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杂色云芝漆酶的分离、纯化和酶学特性研究 被引量：23
1
作者 吴坤 闵航 +3 位作者 朱显峰 贾新成 张世敏 喻子牛 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第2期173-179,共7页
杂色云芝发酵液,经超滤、DEAE-Sephadex A250柱层析两步分离、纯化出两型漆酶.以愈创木酚与酶带在适当条件下反应呈棕红色谱带鉴定出漆酶谱带.两型漆酶分别命名为LacA和LacB.经测定两漆酶亚基的分子量分别为66.0kDa和30.7kDa;等电点pI... 杂色云芝发酵液,经超滤、DEAE-Sephadex A250柱层析两步分离、纯化出两型漆酶.以愈创木酚与酶带在适当条件下反应呈棕红色谱带鉴定出漆酶谱带.两型漆酶分别命名为LacA和LacB.经测定两漆酶亚基的分子量分别为66.0kDa和30.7kDa;等电点pI分别为4.79和5.18;LacA的最适作用温度是40℃,LacB为50℃;保温2h, LacA的半失活温度为60℃,LacB为90℃;LacA和LacB催化愈创木酚的酶活最适pH值均为4.0; 二者的稳定pH值也都在2.5～5.5之间.LacA催化氧化愈创木酚的Km和Vmax分别为286.5μmol·L-1和292.4nmol·mL-1·min-1;LacB催化氧化愈创木酚的Km和Vmax分别为813.0μmol·L-1和127.4nmol·mL-1·min-1. 展开更多
关键词 漆酶 杂色云芝 酶的纯化 酶学特性
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酿造酱油米曲霉产中性蛋白酶提取与酶学性质研究 被引量：17
2
作者 汤鸣强 郑挺 +1 位作者 曾小芳 朱晓清 《中国调味品》 CAS 北大核心 2008年第2期38-40,50,共4页
对米曲霉菌种F-81所产中性蛋白酶的提取及部分性质进行了研究。结果表明：硫酸铵分级沉淀的饱和浓度范围为40％～80％；该中性蛋白酶的最适作用温度为60℃，最适pH值为7．0。40℃下酶稳定性较好，60℃下处理20min，粗酶中几乎检测不到... 对米曲霉菌种F-81所产中性蛋白酶的提取及部分性质进行了研究。结果表明：硫酸铵分级沉淀的饱和浓度范围为40％～80％；该中性蛋白酶的最适作用温度为60℃，最适pH值为7．0。40℃下酶稳定性较好，60℃下处理20min，粗酶中几乎检测不到酶活力；中性蛋白酶pH稳定范围为6．0～8．0。Km值为2．84mg／mL；最大反应速度Vmax为0．32mg／（min·mL）。Mg^2＋对酶活有激活作用，Cu^2＋、Fe^3＋、Zn^2＋、Mn^2＋不同程度抑制酶活性，其中Cu^2＋、Fe^3＋强烈抑制酶活性。 展开更多
关键词 中性蛋白酶 酶学性质 米曲霉
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细菌脱色酶TpmD对三苯基甲烷类染料脱色的酶学特性研究 被引量：17
3
作者 任随周 郭俊 +2 位作者 王亚丽 岑英华 孙国萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期385-389,共5页
从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行有效脱色的脱色酶，命名为TpmD。该酶的亚基分子量为29．4kDa，等电点为5．6。该酶催化上述4种三苯基甲烷类染料脱色反应的适合温度为40～6... 从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行有效脱色的脱色酶，命名为TpmD。该酶的亚基分子量为29．4kDa，等电点为5．6。该酶催化上述4种三苯基甲烷类染料脱色反应的适合温度为40～60℃，适合pH范围为5．5～9．0。动力学参数测定结果显示TpmD对结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿的Km值分别为24．3、40．6、54．2、68．5μmol^-1·L^-1，Vmax值分别为19．6、74．1、82．8、115．6μmol^-1·L^-1。结晶紫为该酶的最适反应底物。TpmD催化的脱色反应依懒于NADH／NADPH及分子氧的存在，显示该酶属于NADH／NADPH依赖型的氧化酶类。这是国内外首次关于细菌中三苯基甲烷类染料脱色酶酶学性质的描述。 展开更多
