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本地毛形线虫49 Ku ES蛋白结构基因的分子克隆及原核表达 被引量:2
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作者 郑宝亮 王秀荣 +3 位作者 路义鑫 李冬梅 闫清波 宋铭忻 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期510-514,共5页
提取Trichinella nativa(T.nativa)肌幼虫的总RNA,用RT-PCR方法扩增出了编码T.nativa 49 Ku ES蛋白的结构基因。基因克隆后测序,序列测定结果表明:目的基因TNPG长度为951 bp,核苷酸序列同已发表的Trichinella spiralis(T.spiralis)相应... 提取Trichinella nativa(T.nativa)肌幼虫的总RNA,用RT-PCR方法扩增出了编码T.nativa 49 Ku ES蛋白的结构基因。基因克隆后测序,序列测定结果表明:目的基因TNPG长度为951 bp,核苷酸序列同已发表的Trichinella spiralis(T.spiralis)相应的序列P49同源性为97.68%,所推导的氨基酸序列同源性为95.24%。将目的基因TNPG插入到原核表达载体pET-30a的BamHⅠ酶切位点处,并转化到感受态表达菌中进行诱导表达。结果显示TNPG在原核表达菌BL-21中获得了高效表达,表达产物为40.8 Ku的融合蛋白,表达量达到菌体总蛋白的22.8%。通过Western blot分析,表达产物可以被小鼠T.nativa和T.spiralis阳性血清以及它们的中国地理株的小鼠血清特异性识别。 展开更多
关键词 旋毛虫 nativa种 旋毛虫 spiralis种 49 KU es蛋白 基因序列 WesTEM BLOT分析
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本地毛形线虫49ku ES重组蛋白诱发小鼠保护性免疫的研究 被引量:1
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作者 韩周 姜曰晓 +3 位作者 李继红 肖文左 宋铭忻 路义鑫 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第2期6-8,共3页
目的研究本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白对小鼠的免疫保护作用。方法以表达的本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白免疫小鼠,共免疫3次。末次免疫后10d,每只小鼠攻击感染200条本地毛形线虫感染性肌幼虫,检测本地毛形线虫7日龄成虫数... 目的研究本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白对小鼠的免疫保护作用。方法以表达的本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白免疫小鼠,共免疫3次。末次免疫后10d,每只小鼠攻击感染200条本地毛形线虫感染性肌幼虫,检测本地毛形线虫7日龄成虫数、雌虫体外产新生幼虫数以及感染35d肌幼虫数,并且计算减虫率,应用自制的ELISA方法测定各组小鼠血清抗体OD值。结果成虫减虫率、新生幼虫减虫率、肌幼虫减虫率分别为9.4%、70.2%和71.3%,免疫组血清抗体水平远远高于佐剂对照组和感染对照组(P<0.01)。结论本地毛形线虫肌幼虫49ku ES重组蛋白诱导小鼠产生较好的抗本地毛形线虫的保护性免疫。 展开更多
关键词 本地毛形线虫 重组49 KU es蛋白 保护性免疫
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旋毛虫感染鼠血清P53抗体消长规律的观察
3
作者 朱江巍 《现代畜牧兽医》 2013年第7期53-55,共3页
以纯化的旋毛形线虫P53排泄分泌重组蛋白包被微量反应板,建立检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法,并以本方法测定旋毛形线虫感染的试验小鼠,试验显示,以100条肌幼虫/只经口饲喂感染25只昆明鼠,于第5天可检出抗体,第27天达到最高峰,第27天到... 以纯化的旋毛形线虫P53排泄分泌重组蛋白包被微量反应板,建立检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法,并以本方法测定旋毛形线虫感染的试验小鼠,试验显示,以100条肌幼虫/只经口饲喂感染25只昆明鼠,于第5天可检出抗体,第27天达到最高峰,第27天到第49天抗体水平维持稳定,随后抗体水平开始呈下降趋势。 展开更多
关键词 旋毛形线虫 P53 es蛋白 间接ELISA 抗体消长规律
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旋毛形线虫感染鼠血清P49抗体消长规律的研究
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作者 朱江巍 《现代畜牧兽医》 2013年第6期45-47,共3页
以纯化的旋毛形线虫P49排泄分泌重组蛋白包被微量反应板,建立检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法,并以本方法测定旋毛形线虫感染的实验小鼠,试验显示,以100条肌幼虫/只经口饲喂感染25只昆明鼠,于第7天可检出抗体,第31天达到最高峰,第31天至... 以纯化的旋毛形线虫P49排泄分泌重组蛋白包被微量反应板,建立检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法,并以本方法测定旋毛形线虫感染的实验小鼠,试验显示,以100条肌幼虫/只经口饲喂感染25只昆明鼠,于第7天可检出抗体,第31天达到最高峰,第31天至第61天抗体水平维持稳定,随后抗体水平开始呈下降趋势。此结果与旋毛形线虫肌幼虫感染后的生活周期相吻合。 展开更多
关键词 旋毛形线虫 P49 es蛋白 间接ELISA 抗体消长规律
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捻转血矛线虫的分泌物/排泄物(ES)蛋白接种绵羊后产生年龄相关的保护性免疫
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作者 马学斌 《国外医学(寄生虫病分册)》 2002年第3期139-140,共2页
捻转血矛线虫是羊体内的一种重要的寄生虫,且对驱虫药普遍具有抗药性,而预防接种可作为一种有用的工具控制其感染的流行,针对捻转血矛线虫的疫苗可以产生部分的保护性免疫。在这一研究中,作者观察不同年龄的绵羊在接种捻转血矛线虫的ES... 捻转血矛线虫是羊体内的一种重要的寄生虫,且对驱虫药普遍具有抗药性,而预防接种可作为一种有用的工具控制其感染的流行,针对捻转血矛线虫的疫苗可以产生部分的保护性免疫。在这一研究中,作者观察不同年龄的绵羊在接种捻转血矛线虫的ES蛋白疫苗后对捻转血矛线虫的易感性的变化。 展开更多
关键词 es蛋白疫苗 预防接种 捻转血矛线虫 分泌物 排泄物 保护性免疫
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石渠棘球绦虫Es95基因克隆及序列分析 被引量:1
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作者 李建秋 李立 +2 位作者 闫鸿斌 娄忠子 贾万忠 《安徽农业科学》 CAS 2015年第18期33-36,共4页
[目的]首次克隆获得石渠棘球绦虫Es95基因,并进行序列分析,为研究抗包虫病候选疫苗提供理论指导。[方法]从高原鼠兔肺脏包囊上获得石渠棘球绦虫原头蚴,提取全基因组,并根据NCBI上6种棘球属绦虫95基因序列设计引物,以基因组DNA为模板扩增... [目的]首次克隆获得石渠棘球绦虫Es95基因,并进行序列分析,为研究抗包虫病候选疫苗提供理论指导。[方法]从高原鼠兔肺脏包囊上获得石渠棘球绦虫原头蚴,提取全基因组,并根据NCBI上6种棘球属绦虫95基因序列设计引物,以基因组DNA为模板扩增到Es95基因,并克隆到T载体上,测序后进行序列分析。[结果]以石渠棘球绦虫全基因组DNA为模板扩增出Es95基因长为1 330 bp,序列分析含有3个外显子和2个内含子,有1个糖基化位点,N端有一信号肽序列(16个氨基酸),C端有跨膜区(23个氨基酸),亲水性低,B细胞抗原表位预测有ES95潜在抗原表位6个。[结论]ES95是一个分泌性糖蛋白,在包虫病的预防上具有重要意义。 展开更多
关键词 石渠棘球绦虫 es95蛋白 序列分析
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