. 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 窖蛋白1 肿瘤转移 上皮间质转化
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EpCAM和HDAC6在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞迁移的影响
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作者 张月 权春姬 +4 位作者 金雪梅 张金山 张紫薇 金仁顺 李珍玲 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期402-410,共9页
目的探讨上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)和组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase,HDAC6)蛋白在前列腺癌及癌旁良性组织中的表达及与前列腺癌临床病理特征的关系,并分析两蛋白之间的相关性。探讨沉默EpCA... 目的探讨上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)和组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase,HDAC6)蛋白在前列腺癌及癌旁良性组织中的表达及与前列腺癌临床病理特征的关系,并分析两蛋白之间的相关性。探讨沉默EpCAM对前列腺癌细胞迁移及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法利用TIMER和UALCAN数据库分析EpCAM和HDAC6 mRNA在各种癌症中的表达情况及在前列腺癌和正常前列腺组织中的表达差异。采用免疫组化法观察EpCAM和HDAC6蛋白在前列腺癌和癌旁良性组织中的表达情况,分析两者间的相关性及与前列腺癌临床病理特征的关系。通过体外实验检测沉默EpCAM蛋白对前列腺癌细胞迁移能力的影响。Western blot实验检测前列腺癌细胞中EMT相关蛋白的表达。结果数据库分析结果显示,EpCAM和HDAC6 mRNA在前列腺癌中均呈高表达,且与前列腺癌Gleason评分和淋巴结转移相关。前列腺癌组织中EpCAM蛋白高表达率高于癌旁良性组织(62.61%vs 21.62%,P<0.001)。EpCAM蛋白高表达与肿瘤大小及浸润程度、Gleason评分和WHO/ISUP预后分级分组有关(P均<0.05)。前列腺癌组织中HDAC6蛋白高表达率高于癌旁良性组织(81.74%vs 43.24%,P<0.001),其表达与WHO/ISUP预后分级分组具有一定相关性(P=0.05),但差异无统计学意义。Starbase数据库检索结果显示,前列腺癌组织中EpCAM与HDAC6 mRNA的表达呈正相关(r=0.206,P=3.44e-06)。Spearman秩相关检验显示,前列腺癌组织中EpCAM与HDAC6蛋白表达呈正相关(r=0.454,P<0.001)。si-EpCAM转染DU-145前列腺癌细胞后,EpCAM和HDAC6蛋白表达减少;与si-NC组相比,si-EpCAM组的迁移、侵袭能力明显下调(P<0.001),EMT相关蛋白E-cadherin表达上调,vimentin表达下调。结论前列腺癌组织中EpCAM和HDAC6高表达与肿瘤的发生、发展和恶性程度有关。沉默EpCAM表达可抑制HDAC6表达,抑制DU145细胞侵袭能力,逆转EMT进程,EpC 展开更多
关键词 前列腺癌 EPCAM HDAC6 上皮-间质转化
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Hydrogen Sulfide Inhibits Transforming Growth Factor Beta-1 Induced Bronchial Epithelial-mesenchymal Transition 被引量:2
5
作者 Cheng-Cheng Liao Ya-Hong Chen +1 位作者 Fan Lin Yong-Fen Qi 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2015年第23期3247-3250,共4页
INTRODUCTION Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is one of the leading causes of death in the developed world and associated with a high individual and socioeconomic burden. It is characterized by persisten... INTRODUCTION Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is one of the leading causes of death in the developed world and associated with a high individual and socioeconomic burden. It is characterized by persistent airflow limitation that is usually progressive and associated with an enhanced chronic inflammatory response in the airways and the lung to noxious panicles or gases. Peri-bronchiolar fibrosis was occurred in small airways in the early state of COPD, and then followed by structure changes, and finally became persistent airflow limitation?21 Recent researches have shown that epithelial-mesenchymal transition (EMT) is one of the leading causes of fibrosis in various diseases. 展开更多