关键词 脱色酶 嗜水气单胞菌 三苯基甲烷类染料 酶学特性
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细菌脱色酶TpmD的酶学特性研究 被引量：10
4
作者 任随周 郭俊 +2 位作者 王亚丽 岑英华 孙国萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期823-826,共4页
从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行高效脱色的脱色酶,命名为TpmD。在测定TpmD分子量、等电点及对不同三苯基甲烷染料脱色的动力学参数、脱色过程对分子氧及NADH/NADPH具有依... 从嗜水气单胞菌DN322中分离纯化出能够对三苯基甲烷类染料结晶紫、碱性品红、灿烂绿及孔雀绿进行高效脱色的脱色酶,命名为TpmD。在测定TpmD分子量、等电点及对不同三苯基甲烷染料脱色的动力学参数、脱色过程对分子氧及NADH/NADPH具有依赖性的基础上,又进一步从黄素FAD/FMN对酶活力的影响、酶抑制剂、酶蛋白N-末端测序及酶溶液的特征吸收光谱等方面对TpmD的酶学本质进行了分析。结果表明,TpmD不含核黄素,其脱色活性也不因加入FAD或FMN而提高。TpmD的N-末端氨基酸序列与多种氧化还原酶具有同源性。甲吡酮及维生素C(Vc)对TpmD的脱色活性具有明显的抑制作用。TpmD酶蛋白的溶液在408nm处有一特征吸收峰,但在连二亚硫酸钠的还原条件下通入CO气体后,该酶却不具有P450酶在450nm处的特征吸收峰。上述结果显示脱色酶TpmD是一种新的氧化酶。 展开更多
关键词 脱色酶 三苯基甲烷类染料 酶学特性
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重组华根霉脂肪酶的酶学性质及其对面团热机械学和烘焙特性的影响 被引量：11
5
作者 张峦 黄立群 +3 位作者 喻晓蔚 徐岩 黄卫宁 TILLEY Michael 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第13期158-163,共6页
对一种新型重组华根霉脂肪酶(Rhizopus chinensis lipase,RCL)的酶学性质进行研究,并利用酶流变分析仪、质构分析仪研究该酶对面团热机械学特性及烘焙特性的影响。结果表明:该酶的最适反应条件为40℃、pH8.5;其在40℃内、pH3～9范围内... 对一种新型重组华根霉脂肪酶(Rhizopus chinensis lipase,RCL)的酶学性质进行研究,并利用酶流变分析仪、质构分析仪研究该酶对面团热机械学特性及烘焙特性的影响。结果表明:该酶的最适反应条件为40℃、pH8.5;其在40℃内、pH3～9范围内稳定性较好,冻干粉酶比活力约为17640U/g。通过与另一种商业脂肪酶(AY"AMANO")的对比研究发现,重组华根霉脂肪酶不仅显著影响面团的热机械学特性,而且能够增加面包的比容和弹性,降低面包的硬度、黏聚性和咀嚼性。 展开更多
关键词 重组脂肪酶 酶学性质 烘焙 酶流变分析仪 质构分析
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真菌木聚糖酶产生菌的筛选及酶学性质研究 被引量：7
6
作者 吴萍 史钧 骆丙国 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期159-163,共5页
本实验通过土壤稀释涂布法,经过初筛、复筛,筛选出了两株酶活力较高真菌菌株C_4和G_1,在此基础上对它们生长的最佳碳源选择、酶学性质进行了研究。结果表明:菌株C_4产酶的最佳碳源为玉米芯-麸皮,培养24h就可以达到产酶高峰,其酶活力达65... 本实验通过土壤稀释涂布法,经过初筛、复筛,筛选出了两株酶活力较高真菌菌株C_4和G_1,在此基础上对它们生长的最佳碳源选择、酶学性质进行了研究。结果表明:菌株C_4产酶的最佳碳源为玉米芯-麸皮,培养24h就可以达到产酶高峰,其酶活力达6582.29U/ml。此酶反应最适温度为40℃,在50℃以下比较稳定,最适反应pH值为5.0,并且pH稳定性比较好;菌株G_1产酶的最佳碳源为玉米芯,培养96h就可以达到产酶高峰,其酶活力到达6301.04U/ml。此酶反应的最适温度是40℃,在40℃以下比较稳定,最适反应pH值为5.0,但pH值稳定性不如菌株C_4。 展开更多
