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酶联免疫斑点技术在结核病诊断中的应用现状 被引量:25
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作者 史可云 胡忠义 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期414-416,共3页
关键词 酶联免疫斑点技术 结核病诊断 T淋巴细胞功能 elispot 酶联免疫吸附实验 B淋巴细胞 体外检测 分泌细胞因子 单细胞水平 分泌抗体
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减毒鼠伤寒沙门氏菌运送CD8^+ T细胞表位的细胞免疫应答 被引量:15
2
作者 张辉 焦新安 +1 位作者 潘志明 张晓明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期137-140,共4页
目的:探索减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答的规律性。方法:通过构建融合表达OVA257~264aa和LCMVNP118~132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组菌SL7207(... 目的:探索减毒沙门氏菌运送CD8+T细胞表位诱导机体产生特异性细胞免疫应答的规律性。方法:通过构建融合表达OVA257~264aa和LCMVNP118~132aaCD8+T细胞表位的原核表达质粒ptG2F,以电穿孔法转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,筛选重组菌SL7207(ptG2F)。采用静脉注射免疫C57BL/6和BALB/c小鼠,间隔2wk,分别于第2次和第3次免疫后,取免疫小鼠脾细胞,用ELISPOT法检测特异性IFN-γ分泌细胞和IL-4分泌细胞。结果:携带CD8+T细胞表位的重组菌SL7207(ptG2F)能诱导产生细胞免疫应答。在提呈OVACD8+T细胞表位时,2次免疫后,诱导产生的细胞免疫应答趋向于Th1;而在3次免疫后,呈现Th1/Th2的平衡转换。在提呈LCMVNPCD8+T细胞表位过程中,Th2免疫应答水平高于Th1,且有增强趋势。结论:减毒沙门氏菌可以有效运送CD8+T细胞表位并诱导产生特异细胞免疫应答,这为减毒细菌作为运送载体的研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 减毒沙门氏菌 elispot 细胞因子分泌细胞 TH1/TH2细胞
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酶联免疫斑点(ELISPOT)技术的应用(讲座) 被引量:18
3
作者 侯世芳 许贤豪 +9 位作者 刘广志 乔立艳 矫毓娟 张华 国红 文诗广 殷剑 魏雪飞 刘江红 王红 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2002年第4期200-202,共3页
此文重点介绍近年来建立起来的另一酶免疫分析技术——酶联免疫斑点 (ELISPOT)技术的基本原理及操作步骤 。
关键词 酶免疫分析技术 酶联免疫斑点技术 elispot 抗体分泌性B细胞 细胞因子分泌性T细胞
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T-SPOT.TB在肺结节病与肺结核鉴别诊断中的应用价值 被引量:17
4
作者 叶秋月 许文兵 +1 位作者 刘晓清 张丽帆 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第4期527-530,共4页
目的通过T-SPOT-TB检测,探讨其在肺结节病和肺结核鉴别诊断中的应用价值。方法检测2008年1月至2011年3月在北京协和医院确诊的44例肺结节病和30例肺结核患者并进行对比。结果44例肺结节病患者T-SPOT.3B阳性12例(27.3%),30例肺结... 目的通过T-SPOT-TB检测,探讨其在肺结节病和肺结核鉴别诊断中的应用价值。方法检测2008年1月至2011年3月在北京协和医院确诊的44例肺结节病和30例肺结核患者并进行对比。结果44例肺结节病患者T-SPOT.3B阳性12例(27.3%),30例肺结核患者阳性27例(90%);肺结节病患者ESAT-6和CFP.10肽段合并的分泌IFN-7细胞频数是46 SFCs/106 PBMC(IQR28~204),显著低于肺结核患者565SFCs/106 PBMC(IQR170~2340)。结论T-SPOT-TB检测有助于鉴别诊断肺结节病与肺结核。 展开更多
