特异性ILK siRNA对膀胱癌EJ细胞EMT及移植瘤生长的影响 被引量：6

1

作者 庄翔 朱军 +1 位作者 吕梦欣 陈俊霞 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第2期191-198,共8页

目的研究整合素连接激酶(ILK)特异siRNA沉默ILK基因对膀胱癌EJ细胞上皮间质转化(EMT)及移植瘤生长的影响。方法用特异性ILK siRNA表达载体p Gensil-1siRNA1质粒和对照质粒p Gensil-1siRNA3稳定转染EJ细胞,实验分为EJ siRNA组、EJ vecto... 目的研究整合素连接激酶(ILK)特异siRNA沉默ILK基因对膀胱癌EJ细胞上皮间质转化(EMT)及移植瘤生长的影响。方法用特异性ILK siRNA表达载体p Gensil-1siRNA1质粒和对照质粒p Gensil-1siRNA3稳定转染EJ细胞,实验分为EJ siRNA组、EJ vector组和EJ细胞组;激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架;Western blot检测p-AKT、p-GSK-3β蛋白的表达;细胞免疫荧光检测p-AKT、p-GSK-3β的表达;用免疫荧光检测整合素连接激酶和核糖核酸酶抑制因子在EJ细胞中的共定位;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;建立裸鼠移植瘤模型,肿瘤和肺组织切片HE染色,免疫组化检测瘤组织中ILK、RI、NM23-H1和E-cadherin蛋白的表达;免疫荧光检测p-AKT、p-GSK-3β和CD31蛋白的表达。结果 EJ siRNA组细胞运动能力减弱;EJ siRNA组p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达明显降低(P<0.05);MTT法结果提示实验组细胞增殖明显受到抑制;下调ILK通过阻滞G0/G1期抑制细胞增殖;下调ILK抑制膀胱癌EJ细胞移植瘤生长转移。结论特异性ILK siRNA可以改变EJ细胞特性,抑制EMT的发生,引起增殖侵袭能力下降。 展开更多

关键词 整合素连接激酶 SIRNA EMT ej细胞 移植瘤

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^(60)Co γ-射线诱导人膀胱癌EJ细胞中磷酸化组蛋白H2AX焦点形成 被引量：4

2

作者 田梅 潘艳 +1 位作者 阮健磊 苏旭 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2008年第3期187-190,共4页

目的探讨60Co γ-射线是否可在人膀胱癌EJ细胞中诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成以及形成的焦点数量与照射剂量及照射后时间的关系。方法免疫印迹法和流式细胞分析法用于检测不同剂量60Co γ-射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达的变化;免... 目的探讨60Co γ-射线是否可在人膀胱癌EJ细胞中诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成以及形成的焦点数量与照射剂量及照射后时间的关系。方法免疫印迹法和流式细胞分析法用于检测不同剂量60Co γ-射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达的变化;免疫荧光法检测不同剂量照射后以及2 Gy照射后不同时间EJ细胞中γH2AX焦点的数量。结果γ-射线照射后γH2AX蛋白表达明显增加,但量效关系不明显;免疫荧光法可检测γH2AX焦点形成的数量和大小,并且存在剂量-效应关系及有时间依赖性,随着照射剂量的增加,γH2AX焦点数目及大小均明显增加,照射的剂量范围从0.1~4.0 Gy均可检测,照射后24 h仍可检测到γH2AX焦点,但焦点数随时间延长而减少、减弱。结论免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目可敏感、直观地反映DNA损伤及修复情况,有望成为辐射检测及辐射致癌的好的生物指标。 展开更多

关键词 γ-射线照射 γH2AX焦点 ej细胞 DNA损伤

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siRNA干扰BMI-1基因对膀胱癌EJ细胞增殖的调控作用及其机制 被引量：6

3

作者 崔学江 朱定军 +3 位作者 韩金利 梁武 苏嘉锐 谢文练 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1519-1524,共6页

目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞... 目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞中表达情况及定位。Real-time RT-PCR检测EJ细胞及膀胱正常移行上皮细胞中3种基因的表达水平,Western blotting检测蛋白水平。构建干扰BMI-1基因siRNA,通过脂质体转染导入EJ细胞中,设立空白对照和阴性干扰对照组,检测BMI-1及下游p16、p14基因表达水平及蛋白表达水平的变化;以CCK-8检测细胞生长观察siRNA干扰BMI-1表达对EJ细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞凋亡的改变。结果:BMI-1mRNA及蛋白水平在EJ细胞表达高于膀胱移行上皮细胞,而p16INK4a和p14ARFmRNA及蛋白在EJ细胞表达水平稍低于膀胱移行上皮细胞。siRNA干扰BMI-1后可以上调EJ细胞中其下游p16和p14 mRNA及蛋白水平,使EJ细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。结论:siRNA干扰BMI-1基因表达对EJ细胞的体外生长具有明显的抑制作用,其作用机制与上调其下游p16INK4a、p14ARF基因的表达有关。 展开更多