关键词 真菌 木聚糖酶 酶学性质 筛选
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香菇漆酶的纯化及部分性质研究 被引量：6
7
作者 王方忠 朱启忠 +3 位作者 董学卫 林金飞 曲悦文 徐国英 《北方园艺》 CAS 北大核心 2008年第6期36-38,共3页
对香菇漆酶进行了丙酮分级沉降、半透膜透析、DEAE-纤维素及Sephadex G100柱层析纯化，并研究了漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件。结果表明：在该培养条件下，香菇第10天达产酶高峰，峰值酶活为216U/mL，酶作用的最适pH值为3.6，在pH值3... 对香菇漆酶进行了丙酮分级沉降、半透膜透析、DEAE-纤维素及Sephadex G100柱层析纯化，并研究了漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件。结果表明：在该培养条件下，香菇第10天达产酶高峰，峰值酶活为216U/mL，酶作用的最适pH值为3.6，在pH值3.6-4.6有较强的稳定性。最适酶解温度为30℃，Ba2＋、Cu2＋对香菇漆酶有激活作用，而Ag＋、Fe3＋则能明显抑制漆酶活性，其它离子影响相对较小。以邻联甲苯胺为底物的表观Km值为1.68mmol/L。 展开更多
关键词 香菇 漆酶 纯化 酶学性质
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重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的纯化及部分酶学性质研究 被引量：7
8
作者 谢焱 顾国贤 李崎 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第20期8510-8512,共3页
[目的]研究重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的性质。[方法]由重组大肠杆菌制备重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶发酵液,经乙醇分级沉淀和DEAE-650M离子交换层析分离纯化后进行SDS-PAGE纯度鉴定,最后分析纯化后重组酶的酶学性质。[结果]SDS-PAGE分析表... [目的]研究重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的性质。[方法]由重组大肠杆菌制备重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶发酵液,经乙醇分级沉淀和DEAE-650M离子交换层析分离纯化后进行SDS-PAGE纯度鉴定,最后分析纯化后重组酶的酶学性质。[结果]SDS-PAGE分析表明纯化后得到了较纯的重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶,比活力达13 437 U/mg,纯化倍数为19.85倍,回收率为20.60%,分子量约30 kDa。纯化后重组酶的最适pH值为6.0,pH值4.5～6.0较稳定;最适温度为50℃,40～50℃较稳定;Cu2＋和Fe2＋对其活力有显著的抑制作用,Mg2＋、Zn2＋和Mn2＋对其活力有抑制作用,比较适合在啤酒酿造上使用。[结论]该研究为重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶的工业化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌 Β-1 3-1 4-葡聚糖酶 纯化 酶学性质
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滑子蘑菌渣粗纤维素酶浸提及其酶学特性研究 被引量：6
9
作者 马怀良 龚振杰 +2 位作者 任荣 李大伟 郭文学 《中国食用菌》 北大核心 2011年第1期48-50,共3页
利用水浸提法浸提滑子蘑菌渣纤维素酶,选取浸提时间、液料比和温度做单因素试验,然后通过正交试验优化滑子蘑菌渣纤维素酶的浸提工艺,并对结果进行了统计分析。结果表明,浸提时间、液料比和温度对纤维素酶浸提均有极显著性影响,最佳浸... 利用水浸提法浸提滑子蘑菌渣纤维素酶,选取浸提时间、液料比和温度做单因素试验,然后通过正交试验优化滑子蘑菌渣纤维素酶的浸提工艺,并对结果进行了统计分析。结果表明,浸提时间、液料比和温度对纤维素酶浸提均有极显著性影响,最佳浸提条件为温度30℃、时间1.5 h、液料比50∶1。滑子蘑菌渣羧甲基纤维素酶活力最适pH为4.4,最适温度为70℃;滤纸酶活力最适pH为6.0,最适温度为60℃。 展开更多
