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上西早生柿ETR5基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究
被引量：
6
1
作者
于丛丛
马俊莲
+1 位作者
宋春丽
陈佳
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第1期84-87,共4页
据已测序的上西早生柿ETR5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase基因片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载...
据已测序的上西早生柿ETR5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase基因片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体pSMAK321的35S启动子和NOS终止子之间,构建成Uenishiwase-ETR5基因的RNA干扰植物表达载体。载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA101中。以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200μmol/L的AS及Spc梯度筛选能有效提高转化率。转化植株经PCR检测得到7株阳性植株。
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关键词
上西早生柿
etr
5
RNAI
植物表达载体
转基因
下载PDF
职称材料
上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建
被引量：
3
2
作者
陈佳
马俊莲
+1 位作者
张子德
唐霞
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2007年第4期25-28,共4页
从上西早生(Uenishiwase)柿叶片中,提取了基因组DNA。以基因组DNA为模板,经PCR扩增,克隆到一个549 bp的ETR5的DNA片段。序列分析表明,上西早生柿基因与洋梨ETR5的核苷酸同源性为79.0%,氨基酸同源性为81.0%;并且含有其他植物ETR5的保守...
从上西早生(Uenishiwase)柿叶片中,提取了基因组DNA。以基因组DNA为模板,经PCR扩增,克隆到一个549 bp的ETR5的DNA片段。序列分析表明,上西早生柿基因与洋梨ETR5的核苷酸同源性为79.0%,氨基酸同源性为81.0%;并且含有其他植物ETR5的保守氨基酸区和不变氨基酸残基,表明克隆到的序列是上西早生柿ETR5的基因片段。设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后,连接到植物表达载体pBI221上,构建成Uenishiwase-ETR5基因的植物表达载体。
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关键词
柿
上西早生
乙烯受体
etr
5
植物表达载体
下载PDF
职称材料
题名
上西早生柿ETR5基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究
被引量：
6
1
作者
于丛丛
马俊莲
宋春丽
陈佳
机构
河北农业大学食品科技学院
河北农业大学中兽医学院
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010年第1期84-87,共4页
基金
河北省自然科学基金项目(C2006000465)
文摘
据已测序的上西早生柿ETR5基因序列,设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase基因片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后,定向连接到植物表达载体pSMAK321的35S启动子和NOS终止子之间,构建成Uenishiwase-ETR5基因的RNA干扰植物表达载体。载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA101中。以上西柿组培苗叶片为外植体,优化遗传转化体系,结果表明:农杆菌重悬液和共培养基中均添加200μmol/L的AS及Spc梯度筛选能有效提高转化率。转化植株经PCR检测得到7株阳性植株。
关键词
上西早生柿
etr
5
RNAI
植物表达载体
转基因
Keywords
Uenishiwase persimmon
etr
5
RNA interference（RNAi） Plant expression vector Transformation
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建
被引量：
3
2
作者
陈佳
马俊莲
张子德
唐霞
机构
河北农业大学食品科技学院
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2007年第4期25-28,共4页
基金
河北省自然科学基金项目(C2006000465)
文摘
从上西早生(Uenishiwase)柿叶片中,提取了基因组DNA。以基因组DNA为模板,经PCR扩增,克隆到一个549 bp的ETR5的DNA片段。序列分析表明,上西早生柿基因与洋梨ETR5的核苷酸同源性为79.0%,氨基酸同源性为81.0%;并且含有其他植物ETR5的保守氨基酸区和不变氨基酸残基,表明克隆到的序列是上西早生柿ETR5的基因片段。设计了2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,PCR扩增到2个ETR5-Uenishiwase片段。2个片段经单酶切消化后连接成反向互补的大片断。连接片断经双酶切消化后,连接到植物表达载体pBI221上,构建成Uenishiwase-ETR5基因的植物表达载体。
关键词
柿
上西早生
乙烯受体
etr
5
植物表达载体
Keywords
Persimmon fruit
Uenishiwase
Ethylene receptor
etr
5
Plant expression vector
分类号
S665.203 [农业科学—果树学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
上西早生柿ETR5基因RNAi植物表达载体构建及遗传转化研究
于丛丛
马俊莲
宋春丽
陈佳
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2010
6
下载PDF
职称材料
2
上西早生柿ETR5基因片段的克隆与植物表达载体的构建
陈佳
马俊莲
张子德
唐霞
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2007
3
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
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