关键词 肺结节病 肺结核 鉴别诊断 elispot T-SPOT-TB
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细胞免疫和遗传因素对乙型肝炎疫苗阻断母婴传播效果的影响 被引量:15
5
作者 廖雪雁 梁争论 +9 位作者 李艳萍 李荣成 刘建源 吴小音 张瑞 方鑫 农艺 黄月奎 张华远 李河民 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1070-1075,共6页
目的比较接种重组乙肝疫苗后不同体液免疫应答高危儿童的细胞免疫反应特点,进一步探讨母婴阻断失败、无应答的机理。方法124名母亲HBsAg和HBeAg双阳性的新生儿按常规乙肝的免疫程序接种重组CHO和酵母乙肝疫苗,于第1针免后3、7、12月检测... 目的比较接种重组乙肝疫苗后不同体液免疫应答高危儿童的细胞免疫反应特点,进一步探讨母婴阻断失败、无应答的机理。方法124名母亲HBsAg和HBeAg双阳性的新生儿按常规乙肝的免疫程序接种重组CHO和酵母乙肝疫苗,于第1针免后3、7、12月检测HBsAg和抗-HBs,判定免疫成功或失败的新生儿,首针后60~120月(平均80月)再次检测HBsAg和抗-HBs指标,选取8名免疫重组乙肝疫苗母婴阻断失败儿童、4名免后无应答抗体反应的儿童和11名母婴阻断成功的儿童采集静脉血样,分离淋巴细胞,应用ELISPOT方法检测产生IL-2斑点形成细胞的数量,并对斑点数和表面抗体滴度的相关性进行比较,同时分析HLA-A、-B、DRB1和DQB1等位基因的多态性。结果(1)124名研究对象中有77.4%的儿童可产生保护性表面抗体,成功阻断母婴传播;13.7%的人免疫失败,感染乙肝;8.9%的儿童则对乙肝疫苗呈无应答状态。(2)免疫成功组产生IL-2细胞数(55.2±42.22)显著高于免疫失败组(3,75±3.24)和抗体无应答组(6.75±3.59),P<0.01。(3)儿童免疫乙肝疫苗后的表面抗体滴度与经乙肝疫苗诱导产生的特异性分泌IL-2的T细胞数量呈显著性正相关(r =0.601,P<0.01)。(4)HLA-B*48在对酵母乙肝疫苗无应答的儿童中占有25%的频率,显著高于免疫成功(2.2%)和失败的儿童(0%),P<0.05。对CHO疫苗无应答儿童的HLA-DRB1*15的频率显著高于免疫成功和失败的儿童(P<0.05)。结论乙肝疫苗母婴阻断失败和免后抗体无应答儿童的细胞免疫应答显著低于阻断成功的儿童,并且可能与遗传因素有关。 展开更多
关键词 重组乙型肝炎疫苗 母要传播 HLA 细胞免疫 elispot
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涂阳活动性肺结核患者HRCT评分与细菌学及免疫学相关性分析 被引量:14
6
作者 彭程 杨倩婷 +7 位作者 陆普选 陈心春 廖明凤 李国葆 杨桂林 邓莹莹 朱文科 周伯平 《中国CT和MRI杂志》 2009年第2期26-29,共4页
目的探讨HRCT评分标准在诊断活动性肺结核中的应用价值。方法对42例痰涂阳性肺结核患者,进行HRCT检查和评分,每侧肺组织划分为为三个区域,分别对各类型CT征象所累及范围进行评分;分析评分结果与痰细菌学检查结果和外周血结核菌特异性IFN... 目的探讨HRCT评分标准在诊断活动性肺结核中的应用价值。方法对42例痰涂阳性肺结核患者,进行HRCT检查和评分,每侧肺组织划分为为三个区域,分别对各类型CT征象所累及范围进行评分;分析评分结果与痰细菌学检查结果和外周血结核菌特异性IFN-γ水平之间的相关性。结果根据结核菌涂片结果分为4组,其中,AFB(+)12例、AFB(++)11例、AFB(+++)10例、AFB(++++)9例,相关性分析显示(1)HRCT总评分与痰阳性分级有正相关性(r=0.9661P<0.0001);(2)HRCT总评分与结核菌抗原ESAT6、P4-6、P8.10特异性IFN-γ释放水平均呈正相关(r=0.4805,P=0.0017,r=0.4451,P=0.0083,r=0.4211,P=0.0131)。结论以活动性肺结核患者复杂的CT征象的范围为基础的HRCT评分标准与细菌学及免疫学均呈正相关,表明该HRCT评分标准对临床诊断治疗和疗效判定具有一定指导意义。 展开更多
关键词 结核 HRCT 抗酸杆菌染色 Γ干扰素 elispot
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T-SPOT.TB试剂盒在结核性胸膜炎临床诊断中的应用价值 被引量:15