关键词 纤维素酶 浸提工艺 菌渣 滑子蘑 酶学特性
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巴西橡胶树胶乳磷脂酶A_2的分离纯化及部分酶学性质鉴定 被引量：5
10
作者 邓治 刘实忠 校现周 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期876-880,共5页
通过丙酮沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶过滤柱层析等分离纯化技术,对巴西橡胶树胶乳C-乳清磷脂酶A2进行分离纯化。用SDS-PAGE测定其亚基的相对分子量。测定该酶最适温度和pH,动力学常数Km和Vmax。并测定Ca2+和L... 通过丙酮沉淀、DEAE-纤维素离子交换柱层析和Sephadex G-100凝胶过滤柱层析等分离纯化技术,对巴西橡胶树胶乳C-乳清磷脂酶A2进行分离纯化。用SDS-PAGE测定其亚基的相对分子量。测定该酶最适温度和pH,动力学常数Km和Vmax。并测定Ca2+和La3+对酶活性的影响。结果显示:该酶被纯化了49.47倍,产率为5.12%。SDS-PAGE检测为单一条带,其亚基相对分子量约43kDa。最适反应温度为37℃,最适反应pH为8.0,Km为0.44mmol·L-1,Vmax为7.22μmol.(mL.min)-1。最适Ca2+浓度为50μmol·L-1,稀土元素La3+离子对磷脂酶A2活性有抑制作用,但加入Ca2+后可缓解La3+对磷脂酶A2活性的抑制作用。胶乳C-乳清磷脂酶A2与其他植物磷脂酶A2在Ca2+的依赖性上存在差异。研究结果为今后探索橡胶树胶乳磷脂酶A2的催化机理、调节机理及生理功能等奠定了基础。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 磷脂酶A2 酶的纯化 酶的性质
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灵芝漆酶的分离纯化及其部分酶学性质研究 被引量：5
11
作者 林卫军 周玉恒 +3 位作者 经艳 卫力 覃香香 张厚瑞 《广西科学》 CAS 2009年第1期82-86,共5页
将灵芝(Ganoderma lucidum)漆酶经过Sephadex G-75和DEAE-Sepharose Fast Flow两步纯化,获得具有3个同工酶的组分,并且纯度提高了81倍,酶活回收率高达83.9%。以ABTS为底物,漆酶最适pH值是2.2～2.6,在pH值4.6～7.8范围内稳定;最适温度45... 将灵芝(Ganoderma lucidum)漆酶经过Sephadex G-75和DEAE-Sepharose Fast Flow两步纯化,获得具有3个同工酶的组分,并且纯度提高了81倍,酶活回收率高达83.9%。以ABTS为底物,漆酶最适pH值是2.2～2.6,在pH值4.6～7.8范围内稳定;最适温度45℃,在低于45℃时较稳定。大部分金属离子、酸根离子对灵芝漆酶普遍有抑制作用,除盐可以提高漆酶活力。 展开更多
关键词 漆酶 纯化 酶学性质 灵芝
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鸡氨肽酶H在大肠杆菌中的表达、纯化与部分酶学性质分析 被引量：5
12
作者 赖庆安 刘树滔 +3 位作者 卢菀华 陈莉 Toshihide NISHIMURA 饶平凡 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期381-386,共6页
氨肽酶H(Aminopeptidase H,APH))是生物组织内一种常见的氨基内肽酶,但因为天然材料中含量很低,基本无法深入研究其催化机理、功能与结构的关系及其在生物体内的确切功能。从鸡肝组织克隆了APH的全基因序列,并把该序列亚克隆到载体pET22... 氨肽酶H(Aminopeptidase H,APH))是生物组织内一种常见的氨基内肽酶,但因为天然材料中含量很低,基本无法深入研究其催化机理、功能与结构的关系及其在生物体内的确切功能。从鸡肝组织克隆了APH的全基因序列,并把该序列亚克隆到载体pET22b(+)上,然后转化大肠杆菌Rosetta(DE3),构建了APH的表达菌株。该菌株经IPTG诱导,在SDS-PAGE上明显出现一条与天然APH理论分子量一致的新增蛋白带,该条带的浓度随着表达时间的延长逐渐加深;6h基本达到平衡,此时重组蛋白占总蛋白的16.7%,表达水平高达94.7mg/L。对表达产物进行了活性检测、纯化和酶学性质分析,发现重组蛋白在亚基构成,热稳定性,最适pH等方面与天然APH基本相同,据此可以确认表达产物确实是APH,发酵液总活力达到1636u/L。这些结果为APH的催化机理及其在生物体内的功能的阐明奠定了重要的物质基础。 展开更多
