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基于表达序列标签的微卫星标记(EST-SSRs)研究进展 被引量:89
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作者 李永强 李宏伟 +1 位作者 高丽锋 何蓓如 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2004年第1期91-95,共5页
作为一种新型分子标记 ,EST SSR来自表达基因 ,因而除具备传统基因组来源的SSR标记所有优势外 ,可能与基因功能表达具有直接或间接关系 ,从而强化了SSR标记在遗传研究中的应用。本文综述了近几年来EST SSR用于遗传图谱构建、基因定位。
关键词 表达序列标签 微卫星标记 est-ssrs 分子标记 表达基因 遗传
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植物EST-SSR标记开发及其应用 被引量:52
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作者 张利达 唐克轩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期534-541,共8页
随着生物科技的进步,大量的植物表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)已经成为开发SSR标记的重要资源。EST-SSR作为一种新型分子标记,其多态性可能与基因功能直接相关,而且在相近植物间具有良好通用性,使得EST-SSR标记在实际应... 随着生物科技的进步,大量的植物表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)已经成为开发SSR标记的重要资源。EST-SSR作为一种新型分子标记,其多态性可能与基因功能直接相关,而且在相近植物间具有良好通用性,使得EST-SSR标记在实际应用中更具价值。采用计算机方法大规模发掘EST-SSR多态性位点极大地提高了SSR标记开发效率。尤其随着新一代测序技术的成熟以及测序成本的急剧下降,利用新一代测序技术产生大量的转录组数据进行EST-SSR多态性标记的计算机大规模发掘将对SSR标记的开发带来深远影响。本文简要介绍了植物EST-SSR分布特点,并对EST-SSR标记开发现状以及相关应用作了综合评述,此外,还对EST-SSR标记的计算机开发新策略进行了展望。 展开更多
关键词 表达序列标签(ests) 简单重复序列(ssrs) est-ssrs
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小麦EST-SSRs的通用性研究 被引量:21
3
作者 李宏伟 刘曙东 +1 位作者 高丽锋 贾继增 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2003年第3期252-255,共4页
小麦EST SSRs是一种从小麦ESTs序列中开发的新型SSR标记。根据小麦ESTs设计的 5 97对EST SSRs引物在小麦、玉米、水稻和大豆中的有效扩增比率分别为 80 %、6 5 8%、6 2 1%和 5 8 1%。其中 ,2 5 5对EST SSRs引物 (42 7%)在四种作物中... 小麦EST SSRs是一种从小麦ESTs序列中开发的新型SSR标记。根据小麦ESTs设计的 5 97对EST SSRs引物在小麦、玉米、水稻和大豆中的有效扩增比率分别为 80 %、6 5 8%、6 2 1%和 5 8 1%。其中 ,2 5 5对EST SSRs引物 (42 7%)在四种作物中都能获得预期产物。序列相似性比较发现 ,2 5 5个通用EST SSRs标记所对应的基因 80 %功能已知 ,其中 30 %与蛋白质定位相关 ,其余 70 %参与细胞代谢、转录调控、细胞发育、防御体系及其他所涉及的生理生化过程。由于不同物种间基因保守性 ,本研究发掘的EST SSRs引物对于小麦功能基因组和比较基因组研究都有重要意义。 展开更多
关键词 小麦 estssrs 通用性 SSR标记 扩增
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用EST-SSRs研究小麦遗传多样性 被引量:34
4
作者 李宏伟 高丽锋 +2 位作者 刘曙东 李永强 贾继增 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期7-12,共6页
小麦EST-SSRs是从小麦ESTs序列(表达序列标签)中开发的一种新型SSR标记。研究采用35对小麦EST-SSRs标记检测了 96份小麦材料的遗传多样性。结果表明,这些小麦EST-SSRs引物均可获得清晰的预期产物,共检测到129个等位变异,其中87.6%有多... 小麦EST-SSRs是从小麦ESTs序列(表达序列标签)中开发的一种新型SSR标记。研究采用35对小麦EST-SSRs标记检测了 96份小麦材料的遗传多样性。结果表明,这些小麦EST-SSRs引物均可获得清晰的预期产物,共检测到129个等位变异,其中87.6%有多态性,大多数引物有2~4个等位变异;其中部分引物可用于普通小麦及其近缘种属的亲缘关系研究,并可根据特征带谱鉴定部分小麦品种;在相似系数为0.745的水平可将人工合成双二倍体小麦材料和一般小麦品种区分开来。与基因组SSR标记相比,EST-SSRs这种新型分子标记来源于表达基因,将其用于小麦遗传研究可直接反映相关基因在不同小麦品种间的表达差异。 展开更多