7
作者 王永生 徐小雅 +2 位作者 杨华 陈易芳 周航 《四川医学》 CAS 2011年第12期1854-1856,共3页
目的研究T-SPOT.TB试剂盒在结核性胸膜炎临床诊断中的应用价值。方法对24例临床和放射学可疑胸膜结核的患者的胸腔积液实施T-SPOT结核试验,对照组为25例渗出性胸膜炎患者,并且无结核原发。结果 24例胸膜结核患者中,23例T-SPOT试验阳性(9... 目的研究T-SPOT.TB试剂盒在结核性胸膜炎临床诊断中的应用价值。方法对24例临床和放射学可疑胸膜结核的患者的胸腔积液实施T-SPOT结核试验,对照组为25例渗出性胸膜炎患者,并且无结核原发。结果 24例胸膜结核患者中,23例T-SPOT试验阳性(95.8%),在对照组25例中T-SPOT试验阳性有5例(20%)。利用T-SPOT.TB试验检测以此诊断活动性胸膜结核的敏感性和特异性分别为95.8%和80%。阳性预测值为82.1%,阴性预测值为95.2%。结论 T-SPOT.TB酶联免疫斑点法是一种具有较高敏感性和特异性的检测结核感染的技术,这对快速而准确地诊断胸膜结核病是有用的。 展开更多
关键词 结核 T—SPOT.TB试剂盒 酶联免疫斑点法 诊断 胸膜炎 结核病
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ELISPOT检测技术在儿童结核病诊断中的应用 被引量:12
8
作者 孙琳 焦伟伟 +8 位作者 赵顺英 李兆娜 胡英慧 冯雪莉 李惠民 迟巍 江沁波 江载芳 申阿东 《标记免疫分析与临床》 CAS 2008年第6期349-353,共5页
为了评价ELISPOT试验在儿童结核病诊断中的应用价值,采用以结核分枝杆菌特异性蛋白ESAT-6和CFP-10(cu lture filtrate prote in-10)为抗原的ELISPOT试验技术,检测了42例非结核性肺疾病患儿和27例活动性结核病患儿体内特异性T淋巴细胞分... 为了评价ELISPOT试验在儿童结核病诊断中的应用价值,采用以结核分枝杆菌特异性蛋白ESAT-6和CFP-10(cu lture filtrate prote in-10)为抗原的ELISPOT试验技术,检测了42例非结核性肺疾病患儿和27例活动性结核病患儿体内特异性T淋巴细胞分泌的γ-干扰素水平,评价其在儿童活动性结核病和潜伏结核感染中的敏感性和特异性,并将结果与结核菌素皮试结果(PPD)进行比较;同时分析了该试验的各影响因素。结果显示,ELIS-POT试验的敏感性为88.9%,特异性(97.6%)高于PPD(81%,P(0.05);与PPD试验结果结合分析,其诊断阳性率为96.3%。此外,ELISPOT试验结果与性别、年龄、BCG接种史、结核病接触史、机体免疫状态、PPD直径和感染部位等影响因素之间的相关性进行了初步探讨。实验结果提示ELISPOT试验适宜作为儿童PPD试验初筛后结核病诊断的重要辅助工具。 展开更多
关键词 结核病 诊断 elispot ESAT-6 CFP-10
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CTL识别的HLA-A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位的鉴定 被引量:8
9
作者 金姝 王颖 +4 位作者 王树军 张惠珍 李美星 陈影 葛海良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期233-236,242,共5页
 目的: 鉴定CTL识别的HLA A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位。方法: 以细胞因子从外周血单个核细胞(PBMC)中诱导树突状细胞(DC), 通过形态学观察和流式细胞术进行鉴定。用表位预测法选取并合成两种肽分子, 分别脉冲成熟的DC, 并刺激H...  目的: 鉴定CTL识别的HLA A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位。方法: 以细胞因子从外周血单个核细胞(PBMC)中诱导树突状细胞(DC), 通过形态学观察和流式细胞术进行鉴定。用表位预测法选取并合成两种肽分子, 分别脉冲成熟的DC, 并刺激HLA- A2+健康人自体CD8+ T细胞。1wk后, 用脉冲肽的自体PBMC以每 7d的间隔刺激该CD8+T细胞 3次。以共接受 4次抗原肽刺激的T细胞作为CTL,用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验, 检测CTL对靶细胞的杀伤效应。用酶联免疫斑点法 (ELISPOT), 检测CTL中抗原特异性分泌IFN- γ的T细胞数。结果: 形态学和流式细胞术的结果显示, PBMC可诱生成熟的DC。肽L235(FLPDHINIV)诱导的CTL, 可特异性杀伤L235脉冲的T2细胞和OVA66+、HLA A2+的SW480细胞, 且L235诱导的特异性分泌IFN- γ的T细胞数增加。结论: 卵巢癌相关抗原OVA66的HLA A2限制性CTL表位L235, 能激发对肿瘤抗原的特异性免疫应答, 为制备肿瘤特异性肽疫苗奠定了实验基础。 展开更多
