期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白对小鼠巨噬细胞自噬功能的影响 被引量:5
1
作者 赵勇 师长宏 +4 位作者 张彩勤 毛峰峰 白冰 伍静 张海 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第6期13-16,共4页
目的研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白对小鼠巨噬细胞自噬功能的影响。方法H37Rv菌株感染小鼠巨噬细胞后加入纯化的重组ESAT6-CFP10融合蛋白,通过透射电镜检测自噬体的形成。提取细胞总RNA和蛋白,以实时定量RT-PCR及Western b... 目的研究结核分枝杆菌(MTB)ESAT6-CFP10融合蛋白对小鼠巨噬细胞自噬功能的影响。方法H37Rv菌株感染小鼠巨噬细胞后加入纯化的重组ESAT6-CFP10融合蛋白,通过透射电镜检测自噬体的形成。提取细胞总RNA和蛋白,以实时定量RT-PCR及Western blot方法检测自噬相关基因(atg)分子水平和蛋白表达水平。结果ESAT6-CFP10融合蛋白可抑制小鼠巨噬细胞自噬体的形成,并导致atg分子表达水平下降,其中atg8表达量下降最为明显。结论MTB ESAT6-CFP10融合蛋白通过调控atg分子表达水平影响小鼠巨噬细胞自噬功能。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 esat6-cfp10融合蛋白 自噬 自噬相关基因(atg)
下载PDF
牛结核分枝杆菌ESAT6-CFP10-BFH融合蛋白原核表达及皮试反应
2
作者 鲍佳鹏 孙悦 +9 位作者 张建军 苏岳乐 毕力格 郭宇 巴依尔塔 赵东辉 陈彪 冯紫佳 郑可 秦建华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2502-2508,共7页
为了改善ESAT6-CFP10融合蛋白检测牛结核分枝杆菌感染存在灵敏度低的问题,应用铁蛋白骨架显著性提升EC(ESAT6-CFP10)法的灵敏度,将ESAT6、CFP10和牛源铁蛋白重链(BFH)用柔性多肽连接,按照ESAT6-CFP10-BFH的串联组合方案设计基因序列,构... 为了改善ESAT6-CFP10融合蛋白检测牛结核分枝杆菌感染存在灵敏度低的问题,应用铁蛋白骨架显著性提升EC(ESAT6-CFP10)法的灵敏度,将ESAT6、CFP10和牛源铁蛋白重链(BFH)用柔性多肽连接,按照ESAT6-CFP10-BFH的串联组合方案设计基因序列,构建pET-28a-EC-BFH重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中。使用自诱导培养基对铁蛋白EC融合抗原(EC-BFH蛋白)进行诱导表达,亲和层析镍柱法纯化EC-BFH蛋白,使用蛋白印迹(Western blot)对EC-BFH蛋白进行鉴定及纯度测定。将EC-BFH蛋白对健康豚鼠进行皮试,通过观察皮试部位是否会引起炎性反应,验证EC-BFH蛋白的特异性。对牛结核分枝杆菌致敏成功的豚鼠,以提纯牛型结核菌素(PPDB)作为对照,检测EC蛋白和EC-BFH蛋白效价对比阳性率。结果表明:EC-BFH蛋白的相对分子质量约为48.4 kDa,与预期相同,说明成功纯化EC-BFH蛋白。EC-BFH蛋白对健康豚鼠进行皮试24 h后无炎症反应,说明EC-BFH蛋白特异性良好。根据阳性率数据显示EC-BFH蛋白效价远远高于EC蛋白;在注射量为1,10和20μg时,EC-BFH蛋白皮试的阳性率均高于EC蛋白,尤其注射量在1μg时,EC蛋白和EC-BFH蛋白的阳性率分别为16.6%和100%,且EC-BFH蛋白与PPDB的阳性率接近。结果表明EC-BFH融合蛋白提高了EC法检测牛结核分枝杆菌感染的灵敏度,增强了皮试反应效果,作为检测牛结核分枝杆菌感染的诊断试剂有很大的研究价值。 展开更多
关键词 esat6-cfp10融合蛋白 牛结核分枝杆菌 提纯牛型结核菌素
原文传递
三种结核分枝杆菌分泌蛋白的抗体制备及其在抗原检测中的应用 被引量:10
3
