冬凌草甲素通过激活ERK途径诱导U937细胞凋亡 被引量：11

1

作者 刘艳秋 游松 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期1856-1859,共4页

目的:研究冬凌草甲素诱导人组织淋巴瘤U937细胞凋亡的机制及ERK激酶在凋亡过程中的作用。方法:噻唑蓝(MTT)法,Hoechst 33258染色法,DNA凝胶电泳及Western blot检测法。结果:冬凌草甲素对U937细胞生长抑制作用呈时间剂量依赖性。27μmol.... 目的:研究冬凌草甲素诱导人组织淋巴瘤U937细胞凋亡的机制及ERK激酶在凋亡过程中的作用。方法:噻唑蓝(MTT)法,Hoechst 33258染色法,DNA凝胶电泳及Western blot检测法。结果:冬凌草甲素对U937细胞生长抑制作用呈时间剂量依赖性。27μmol.L-1冬凌草甲素作用细胞12 h后,Hoechst 33258染色细胞,出现明显凋亡小体,并诱导ERK发生磷酸化。ERK磷酸化抑制剂PD98059阻断了冬凌草甲素诱导的细胞生长抑制及DNA片段化。细胞内抑制凋亡蛋白Bcl-XL表达量时间依赖性减少,促凋亡蛋白Bax表达量增加,而ERK抑制剂可逆转这种作用。结论:冬凌草甲素(27μmol.L-1)诱导U937细胞凋亡,这种作用是通过活化ERK激酶,改变其下游Bax/Bcl-XL的表达比率,从而促进U937细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 U937细胞 凋亡 erk激酶

下载PDF 职称材料

ERK在NGF诱导PC12细胞分化中的作用 被引量：6

2

作者 张雯 彭芳芳 +3 位作者 张百芳 沈晗 吴少波 武栋成 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第3期227-231,共5页

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1/2蛋白和磷酸化ERK1/2蛋白水平的影响,并观察MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂U012... 目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)在NGF诱导的PC12细胞分化中的作用机制。方法以NGF处理PC12细胞建立分化模型,运用免疫印迹检测不同浓度不同作用时间时NGF对ERK1/2蛋白和磷酸化ERK1/2蛋白水平的影响,并观察MAPK/ERK激酶(MEK)抑制剂U0126对NGF诱导的细胞形态学改变的影响。结果ERK1/2蛋白的磷酸化呈现NGF剂量和时间依赖性。NGF作用细胞5min即可观察到明显的ERK1/2蛋白磷酸化,持续1h左右,2h时降低到初始水平,而细胞形态的改变出现在NGF作用12h以后。倒置相差显微镜观察可见PC12细胞分化的程度与ERK1/2活化持续的时间正相关,U0126可完全即时抑制ERK1/2的活化,而ERK1/2活化的抑制可完全阻断NGF诱导的PC12细胞分化。结论ERK1/2的活化是PC12细胞发生分化的必需事件,其活化时间的长短对分化具有决定作用。 展开更多

关键词 细胞分化 NGF erk1/2 细胞外信号调节激酶 细胞形态学改变 PC12细胞 免疫印迹检测 erk激酶 时间依赖性 蛋白磷酸化 作用机制 分化模型 蛋白水平 作用时间 不同浓度 MAPK 微镜观察 细胞发生 决定作用 2蛋白 活化 抑制剂 NCF 正相关