关键词 Chronic Obstructive Pulmonary Disease epithelia-mesenchymal transition Hydrogen Sulfide Small Airway Fibrosis
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子宫内膜腺癌中EMT的发生及miR200a/ZEB1信号通路在该过程中发挥的作用 被引量:3
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作者 张晓晖 颜磊 +3 位作者 齐莎莎 路真真 李明江 赵兴波 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2015年第7期48-52,57,共6页
目的检测上皮-间质转化(EMT)在子宫内膜腺癌中的发生,并探讨mi R200a/E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)信号通路在其中发挥的作用。方法 1分组:取自石蜡切片的子宫内膜腺癌为A组(n=45),正常子宫内膜为B组(n=22);取自手术中的子宫内膜腺癌标本为C... 目的检测上皮-间质转化(EMT)在子宫内膜腺癌中的发生,并探讨mi R200a/E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)信号通路在其中发挥的作用。方法 1分组:取自石蜡切片的子宫内膜腺癌为A组(n=45),正常子宫内膜为B组(n=22);取自手术中的子宫内膜腺癌标本为C组(n=34),正常子宫内膜标本为D组(n=15);2采用免疫组化法检测A、B两组间E钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、ZEB1的表达;采用Western blotting法检测C、D两组间上述3种蛋白的表达;3 Real-time RT-PCR法检测C、D两组间各蛋白相应m RNA及mi R200a的表达。结果 1 B组与A组比较,E-cadherin表达降低(P<0.05),Vimentin及ZEB1表达升高(P<0.05);2 D组与C组比较,E-cadherin蛋白及m RNA表达降低(P<0.05),Vimentin蛋白及m RNA表达升高(P<0.05),ZEB1蛋白及m RNA表达升高(P<0.05);3与C组数据相比,D组中mi R200a表达量降低(P<0.05),D组中mi R200a与E-cadherin的m RNA表达量之间存在正相关关系(r=0.63,P<0.01)。结论子宫内膜腺癌中明确发生了EMT过程,而mi R200a/ZEB1信号通路可对EMT过程中重要的分子标记物产生抑制作用。 展开更多
关键词 上皮-间质转化 子宫内膜腺癌 微小RNA200a E盒结合锌指蛋白1 调控作用
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低氧对前列腺癌PC3细胞上皮间质转化的影响 被引量:3
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作者 刘桂勇 宋洪飞 +2 位作者 刘修恒 王敏 魏少忠 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期108-111,共4页
目的探讨低氧对前列腺癌细胞上皮间质转化的影响。方法分别在常氧(常氧组)和低氧(低氧组)条件下培养PC3细胞24 h,细胞增殖MTT实验检测低氧对前列腺癌PC3细胞增殖力的影响,Transwell侵袭实验评估低氧对前列腺癌PC3细胞侵袭力的影响,Weste... 目的探讨低氧对前列腺癌细胞上皮间质转化的影响。方法分别在常氧(常氧组)和低氧(低氧组)条件下培养PC3细胞24 h,细胞增殖MTT实验检测低氧对前列腺癌PC3细胞增殖力的影响,Transwell侵袭实验评估低氧对前列腺癌PC3细胞侵袭力的影响,Western blot检测HIF-1α、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平。另外,在常氧条件下用si RNA抑制HIF-1α表达(干扰组),用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平变化。结果与常氧组比较,低氧组前列腺癌PC3细胞的增殖力和侵袭力增加,HIF-1α表达水平增加(P=0.0004),HIF-1α向核内转位;N-cadherin(P<0.0001)和Vimentin(P<0.0001)的表达水平显著增加,E-cadherin的表达水平显著下降(P<0.0001)。同时,干扰组跟常氧组比较,抑制HIF-1α表达使N-cadherin(P=0.0002)和Vimentin(P=0.0002)的表达水平显著下降,而使E-cadherin的表达水平显著增加(P<0.0001)。结论低氧可能通过调节HIF-1α表达促进前列腺癌PC3细胞的上皮间质转化。 展开更多
关键词 低氧 低氧诱导因子-1Α 前列腺癌 上皮间质转化
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Slit2对高糖诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转分化的作用及机制 被引量:2
8