关键词 小麦品种 est-ssrs 遗传多样性 等位变异 SSR标记 引物 双二倍体 表达基因 表达序列标签 近缘种
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白菜EST-SSR标记的通用性 被引量:33
5
作者 忻雅 崔海瑞 +5 位作者 张明龙 姚艳玲 卢美贞 金基强 林容杓 崔水莲 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第2期248-252,共5页
EST-SSR是从表达序列标签(expressedsequencetag,EST)中开发的新型简单序列重复(simplesequencerepeat,SSR)标记。根据白菜EST设计了15对SSR引物,对白菜、油菜、玉米、高粱、水稻和茶树等进行了PCR,研究了白菜的EST-SSR标记在不同物种... EST-SSR是从表达序列标签(expressedsequencetag,EST)中开发的新型简单序列重复(simplesequencerepeat,SSR)标记。根据白菜EST设计了15对SSR引物,对白菜、油菜、玉米、高粱、水稻和茶树等进行了PCR,研究了白菜的EST-SSR标记在不同物种间的通用性。所设计的引物对不同白菜品种、近缘种油菜和远缘种玉米、高粱、水稻和茶树的扩增成功率分别为100%、93.3%、80%、93.3%、93.3%和86.7%。在15对引物中,有11对在远缘种中都有扩增产物,而且一些引物可显示多态性,多态性引物分别占了可扩增引物的33.3%、28.6%、28.6%和61.5%。这些结果表明,白菜EST-SSR引物具有较高的通用性,这对于比较基因组学研究有重要意义。 展开更多
关键词 SSR标记 通用性 白菜 SSR引物 表达序列标签 简单序列重复 比较基因组学 扩增产物 多态性 est
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普通小麦SSR和EST-SSR引物对冰草通用性的比较分析 被引量:30
6
作者 宿俊吉 柴守诚 +2 位作者 刘伟华 杨欣明 李立会 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1311-1316,共6页
选用定位于普通小麦7个部分同源群的534对SSR引物和351对EST-SSR引物分别对普通小麦品种‘Fukuho’和四倍体冰草‘Z559’的基因组DNA进行扩增,结果显示:有475对(89.0%)SSR引物和314对(89.5%)EST-SSR引物对‘Fukuho’能有效扩增,226对(42... 选用定位于普通小麦7个部分同源群的534对SSR引物和351对EST-SSR引物分别对普通小麦品种‘Fukuho’和四倍体冰草‘Z559’的基因组DNA进行扩增,结果显示:有475对(89.0%)SSR引物和314对(89.5%)EST-SSR引物对‘Fukuho’能有效扩增,226对(42.3%)SSR和258对(73.5%)EST-SSR引物对‘Z559’能有效扩增,表明小麦EST-SSR对冰草的通用性明显高于SSR;扩增强带比率SSR和EST-SSR引物分别为76.1%、84.1%,说明小麦EST-SSR在冰草上扩增带的质量亦优于SSR。选择上述在‘Fukuho’和‘Z559’基因组DNA之间有多态性扩增且带谱清晰的SSR和EST-SSR引物各60对,对‘Fukuho’、‘中国春’、‘北京8号’和二、四、六倍体冰草‘Z804’、‘Z559’、‘Z1075’的基因组DNA再行PCR扩增,结果显示,40对(66.7%)SSR和22对(36.7%)EST-SSR引物在‘Fukuho’、‘中国春’和‘北京8号’间扩增产物表现多态性,且前者高于后者;50对(83.3%)SSR和52对(86.7%)EST-SSR引物在冰草‘Z804’、‘Z559’和‘Z1075’间扩增产物表现多态性,两者相当。通用性、多态性和扩增强带比率综合比较表明,普通小麦EST-SSR和SSR经筛选虽都能转用于冰草,但两者相比EST-SSR更优。 展开更多
关键词 普通小麦 冰草 通用性 分子标记 SSR est-SSR
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微卫星位点筛选方法综述 被引量:22
7
作者 曾庆国 陈艺燕 《生态科学》 CSCD 2005年第4期368-372,共5页
微卫星标记因其丰富的多态性和共显性等特点,已得到了广泛的应用。应用微卫星标记首先需要获得微卫星位点的序列信息,用来设计引物。获得微卫星位点的方法有多种,本文综述了获得和富集微卫星位点的常用方法。最简便、最省时的方法是从... 微卫星标记因其丰富的多态性和共显性等特点,已得到了广泛的应用。应用微卫星标记首先需要获得微卫星位点的序列信息,用来设计引物。获得微卫星位点的方法有多种,本文综述了获得和富集微卫星位点的常用方法。最简便、最省时的方法是从公共数据库(如EMBL、Genbank、EST数据库等)或已发表的文献中查找到微卫星位点,但只限于已经有序列数据发布的物种。第二种方法是种间转移扩增,即从相近物种的数据库中查找微卫星位点,或使用已有数据发表的遗传距离相近物种的微卫星标记。第三种方法是从基因组DNA中筛选微卫星位点,其中用于富集微卫星的方法有引物法、磁珠杂交法、尼龙膜杂交法以及RAPD技术法。 展开更多