作者 唐宇龙 杨华 +5 位作者 刘湘新 柳斌 秦莲花 郑瑞娟 丁元生 胡忠义 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期597-600,共4页
目的制备结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6、MPT84和MPT63-MPT70重组蛋白抗体,探讨其在检测结核抗原中的应用价值。方法应用重组蛋白CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63- MPT70免疫血清,制备包被抗体和标记抗体,建立检测3种蛋白的双抗体夹心法,并将其... 目的制备结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6、MPT84和MPT63-MPT70重组蛋白抗体,探讨其在检测结核抗原中的应用价值。方法应用重组蛋白CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63- MPT70免疫血清,制备包被抗体和标记抗体,建立检测3种蛋白的双抗体夹心法,并将其用于17种分枝杆菌培养上清液和341份临床血清标本的检测。结果CFP10-ESAT-6的最低检出浓度为25 ng/mL,MPT64和MPT63-MPT70均为50 ng/mL。CFP10-ESAT-6检测17种分枝杆菌培养上清液,只有结核分枝杆菌为阳性;而MPT64和MPT63-MPT70检测除结核分枝杆菌阳性外,还各有5种非结核分枝杆菌培养上清液为阳性结果。CFP10-ESAT6、MPT64和MPT63-MPT70检测165例临床诊断的肺结核患者血清标本阳性率分别为33.9%、41.2%和47.9%;检测112例非结核患者血清标本的假阳性率分别为1.8%、7.1%和10.7%;检测64例健康对照的假阳性率分别为0、3.1%和7.8%。结论CFP10-ESAT-6、MPT64和MPT63-MPT70重组蛋白制备的抗体检测血清标本结核抗原的阳性率均不高,但特异性较好。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 重组蛋白质类 esat-6-cfp10融合蛋白 MPT64蛋白 结核分枝杆菌 MPT63-MPT70
原文传递
ESAT-6/CFP-10融合蛋白的抗原性分析及其对诊断结核临床应用价值 被引量:10
4
作者 沈颖 陆国华 姚航平 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1531-1534,共4页
目的分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作为结核抗原的特性,并探讨以其作为抗原的酶联免疫斑点实验(ELISPOT)在结核诊断中的应用价值。方法以ESAT-6/CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT法(ESAT-6/CFP-10-ELISPOT)检测经结核特异性抗原刺激后分... 目的分析ESAT-6/CFP-10融合蛋白作为结核抗原的特性,并探讨以其作为抗原的酶联免疫斑点实验(ELISPOT)在结核诊断中的应用价值。方法以ESAT-6/CFP-10融合蛋白为刺激抗原的ELISPOT法(ESAT-6/CFP-10-ELISPOT)检测经结核特异性抗原刺激后分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞数量方法,测定65例单纯结核病患者,16例HIV/结核双重感染患者,20例HIV感染患者,32例非结核呼吸道疾病患者,30名健康体检者外周血单个核细胞中结核菌抗原特异的T淋巴细胞的频率。结果 ESAT-6/CFP-10-ELISPOT与结核菌素皮肤试验(TST)在所有81例结核患者中的比较,ESAT-6/CFP-10-ELISPOT阳性率98.8%,TST阳性率为56.8%;ESAT-6/CFP-10-ELISPOT在涂阳结核组、涂阴结核组、HIV/结核双重感染组阳性率分别为100.0%、97.1%、100.0%,其敏感性远高于痰涂片检查,且各组结果差异无统计学意义;20例HIV感染组有1例阳性,非结核呼吸道疾病患者组与健康对照组均为阴性,提示ESAT-6/CFP-10-ELISPOT方法的特异度为98.8%。结论ESAT-6/CFP-10融合蛋白可以很好的刺激效应T淋巴细胞分泌γ干扰素,适合作为结核诊断中的特异性抗原,因而可以用于ELISPOT的检测,ESAT-6/CFP-10-ELISPOT对结核诊断有应用价值。 展开更多