关键词 表位 树突状细胞 CTL 肽疫曲 elispot
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类风湿关节炎患者关节中Th1/Th2型细胞因子的模式及临床意义 被引量:9
10
作者 张浩 朱平 王彦宏 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 2000年第3期237-239,共3页
目的 分析类风湿关节炎 (RA)患者滑膜液及外周血中Th1/Th2型细胞因子网络的偏移及其在疾病过程中的意义。方法 用酶联免疫斑点法 (enzymelinkedimmunospotassay ,ELISPOT) ,检测RA患者滑膜液单个核细胞 (SFMC)和外周血单个核细胞 (PB... 目的 分析类风湿关节炎 (RA)患者滑膜液及外周血中Th1/Th2型细胞因子网络的偏移及其在疾病过程中的意义。方法 用酶联免疫斑点法 (enzymelinkedimmunospotassay ,ELISPOT) ,检测RA患者滑膜液单个核细胞 (SFMC)和外周血单个核细胞 (PBMC)中的Th1和Th2细胞 ,并分析Th1/Th2细胞的比值与血沉 (ESR)和C 反应蛋白 (CRP)的相关性。结果 与PBMC相比较 ,RA患者SFMC中CD3 +T细胞的百分率 ,Th1细胞及Th1/Th2细胞的比值显著升高P <0 0 1) ,且此比值与患者的ESR和CRP均呈正相关(分别为r =0 84,P <0 0 1和r =0 74,P <0 0 2 )。结论 在RA患者关节中Th1细胞明显增多并占优势 ,Th1/Th2细胞的比值与疾病的活动程度明显相关 。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 TH1/TH2细胞 细胞因子 elispot
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应用ELISPOT试验测定重组卡介苗诱导的T细胞应答 被引量:7
11
作者 焦新安 RichardLo-man +4 位作者 EdithD’eriaud Brigitte Gicquel Nathalie Winter Claude Leclerc 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期46-49,共4页
应用免疫磁性分离技术去除免疫小鼠脾脏细胞中CD4+或CD8+T细胞后 ,在酶联免疫斑点试验中证实表达大肠杆菌MalE蛋白的重组卡介苗 (rBCG·MalE)诱导的T细胞应答是CD4+T细胞依赖的。对MalE、PPD特异T细胞应答的动态分析结果表明 ,rBCG&... 应用免疫磁性分离技术去除免疫小鼠脾脏细胞中CD4+或CD8+T细胞后 ,在酶联免疫斑点试验中证实表达大肠杆菌MalE蛋白的重组卡介苗 (rBCG·MalE)诱导的T细胞应答是CD4+T细胞依赖的。对MalE、PPD特异T细胞应答的动态分析结果表明 ,rBCG·MalE、BCG诱导的特异CD4+T细胞应答存在Th1/Th2平衡转换现象 ,即起始阶段为Th1应答 ,一段时间后出现Th2应答 ,并逐步形成Th1/Th2混合应答。这些结果 ,为分枝杆菌T细胞应答规律提供了新的认识 ,同时 ,亦表明BCG是优良的外源抗原表达与运送载体。 展开更多
关键词 elispot 重组BCG T细胞 免疫应 卡介苗
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小茴香对实验性肝纤维化大鼠细胞因子TNF-α的影响 被引量:9
12
作者 刘玉平 许晏 +3 位作者 甘子明 朱明 徐茜 顾丹今 《新疆医科大学学报》 CAS 2008年第4期427-429,共3页