关键词 氨肽酶H(APH) 表达 纯化 酶活
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白腐菌TP21漆酶分离纯化及其部分酶学特性的研究 被引量：5
13
作者 苏东海 苏东民 +1 位作者 杨国伟 孙君社 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第5期54-57,共4页
白腐菌TP21漆酶粗酶液经过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellulose离子交换层析,得到了电泳纯的漆酶,总酶活回收率达到25.7%,纯化了37.1倍,酶的相对分子质量为61.5×103,其最适作用温度为45℃.漆酶催化愈创木酚的υm和Km分别为4.5×10-... 白腐菌TP21漆酶粗酶液经过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Cellulose离子交换层析,得到了电泳纯的漆酶,总酶活回收率达到25.7%,纯化了37.1倍,酶的相对分子质量为61.5×103,其最适作用温度为45℃.漆酶催化愈创木酚的υm和Km分别为4.5×10-3mmol.L-1.min-1和2.22×10-5mmol/L.金属离子K+和Mn2+对酶有激活作用,Fe2+、Fe3+、Ca2+和Co2+对酶活有很大的抑制作用. 展开更多
关键词 漆酶 酶的纯化 酶的性质
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基于麦芽糖诱导型启动子在枯草芽胞杆菌中异源表达麦芽四糖淀粉酶及其酶学性质的研究
14
作者 丛贵龙 李明玉 +4 位作者 姜梦彤 国丹 刘羽欣 王从纲 李宪臻 《微生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期23-31,共9页
麦芽四糖淀粉酶(Maltotetraose amylase,Mta)可以从淀粉的非还原末端特异性依次切割第4个α-1,4糖苷键形成麦芽四糖,目前在食品、医疗保健和造纸等领域具有重要应用。构建安全、高效的表达系统强化麦芽四糖淀粉酶的重组表达,进而降低以... 麦芽四糖淀粉酶(Maltotetraose amylase,Mta)可以从淀粉的非还原末端特异性依次切割第4个α-1,4糖苷键形成麦芽四糖,目前在食品、医疗保健和造纸等领域具有重要应用。构建安全、高效的表达系统强化麦芽四糖淀粉酶的重组表达,进而降低以其为核心酶的麦芽四糖生物转化过程的生产成本具有迫切的现实需求。本研究将源自Pseudomonas saccharophila(DSM 654)的麦芽四糖淀粉酶基因mta在枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis中重组表达,利用麦芽糖诱导型启动子实现其安全高效表达,之后对重组酶进行分离纯化和酶学性质表征。结果显示,将携带麦芽糖诱导型启动子Pglv的表达载体转入B.subtilis WB800N中,成功构建工程菌后进行诱导表达,并且利用金属离子螯合层析技术成功获得了Mta纯酶。酶学性质研究结果显示其最适反应温度为55℃,最适反应pH为7.5。动力学常数Km为(1.26±0.17)g/L、kcat/Km为(2275.07±32.83)L/s·g,纯酶在4℃储存14 d后保留40%的酶活力。本研究成功构建出安全、高效表达重组麦芽四糖淀粉酶的表达系统,为其规模化制备和应用提供了新策略。 展开更多
关键词 麦芽四糖 麦芽四糖淀粉酶 枯草芽胞杆菌 异源表达 启动子 酶学性质
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构巢曲霉内切纤维素酶A10在毕赤酵母中的表达及重组蛋白质的表征 被引量：4
15