关键词 微卫星 est-ssrs 种间转移扩增 磁珠杂交 尼龙膜杂交 RAPD
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茶树EST-SSRs分布特征及引物开发 被引量:28
8
作者 王丽鸳 姜燕华 +3 位作者 段云裳 成浩 周健 曾建明 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期511-516,共6页
为了在茶树中开发EST-SSRs功能性标记,利用生物信息学方法对NCBI网上公开的3288奈茶树(Camellia subebsus)ESTs序列进行EST-SSRs特征分析。剔除冗余序列,得到非冗余序列2083条。在非冗余序列中发现含不同重复基元SSRs的EST序列有38... 为了在茶树中开发EST-SSRs功能性标记,利用生物信息学方法对NCBI网上公开的3288奈茶树(Camellia subebsus)ESTs序列进行EST-SSRs特征分析。剔除冗余序列,得到非冗余序列2083条。在非冗余序列中发现含不同重复基元SSRs的EST序列有385条,共486个EST-SSRs,平均相隔2.10kb出现1个SSR。在2~6bp的重复基元中,二核苷酸重复基元的SSRs出现频率最高(51.97%),其次是三核苷酸(19.55%)。对所有的重复基元类型进行统计分析发现,所占比例最高的是AG/CT(47.74%),其次分别是AT/TA(4.73%)和AAG/CTT(4.73%)。利用Prime5软件,设计了206对EST-SSRs引物,随机选用72对引物进行SSR扩增,发现31对引物可以扩增出条带,其中29对引物具有多态性,多态性比率为93.5%。这些EST-SSRs将有助于茶树基因组学方面的研究。 展开更多
关键词 茶树 est-ssrs 分子标记 多态性
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雷蒙德氏棉EST-SSRs分布特征及开发与利用 被引量:24
9
作者 王长彪 郭旺珍 +1 位作者 蔡彩平 张天真 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期316-320,共5页
微卫星或简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)存在于表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)中.为了在棉花中开发EST—SSR功能性标记,利用生物信息学方法对NCBI网上公开的63485条雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii U... 微卫星或简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)存在于表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)中.为了在棉花中开发EST—SSR功能性标记,利用生物信息学方法对NCBI网上公开的63485条雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii Ulbrich)ESTs序列进行EST-SSRs特征分析.剔除冗余序列,得到非冗余序列58906条.在非冗余序列中发现含不同重复基元SSRs的EST序列有2620条,共2818个EST-SSRs,EST-SSRs序列的频率是4.45%,平均相隔14.8kb出现一个SSR.在1~6bp的重复基元中,三核苷酸重复基元的SSRs出现频率最高(38.31%),其次是二核苷酸(24.09%)、单核苷酸(23.35%).对所有的重复基元类型进行统计分析发现,所占比例最大的是A/T(18.67%),其次是AT/TA(14.83%).在复合型(compound)中发现三核苷酸串联三核苷酸的重复基元出现频率最高,为48.65%.利用Prime3软件,设计了1554对EST-SSRs引物,随机选用300对对本室四倍体作图亲本陆地棉TM-1和海岛棉海7124进行多态性检测,其中129对有多态性,多态性频率为43%.这些EST-SSRs将有效用于不同棉种间的分布特征比较及染色体定位等方面研究. 展开更多
关键词 雷蒙德氏棉 est-ssrs 分布 分子标记 多态性
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鲤与生长性状相关的EST-SSRs标记筛选 被引量:21
10
作者 顾颖 曹顶臣 +5 位作者 张研 常玉梅 李鸥 张晓峰 鲁翠云 孙效文 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期15-22,共8页