目的:研究小茴香治疗实验性肝纤维化大鼠对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:80只Wistar健康大鼠随机分为5组,即正常对照组、模型组、秋水仙碱治疗组、小茴香低剂量治疗组、小茴香中剂量治疗组、小茴香高剂量治疗组。采用复合因素... 目的:研究小茴香治疗实验性肝纤维化大鼠对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:80只Wistar健康大鼠随机分为5组,即正常对照组、模型组、秋水仙碱治疗组、小茴香低剂量治疗组、小茴香中剂量治疗组、小茴香高剂量治疗组。采用复合因素建立肝纤维化模型,并用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测单个核细胞分泌TNF-α的水平。观察小茴香对肝纤维化大鼠细胞因子TNF-α的影响。结果:经小茴香治疗后肝细胞脂肪变性程度减轻,纤维化程度好转。ELISPOT检测显示:正常对照组和模型组、模型组和治疗组分泌TNF-α的细胞计数差异均有统计学意义(P<0.05);小茴香高剂量治疗组降低细胞分泌TNF-α的作用高于中、低剂量治疗组(P<0.05)。结论:小茴香低、中、高剂量治疗组均有减少TNF-α的分泌,抑制大鼠肝脏炎症,改善肝脏纤维化的作用。 展开更多
关键词 小茴香 肝纤维化 elispot TNF-Α
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固相酶联免疫斑点技术检测递增负荷过度训练大鼠细胞免疫机能变化研究 被引量:9
13
作者 王茹 陈佩杰 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期380-383,共4页
目的:建立大鼠脾脏淋巴细胞中Th1/Th2型淋巴细胞亚群表达的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术检测方案,进一步比较Th1/Th2淋巴细胞和CD4+/CD8+在大鼠递增负荷过度训练过程中的改变,为筛选最佳免疫学评价指标提供参考。方法:雌性SD大鼠进行... 目的:建立大鼠脾脏淋巴细胞中Th1/Th2型淋巴细胞亚群表达的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术检测方案,进一步比较Th1/Th2淋巴细胞和CD4+/CD8+在大鼠递增负荷过度训练过程中的改变,为筛选最佳免疫学评价指标提供参考。方法:雌性SD大鼠进行9周递增负荷跑台训练,分别在训练的第1周、第3周、第9周训练结束后的36小时,以及恢复1周后处死大鼠。采用不同种类刺激剂、不同刺激剂浓度刺激不同数量大鼠脾脏淋巴细胞,建立最佳ELISPOT检测方案。检测大鼠血红蛋白、睾酮、皮质酮,评估疲劳模型的建立,并对Th1/Th2型淋巴细胞亚群以及传统免疫学指标CD4+/CD8+进行动态观察。结果:建立最佳ELISPOT技术检测方案:PMA和Ionomycin联合刺激。刺激物浓度:检测γ干扰素(IFN-γ)时PMA浓度为2.5ng/ml,检测白细胞介素4(IL-4)时PMA浓度为10ng/ml;检测IFN-γ时Ionomycin浓度为0.05μg/ml,检测IL-4时Ionomycin浓度为0.2μg/ml。细胞浓度:3×104cells/孔(IFN-γ),60×104cells/孔(IL-4)。运动后36小时,运动组血红蛋白、睾酮、皮质酮均较对照组显著下降;经1周恢复后,和对照组相比无显著性差异。递增负荷运动第1周跑台训练后,运动组Th1型细胞因子IFN-γ与对照组相比显著升高;第3周跑台训练后,运动组和对照组相比显著下降;恢复1周后,运动组IFN-γ与对照组相比显著下降。递增负荷训练结束后的恢复期,运动组Th2型细胞因子IL-4较对照组升高了1.44倍(P<0.01)。CD4+/CD8+在整个训练期及恢复期均无显著性变化。结论:递增负荷过度训练过程中,与CD4+/CD8+相比,采用ELISPOT技术检测SD大鼠Th1/Th2淋巴细胞亚群的改变具有较高的灵敏性。 展开更多
关键词 固相酶联免疫斑点技术 CD4^+/CD8^+ Γ-干扰素 白细胞介素-4 大鼠 递增负荷过度训练
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类风湿关节炎患者Th1/Th2细胞平衡的研究 被引量:8
14
作者 张浩 朱平 +2 位作者 王彦宏 丁景春 陈庆平 《风湿病学杂志》 CSCD 2000年第2期72-74,共3页