作者 胡成芳 李艺 +4 位作者 刘军辉 王小龙 侯世会 官涛 黄云剑 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期652-658,共7页
目的探讨Slit2/ROBO1信号通路在高糖诱导肾小管上皮细胞上皮间质细胞转分化(EMT)中的作用及机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,进行高糖浓度梯度实验,随机分为正常组、对照组1、对照组2和高糖组1、高糖组2;同时进行高糖时间梯度实... 目的探讨Slit2/ROBO1信号通路在高糖诱导肾小管上皮细胞上皮间质细胞转分化(EMT)中的作用及机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,进行高糖浓度梯度实验,随机分为正常组、对照组1、对照组2和高糖组1、高糖组2;同时进行高糖时间梯度实验,随机分为正常组、对照组、高糖24h组、高糖36h组和高糖48h组,采用Western blotting检测HK-2细胞中Slit2、ROBO1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白的表达变化,筛选出最佳高糖刺激浓度和时间。采用Slit2过表达质粒及阴性对照质粒转染HK-2细胞,验证转染成功后,随机分为正常组、对照组、高糖组、高糖+空载组及高糖+Slit2组,经最佳高糖浓度及时间刺激后提取总蛋白,Western blotting检测纤维连接蛋白及α-SMA的表达变化。结果在高糖浓度梯度实验中,与正常组相比,高糖组1、高糖组2的Slit2表达明显下降(分别为0.647±0.048、0.210±0.023vs.1.000±0.050),ROBO1表达明显下降(分别为0.703±0.041、0.303±0.022vs.1.000±0.057),纤维连接蛋白表达明显增加(分别为1.953±0.042、2.997±0.078vs.0.990±0.059),α-SMA表达明显增加(分别为1.767±0.012、2.427±0.059vs.1.033±0.067),差异均有统计学意义(P<0.05)。与高糖组1相比,高糖组2的Slit2、ROBO1表达下降,纤维连接蛋白和α-SMA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在高糖时间梯度实验中,与正常组相比,高糖36h组、高糖48h组的Slit2表达明显下降(分别为0.557±0.020、0.450±0.055vs.0.943±0.032),ROBO1表达下降(分别为0.600±0.023、0.227±0.028vs.1.000±0.058),高糖24h组、高糖36h组、高糖48h组纤维连接蛋白表达增加(分别为1.247±0.052、1.733±0.084、2.780±0.090vs.0.970±0.040),α-SMA表达增加(分别为1.277±0.041、1.767±0.120、2.537±0.078vs.1.033±0.067),差异均有统计学意义(P<0.05)。与高糖24h组相比,高糖36h组、高糖48h组的Slit2表达下降(分别为0.557±0.020、0.450±0.055vs.0.893±0.034 展开更多
关键词 SLIT2 ROBO1 上皮间质转分化 高糖 HK-2细胞
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赖氨酰氧化酶样蛋白2在肝细胞癌发生发展中的作用研究进展 被引量:1
9
作者 申亚琼 李皎 +2 位作者 李兴欣 徐敬 金焰 《肝癌电子杂志》 2023年第2期41-44,共4页
赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)是赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)家族成员之一,可催化细胞外基质中胶原蛋白与弹性蛋白共价交联,在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中过表达可促进肝癌细胞生长、肿瘤侵袭及... 赖氨酰氧化酶样蛋白2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)是赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)家族成员之一,可催化细胞外基质中胶原蛋白与弹性蛋白共价交联,在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中过表达可促进肝癌细胞生长、肿瘤侵袭及转移。近年来,越来越多的证据表明LOXL2在HCC的发生、发展中发挥着关键作用,较高水平的LOXL2是影响HCC患者预后的独立因素,提示其有作为治疗靶点的巨大潜力。 展开更多
关键词 赖氨酰氧化酶样蛋白2 肝细胞癌 肿瘤微环境 血管生成拟态 上皮细胞-间充质细胞转化
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GLI1与胃癌上皮间质转换的关系及临床研究 被引量:2
10
作者 林智平 段炤 《中国当代医药》 2017年第29期49-52,共4页
目的观察GLI1表达与胃癌上皮间质转换的关系。方法收集2006年1月~2011年12月诊断明确、资料完整的58例手术切除胃癌标本,做成组织芯片,采用免疫组化SP的方法检测组织芯片中胃癌组织及正常胃黏膜组织中GLI1、E-cadherin、N-cadherin的表... 目的观察GLI1表达与胃癌上皮间质转换的关系。方法收集2006年1月~2011年12月诊断明确、资料完整的58例手术切除胃癌标本,做成组织芯片,采用免疫组化SP的方法检测组织芯片中胃癌组织及正常胃黏膜组织中GLI1、E-cadherin、N-cadherin的表达。结果 GLI1在胃癌中表达较正常组织高,与胃癌的淋巴转移、临床分期、Lauren分型、肿瘤分化明显有关,差异有统计学意义(P<0.05);E-cadherin在正常胃黏膜组织表达比胃癌组织高,与胃癌的淋巴转移、临床分期、Lauren分型、肿瘤分化明显有关,差异有统计学意义(P<0.05);N-cadherin在胃癌中表达高于正常胃黏膜组织,与胃癌的淋巴转移、临床分期、Lauren分型、肿瘤分化明显有关,差异有统计学意义(P<0.05);GLI1表达与上皮间质转换的状态有关,差异有统计学意义(P<0.01)。结论在胃癌组织中GLI1表达与E-cadherin、N-cadherin有关,提示GLI1可能参与了EMT过程。 展开更多