以大头鲤(Cyprinus pellegrini Tchang)(母本)与荷包红鲤(Cyprinus carpio wuyuanensis)抗寒品系(父本)杂交产生的F1作为亲本,以其自交F2作为分离群体,结合"拟测交"策略,用EST-SSRs标记对其中92个个体进行基因型检测。利用Win... 以大头鲤(Cyprinus pellegrini Tchang)(母本)与荷包红鲤(Cyprinus carpio wuyuanensis)抗寒品系(父本)杂交产生的F1作为亲本,以其自交F2作为分离群体,结合"拟测交"策略,用EST-SSRs标记对其中92个个体进行基因型检测。利用Windows Map Manager2.0的标记回归法对符合拟测交分离的70个EST-SSRs标记进行单标记回归分析,检测出8个与鲤体长、体高、体厚性状相关的标记。对同一标记不同基因型个体间生长性状进行显著性比较,通过t检验,找到与生长性状相关的基因型。将上述8个EST序列与GenBank数据库进行BLAST比对,有3条EST序列与蛋白库中已知功能的序列高度同源。其中HLJE225与编码斑马鱼(Denio rerio)冷诱导基因RNA结合蛋白的基因同源性水平高达97%,HLJE222与编码斑马鱼DAZ相关蛋白1基因同源性水平也高达97%,HLJE599与编码斑点叉尾(Ictalurus punctatus)核糖体蛋白L6基因的同源水平为87%。本研究鉴定的与鲤生长性状相关的功能基因及有利用价值的基因型,为鲤重要生长性状的QTL(数量性状基因座)定位和分子标记辅助育种提供了一定的依据。 展开更多
关键词 est-ssrs 生长性状 BLAST 冷诱导基因RNA结合蛋白 DAZ相关蛋白1 核糖体蛋白L6
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Characterizati0n,development and exploitation of EST-derived microsatellites in Gossypium raimondii Ulbrich 被引量:21
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作者 WANG Changbiao GUO Wangzhen CAI Caiping ZHANG Tianzhen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2006年第5期557-561,共5页
Microsatellite DNA or simple sequence repeats (SSRs) can be derived from expressed se- quence tags (ESTs). These markers are important for gene mapping as well as marker-assisted selection (MAS). To develop EST-SSRs f... Microsatellite DNA or simple sequence repeats (SSRs) can be derived from expressed se- quence tags (ESTs). These markers are important for gene mapping as well as marker-assisted selection (MAS). To develop EST-SSRs for cotton gene map- ping, we selected and characterized functional markers in Gossypium raimondii, which consisted of 58906 non-redundant EST sequences from NCBI. Among them there were 2620 microsatellite se- quences containing 2818 EST-SSRs, which amoun- ted to 4.45% of the non-redundant starting sequence population. This incidence was equivalent to one EST-SSR in every 14.8 kb of G. raimondii genetic material. Among the different motifs ranging from 1 to 6 bp, trinucleotide repeats were most abundant (38.31%), followed by dinucleotide repeats (24.09%) and mononucleotide repeats (23.35%). Among all identified motif types, A/T had the highest frequency (18.67%), followed by AT/TA (14.83%). Among the compound motifs, tandem trinucleotides occurred with the highest frequency (48.65%). In all, we identi- fied 1554 EST-SSRs primer pair sequences. 300 of them were randomly selected to screen the poly- morphisms between the mapping parents G· hirsutum acc. TM-1 and G· barbadense cv. Hai7124, to con- struct linkage groups in cultivated allotetraploid cot- ton. Among them, 129 (43%) primer pairs were found to have polymorphisms. Using these EST-SSRs we can compare EST-SSR distributions among different cotton species and various chromosomal locations. 展开更多