下载PDF 职称材料

冬凌草甲素增强U937细胞吞噬凋亡小体过程中ERK途径的调节作用 被引量：3

3

作者 刘艳秋 游松 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期110-113,共4页

目的研究冬凌草甲素促进U937人淋巴瘤细胞分化的巨噬细胞吞噬凋亡小体的机制。方法光学显微镜下计数检测吞噬率,PKC活力检测盒测定PKC活力,吖啶橙染色,Hoechst 33258染色及W estern b lot法。结果酪氨酸蛋白激酶(PTK)抑制剂gen iste in... 目的研究冬凌草甲素促进U937人淋巴瘤细胞分化的巨噬细胞吞噬凋亡小体的机制。方法光学显微镜下计数检测吞噬率,PKC活力检测盒测定PKC活力,吖啶橙染色,Hoechst 33258染色及W estern b lot法。结果酪氨酸蛋白激酶(PTK)抑制剂gen iste in和蛋白激酶C(PKC)广泛的抑制剂stauroporine均不同程度地抑制了冬凌草甲素诱导U937分化的巨噬细胞对凋亡小体的吞噬增强效果。2.7μmol.L-1的冬凌草甲素处理U937细胞后,时间依赖性地增加了PKC活力。ERK磷酸化抑制剂PD98059阻断了冬凌草甲素的吞噬增强作用。免疫印迹结果显示冬凌草甲素作用U937细胞后,ERK磷酸化程度增加,而PD98059逆转了ERK磷酸化。结论冬凌草甲素增强U937细胞对凋亡小体的吞噬作用,其吞噬机制是通过激活PTK和PKC激酶,导致下游ERK途径活化,从而增强吞噬过程。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 U937细胞 吞噬 erk激酶

下载PDF 职称材料

抗癌药Sorafenib 被引量：2

4

作者 葛涛 范鸣 《药学进展》 CAS 2005年第7期338-338,F003,共2页

关键词 抗癌药 信号传导系统 信号传导途径 erk激酶 苏氨酸激酶 细胞生长 连锁反应 细胞表面 相关激酶 erk1 激活途径 肿瘤组织 MEK Raf Ras MAP 丝氨酸 磷酸化 调控 胞核 增殖

下载PDF 职称材料

1,5-二咖啡酰奎宁酸减轻MPP^+所致PC12细胞损伤的机制研究 被引量：3

5

作者 肖海兵 李建英 +5 位作者 曹旭 刘人恺 李雯飞 杨志刚 林勤郁 杨春水 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期262-267,共6页

目的探讨1,5-二咖啡酰奎宁酸(1,5-diCQA)是否通过激活Nrf2而减轻1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)所致的PC12细胞损伤,并对可能的信号通路进行研究。方法采用MPP+处理具有多巴胺(DA)能神经元特性的PC12细胞作为帕金森病(PD)的体外模型。实... 目的探讨1,5-二咖啡酰奎宁酸(1,5-diCQA)是否通过激活Nrf2而减轻1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)所致的PC12细胞损伤,并对可能的信号通路进行研究。方法采用MPP+处理具有多巴胺(DA)能神经元特性的PC12细胞作为帕金森病(PD)的体外模型。实验分为正常对照组、MPP+处理组、1,5-diCQA预处理+MPP+处理组,为了观察1,5-diCQA预处理的浓度-效应关系,将1,5-diCQA的浓度设为10、20、50、100μmol/L。用CCK8法测定各组细胞存活率,酶标仪检测细胞谷胱甘肽(GSH)水平和活性氧族(ROS)水平,Western blot检测各组细胞的Nrf2蛋白水平。进一步采用siRNA转染沉默Nrf2,加入MAPK家族一系列激酶抑制剂后再检测上述相关指标。结果 MPP+(250mmol/L)处理PC12细胞24h后,与正常对照组相比,细胞存活率下降,GSH耗竭,ROS生成增多,说明PD细胞模型建立成功。不同浓度的1,5-diCQA预处理可以减轻MPP+导致的细胞损伤,且在一定范围内具有量效关系;不同浓度的1,5-diCQA预处理可以明显上调Nrf2蛋白的水平。沉默Nrf2后,1,5-diCQA预处理对MPP+诱导损伤的PC12细胞的保护作用消失,细胞存活率未能回升[MPP+组vs.MPP++1,5-diCQA组:(19.47±1.65)%vs.(21.13±2.85)%,P=0.352 6],GSH水平在Nrf2敲除的PC12细胞中明显下降[NT siRNA组vs.Nrf2siRNA组:(15.05±1.71)nmol/mgprotein vs.(4.31±0.83)nmol/mg protein,P<0.001],且1,5-diCQA预处理对GSH耗竭的逆转效应也消失。对MAPK激酶家族的一系列激酶进行信号通路筛选发现,Erk激酶参与了1,5-diCQA通过激活Nrf2而减轻MPP+诱导的PC12细胞损伤这一过程。结论 1,5-diCQA可浓度依赖性地减轻MPP+诱导的PC12氧化应激损伤。这种保护作用是通过激活Erk激酶,进而激活Nrf2,然后上调细胞内源性抗氧化系统来实现的。 展开更多