关键词 胃癌 GLI1 上皮间质转换
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EGFR突变阳性非小细胞肺癌中上皮间质转化对EGCG逆转吉非替尼耐药的作用 被引量:2
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作者 侯磊 安改丽 +3 位作者 孙晶莹 冯阳蒙 霍雪萍 赵永丽 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第7期812-817,共6页
目的探索表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)在EGFR突变阳性非小细胞肺癌中逆转吉非替尼耐药与上皮间质转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法首先构建吉非替尼耐药的PC9细胞。将实验分为5组... 目的探索表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)在EGFR突变阳性非小细胞肺癌中逆转吉非替尼耐药与上皮间质转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法首先构建吉非替尼耐药的PC9细胞。将实验分为5组,分别为PC9耐药组、EGCG处理PC9耐药细胞的EGCG组、吉非替尼处理PC9耐药细胞的吉非替尼组、吉非替尼联合EGCG处理PC9耐药细胞的吉非替尼+EGCG组以及PC9组。MTT法检测细胞半数致死量(IC 50)。流式细胞仪检测细胞周期及凋亡变化。Western blot检测细胞Caspase-3、Bcl-2、E-cadherin与N-cadherin蛋白表达。结果与吉非替尼组比较,吉非替尼+EGCG组IC 50明显降低(P<0.05)。与PC9耐药组、吉非替尼组及EGCG组比较,吉非替尼+EGCG组细胞G2/M期增多(P<0.05),凋亡百分数增多(P<0.05)、Caspase-3表达增多(P<0.05),Bcl-2表达减少(P<0.05)。与PC9组比较,PC9耐药组细胞E-cadherin表达减少(P<0.05),N-cadhrein表达增多(P<0.05);与PC9耐药组比较,EGCG组细胞E-cadherin表达增多,N-cadhrein表达减少(P<0.05)。结论EGCG能够逆转吉非替尼耐药,其中对EMT抑制发挥了一定作用。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 上皮间质转化 吉非替尼 非小细胞肺癌
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TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响 被引量:2
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作者 龙金晶 刘星娅 徐美 《肿瘤药学》 CAS 2022年第2期191-196,共6页
目的探讨TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中的TUSC3表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系。构建TUSC3过表达的慢病毒载体(LV11-T... 目的探讨TUSC3在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中的TUSC3表达水平,分析其表达与宫颈癌临床病理特征的关系。构建TUSC3过表达的慢病毒载体(LV11-TUSC3)及对照载体(LV11-NC),选取过表达TUSC3的SiHa细胞作为LV11-TUSC3组,感染对照载体的SiHa细胞作为LV11-NC组,未感染慢病毒的SiHa细胞作为Con组。采用qRT-PCR检测各组细胞中TUSC3的mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法检测TUSC3、E-cadherin、Ncadherin、GRP78、ATF6的蛋白表达水平,MTT实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果宫颈癌组织中TUSC3 mRNA表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。TUSC3表达水平与宫颈癌患者的年龄、肿瘤体积、宫颈浸润深度无关(P>0.05),而与FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。与Con组和LV11-NC组相比较,LV11-TUSC3组细胞TUSC3 mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin表达上调,N-cadherin表达下调,细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,内质网应激水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TUSC3在宫颈癌组织中表达下调,上调其表达可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖、上皮间质转化、迁移和侵袭、内质网应激。TUSC3可能成为宫颈癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 TUSC3 宫颈癌 上皮间质转化 迁移 侵袭 内质网应激