关键词 棉属 est-ssrs 微卫生DNA 分子标记 多态性
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褐飞虱EST资源的微卫星信息分析 被引量:20
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作者 刘玉娣 侯茂林 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期239-247,共9页
表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)是开发微卫星标记的一个重要的资源。褐飞虱Nilaparvata lugens(Sta°l)EST序列的公布为开发EST-SSRs提供了宝贵的数据资源,本研究利用生物信息学对NCBI公共数据库中的37398条褐飞虱EST... 表达序列标签(expressed sequence tags,ESTs)是开发微卫星标记的一个重要的资源。褐飞虱Nilaparvata lugens(Sta°l)EST序列的公布为开发EST-SSRs提供了宝贵的数据资源,本研究利用生物信息学对NCBI公共数据库中的37398条褐飞虱ESTs序列进行EST-SSRs特征分析,得到全长为7619.324kb的无冗余EST9852条。按照3个不同的查找标准在这些序列中搜索SSR。查找结果显示:褐飞虱EST-SSRs主要重复基元以1~3碱基为主,占总EST-SSR的95%以上。在单碱基重复基元中,A/T是占优势的重复基元,在二相重复类型中,AG/CT重复基元出现的频率最多,而AAG/CTT是三相重复中占绝对优势的重复基元。在褐飞虱EST-SSRs中未查找到GC重复基元。以100bp为参照,在3种查找标准下含有SSR的EST序列中两端侧翼序列均≥100bp的序列分别为738,89和42个。通过分析褐飞虱EST-SSRs标记可以为褐飞虱和近缘种的SSR标记的开发提供信息,同时通过分析褐飞虱EST-SSRs的分布频率和分布特征可以为昆虫EST-SSRs的研究提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 褐飞虱 生物信息学 表达序列标签 est-ssrs 查找标准 重复基元
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草鱼EST-SSR标记及5个不同地域群体的遗传结构分析 被引量:19
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作者 王解香 于凌云 +2 位作者 白俊杰 樊佳佳 全迎春 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期24-32,共9页
以草鱼(Ctenopharyngodon idella)脑、肌肉、肝等组织构建cDNA文库,经测序获得unigenes序列45 318个,从中筛选微卫星序列共5 556个,据此设计EST-SSR引物118对,其中19对引物能够扩增出带型清晰且多态性较高的谱带。用这19个EST-SSR标记研... 以草鱼(Ctenopharyngodon idella)脑、肌肉、肝等组织构建cDNA文库,经测序获得unigenes序列45 318个,从中筛选微卫星序列共5 556个,据此设计EST-SSR引物118对,其中19对引物能够扩增出带型清晰且多态性较高的谱带。用这19个EST-SSR标记研究3个长江水系群体(石首、监利和长沙)和2个珠江水系群体(清远和肇庆)草鱼的遗传结构。结果表明,5个群体的平均多态信息含量(PIC)为0.415 4~0.460 4,显示草鱼群体的遗传多样性偏低;平均观测杂合度(Ho)为0.415 8~0.501 3,平均期望杂合度为(He)0.450 6~0.502 8,其中,长沙群体平均期望杂合度最高,为0.502 8,监利群体的平均观察杂合度和平均期望杂合度均最低,分别为0.415 8和0.450 6,即长沙群体的遗传多样性最高,监利群体的遗传多样性最低;对数据进行F-检验,结果表明,群体间的遗传分化程度低。Hardy-Weinberg平衡的卡方检验结果表明,5个群体均一定程度上偏离了平衡;聚类分析显示长沙群体、石首群体与监利群体聚成一支;肇庆群体与清远群体聚成一支,这与草鱼群体的流域分布一致。 展开更多
关键词 草鱼 est-ssrs 遗传结构 野生群体 遗传多样性
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用生物信息学技术构建cSSR分子标记开发体系 被引量:9
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作者 汤继凤 曹永生 +1 位作者 高丽锋 贾继增 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期328-332,共5页