关键词 1 5-二咖啡酰奎宁酸 核因子2红系相关因子2 氧化应激 erk激酶 帕金森病

下载PDF 职称材料

p38MAPK信号途径抑制剂对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞中MAPK通路的调控 被引量：3

6

作者 刘霖 王智超 丁洪涛 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期538-541,共4页

目的：探讨p38MAPK特异性抑制剂SB203580（SB）对缺血再灌注损伤心肌细胞的保护作用及对凋亡信号通路的影响。方法：选择45只250~300g雄性SD大鼠,通过阻断其左冠状动脉（冠脉）前降支（LAD）30min再灌注180min制备I/R损伤模型,随机分为... 目的：探讨p38MAPK特异性抑制剂SB203580（SB）对缺血再灌注损伤心肌细胞的保护作用及对凋亡信号通路的影响。方法：选择45只250~300g雄性SD大鼠,通过阻断其左冠状动脉（冠脉）前降支（LAD）30min再灌注180min制备I/R损伤模型,随机分为3组（每组15只）：溶剂对照组（Vehicle组）、低剂量SB预处理组（SB-L组）和高剂量SB预处理组（SB-H组）。同时选取15只同周龄SD大鼠仅穿线但不结扎（Sham组）。SB-L组和SB-H组分别于LAD结扎前30min注射50、100μg/kg SB,其余两组注射等体积的0.9%氯化钠溶液。分别在术前（T0）、缺血30min后（T1）、再灌注60min（T2）、120min（T3）及180min后（T4）检测各组血浆肿瘤坏死因子（TNF）-a水平,处死大鼠并通过TTC染色分析缺血程度和梗死程度,将心脏组织包埋并采用免疫组织化学技术切片染色方法检测心肌组织中细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase ERK）和C-Jun氨基末端激酶（C-Jun N-terminal kinase JNK）及凋亡细胞的表达。结果：与Sham组相比,Vehicle组除T0外的I/R其余时间点的TNF-a水平均升高（均P〈0.05）;SB处理后可减轻TNF-a的升高且改善心肌缺血及梗死程度,ERK表达较Vehicle组增强,JNK表达较Vehicle组减弱（均P〈0.05）,SB-H组的改善效果优于SB-L组（P〈0.05）。结论：SB对心肌I/R损伤有改善作用,可降低心肌缺血及梗死程度,并促进ERK信号通路表达,抑制JNK信号通路的活化,抑制心肌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注 SB203580 erk激酶 JNK蛋白

原文传递

蛋白激酶ERK活化介导IFN-α在人骨髓瘤细胞系U266上的增殖促进效应 被引量：2

7

作者 宋伦 黎燕 +1 位作者 于鸣 沈倍奋 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期339-341,共3页