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肾透明细胞癌组织中Cripto-1的表达及其对预后的预测价值 被引量:2
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作者 罗文山 赵凌昆 +1 位作者 刘婷婷 张秀利 《中国实验诊断学》 2020年第3期394-398,共5页
目的观察Cripto-1在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达情况,并统计分析其对预后的价值。方法收集76对ccRCC和周围正常肾组织的石蜡标本,应用免疫组织化学法(IHC)、RT-qPCR和Western blot检测其中Cripto-1的表达情况,并分析其表达与预后的关... 目的观察Cripto-1在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达情况,并统计分析其对预后的价值。方法收集76对ccRCC和周围正常肾组织的石蜡标本,应用免疫组织化学法(IHC)、RT-qPCR和Western blot检测其中Cripto-1的表达情况,并分析其表达与预后的关系。体外实验分析Cripto-1对细胞系的增殖、迁移、侵袭的影响。结果Cripto-1在ccRCC组织中的表达显著高于正常肾组织(P<0.05);Cripto-1高表达的患者预后更差;Cripto-1可以促进肿瘤细胞增殖,提高迁移和侵袭的能力。结论Cripto-1在肾透明细胞癌中表达升高,可以作为判断预后的一项指标,同时也可能成为治疗ccRCC的新靶点。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 Cripto-1 免疫组织化学法 上皮-间质转化 预后
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Klotho对FGF2诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转分化的抑制作用 被引量:2
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作者 管旭 杨可 +4 位作者 肖堂利 李艺 何婷 徐新丽 赵景宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1327-1330,共4页
目的探讨Klotho抑制成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor2,FGF2)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法重组人Klotho蛋白预孵育前后,倒置显微镜观察FGF2对H... 目的探讨Klotho抑制成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor2,FGF2)诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间充质转分化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制。方法重组人Klotho蛋白预孵育前后,倒置显微镜观察FGF2对HK-2细胞形态的影响,免疫荧光检测上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化,Western blot检测α-SMA、E-cadherin和ERK1/2的表达变化。结果 100 ng/mL的FGF2作用于HK-2细胞48 h后,HK-2细胞变成长梭形,细胞间隙明显增大,上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降,间充质细胞标志物α-SMA表达明显升高(P<0.05),提示FGF2可以诱导HK-2细胞发生EMT。而Klotho蛋白预孵育可以显著抑制FGF2诱导的EMT,并且FGF2/FGFR(FGFs受体)下游信号分子pERK1/2的表达明显减弱(P<0.05)。结论 Klotho可以通过减弱FGF2信号通路活化抑制FGF2诱导的HK-2细胞EMT,Klotho可能参与了肾间质纤维化的发生和发展。 展开更多
关键词 KLOTHO FGF2 上皮-间充质转分化
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氰酸盐诱导氧化应激促进肾小管上皮细胞上皮–间充质转化 被引量:1
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作者 田宽 袁德智 +8 位作者 胡玲 张滔 周鹏 郭星娴 陈益 郭小宇 李林颖 李静 冉建华 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第2期228-234,共7页
该研究探讨氰酸盐(cyanate)诱导肾小管上皮细胞氧化应激损伤和促进肾纤维化的作用。氰酸盐作用HK-2肾小管上皮细胞后, CCK8法检测其对细胞活力的影响;倒置显微镜观察细胞形态的改变; DCFH-DA法检测细胞ROS水平;细胞免疫荧光和Western b... 该研究探讨氰酸盐(cyanate)诱导肾小管上皮细胞氧化应激损伤和促进肾纤维化的作用。氰酸盐作用HK-2肾小管上皮细胞后, CCK8法检测其对细胞活力的影响;倒置显微镜观察细胞形态的改变; DCFH-DA法检测细胞ROS水平;细胞免疫荧光和Western blot分别检测E-cadherin、Fibronectin、α-SMA的表达; Western blot检测TGF-β的表达水平。结果显示, 2 mmol/L氰酸盐明显下调HK-2细胞的活力(P<0.05),细胞形态变为长梭形。氰酸盐作用24 h后, HK-2细胞内ROS水平呈浓度依赖性升高。免疫荧光和Western blot结果均显示,氰酸盐作用24 h后, HK-2的Fibronectin、α-SMA表达升高, E-cadherin表达下降; TGF-β的表达水平随氰酸盐浓度升高而上调(P<0.05)。以上结果表明,氰酸盐诱导肾小管上皮细胞产生过量ROS,上调TGF-β水平促进细胞上皮–间充质细胞转化(epithelia-mesenchymal transition, EMT)。 展开更多