目的 在单个细胞水平上研究类风湿关节炎 (RA)患者滑液及外周血中Th1/Th2细胞平衡状态及其与疾病活动程度的关系。方法 用酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测RA患者滑液单个核细胞 (SFMC)和外周血单个核细胞 (PBMC)的细胞内细胞因子IFN γ... 目的 在单个细胞水平上研究类风湿关节炎 (RA)患者滑液及外周血中Th1/Th2细胞平衡状态及其与疾病活动程度的关系。方法 用酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测RA患者滑液单个核细胞 (SFMC)和外周血单个核细胞 (PBMC)的细胞内细胞因子IFN γ和IL 4的表达情况。结果 RA患者SFMC中Th1及Th1/Th2比值与自身及正常人PBMC相比显著升高 (P <0 0 1) ,Th1/Th2比值与患者Stoke指数呈正相关 (r =0 893,P <0 0 1)。结论 在RA患者关节中细胞因子分泌模式朝Th1偏移 ,Th1/Th2比值与疾病活动性相关 ,Th1/Th2平衡在RA发病机制及疾病进展中起重要作用。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 TH1/TH2细胞 比值 elispot
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Elispot assay检测牛奶中庆大霉素 被引量:7
15
作者 王丹 许杨 +2 位作者 何庆华 黄志兵 康敏 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期224-227,共4页
为了建立快速检测牛奶中庆大霉素的Elispot assay,采用制备GM免疫抗原获得抗GM多克隆抗体。将检测抗原点阵在PVDF膜上,通过检测抗原和样品中GM竞争结合抗GM多克隆抗体,酶标结合物催化底物显色,根据颜色的有无及深浅判读结果,从而建立了... 为了建立快速检测牛奶中庆大霉素的Elispot assay,采用制备GM免疫抗原获得抗GM多克隆抗体。将检测抗原点阵在PVDF膜上,通过检测抗原和样品中GM竞争结合抗GM多克隆抗体,酶标结合物催化底物显色,根据颜色的有无及深浅判读结果,从而建立了检测牛奶中GM的Elispot assay。该方法的检测阈值为10 ng/mL,检测时间为40 min,可对样品实现半定量检测。该方法制备的试纸条于4℃密封保存90 d仍可用于检测;与多种结构类似物未见交叉反应;其结果与酶联免疫方法一致。 展开更多
关键词 庆大霉素 elispot ASSAY PVDF膜
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Dendritic cells pulsed with hsp70-peptide complexes derived from human hepatocellular carcinoma induce specific anti-tumor immune responses 被引量:8
16
作者 Xian-Hua Wang, Yan Qin +1 位作者 Mei-Hao Hu Yong Xie 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第36期5614-5620,共7页
AIM: To investigate the anti-tumor effect of dendritic cells (DCs) pulsed with hsp70-peptide complexes derived from human hepatocellular carcinoma (HCC) cells on human T cells. METHODS: Hsp70-peptide complexes w... AIM: To investigate the anti-tumor effect of dendritic cells (DCs) pulsed with hsp70-peptide complexes derived from human hepatocellular carcinoma (HCC) cells on human T cells. METHODS: Hsp70-peptide complexes were purified from human HCC cells with column chromatography using ADP-agarose and DEAE-Sepharose. DCs were derived from peripheral blood mononuclear cells of healthy donors in the presence of human GM-CSF and IL-4. The anti-tumor effect of