存在于基因编码区的简单重复序列(又称cSSR或者EST-SSR),既可用作分子标记又可用于基因功能研究。Internet上大量的EST数据为cSSR标记的开发提供了丰富的资源。生物信息学是cSSR分子标记开发的有力工具。笔者构建的cSSR分子标记开发体... 存在于基因编码区的简单重复序列(又称cSSR或者EST-SSR),既可用作分子标记又可用于基因功能研究。Internet上大量的EST数据为cSSR标记的开发提供了丰富的资源。生物信息学是cSSR分子标记开发的有力工具。笔者构建的cSSR分子标记开发体系包括自行编制的SSR标记发掘程序SSRFinder,生物学家常用的引物设计程序Primer3和DNAstar, 以及遗传定位程序MapMaker和图形显示程序JgeneMap。根据SSR分子标记发掘中存在的问题,提出了SSR分子标记发掘算法,并用此算法编写了程序SSRFinder。利用该程序不但可以从大量的EST序列中发掘cSSR标记,还能比较准确地进行统计和分析。JgeneMap完善了GeneMap的图形显示功能,增加了图片保存及调整图片大小和字体类型、大小的功能,具有友好的用户图形界面。用此体系已从小麦的37 270条EST中挖掘了1228个精确cSSR(perfect cSSR) 和875个复合型cSSR(compound cSSR);根据1228个精确cSSR标记序列成功设计了597对引物,其中478对为有效扩增引物,在小麦遗传图谱上已经定位了66个标记。 展开更多
关键词 生物信息学 SSR分子标记 遗传图谱 精确SSR 复合型SSR 遗传图谱 小麦
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橡胶树EST-SSRs发掘研究 被引量:15
15
作者 华玉伟 卢轶 +3 位作者 龙青姨 曾霞 胡彦师 黄华孙 《热带作物学报》 CSCD 2008年第5期583-588,共6页
随着橡胶树大量ESTs序列的产生,为EST-SSRs发掘提供了丰富的公共序列资源。本研究首先将11809条橡胶树ESTs组装成3932条非冗余序列,其中323条ESTs检索到SSRs358个,SSRs出现的频率为9.1%。SSR重复单元共93种,其中二核苷酸重复(57.5%)、... 随着橡胶树大量ESTs序列的产生,为EST-SSRs发掘提供了丰富的公共序列资源。本研究首先将11809条橡胶树ESTs组装成3932条非冗余序列,其中323条ESTs检索到SSRs358个,SSRs出现的频率为9.1%。SSR重复单元共93种,其中二核苷酸重复(57.5%)、三核苷酸重复(26.0%)和六核苷酸重复(12.8%)占所有重复单元的96.3%。对323条SSR-ESTs进行特异扩增引物设计,共获得158对引物,对48份包括31份魏可汉种质、12份1981'野生种质、2份色宝橡胶、2份光亮橡胶和1份少花橡胶扩增,其中60对引物扩增出1条预期长度DNA片段,占所有设计引物的38%,并筛选到40对具有多态性的引物。EST-SSRs标记的发掘为巴西橡胶树分子辅助育种、种质资源功能遗传多样性分析等研究提供了良好的标记。 展开更多
关键词 橡胶树 分子标记 est-ssrs
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陆地棉EST-SSRs在向日葵中的通用性研究 被引量:9
16
作者 陈树林 王沛政 胡保民 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期502-506,共5页
利用陆地棉EST—SSRs(Expressed sequence tags—simple sequence repeats)在陆地棉和向日葵品种中进行了通用性分析。利用本实验室合成的1500对陆地棉EST—SSRs在4个陆地棉品种中进行了扩增,有效扩增比率为95%,扩增产物符合预期... 利用陆地棉EST—SSRs(Expressed sequence tags—simple sequence repeats)在陆地棉和向日葵品种中进行了通用性分析。利用本实验室合成的1500对陆地棉EST—SSRs在4个陆地棉品种中进行了扩增,有效扩增比率为95%,扩增产物符合预期大小(50~500bp);每对引物可以检测到1~6个数目不等的片段(allele),平均约为2.7个;每2个陆地棉之间大约有7%~9%的多态性。从1500对陆地棉EST—SSRs引物中选取400对引物在向日葵中进行了扩增,有效扩增比率为63%.每对引物可以检测到1~6个数日不等的片段,平均为1.7个,片段大小介于50~500bp之间。选取了200对在向日葵中得到有效扩增的引物对向日葵G101的父母本进行了多态性筛选,约25%引物具有多态性。结果表明,陆地棉EST—SSRs在向日葵中具有较高的通用性,可用于向日葵比较基因组研究和分子标记研究。 展开更多
关键词 向日葵 陆地棉 通用性 estssrs
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微卫星标记的制备策略 被引量:10
17
作者 常玉梅 李绍戊 +1 位作者 梁利群 孙效文 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B04期210-214,共5页