目的　研究IFN α在人骨髓瘤细胞系U2 6 6上的生物学效应及其分子机制。方法　采用MTT方法检测IFN α对U2 6 6细胞生长的影响 ;采用FACS方法检测IFN α作用下U2 6 6细胞生长周期及其表面IL 6R、gp130等分子表达水平的改变情况 ;采用免... 目的　研究IFN α在人骨髓瘤细胞系U2 6 6上的生物学效应及其分子机制。方法　采用MTT方法检测IFN α对U2 6 6细胞生长的影响 ;采用FACS方法检测IFN α作用下U2 6 6细胞生长周期及其表面IL 6R、gp130等分子表达水平的改变情况 ;采用免疫印迹方法检测能够介导细胞生长的Ras/MAPK途径中蛋白激酶ERK在IFN α刺激作用下的活化情况 ,并同时观察Ras/MAPK途径特异性抑制剂PD980 5 9作用后ERK激酶活化和细胞生长所发生的变化。结果　IFN α能够促进U2 6 6细胞周期行进 ,同时表现出细胞增殖促进效应 ;但它不影响U2 6 6细胞上IL 6R和gp130分子的表达。IFN α可明显激活蛋白激酶ERK ,PD980 5 9作用后ERK活化受抑 ,同时IFN α在U2 6 6细胞上的生长促进效应明显下调。结论　IFN α通过激活蛋白激酶ERK介导其在U2 6 展开更多

关键词 IFN-Α 多发性骨髓瘤 增殖效应 erk激酶 MM FACS法

原文传递

基于MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1通路探讨三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型的影响 被引量：9

8

作者 陆慧敏 孙文熙 +1 位作者 霍晨星 陈宝艳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期75-81,共7页

目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤... 目的:通过研究三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/Erk激酶,SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路的影响,探讨三七总皂苷抑制肿瘤的可能机制。方法:建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型,将48只造模成功的小鼠随机分为三七总皂苷低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg^-1)和模型组,每组12只,三七总皂苷各剂量组腹腔注射剂量为10 mL·kg^-1,模型组给予相同剂量的生理盐水,连续给药28 d。给药结束后分离肿瘤组织、称质量、切片、匀浆等,采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1蛋白表达。结果:与模型组比较,三七总皂苷中、高剂量组的肿瘤质量明显下降(P<0.05);肿瘤细胞凋亡数量随三七总皂苷剂量的升高明显升高(P<0.05);三七总皂苷中、高剂量组肿瘤组织中MEKK1,SEK1,JNK1,AP-1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤模型具有抑制作用,其作用机制可能与激活MEKK1/SEK1/JNK1/AP-1信号通路有关。 展开更多

关键词 三七总皂苷 4T1小鼠乳腺癌细胞 促分裂原激活的蛋白激酶的激酶1(MEKK1)/应激激活的蛋白激酶/细胞外信号调节的蛋白激酶(SAPK/erk激酶 SEK1)/c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)/激活蛋白-1(AP-1)通路 凋亡

原文传递

异槲皮苷对糖尿病肾病大鼠MEK/ERK/Nrf1信号通路及肾脏纤维化的影响 被引量：7

9

作者 陈杰彬 魏连波 +2 位作者 李成杰 汪晓娟 聂晓莉 《中国中西医结合肾病杂志》 2020年第10期853-856,共4页

目的:探讨异槲皮苷对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化及ERK激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)/核因子E2相关因子1(Nrf1)信号通路的影响。方法:实验分为正常组、模型组、异槲皮苷(低、中、高)剂量组、阳性对照组。血糖仪、24 h尿蛋白检测... 目的:探讨异槲皮苷对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化及ERK激酶(MEK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)/核因子E2相关因子1(Nrf1)信号通路的影响。方法:实验分为正常组、模型组、异槲皮苷(低、中、高)剂量组、阳性对照组。血糖仪、24 h尿蛋白检测试剂盒分别检测空腹血糖、24 h尿蛋白定量;苏木精-伊红(HE)观察大鼠肾脏组织形态;超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD、MDA水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测层黏连蛋白(LN)、纤维连接蛋白(FN)mRNA水平;蛋白免疫印迹检测MEK、ERK、p-ERK、Nrf1蛋白水平。结果:模型组组织纤维化、炎症浸润明显;异槲皮苷(低、中、高)剂量组随着剂量升高,组织纤维化、炎症浸润现象逐渐缓解;阳性对照组无组织纤维化、炎症浸润现象。与正常组相比,模型组空腹血糖、24 h尿蛋白定量,MDA,LN、FN mRNA,MEK、p-ERK蛋白水平升高(P<0.05);SOD、Nrf1蛋白水平降低(P<0.05)。与模型组相比,异槲皮苷(中、高)剂量组、阳性对照组空腹血糖、24 h尿蛋白定量,MDA,LN、FN mRNA,MEK、p-ERK蛋白水平降低(P<0.05);SOD、Nrf1蛋白水平升高(P<0.05)。异槲皮苷低剂量组24 h尿蛋白定量、MDA水平降低(P<0.05),Nrf1蛋白水平升高(P<0.05)。结论:异槲皮苷可抑制MEK/ERK信号通路促进Nrf1表达,实现对肾脏纤维化的修复。 展开更多