DCs pulsed with hsp70-peptide complexes on human T-cell was assayed by CTL and enzyme-linked immunospot (ELISPOT) tests. RESULTS: Hsp70-peptide complexes derived from human HCC cells activated phenotypic and functional maturation of DCs. The matured DCs stimulated a high level of autologous T-cell proliferation and type Ⅰ cytokine secretion, and induced HCC-specific cytotoxic T lymphocytes (CTLs), which specifically killed HCC cells by a MHC class Ⅰ restricted mechanism. CONCLUSION: Hsp70-peptide complexes derived from human HCC cells can serve as a potent tumor antigen source for pulsing DCs, the pulsed DCs are very effective in activating specific T-cell responses against HCC cells. 2005 The WJG Press and Elsevier Inc. All rights reserved 展开更多
关键词 Hsp70-peptidde complexes DENDRITIC Cytotoxic T lymphocytes elispot assay Hepatocellular carcinoma
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新型免疫佐剂在淋巴细胞杂交瘤技术中的应用 被引量:4
17
作者 许晓光 朱勇 +3 位作者 刘雪松 刘莹 户义 金伯泉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期419-423,共5页
目的 观察新型免疫佐剂ImmunEasyTM(CpGODN)的免疫调节作用 ,并与弗氏佐剂相比较 ,探讨其在单克隆抗体制备中的应用前景。方法 将小鼠用新型免疫佐剂ImmunEasyTM 或弗氏佐剂混合原核表达的重组APRIL抗原 ,分别以常规免疫和少量抗原免... 目的 观察新型免疫佐剂ImmunEasyTM(CpGODN)的免疫调节作用 ,并与弗氏佐剂相比较 ,探讨其在单克隆抗体制备中的应用前景。方法 将小鼠用新型免疫佐剂ImmunEasyTM 或弗氏佐剂混合原核表达的重组APRIL抗原 ,分别以常规免疫和少量抗原免疫方案免疫Balb c小鼠 ,用间接ELISA法检测不同时相小鼠免疫血清抗APRIL抗体的总效价及各类和亚类的效价。建立一种能在单个细胞水平反映小鼠B细胞分泌特异性抗体亚类的改良ELISPOT方法 ,并对两种佐剂免疫组中配对的小鼠进行检测。常规方法制备杂交瘤 ,以间接ELISA法筛选阳性杂交瘤 ,比较不同佐剂免疫小鼠所获得的杂交瘤上清液的类及其亚类频率。结果 与弗氏佐剂相比 ,ImmunEasyTM 在单克隆抗体制备过程中可明显减少抗原用量 ,缩短免疫周期 ,提高免疫血清效价 ,并增加IgG2a、IgM及IgA抗体的比例。结论 在细胞融合制备鼠源性mAb中 ,应用ImmunEasyTM,可减少免疫原用量 ,提高效率 ,还可优先获得某些类及其亚类的mAb。 展开更多
关键词 免疫佐剂 淋巴细胞杂交瘤 免疫调节作用 ImmunEasy^TM 单克隆抗体
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三种检测方法对结核性胸膜炎诊断价值的探讨 被引量:9
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作者 陶波山 《临床肺科杂志》 2011年第8期1289-1290,共2页