关键词 B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1 p16INK4a/p14ARF RNA干扰 ej细胞

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膀胱癌EJ细胞的CD44异常糖基化及其单抗KMP1的生物学功能研究 被引量：4

4

作者 丁明霞 李翀 +3 位作者 左毅刚 詹辉 范祖森 王剑松 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期759-762,共4页

目的:研究EJ细胞单抗KMPl的结合抗原CD44的变化和KMPl对EJ细胞生物学功能的影响。方法:采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMPl,免疫荧光检测KMPl的亲和性、结合部位及效价。流式细胞检测KMPl对膀胱癌细胞的特异性。免疫组化... 目的:研究EJ细胞单抗KMPl的结合抗原CD44的变化和KMPl对EJ细胞生物学功能的影响。方法:采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMPl,免疫荧光检测KMPl的亲和性、结合部位及效价。流式细胞检测KMPl对膀胱癌细胞的特异性。免疫组化检测对膀胱癌组织的特异性。亲和层析分离纯化特异性抗原,检测抗原的氨基酸序列。糖基转化酶抑制剂和过碘酸氧化后分析抗原决定簇的理化性质改变。软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验检测KMPl对EJ细胞株的增殖和迁移功能的影响。结果:获得的单抗KMPl是IgGl,能与EJ、BIU-87、T24膀胱癌细胞和膀胱癌组织特异性结合,而与Lovo、HeLa、K562、HepC2、Jurkat、293、HCV29、人的红细胞和白细胞无结合性,也不能结合正常膀胱黏膜。其结合EJ细胞的抗原是异常糖基化的CD44,糖基转化酶抑制剂BC作用EJ细胞7d,KMPl对EJ细胞结合性降低,过碘酸氧化后Western blot显示KMPl对CD44结合性降低,软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验结果示KMPl还能减弱EJ细胞的增殖和迁移功能。结论:膀胱癌的高复发性、易转移可能与出现异常糖基化的CD44高表达具有一定的相关性,KMPl可结合异常糖基化的CD44,并抑制EJ细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 膀胱癌 ej细胞 单克隆抗体 CD44 糖基化

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CD44 RNAi对EJ细胞增殖、迁移及其与特异性单抗结合力的影响 被引量：3

5

作者 丁明霞 李翀 +1 位作者 左毅刚 王剑松 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第3期313-316,共4页

目的研究EJ细胞中CD44小RNA干扰后细胞增殖、迁移功能以及其与特异性单抗KMP1结合力的改变。方法小RNA干扰的方法抑制EJ细胞中CD44表达,Western blot和流式细胞仪检测EJ细胞与CD44特异性单抗KMP1的结合功能变化,细胞划痕实验和Boyden小... 目的研究EJ细胞中CD44小RNA干扰后细胞增殖、迁移功能以及其与特异性单抗KMP1结合力的改变。方法小RNA干扰的方法抑制EJ细胞中CD44表达,Western blot和流式细胞仪检测EJ细胞与CD44特异性单抗KMP1的结合功能变化,细胞划痕实验和Boyden小室检测shCD44-EJ细胞的迁移功能,[3H]掺入法检测shCD44-EJ细胞的增殖能力。结果 shCD44-EJ细胞与KMP1的结合能力下降,CD44的表达量也降低,Wide type组和shCD44-EJ组的迁移到划痕中央的细胞数分别为257±32个和132±29个,shCD44-EJ组和Vector组细胞迁移到膜中和下室中的平均细胞数为356±13和672±17个,显示shCD44-EJ细胞的迁移能力较Wide type组和Vector组分别降低52%和53%,shCD44-EJ细胞的增殖活性是Vector组的73%。结论特异性沉默CD44可降低EJ细胞与其特异性单抗KMP1的结合功能,并抑制EJ细胞的迁移和增殖能力。 展开更多

