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miR-483-5p通过靶基因ERK1调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡 被引量：7
1
作者 蒋秀敏 刘雨生 许波 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第11期1639-1644,共6页
目的证明miR-483-5p及其靶基因ERK1参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。方法 1体外培养人正常颗粒细胞,调控其miR-483-5p超表达,聚合酶链反应(PCR)及Western blot法检测ERK1的mRNA及蛋白表达情况;将包含野生型或突变型的ERK1 mRNA 3'... 目的证明miR-483-5p及其靶基因ERK1参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。方法 1体外培养人正常颗粒细胞,调控其miR-483-5p超表达,聚合酶链反应(PCR)及Western blot法检测ERK1的mRNA及蛋白表达情况;将包含野生型或突变型的ERK1 mRNA 3'UTR的DNA片段克隆在荧光素酶标记的质粒,共转染miR-483-5p mimics、controlmiR mimics和野生型、突变型重组质粒,检测其颗粒细胞相对荧光素酶活性;2将miR-483-5p mimics及ERK1 siRNAs单独及共同转染颗粒细胞,MTT法及TUNEL法分别检测三种情况下卵巢颗粒细胞的增殖、凋亡情况。结果 1 miR-483-5p超表达后,ERK1基因及蛋白表达均下降;与controlWt(野生型)转染组相比,miR-483-Wt组的荧光素酶活性显著降低;miR-483-Mut(突变型)与control-Mut转染组间荧光素酶活性的比较差异无统计学意义;2 miR-483-5p mimics与ERK1 siRNAs单独及共同转染颗粒细胞,三种转染条件下颗粒细胞增殖均显著受抑制、凋亡率显著升高,且三种作用效果差异无统计学意义。结论 miR-483-5p通过直接与靶基因ERK1结合,参与调控人类颗粒细胞增殖凋亡平衡。 展开更多
关键词 miR-483-5p erk1/2-mapk通路 颗粒细胞 增殖凋亡平衡
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橄榄苦苷经ERK1/2-MAPK通路诱导SH-SY5Y细胞周期阻滞
2
作者 李文杰 高钟丽 《医学新知》 CAS 2019年第5期486-488,共3页
目的探讨橄榄苦苷对入神经母细胞瘤细胞——SH-SY5Y细胞周期的影响.方法将SH-SY5Y细胞分为溶剂对照组、橄榄苦苷4个不同浓度(100、200、400、800μmol/L)组,采用巯基罗丹明B法检测细胞的存活率,流式细胞术检测细胞周期,蛋白质免疫印迹... 目的探讨橄榄苦苷对入神经母细胞瘤细胞——SH-SY5Y细胞周期的影响.方法将SH-SY5Y细胞分为溶剂对照组、橄榄苦苷4个不同浓度(100、200、400、800μmol/L)组,采用巯基罗丹明B法检测细胞的存活率,流式细胞术检测细胞周期,蛋白质免疫印迹法检测胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平.结果橄榄苦苷作用48 h后,SH-SY5Y细胞的存活率显著下降(P<0.01),G0/G1期细胞比例增加(P<0.01),S期及G2/M期细胞比例下降(均P<0.05),ERK1/2表达减低(P<0.01).结论橄榄苦苷可经ERK1/2-MAPK(丝裂原活化蛋白激酶)通路诱导SH-SY5Y细胞周期阻滞,抑制细胞存活率. 展开更多
关键词 橄榄苦苷 erk1/2-mapk通路 人神经母细胞瘤细胞 周期阻滞
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环孢素引起肾小管上皮细胞培养液中肾损伤分子-1水平升高的机制 被引量：3
3
作者 宋莲莲 赵军 +3 位作者 于金宇 张文岚 薛丽娟 傅耀文 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1201-1205,共5页