关键词 esat-6/cfp-10融合蛋白 结核 人类免疫缺陷病毒 酶联免疫斑点 诊断
原文传递
ESAT-6/CFP-10融合蛋白诊断结核性感染和结核病的研究 被引量:2
5
作者 彭孝红 肖勇 《临床血液学杂志(输血与检验)》 CAS 2009年第1期81-83,共3页
目的::探讨ESAT-6/CFP-10融合蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)释放IFN-γ反应及其对结核性感染和结核病的诊断价值。方法:选取健康对照组(34例),密切接触组(19例)和结核病组(39例)3组对象,按其有无卡介苗(BCG)接种各分成两个2组共6小组... 目的::探讨ESAT-6/CFP-10融合蛋白刺激外周血单个核细胞(PBMC)释放IFN-γ反应及其对结核性感染和结核病的诊断价值。方法:选取健康对照组(34例),密切接触组(19例)和结核病组(39例)3组对象,按其有无卡介苗(BCG)接种各分成两个2组共6小组:健康对照组BCG未接种者(15例)、健康对照组BCG接种者(19例)、密切接触组BCG未接种者(6例)、密切接触组BCG接种者(13例)、结核病组BCG未接种者(7例)和结核病组BCG接种者(32例)。分离PBMC并分别与PPD和ESAT-6/CFP-10融合蛋白共同培养5d,以酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测培养上清液中IFN-γ,观察6组对象IFN-γ释放反应。结果:PPD刺激后,健康对照组BCG未接种者与密切接触组BCG未接种者结果之间差异有统计学意义(P<0.01),而3组BCG接种者之间结果差异无统计学意义(P>0.05)。ESAT-6/CFP-10融合蛋白刺激后,健康对照组、密切接触组、和结核病组3组总阳性率分别为0%,21.1%,87.2%,阳性率明显增加。健康对照组BCG未接种者与密切接触组BCG未接种者结果之间差异有统计学意义(P<0.05);健康对照组BCG接种者与密切接触组BCG接种者结果之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:ESAT-6/CFP-10融合蛋白为结核杆菌特异性抗原,能够区分BCG接种和结核病,在结核性感染和结核病的诊断中有应用价值。 展开更多
关键词 esat-6/cfp 10融合蛋白 PPD 结核 BCG IFN-Γ
原文传递
比较两种γ-干扰素释放试验对结核分枝杆菌感染的诊断价值
6
作者 赵志鹏 李晓晨 +2 位作者 熊攀 林明贵 赵秀英 《标记免疫分析与临床》 CAS 2022年第12期2116-2120,共5页
目的分析两种结核特异性γ-干扰素释放试验在辅助诊断结核感染中的应用价值。方法对平行对照组(同时进行了A、B两种方法检测)、临床病例组(部分进行了A方法检测,另外一部分进行了B方法检测),两组检测结果与临床诊断结果进行比对,评估两... 目的分析两种结核特异性γ-干扰素释放试验在辅助诊断结核感染中的应用价值。方法对平行对照组(同时进行了A、B两种方法检测)、临床病例组(部分进行了A方法检测,另外一部分进行了B方法检测),两组检测结果与临床诊断结果进行比对,评估两种方法在结核感染性疾病的辅助诊断中价值差异。进一步将临床病例组分为肺结核组和肺外结核组,比较了两种方法在肺内和肺外结核感染诊断中的应用价值。结果A方法与临床诊断的一致性、灵敏度、特异性均高于B方法;两种方法对肺结核诊断的灵敏度均优于对肺外结核的诊断,但A方法阳性率高于B方法。结论在辅助临床诊断结核感染中,无论肺结核感染还是肺外结核感染,A方法的价值均优于B方法。A方法值得试验室优先选择。 展开更多
关键词 结核感染 Γ-干扰素释放试验 干扰素-Γ 融合蛋白 esat-6-cfp-10-Rv1985c
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部