关键词 异槲皮苷 糖尿病肾病 肾脏纤维化 erk激酶/细胞外调节蛋白激酶/核因子E2相关因子1信号通路

下载PDF 职称材料

MAPK信号通路在FGF1刺激大鼠原代肝细胞增殖中的作用 被引量：2

10

作者 佘丽君 周晓东 魏菁 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2007年第1期41-42,共2页

目的观察MEK/MAPK信号通路在FGF1刺激体外培养原代大鼠肝细胞增殖中的作用。方法体外培养原代大鼠肝细胞分三组,第二组培养基中加入FGF1,第三组加FGF1和MEK1阻滞剂PD98059,一定时间后检测并分析不同组肝细胞增殖情况。结果FGFl组与FGF1+... 目的观察MEK/MAPK信号通路在FGF1刺激体外培养原代大鼠肝细胞增殖中的作用。方法体外培养原代大鼠肝细胞分三组,第二组培养基中加入FGF1,第三组加FGF1和MEK1阻滞剂PD98059,一定时间后检测并分析不同组肝细胞增殖情况。结果FGFl组与FGF1+PD98059组肝细胞进入S期无差别,但与对照组却有差别。结论本实验条件下Src/Raf/MEK/MAPK通路组分MEK1的特异阻滞剂PD98059不能阻断FGF1促进体外培养的原代大鼠肝细胞增值的作用。 展开更多

关键词 酸性成纤维细胞生长因子 PD98059 丝裂原活化蛋白激酶 erk激酶(MEK) 丝裂原活化蛋白激酶erk(MAPK)

下载PDF 职称材料

孕哺期氯化镧暴露对子代大鼠学习记忆及细胞外信号调节激酶通路的影响 被引量：1

11

作者 洪云婷 孙文昌 +3 位作者 袁慧 张彦强 王剑波 杨敬华 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期768-771,共4页