关键词 膀胱癌 ej细胞 CD44 RNA干扰

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斑蝥酸钠对体外培养的EJ细胞的实验研究 被引量：2

6

作者 苏建玲 孙黎 罗强 《中国医药导报》 CAS 2013年第24期26-28,共3页

目的观察斑蝥酸钠对体外培养的人膀胱癌系EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 EJ细胞贴壁后分为对照组、1组、2组、3组、4组、5组,分别给予0、0.5、1、5、10、15 g/L浓度斑蝥酸钠处理,24 h后采用流式细胞仪检测细胞周期情况,CCK-8法... 目的观察斑蝥酸钠对体外培养的人膀胱癌系EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 EJ细胞贴壁后分为对照组、1组、2组、3组、4组、5组,分别给予0、0.5、1、5、10、15 g/L浓度斑蝥酸钠处理,24 h后采用流式细胞仪检测细胞周期情况,CCK-8法检测斑蝥酸钠对EJ细胞增值抑制的影响,荧光倒置显微镜下观察细胞的凋亡情况,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况。结果以0.5、1、5、10、15 mg/L 5个浓度的斑蝥酸钠作用于EJ细胞24 h,EJ细胞的增殖出现不同程度的抑制,且与药物浓度成正相关。1、2、3、4、5组抑制率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组S期细胞比例为8.94%,G2/M期为4.16%,G0/G1期为86.91%,与1、2、3、4、5组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。使用斑蝥酸钠作用EJ细胞24 h后,电泳出现凋亡特有的阶梯状条带,随着药物浓度的增加,凋亡带增多,而对照组则没有出现凋亡带。荧光显微镜下,对照组未出现凋亡小体,加入斑蝥酸钠的药物组有凋亡小体出现,0.5、5 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较少,15 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较多。结论斑蝥酸钠对体外培养EJ细胞增殖有显著的抑制作用,诱导EJ细胞凋亡。 展开更多

关键词 斑蝥酸钠 ej细胞 CCK-8 细胞凋亡

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慢病毒介导的p21/Waf1基因沉默增强膀胱癌特异性溶瘤腺病毒的复制及对EJ细胞增殖的抑制作用 被引量：1

7

作者 石洁 王志平 +5 位作者 李晓娟 杨兰 秦晓东 王莉 付生军 陶燕 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1083-1091,共9页

目的 :沉默人膀胱癌EJ细胞中p21/Waf1基因的表达,并探讨p21/Waf1表达下调对膀胱癌特异性溶瘤腺病毒复制及对EJ细胞增殖的影响。方法 :设计并合成特异性针对p 21/Waf 1基因的sh RNA,插入含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)... 目的 :沉默人膀胱癌EJ细胞中p21/Waf1基因的表达,并探讨p21/Waf1表达下调对膀胱癌特异性溶瘤腺病毒复制及对EJ细胞增殖的影响。方法 :设计并合成特异性针对p 21/Waf 1基因的sh RNA,插入含绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)编码基因的p Magic 7.1载体,构建p21/Waf1-sh RNA重组慢病毒质粒p LVT1051,并进行PCR和测序鉴定。将p LVT1051、p CMV-VSV-G和p CMV-d R8.91三种质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒。将携带有p21/Waf1-sh RNA的慢病毒感染EJ细胞,采用嘌呤霉素筛选p21/Waf1-sh RNA稳定转入的EJ细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测p21/Waf1-sh RNA稳定感染后EJ细胞中p21/waf1 m RNA和蛋白的表达水平。将膀胱癌特异性溶瘤腺病毒Ad/PSCAE/UPⅡ/E1A感染p 21/waf 1基因沉默的EJ细胞,采用蛋白质印迹法检测病毒复制相关指标E1A和Hexon蛋白的表达水平,MTT法检测腺病毒Ad/PSCAE/UPⅡ/E1A对EJ细胞增殖的影响。结果 :成功构建了携带有p21/Waf1-sh RNA的重组慢病毒表达载体并获得相应的慢病毒;经嘌呤霉素筛选2周后成功获得稳定感染的EJ细胞。p21/Waf1-sh RNA能明显降低EJ细胞中p21/Waf1 m RNA及蛋白的表达水平,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。膀胱癌特异性溶瘤腺病毒(Ad/PSCAE/UPⅡ/E1A)作用于p 21/waf 1基因沉默的EJ细胞后,其病毒复制相关指标E1A和Hexon的表达水平明显上调,对EJ细胞的增殖抑制作用明显增强(P<0.01)。结论 :成功建立了p21/Waf1基因沉默表达的EJ细胞,沉默p21/Waf1基因的表达能增强膀胱癌特异性溶瘤腺病毒的复制能力,并对EJ细胞的增殖有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 RNA 小分子干扰 慢病毒感染 p21/Waf1基因 病毒复制 ej细胞

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人膀胱癌EJ细胞株CD44基因的小RNA干扰抑制细胞侵袭功能 被引量：1

8

作者 丁明霞 李翀 +2 位作者 左毅刚 范祖森 王剑松 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2011年第6期345-347,共3页

目的研究人膀胱癌EJ细胞株中CD44基因小RNA干扰后细胞侵袭功能的变化。方法小RNA干扰的方法抑制EJ细胞中CD44基因表达,细胞划痕实验和Boyden小室研究shCD44-EJ细胞的侵袭功能改变。结果流式细胞学检测显示shCD44-EJ细胞与CD44的单克隆... 目的研究人膀胱癌EJ细胞株中CD44基因小RNA干扰后细胞侵袭功能的变化。方法小RNA干扰的方法抑制EJ细胞中CD44基因表达,细胞划痕实验和Boyden小室研究shCD44-EJ细胞的侵袭功能改变。结果流式细胞学检测显示shCD44-EJ细胞与CD44的单克隆抗体的结合性下降,Westernblot检测CD44蛋白的表达量减少,细胞划痕实验和Boyden小室研究结果显示shCD44-EJ细胞的侵袭能力降低约50%。结论特异性沉默CD44可抑制EJ细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 ej细胞 CD44 RNA干扰