关键词 氰酸盐 HK-2细胞 氧化应激 上皮–间充质细胞转化
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钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ对前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭及上皮-间充质转化的影响 被引量:1
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作者 彭璇 陈晖 +1 位作者 王敏 刘修恒 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2957-2960,共4页
目的观察钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)活化的抑制对人前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭能力及上皮一间充质转化(EMT)相关信号通路的影响。方法通过CaMKⅡ特异性抑制剂KN93处理PC3细胞,抑制其活化后,采用噻唑蓝(Mrrr)法检测PC3细... 目的观察钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)活化的抑制对人前列腺癌PC3细胞增殖、侵袭能力及上皮一间充质转化(EMT)相关信号通路的影响。方法通过CaMKⅡ特异性抑制剂KN93处理PC3细胞,抑制其活化后,采用噻唑蓝(Mrrr)法检测PC3细胞增殖抑制率,Transwell小室法检测PC3细胞侵袭能力,Westernblot测定PC3细胞中磷酸化CaMKII(p-CaMKII)、核因子-KB(NF-KB)、锌指转录因子(Snail)、Raf激酶抑制蛋白(RKIP)的表达。结果不同浓度KN93处理PC3细胞24h后,5、10、20p,mol/L药物组p-CaMKII蛋白表达(0.453±0.070、0.368±0.076、0.308±0.011)较对照组(0.596±0.028)显著减少(P〈0.05),40g,mol/L药物组未见明显蛋白表达。各药物组24h增殖抑制率分别为(6.88±1.79)%、(12.92±2.74)%、(17.88±2.86)%、(31.23±4.24)%;48h增殖抑制分别为(16.53±2.45)%、(29.02±1.74)%、(40.52±1.98)%、(52.26±3.51)%。Transwell小室培养48h后,对照组和各药物组穿膜细胞数分别为(149±17)、(97±7)、(59±9)、(51±7)、(24±3)μmol/高倍视野,各药物组穿膜细胞数均明显减少(P〈0.01)。Westernblot结果示,对照组和各药物组NF.KBp65蛋白的相对表达量差异无统计学意义(P〉0.05)。而各药物组p-NF-KBp65蛋白的相对表达量(0.483±0.052、0.490±0.064、0.432±0.057、0.341±0.008)较对照组(0.597±0.020)明显降低(P〈0.05)。与对照组(0.716±0.046)比较,5、10μmol/L药物组Snail蛋白的相对表达量(0.337±0.058、0.137±0.045)显著降低(P〈0.01),20、40μmol/L药物组甚至未见明显蛋白表达。而药物组RKIP蛋白的相对表达量(0.720±0.003、0.732±0.008、0.991±0.025、1.116±0.020)显著高于对照组(0.372±0.010,P〈0.01)。结论CaMK 展开更多
关键词 前列腺癌 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 增殖 侵袭 上皮-间充质转化
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Downregulation of MTDH using short hairpin RNA inhibited EMT in breast cancer cells
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作者 Heng Cao Zhaozhe Liu +3 位作者 Dongchu Ma Zhenyu Ding Cheng Du Xiaodong Xie 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2013年第7期326-331,共6页