目的研究孕哺期氯化镧暴露对子代大鼠大脑皮质细胞外信号调节激酶(extracellular-signal-regulated kinases,ERK)、MAPK/ERK(MEK)及磷酸化水平和Raf-1表达的影响。方法将32只健康成年雌性Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量氯化镧... 目的研究孕哺期氯化镧暴露对子代大鼠大脑皮质细胞外信号调节激酶(extracellular-signal-regulated kinases,ERK)、MAPK/ERK(MEK)及磷酸化水平和Raf-1表达的影响。方法将32只健康成年雌性Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量氯化镧组,与雄性成年Wistar大鼠按1∶1比例同笼交配。自受孕起对照组饮用蒸馏水,低、中、高剂量染镧组分别饮用含1.25、2.5、5.0 g/L LaCl3的蒸馏水溶液,并哺育其子代大鼠,至子代大鼠断乳后结束染毒。采用Morris水迷宫测试子代大鼠空间辨别性学习记忆能力,采用透射电镜法研究子代大鼠大脑皮质神经突触超微结构的改变,采用Western blot法测定子代大鼠大脑皮质Raf-1、MEK、ERK蛋白水平和MEK、ERK磷酸化水平。结果各染镧组仔鼠学习记忆能力与对照组相比明显下降,且随着染镧剂量的增加下降越来越明显。与对照组相比,各染镧组仔鼠大脑皮质神经突触超微结构出现异常改变,如突触活性带变短、突触后致密物变薄,其中5.0 g/L LaCl3组神经突触超微结构异常改变最为明显。各染镧组Raf-1蛋白水平低于对照组(P<0.05),且随着染镧剂量的增加而下降。各染镧组p-MEK和p-ERK蛋白水平低于对照组(P<0.05),且随着染镧剂量的增加而降低,其中5.0 g/L LaCl3组p-MEK和p-ERK蛋白水平与对照组、1.25和2.5 g/L LaCl3组比较均下降(P<0.05)。而各染镧组MEK和ERK蛋白水平与对照组比较无明显变化(P>0.05)。结论孕哺期氯化镧暴露导致子代大鼠大脑皮质中Raf-1表达、MEK和ERK磷酸化水平降低,这可能是氯化镧对神经系统毒性损伤的机制之一。 展开更多

关键词 镧 学习记忆 大脑皮质 RAF-1 MAPK/erk激酶(MEK) 细胞外信号调节激酶(erk)

原文传递

BCR-ABL1抑制剂与MEK抑制剂联用治疗耐药性慢性粒细胞白血病

12

作者 张世俊 《国际药学研究杂志》 CAS 2012年第3期219-219,共1页

抑制引起慢性粒细胞白血病（CML）的致癌激酶BCR-ABL1是临床上靶向治疗的成功典范,但在临床治疗中却频繁出现耐药性突变。一项新的研究表明,抑制耐药性BCR-ABL1突变可能会适得其反地将致癌信号激活,提出了克服耐药的协同战略。研究人员... 抑制引起慢性粒细胞白血病（CML）的致癌激酶BCR-ABL1是临床上靶向治疗的成功典范,但在临床治疗中却频繁出现耐药性突变。一项新的研究表明,抑制耐药性BCR-ABL1突变可能会适得其反地将致癌信号激活,提出了克服耐药的协同战略。研究人员对几种蛋白抑制剂对表达致癌基因NRASQ61L的人黑素瘤细胞的影响进行了研究,结果发现，BCR—ABLl抑制剂伊马替尼、尼洛替尼和达沙替尼反而高度激活RAF．MEK．ERK激酶通路的致癌信号。这也发生于KRAS突变激活的细胞中。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病 MEK抑制剂 耐药性突变 联用治疗 erk激酶 致癌基因 人黑素瘤细胞 临床治疗

下载PDF 职称材料

活化蛋白C经胞外信号调节激酶途径抑制肿瘤坏死因子-α介导的炎症反应 被引量：3

13

作者 许国斌 张近波 +8 位作者 张小乐 董美平 朱金强 史朝红 鄢来超 曹烈祥 吴仙丹 董志兵 王文龙 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期190-192,共3页

目的观察活化蛋白C(APC)能否经胞外信号调节激酶(ERK)途径抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的炎症反应。方法分离培养并分成3组:正常对照组、TNF-α组、TNF-α+rhAPC组人脐静脉内皮细胞。分别用ELISA法检测细胞上清液中细胞间黏附分子-1... 目的观察活化蛋白C(APC)能否经胞外信号调节激酶(ERK)途径抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的炎症反应。方法分离培养并分成3组:正常对照组、TNF-α组、TNF-α+rhAPC组人脐静脉内皮细胞。分别用ELISA法检测细胞上清液中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)浓度;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)与western bloting技术,检测人脐静脉内皮细胞ERKmRNA、磷酸化ERK蛋白的表达。结果 TNF-α组,细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的浓度较正常对照组显著升高(均P<0.05)。TNF-α+rhAPC组,细胞上清液中ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的浓度较TNF-α组显著降低(均P<0.05)。TNF-α组,人脐静脉内皮细胞ERK mRNA、磷酸化蛋白表达水平较正常对照组均显著升高(均P<0.05)。TNF-α+rhAPC组,ERK mRNA、磷酸化蛋白表达水平较TNF-α组均显著降低(均P<0.05)。结论活化蛋白C通过抑制黏附分子的产生来调节TNF-α介导的炎症反应,其作用机制之一可能是通过ERK途径来实现。 展开更多