目的:探讨环孢素(CsA)引起人肾小管上皮细胞(HKC)培养液中肾损伤分子-1(KIM-1)水平升高的作用机制,阐明KIM-1表达与p38 MAPK通路和EKR1/2 MAPK通路的关系。方法:将处于对数生长期的HKC分为空白组、CsA损伤组、CsA与p38激酶抑制剂合用组... 目的:探讨环孢素(CsA)引起人肾小管上皮细胞(HKC)培养液中肾损伤分子-1(KIM-1)水平升高的作用机制,阐明KIM-1表达与p38 MAPK通路和EKR1/2 MAPK通路的关系。方法:将处于对数生长期的HKC分为空白组、CsA损伤组、CsA与p38激酶抑制剂合用组、p38激酶抑制剂组、CsA与ERK1/2激酶抑制剂合用组和ERK1/2激酶抑制剂组。MTT法检测各组HKC增殖抑制率,ELISA法测定各组HKC上清液中KIM-1水平,流式细胞术检测各组细胞存活率、细胞凋亡率和细胞坏死率。结果:与空白组比较,CsA损伤组细胞上清液中KIM-1水平显著升高(P<0.05),细胞存活率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和细胞坏死率显著升高(P<0.05);p38激酶抑制剂组和ERK1/2激酶抑制剂组中细胞存活率、细胞凋亡率和细胞坏死率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CsA损伤组比较,CsA与p38激酶抑制剂合用组、CsA与ERK1/2激酶抑制剂合用组细胞上清液中KIM-1水平显著降低(P<0.05),细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和细胞坏死率显著降低(P<0.05)。结论:p38 MAPK通路和ERK1/2 MAPK通路参与CsA素引起肾小管上皮细胞培养液中KIM-1水平升高的过程,KIM-1的表达可能成为临床监测CsA肾毒性的生化指标。 展开更多
关键词 肾损伤分子-1 人肾小管上皮细胞 P38mapk通路 erk1/2mapk通路 kidney injury MOLECULE-1
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表儿茶素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERK1/2 MAPK信号通路影响的研究 被引量：3
4
作者 朱君 朱韬 +2 位作者 陶革方 武凤莲 李力群 《新中医》 CAS 2019年第7期14-17,共4页
目的:研究表儿茶素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERK1/2 MAPK信号通路的影响。方法:取4例增生性腹部瘢痕组织,分离成纤维细胞并鉴定和培养,根据表儿茶素对成纤维细胞增殖抑制的半数抑制浓度(The median inhibition concentration,IC50)... 目的:研究表儿茶素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERK1/2 MAPK信号通路的影响。方法:取4例增生性腹部瘢痕组织,分离成纤维细胞并鉴定和培养,根据表儿茶素对成纤维细胞增殖抑制的半数抑制浓度(The median inhibition concentration,IC50)确定表儿茶素的浓度,用表儿茶素分别作用24 h、48 h、72 h,用MTT法检测细胞抑制情况,Western Blot法检测细胞外信号调节激酶1/2 (Extracellular-signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2 (p-ERK1/2)和CyclinD1蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞周期。结果:表儿茶素对成纤维细胞的24 h IC50为20.47 mg/mL,故选择浓度为20.00 mg/mL进行后续实验。随着表儿茶素作用时间的增加,抑制情况增加越显著(P <0.05);表儿茶素对成纤维细胞ERK1/2蛋白表达影响不显著;与表儿茶素作用0 h比较,作用24 h、48 h和72 h后成纤维细胞p-ERK1/2、CyclinD1蛋白表达和G0/G1期降低,成纤维细胞G2/M期增加(P <0.05);随着作用时间的增加,成纤维细胞p-ERK1/2、CyclinD1蛋白表达和G0/G1期降低越显著,G2/M期增加越显著(P <0.05)。结论:表儿茶素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖有抑制作用,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化,阻滞细胞周期有关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 表儿茶素 成纤维细胞 细胞增殖 erk1/2mapk信号通路
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circRNA_079813调控ROR2和ERK1/2-MAPK信号通路对牙髓损伤大鼠成骨分化的影响 被引量：1
5
作者 周洋 张悦 刘景 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第9期1455-1462,共8页
