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MiR-146a-5p对脂多糖诱导的小鼠胚胎吸收和胎鼠发育不良的改善作用及其机制初探
1
作者 王龙斌 杨龙 +3 位作者 叶舒婷 石燕 郭艺芬 顾艳 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期170-178,共9页
目的观察外源性miR-146a-5p对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠胚胎吸收和胎鼠发育不良的改善作用,并初步探讨其作用机制。方法①将36只成年雌鼠与雄鼠交配,分别于交配前(D0/未孕)、孕第0.5天(day 0.5,D0.5,即见栓当日)、孕第... 目的观察外源性miR-146a-5p对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠胚胎吸收和胎鼠发育不良的改善作用,并初步探讨其作用机制。方法①将36只成年雌鼠与雄鼠交配,分别于交配前(D0/未孕)、孕第0.5天(day 0.5,D0.5,即见栓当日)、孕第4.5天(day 4.5,D4.5)、孕第7.5天(day 7.5,D7.5)、孕第9.5天(day 9.5,D9.5)和孕第13.5天(day 13.5,D13.5)收集小鼠子宫组织,通过实时荧光定量PCR(quantitative PCR,qPCR)和Western blotting检测不同妊娠期小鼠子宫组织中miR-146a-5p及其靶基因TRAF6蛋白的表达水平;②对孕D7.5小鼠腹腔分别注射生理盐水(对照,记为COL组)、LPS 250μg/kg(记为LPS250组)、LPS合并尾静脉注射10 nmol miR-146a-5p无关序列(negative control,NC,记为LPS250+NC组)、LPS合并尾静脉注射10 nmol miR-146a-5p激动剂(miR-146a-5p agomir,记为LPS250+miR-146a-5p agomir组),孕第8.5天(day 8.5,D8.5)对小鼠宫内总胚胎数和吸收胚胎数进行计量分析,通过qPCR和Western blotting分别检测子宫组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)mRNA和TRAF6蛋白表达水平;③将LPS剂量减为50μg/kg后,将孕D7.5小鼠分为2组,每组3只:一组腹腔注射100μL LPS(50μg/kg),同时鼠尾静脉注射10 nmol的无关序列,记为LPS50+NC组;另一组行腹腔注射100μL LPS(50μg/kg),同时鼠尾静脉注射10 nmol的miR-146a-5p agomir,记为LPS50+miR-146a-5p agomir组,孕第16.5天(day 16.5,D16.5)对小鼠宫内总胎数/胚胎数、吸收胚胎数、存活胎数及存活胎鼠重量和胎盘重量进行计量分析;④分离培养原代小鼠骨髓源性巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM),利用LPS刺激诱导其M1极化,再瞬时转染miR-146a-5p模拟物(miR-146a-5p mimics)或其NC片段后,通过qPCR和Western blotting分别检测细胞中TNFαmRNA和pSTAT1蛋白表达水平。结果miR-146a-5p在孕D7.5、D9.5和D13.5小鼠子宫植入部位的表达水平显著高于非植入部位(P=0.013、P=0.012、P=0.003),TRAF6蛋白在D13.5植入部位的� 展开更多
关键词 巨噬细胞 脂多糖 miR-146a-5p 胚胎吸收 胎鼠发育不良
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益气补肾法对自然流产模型小鼠脾脏Foxp3表达及妊娠结局的影响 被引量：3
2
作者 叶平 张丽 +1 位作者 柯雪爱 叶骞 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期3215-3217,共3页
目的:探讨益气补肾法对自然流产模型小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞上Foxp3因子的表达及妊娠结局的影响。方法:将雌性CBA/J与雄性DBA/2小鼠合笼交配,造成自然流产模型。将CBA/J孕鼠随机分成5组,中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、阳... 目的:探讨益气补肾法对自然流产模型小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞上Foxp3因子的表达及妊娠结局的影响。方法:将雌性CBA/J与雄性DBA/2小鼠合笼交配,造成自然流产模型。将CBA/J孕鼠随机分成5组,中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、阳性对照组(CsA组)、阴性对照组(NS组),分别于妊娠第9天、第14天将其处死,其中孕第14天计算胚胎吸收率,并采用流式细胞术分析Foxp3因子比例。结果:1各种干预手段对自然流产模型妊娠结局的影响:孕第14天,各治疗组与阴性对照组相比,仅中药中剂量组与其相比差异存在统计学意义(P<0.05);中药各治疗组与阳性对照组相比不存在统计学差异;中药中剂量组与中药低剂量组相比存在统计差异意义(P<0.05)。2各种干预手段对自然流产模型小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞上Foxp3因子表达的影响:孕第9天,各治疗组与阴性对照组相比,差异均存在统计学意义(P<0.05,P<0.01);各治疗组与阳性对照组相比,仅中药高剂量组与其相比差异存在统计学意义(P<0.01);中药高剂量组与中药中剂量组、中药低剂量组相比差异存在统计学意义(P<0.05)。孕第14天,各组间相比,仅中药中剂量组与阴性对照组相比差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:益气补肾法可使自然流产模型小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞上Foxp3因子高表达并有降低胚胎吸收率的趋势,为益气补肾中药在临床的应用提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 小鼠 自然流产模型 FOXP3 胚胎吸收率 益气补肾法
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