目的探讨腺苷脱氨酶(ADA),结核蛋白芯片,结核分枝杆菌特异性酶联免疫斑点技术(ELISPOT)三种方法在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。方法对102例结核性胸膜炎患者的胸腔积液、血清和48例非结核性胸膜炎患者的胸腔积液、血清分别用ADA、结... 目的探讨腺苷脱氨酶(ADA),结核蛋白芯片,结核分枝杆菌特异性酶联免疫斑点技术(ELISPOT)三种方法在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。方法对102例结核性胸膜炎患者的胸腔积液、血清和48例非结核性胸膜炎患者的胸腔积液、血清分别用ADA、结核蛋白芯片和结核分枝杆菌特异性ELISPOT三种方法进行检测。结果胸液中的ADA、结核蛋白芯片和结核分枝杆菌特异性ELISPOT的灵敏性分别是84.3%、52.9%、97.1%,特异性分别是85.4%、89.6%、97.9%;血清中的ADA、结核蛋白芯片和结核分枝杆菌特异性ELISPOT的灵敏性分别是31.4%、74.5%、91.2%,特异性分别为75.0%、93.8%、95.8%。结论胸水的ADA检测,血清的结核蛋白芯片检测,胸水与血清的结核分枝杆菌特异性ELISPOT检测对结核性胸膜炎有较高的灵敏性与特异性,对结核性胸膜炎有较高的临床诊断价值。 展开更多
关键词 结核性胸膜炎 蛋白芯片检测 临床诊断价值 elispot 结核分枝杆菌 结核蛋白芯片 酶联免疫斑点技术 特异性
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IL-4在诱导CD4,45RA^+和CD4,45RO^+T细胞向IL-4产生细胞分化过程中的效应 被引量:4
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作者 王江滨 王育珊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期10-14,共5页
应用ELISPOT(Enzyme-linkedimmunospotassay)单细胞检测技术,研究了淋巴因子在诱导CD4,45RO+和CD4,45RA+T细胞向IL-4产生细胞分化过程中的影响。在存在PMA和iono... 应用ELISPOT(Enzyme-linkedimmunospotassay)单细胞检测技术,研究了淋巴因子在诱导CD4,45RO+和CD4,45RA+T细胞向IL-4产生细胞分化过程中的影响。在存在PMA和ionomycin的情况下,IL-2和IL-4均可以诱导CD4,45RO+T细胞分化为IL-4产生细胞,但是只有IL-4可以诱导CD4,45RA+T细胞向IL-4产生细胞分化,IFNγ既不能诱导CD4,45RA+,亦不能对CD4,45RO+T细胞产生诱导作用。当内源性IL-4被中和后,IL-2对CD4,45RO+T细胞的诱导作用消失。本文结果初步表明IL-4在决定Th前体细胞是向Th1还是向Th2方向发展起着关键的作用。 展开更多
关键词 白细胞介素4 T细胞 CD4 elispot 淋巴因子
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一种IFN-γ ELISPOT检测方法的建立 被引量:6
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作者 刘培培 王洪芳 +1 位作者 吕品 王少雄 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期62-66,共5页
目的:建立检测一种融合蛋白疫苗诱导特异性细胞免疫的ELISPOT实验方法,通过分析免疫小鼠分泌IFN-γ的水平,评价疫苗诱导的细胞免疫应答效应。方法:以融合蛋白疫苗免疫C57BL/6小鼠,14天后加强免疫一次,于第28天无菌取脾,分离脾淋巴细胞,... 目的:建立检测一种融合蛋白疫苗诱导特异性细胞免疫的ELISPOT实验方法,通过分析免疫小鼠分泌IFN-γ的水平,评价疫苗诱导的细胞免疫应答效应。方法:以融合蛋白疫苗免疫C57BL/6小鼠,14天后加强免疫一次,于第28天无菌取脾,分离脾淋巴细胞,计数并调整细胞浓度,在已包被好的ELISPOT板中分别加入细胞悬液和刺激肽进行刺激培养。裂解细胞,依次加入酶标二抗、底物、显色液,在ELISPOT读板仪进行斑点计数和分析。结果:ELISPOT检测结果与动物免疫途径、细胞培养时间、细胞密度、肽浓度等条件密切相关。实验结果证明:采用皮下注射的免疫途径,免疫效果最佳;小鼠脾淋巴细胞浓度为4×105个/孔,加入1μg/孔的刺激肽刺激培养24~48小时的条件下,产生的特异性斑点数最多,本底干扰小,有利于结果判断。结论:实验建立了IFN-γELISPOT检测方法,可用于该融合蛋白疫苗细胞免疫研究。 展开更多
关键词 融合蛋白疫苗 细胞免疫 elispot IFN-Γ
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