目的:探讨circRNA_079813对牙髓损伤模型大鼠成骨分化的作用及其机制。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,即假手术组、牙髓损伤组、pcDNA3.1空载体(pcDNA-null)+牙髓损伤组、过表达circRNA_079813(pcDNA-circ)+牙髓损伤组、pcDNA-circ+siRN... 目的:探讨circRNA_079813对牙髓损伤模型大鼠成骨分化的作用及其机制。方法:将70只SD大鼠随机分为7组,即假手术组、牙髓损伤组、pcDNA3.1空载体(pcDNA-null)+牙髓损伤组、过表达circRNA_079813(pcDNA-circ)+牙髓损伤组、pcDNA-circ+siRNA-NC+牙髓损伤组、pcDNA-circ+siRNA-ROR2+牙髓损伤组、pcDNA-circ+PD98059(ERK1/2抑制剂)+牙髓损伤组,每组10只。术后3 d采用苏木精—伊红(HE)染色观察牙髓组织病理变化。检测各组碱性磷酸酶(ALP)活性,RTqPCR法检测circRNA_079813表达,western blotting法检测ROR2、磷酸化(p-)ERK1/2、骨涎蛋白(BSP)、骨钙蛋白(OCN)、ALP、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白-1(DMP-1)蛋白表达。结果:与假手术组比较,牙髓损伤组牙髓组织有明显炎症浸润和损伤特征,circRNA_079813表达下调(P<0.05)。与pcDNA-null+牙髓损伤组比较,pcDNA-circ+牙髓损伤组circRNA_079813、ROR2、p-ERK1/2、BSP、ALP、OCN、DSPP、DMP-1表达水平及ALP活性均升高(均P<0.05)。沉默ROR2表达后,与pcDNA-circ+siRNA-NC+牙髓损伤组比较,pcDNA-circ+siRNA-ROR2+牙髓损伤组ROR2、p-ERK1/2、BSP、ALP、OCN、DSPP、DMP-1表达及ALP活性均下降(均P<0.05)。与pcDNA-circ+牙髓损伤组比较,pcDNA-circ+PD98059+牙髓损伤组pERK1/2、ALP、BSP、OCN、DSPP、DMP-1表达及ALP活性均下降(均P<0.05)。结论:circRNA_079813通过促进ROR2表达激活牙髓损伤大鼠ERK1/2-MAPK信号通路促进成骨分化。 展开更多
关键词 circRNA_079813 成骨分化 牙髓损伤 ROR2 erk1/2-mapk信号通路
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开心片治疗ACS对ERK1/2MAPK信号通路的影响
6
作者 张瑶 《中国中医药现代远程教育》 2018年第9期62-64,共3页
目的通过观察开心片对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者内脂素(Visfatin)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogena-ctivated protein kinases,MAPK)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等相关炎性指标的影响,探讨其对ER K1/2MAPK信号通路... 目的通过观察开心片对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者内脂素(Visfatin)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogena-ctivated protein kinases,MAPK)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等相关炎性指标的影响,探讨其对ER K1/2MAPK信号通路的影响。方法选择ACS患者120例,按简单随机化方法分为对照组(以西医规范化治疗方案)和开心片组(西医规范化治疗和中成药开心片口服),分别在治疗前及治疗后1个月检测Visfatin、MAPK、MMP-9、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)水平,并观察治疗后的不良反应情况。结果开心片能明显降低MAPK、MCP-1、MMP-9、IL-6、hs-CRP浓度,但对Visfatin水平无明显改变。结论推断开心片可通过影响ERK1/2MAPK信号转导通路而调控炎症因子,同时改善ACS患者的临床症状。 展开更多
关键词 急性冠脉综合征 开心片 炎症因子 erk1/2mapk信号通路 胸痹
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