作者 李建军 李小连 +1 位作者 王自强 杜昱光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期757-765,共9页
内切纤维素酶是纤维素酶高效降解纤维素的一个关键因子,已广泛应用于工业生物技术领域。对来源于腐生真菌构巢曲霉的一个内切纤维素酶进行过表达及详细的酶学性质研究,研究结果表明:该内切纤维素酶在摇瓶和发酵罐条件下都成功获得表达,... 内切纤维素酶是纤维素酶高效降解纤维素的一个关键因子,已广泛应用于工业生物技术领域。对来源于腐生真菌构巢曲霉的一个内切纤维素酶进行过表达及详细的酶学性质研究,研究结果表明:该内切纤维素酶在摇瓶和发酵罐条件下都成功获得表达,发酵罐条件下的蛋白质表达量达到0.89 mg/mL;该酶的最适反应p H和温度分别为4.0和80℃,在pH 2.0–12.0之间表现出了很好的稳定性;在温度￡60℃时,该酶非常稳定,当温度370℃,酶的稳定性大大降低;Co^(2+)、Mn^(2+)和Fe^(2+)促进了CMCase活性,而Pb^(2+)、Ni^(2+)和Cu^(2+)等金属离子表现出了一定的抑制作用。因此,该构巢曲霉内切纤维素酶表现出了非常好的耐酸、耐碱以及一定的耐热性等性能,具有开发为商品酶的潜力,为深入开发构巢曲霉来源糖苷酶的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 构巢曲霉 内切纤维素酶 酶学性质 二价金属离子 发酵
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嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质研究 被引量：3
16
作者 王武 唐晓明 +1 位作者 付敏 潘见 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期243-246,共4页
本实验对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质进行了研究。结果表明:以亚油酸为底物,亚油酸异构酶的最适反应温度为40℃;最适反应pH值为4.0,pH值在3.0～6.0范围内有较高的稳定性;不同的金属离子和有机试剂对亚油酸异构酶的影响程度不同,... 本实验对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质进行了研究。结果表明:以亚油酸为底物,亚油酸异构酶的最适反应温度为40℃;最适反应pH值为4.0,pH值在3.0～6.0范围内有较高的稳定性;不同的金属离子和有机试剂对亚油酸异构酶的影响程度不同,同一种金属离子和有机试剂在不同浓度下也不相同;以亚油酸为底物的酶促反应米氏常数Km=33.33mol/L,Vmax=15.6mol/L·h。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 亚油酸异构酶 酶学性质
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超声波浸提黑木耳菌糠纤维素酶、木聚糖酶条件及其部分酶学性质研究 被引量：4
17
作者 马怀良 龚振杰 +3 位作者 柴军红 弥春霞 孙佳琦 郭文学 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期117-121,共5页
以黑木耳菌糠为原料,通过单因素试验和正交试验,确定超声波法浸提纤维素酶和木聚糖酶的最佳条件为:振幅90%、超声时间15 min、液料比为60 1。对比试验中,超声波法浸提液羧甲基纤维素酶活和木聚糖酶活为7.500和4.921 IU.g-1,高于水浸提法... 以黑木耳菌糠为原料,通过单因素试验和正交试验,确定超声波法浸提纤维素酶和木聚糖酶的最佳条件为:振幅90%、超声时间15 min、液料比为60 1。对比试验中,超声波法浸提液羧甲基纤维素酶活和木聚糖酶活为7.500和4.921 IU.g-1,高于水浸提法(对照)。粗酶液羧甲基纤维素酶活最适pH为4.4,最适温度60℃;滤纸酶活最适pH为5.2,最适温度60℃;木聚糖酶最适pH为4.8,最适温度为50℃。 展开更多
关键词 超声波 纤维素酶 木聚糖酶 黑木耳 菌糠 酶学性质
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灵芝超高压突变株漆酶的纯化和酶学性质 被引量：3
18