Objective: Metadherin (MTDH) could regulate epithelial-mesenchymal transition (EMT), and is involved in tumor metastasis.This study was designed to observe the effect of MTDH-short hairpin RNA (shRNA) on EMT, a... Objective: Metadherin (MTDH) could regulate epithelial-mesenchymal transition (EMT), and is involved in tumor metastasis.This study was designed to observe the effect of MTDH-short hairpin RNA (shRNA) on EMT, and the role of MTDH in breast tumor metastasis. Methods: RNA interference plasmid that can express shRNA targeting MTDH or shRNA-nega- tive plasmid that does not match any known human coding mRNA was designed, constructed and named MTDH-shRNA and MTDH-shRNA-neg, which were transiently transfected into MDA-MB-231 cells using LipofectamineTM2000. After 48 h, the levels of MTDH, E-cadherin and a-SMA expression were determined by reverse transcription-polymerase chain reactin (RT- PCR), Western blot. The invasion and immigration potential was examined by Transwell chamber invasion or migration assay. Results: Compared with MDA-MB-231, the MTDH mRNA level was down-regulated by 41.2%, the MTDH protein level was down-regulated by 40.3%. The invasion and immigration potential of MDA-MB-231 cells was decreased after transfection of MTDH-shRNA. Compared with MDA-MB-231 or MTDH-shRNA-neg, the mRNA and protein level of a-SMA was reduced and E-candherin were increased in MTDH-shRNA, with statisticat significance. Conclusion: Downregulation of MTDH increase E-candherin expression and reduced a-SMA expression, which inhibit EMT in MDA-MB-231 cells. This knockdown significantly suppresse migration and invasion in MDA-MB-231 cells. 展开更多
关键词 metadherin (MTDH) breast cancer epithelia-mesenchymal transition (EMT) invasion IMMIGRATION
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白藜芦醇对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的抑制作用
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作者 何婷 管旭 +5 位作者 孙蕾 杨可 肖堂利 徐新丽 杨琴 赵景宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期1572-1576,共5页
目的探讨白藜芦醇对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)发生上皮-间充质细胞转分化(epitheliamesenchymal transition,EMT)的抑制作用及机制。方法体外培养HK-2细胞,分为正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、高糖组(HG,30 mmol/L)、白藜芦醇组(RES... 目的探讨白藜芦醇对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)发生上皮-间充质细胞转分化(epitheliamesenchymal transition,EMT)的抑制作用及机制。方法体外培养HK-2细胞,分为正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、高糖组(HG,30 mmol/L)、白藜芦醇组(RES,10μmol/L)、高糖(30 mmol/L)+白藜芦醇(10μmol/L)组(HG+RES)、二苯基碘(diphenyleneiodonium)组(DPI,10μmol/L)、高糖(30 mmol/L)+DPI(10μmol/L)组(HG+DPI)。倒置显微镜下观察高糖对细胞形态的影响。免疫荧光检测上皮细胞标志物波形蛋白(cytokeratin)及间充质细胞标志物波形蛋白(vimentin)的表达变化,Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、NADPH氧化酶亚基(NOXs)的表达变化,DCFH-DA法检测细胞内ROS水平。结果与正常对照组相比,高糖处理后的HK-2细胞失去原有形态,呈长梭形改变,上皮细胞标志物cytokeratin及E-cadherin表达明显减少,间充质细胞标志物vimentin及α-SMA表达明显升高(P<0.01),同时NADPH氧化酶亚基NOX1、NOX4表达明显升高(P<0.01),NOX2无明显变化,ROS产生明显增多[(1 723.82±303.97)vs(2 579.36±353.76),P<0.01],而加入白藜芦醇或NADPH氧化酶抑制剂DPI预孵育后,均能抑制高糖诱导的HK-2细胞EMT(P<0.01)和ROS[(1 803.36±199.54)或(1 837.45±266.83)vs(2 579.36±353.76),P<0.01]产生增多,并且白藜芦醇可以明显抑制高糖诱导的NOX1以及NOX4表达升高(P<0.01)。结论白藜芦醇可能通过抑制NADPH氧化酶降低肾小管上皮细胞ROS生成,进而抑制高糖状态下HK-2细胞EMT的发生。 展开更多