关键词 活化蛋白C erk蛋白激酶 细胞因子 黏附分子

原文传递

铈诱导细胞凋亡过程中O_2^-·对ERK-like激酶的调控 被引量：2

14

作者 杨松 葛志强 元英进 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期902-907,共6页

对1mmol·L-1Ce4+诱导东北红豆杉细胞凋亡中ERKlike和O-2·的变化规律及其信号调控进行了分析和研究.结果表明,一相对分子质量约为46×103的ERKlike激酶在诱导5min时被快速激活,60min时达到对照水平的2.1倍,并在120min内持... 对1mmol·L-1Ce4+诱导东北红豆杉细胞凋亡中ERKlike和O-2·的变化规律及其信号调控进行了分析和研究.结果表明,一相对分子质量约为46×103的ERKlike激酶在诱导5min时被快速激活,60min时达到对照水平的2.1倍,并在120min内持续激活,诱导240min后ERKlike下调到对照水平的43%,到48h下调到对照的25%.Ce4+诱导O-2·迅速产生,并有两次迸发峰分别出现在3.7～4h和7h.在Ce4+诱导前2h分别加入5μmol·L-1和10μmol·L-1DPI有效抑制了O-2·迸发,并且显著提高和延长了ERKlike磷酸化水平,诱导60min时ERKlike达到对照水平的7.3和18.8倍,240min时达到对照的9.6和10.5倍.这些结果揭示ERKlike的激活和O-2·迸发在诱导早期应是相互独立的信号事件,诱导约4h后O-2·大量迸发对ERKlike的激活有明显信号负调控作用,并通过ERKlike的下调介导了凋亡信号传递. 展开更多

关键词 铈 erk-like激酶 超氧阴离子 凋亡 东北红豆杉细胞

下载PDF 职称材料

Ce^(4+)对不同培养时期红豆杉细胞p-ERK-like的影响

15

作者 葛志强 王莹 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期774-779,共6页

为了探究培养生长不同时期的红豆杉细胞对Ce4+应答差异的机制,采用West-Blot免疫印迹法考察了1 mmol.L-1Ce4+对培养不同时期的红豆杉细胞的细胞外信号调节蛋白激酶磷酸化(p-ERK-like)的表达变化。结果发现,悬浮培养的红豆杉细胞基础p-ER... 为了探究培养生长不同时期的红豆杉细胞对Ce4+应答差异的机制,采用West-Blot免疫印迹法考察了1 mmol.L-1Ce4+对培养不同时期的红豆杉细胞的细胞外信号调节蛋白激酶磷酸化(p-ERK-like)的表达变化。结果发现,悬浮培养的红豆杉细胞基础p-ERK-like的表达在整个培养周期中呈"M"型变化,分别在培养第五天和第二十一天出现两个高峰,而培养第十一天达到低谷,仅为参比值的77%。在培养的不同时间点应用Ce4+诱导后,细胞的最大p-ERK-like表达量以及到达最大量所需的时间表现出显著的差异,培养第十一天的细胞经Ce4+诱导后其p-ERK-like表达速率达高峰。结果表明,处于不同培养时期的红豆杉细胞其p-ERK-like表达存在显著差异,这可能是导致不同培养时期细胞对Ce4+产生不同应答效应的一个因素。 展开更多

关键词 铈 erk-like激酶 红豆杉细胞 悬浮培养 稀土

下载PDF 职称材料