微卫星标记作为一类重要的、成熟的分子遗传标记,凭借自身的高变异性、孟德尔遗传模 式、共显性遗传方式等优点,在遗传及其它相关领域发挥了十分重要的作用,而其主要的缺点是 必须知道所研究生物的微卫星序列及其旁侧序列。随着人类及... 微卫星标记作为一类重要的、成熟的分子遗传标记,凭借自身的高变异性、孟德尔遗传模 式、共显性遗传方式等优点,在遗传及其它相关领域发挥了十分重要的作用,而其主要的缺点是 必须知道所研究生物的微卫星序列及其旁侧序列。随着人类及模式生物基因组的深入研究,微 卫星标记的制备经历了从费时、费力、低效的传统法到周期短、效率高的富集法(选择性杂交法和 FIASCO法);从基因组构建文库筛选到公共数据库ESTs发掘;从实验室自制到花钱购买。总之, 随着方法与技术的不断改进,从目标生物中获得微卫星标记变得越来越简单、经济。 展开更多
关键词 微卫星标记 PIMA 选择性杂交法 FIASCO est-ssrs
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文蛤30个微卫星标记的开发及在斧文蛤和帘文蛤中的通用性检测 被引量:10
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作者 齐晓艳 董迎辉 +2 位作者 姚韩韩 周小龙 林志华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1147-1154,共8页
为开展文蛤多态性微卫星标记及其在斧文蛤和帘文蛤中的通用性研究,实验从磁珠富集法构建的基因组文库和EST文库中开发了30个文蛤多态性微卫星标记,包括8个G-SSR和22个EST-SSR多态性位点。共获得140个等位基因,平均等位基因数为4.67;多... 为开展文蛤多态性微卫星标记及其在斧文蛤和帘文蛤中的通用性研究,实验从磁珠富集法构建的基因组文库和EST文库中开发了30个文蛤多态性微卫星标记,包括8个G-SSR和22个EST-SSR多态性位点。共获得140个等位基因,平均等位基因数为4.67;多态性信息含量、观测杂合度、期望杂合度分别为0.172~0.744、0.040~0.720、0.187~0.793;G-SSRs的平均等位基因数、平均多态性信息含量、平均观测杂合度和平均期望杂合度都较EST-SSRs高;Hardy-Weinberg平衡检测发现,24个位点偏离了平衡状态;利用BLASTx对含多态性SSR位点的EST进行功能注释,11个位点来自注释基因序列。将30对文蛤多态性SSR引物分别在斧文蛤和帘文蛤中进行了通用性检测,通用率分别为40%和30%。这些微卫星多态性位点的获得,为进一步开展文蛤遗传多样性分析、种质资源评价、分子标记辅助选育等奠定了基础,并且可用于文蛤、斧文蛤和帘文蛤的比较作图、基因发掘和QTL定位等研究。 展开更多
关键词 文蛤 G-ssrs est-ssrs 多态性 通用性
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EST-SSRs的开发及应用研究进展 被引量:11
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作者 王家麟 孙佳莹 +6 位作者 于清岩 李亮 王艳丽 宋金壑 刘春燕 胡国华 陈庆山 《生物信息学》 2007年第3期140-142,共3页
综述了EST-SSR标记的开发方法及其在构建遗传学图谱,筛选与定位目的基因,遗传多样性的研究,比较基因组学的研究和品种鉴别等方面的应用。
关键词 表达序列标签(est) 简单重复序列(SSR) estssrs
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红鳍东方鲀BAC数据库和ESTs数据库中微卫星的筛选与应用 被引量:9
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作者 郝君 孙效文 +1 位作者 孟雪松 冯剑 《大连水产学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期97-101,共5页
利用Tandem Repeats Finder软件在红鳍东方鲀Takifugu rubriper BAC数据库和ESTs数据库中查找微卫星标记。选取其中22个序列(11个BAC-SSR s序列、11个EST-SSRs序列)设计引物,并将22对引物用于庄河、河北Ⅰ和河北Ⅱ3个群体,均能扩增出产... 利用Tandem Repeats Finder软件在红鳍东方鲀Takifugu rubriper BAC数据库和ESTs数据库中查找微卫星标记。选取其中22个序列(11个BAC-SSR s序列、11个EST-SSRs序列)设计引物,并将22对引物用于庄河、河北Ⅰ和河北Ⅱ3个群体,均能扩增出产物,其中EST-SSRs有2对引物扩增产物比预期扩增产物偏大,可能是相应基因组中有内含子导致。研究结果表明,EST-SSRs标记要比BAC-SSR s标记的多态性低,其中11个BAC-SSR s和9个EST-SSRs标记有很好的多态性,可以用于红鳍东方鲀的遗传多样性分析和重要经济性状筛选等方面的研究。 展开更多
关键词 红鳍东方鲀 微卫星标记 BAC-ssrs est-ssrs
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