作者 王琼波 王福青 +1 位作者 赵凤琴 王岁楼 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第7期649-652,共4页
灵芝超高压突变株G1502的发酵液经浓缩、DEAE-纤维素柱层析，纯化出一种漆酶。其最适作用温度为45℃，在不高于45℃的条件下保存5h，残余酶活在97％以上；最适pH为4．4，在pH=3．8～6．6内保存，残余酶活在80％以上。漆酶催化愈创木酚的... 灵芝超高压突变株G1502的发酵液经浓缩、DEAE-纤维素柱层析，纯化出一种漆酶。其最适作用温度为45℃，在不高于45℃的条件下保存5h，残余酶活在97％以上；最适pH为4．4，在pH=3．8～6．6内保存，残余酶活在80％以上。漆酶催化愈创木酚的vmax和Km分别为2．28μmol·L^-1·min^-1和1．94×10^-4mol·L^-1。金属离子K^＋和Cu^2＋对酶有激活作用，Fe^2＋、Co^2＋、Ca^2＋、Na^＋、Ba^2＋对酶活有很大的抑制作用。 展开更多
关键词 漆酶 灵芝 酶的纯化 酶学性质 生物工程
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裂褶菌产内切β-1,3-葡聚糖酶的特性研究 被引量：3
19
作者 郑必胜 周萌 《现代食品科技》 EI CAS 2011年第7期731-733,801,共4页
对裂褶菌所产内切β-1,3-葡聚糖酶进行有效分离纯化并用电泳法对其纯度进行鉴定,进而研究其酶学特性。结果表明:经过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤分离纯化得到电泳纯分子量约为45 kD的内切β-1,3-葡聚糖酶,... 对裂褶菌所产内切β-1,3-葡聚糖酶进行有效分离纯化并用电泳法对其纯度进行鉴定,进而研究其酶学特性。结果表明:经过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤分离纯化得到电泳纯分子量约为45 kD的内切β-1,3-葡聚糖酶,其最适pH为5.0,最适温度为45℃;Fe2+、Ba2+、Cu2+对该酶有激活作用,Zn2+、K+、Ag+、Hg2+、Ca2+对该酶有一定抑制作用;该酶的米式常数Km为0.8813 mg/mL。由圆二色谱分析发现该酶二级结构中的含量分别为α-螺旋4.6%、β-折叠49.1%、β-转角8.7%、无规则卷曲37.5%,表明其为典型的β型结构。 展开更多
关键词 内切β-1 3-葡聚糖酶 纯化 鉴定 酶学性质
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1株产淀粉酶嗜盐细菌X50的分类鉴定及其粗酶活特性研究 被引量：3
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作者 王传旭 于慧瑛 +2 位作者 曹建斌 高文庚 李新 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期78-82,共5页
从运城盐湖分离获得一株可产淀粉酶的嗜盐细菌菌株X50,对其进行分类鉴定及酶学特性分析。采用底物平板法进行菌株X50产胞外淀粉酶活性检测。通过16S rRNA基因序列分析对其进行分类鉴定。研究不同因素对菌株X50所产淀粉酶活性的影响。16S... 从运城盐湖分离获得一株可产淀粉酶的嗜盐细菌菌株X50,对其进行分类鉴定及酶学特性分析。采用底物平板法进行菌株X50产胞外淀粉酶活性检测。通过16S rRNA基因序列分析对其进行分类鉴定。研究不同因素对菌株X50所产淀粉酶活性的影响。16S rRNA基因序列分析结果表明,该菌为Thalassobacillus属成员,命名为Thalassobacillus sp.X50。对其所产淀粉酶酶特性进行了初步研究,结果发现该酶最适pH值为6.0,在较宽pH范围内(4.0~12.0)可保持高活力,具有较强的耐酸碱能力。无盐条件下,酶活性最强,且该酶具有良好的耐热性,高温处理后仍可保持较高活性。除Mg2+对酶的抑制作用较为显著外,其他金属离子基本无影响。PMSF可明显抑制该酶活性,而DEPC和EDTA作用不明显,表明该酶活性中心不含金属离子,可能为丝氨酸蛋白酶。本文的研究结果将为促进运城盐湖极端微生物资源的开发利用提供参考。 展开更多
关键词 嗜盐细菌 Thalassobacillus 分类鉴定 淀粉酶 酶学特性
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