关键词 白藜芦醇 高糖 上皮-间充质转分化 NADPH氧化酶
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肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达及其与上皮-间质转化的相关性 被引量:30
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作者 田茗源 王林辉 +2 位作者 张雄 罗红池 李昱 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第9期1068-1071,共4页
目的探讨肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达及其与上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关性。方法采用免疫组化SP法检测44例肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达,并分析二者与肺癌临床特征及EMT之间的相关... 目的探讨肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达及其与上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关性。方法采用免疫组化SP法检测44例肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达,并分析二者与肺癌临床特征及EMT之间的相关性。结果肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达率分别为40.9%和25.0%;中晚期肺癌(Ⅲ-Ⅳ)中E-cadherin的表达率(16.7%)明显低于早期肺癌(Ⅰ-Ⅱ)(50.0%),有淋巴结转移肺癌组织中E-cadherin的表达率(17.6%)低于无淋巴结转移肺癌组织(55.6%),且差异均有统计学意义(P<0.05);中晚期肺癌组织中Vimentin的表达率(58.3%)明显高于早期肺癌组织(12.5%),在有淋巴结转移组的表达率(41.2%)高于无淋巴结转移组(14.8%),且差异均有统计学意义(P<0.05);肺癌组织中E-cadherin与Vimentin的表达呈负相关(r=-0.397,P<0.05)。结论 E-cadherin的表达降低和Vimentin的表达升高与肺癌的淋巴结转移、病理分期相关,E-cadherin和Vimentin参与了EMT过程,在肺癌转移中具有重要作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 E-CADHERIN VIMENTIN 上皮-间质转化
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下调MTDH基因表达对乳腺癌细胞转移潜能影响机制研究 被引量:8
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作者 刘兆喆 曹恒 +4 位作者 丁震宇 杜成 王璐 韩雅玲 谢晓冬 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期575-579,共5页
目的:通过观察shRNA干扰MTDH基因逆转乳腺肿瘤上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),探讨MTDH在乳腺肿瘤侵袭转移中的作用机制。方法:构建能表达针对MTDH的干扰表达载体MTDH-shRNA和阴性对照干扰表达载体MTDH-shRNA-ne... 目的:通过观察shRNA干扰MTDH基因逆转乳腺肿瘤上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),探讨MTDH在乳腺肿瘤侵袭转移中的作用机制。方法:构建能表达针对MTDH的干扰表达载体MTDH-shRNA和阴性对照干扰表达载体MTDH-shRNA-neg并用脂质体转染法瞬时转染MDA-MB-231细胞。转染48h后,采用RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测MTDH、mTOR、S6K1、E-cadherin和α-SMA的表达水平;Transwell小室体迁移和外侵袭实验反映细胞迁移和侵袭转移能力的变化。结果:相对于空白对照组,实验组中MTDH基因在mRNA水平降低41.2%,t=12.655,P<0.001;蛋白水平上降低40.3%,t=11.910,P<0.001。与空白对照组或阴性对照组相对比,下调MTDH表达后可以促使上皮标记基因E-cadherin的表达水平升高,而间充质标记基因α-SMA、mTOR和S6K1的表达水平降低,差异有统计学意义,P<0.05。与空白对照组相对比,转染shRNA-MTDH质粒后,细胞迁移能力降低44.3%,t=7.309,P=0.002;侵袭能力降低35.2%,t=8.812,P=0.001。结论:下调MTDH基因表达,可以抑制乳腺癌MDA-MB-231发生EMT;降低其侵袭和迁移能力。下调MTDH基因表达后,抑制mTOR/S6K1信号通路表达,MTDH基因可能通过mTOR/S6K1信号通路介导EMT的发生。 展开更多
关键词 异黏蛋白 乳腺肿瘤 上皮细胞间质转化 侵袭 迁移
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