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尿道致病性大肠杆菌黏附人尿路膀胱癌细胞的实验研究

9

作者 谷超 王海涛 +2 位作者 周晓冬 侯敏 李光 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第10期973-976,共4页

目的检测尿道致病性大肠杆菌(UPEC)菌株毒力基因,并将人膀胱癌细胞系EJ细胞应用于UPEC的黏附作用研究。方法利用PCR和复合PCR方法检测UPEC132菌株毒力基因pap C,hly和cnf1;制备EJ的单层细胞爬片用于UPEC和阴性对照菌株E.coli K-12p678-5... 目的检测尿道致病性大肠杆菌(UPEC)菌株毒力基因,并将人膀胱癌细胞系EJ细胞应用于UPEC的黏附作用研究。方法利用PCR和复合PCR方法检测UPEC132菌株毒力基因pap C,hly和cnf1;制备EJ的单层细胞爬片用于UPEC和阴性对照菌株E.coli K-12p678-54的黏附试验;分别于不同作用时间观察黏附细胞形态学变化,并计算黏附率和黏附指数。结果PCR检测显示UPEC132菌株具有毒力基因pap C,hly和cnf1,将其作用于EJ细胞后,15 min细菌开始黏附,120 min达到高峰。而阴性对照组结果均为阴性。经光镜镜检,UPEC黏附EJ细胞后使其产生明显的形态学变化。结论 EJ细胞可用于UPEC的黏附试验,为建立UPEC细胞感染模型和深入探究UPEC的致病机制奠定基础。 展开更多

关键词 尿道致病性大肠杆菌 膀胱癌 ej细胞 黏附率 黏附指数 毒力基因

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单抗KMP1的体内抑制膀胱癌EJ细胞株成瘤的动物实验

10

作者 杨灿 巩宇航 +8 位作者 王海峰 李海皓 刘靖宇 王伟 王剑松 左毅刚 陈戬 詹辉 丁明霞 《昆明医科大学学报》 CAS 2018年第5期1-6,共6页

目的研究膀胱癌单抗KMP1的体内抑制EJ细胞成瘤功能.方法免疫组化鉴定单抗KMP1与EJ、EJ-GFP的结合性,荧光活体成像观察KMP1的抑制EJ-GFP裸鼠移植瘤的生长状况,免疫组化和HE染色鉴定移植瘤的肿瘤特征.结果 EJ和EJ-GFP细胞成瘤功能的生长... 目的研究膀胱癌单抗KMP1的体内抑制EJ细胞成瘤功能.方法免疫组化鉴定单抗KMP1与EJ、EJ-GFP的结合性,荧光活体成像观察KMP1的抑制EJ-GFP裸鼠移植瘤的生长状况,免疫组化和HE染色鉴定移植瘤的肿瘤特征.结果 EJ和EJ-GFP细胞成瘤功能的生长曲线近似,EJ-GFP呈现良好的绿色荧光,EJ和EJ-GFP细胞都能与KMP1结合,且KMP1治疗组移植瘤重量明显低于m Ig G对照组(P<0.001).结论 KMP1能良好的抑制EJ-GFP细胞在裸鼠体内移植瘤生长,KMP1能抑制膀胱癌EJ细胞株体内移植瘤,是一种可能的靶向治疗药物. 展开更多

关键词 膀胱癌 ej细胞 单克隆抗体

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五倍子单宁酸体外诱导人膀胱癌EJ细胞凋亡及机制研究 被引量：3

11

作者 高章远致 李国浩 +3 位作者 郭凡 周洁 万鸣 高文喜 《湖北中医药大学学报》 2021年第5期5-8,共4页

目的观察五倍子单宁酸(TA)在体外培养条件下对人膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将EJ细胞分为阴性对照组(TA浓度为0μmol/L)和不同梯度浓度TA实验组,阴性对照组加入不含TA药物的培养基,其他各组加入含有梯度浓度TA的培... 目的观察五倍子单宁酸(TA)在体外培养条件下对人膀胱癌EJ细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将EJ细胞分为阴性对照组(TA浓度为0μmol/L)和不同梯度浓度TA实验组,阴性对照组加入不含TA药物的培养基,其他各组加入含有梯度浓度TA的培养基;用台盼蓝染色检测细胞损伤率,CCK-8检测细胞增殖率,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色以及流式分析检测细胞凋亡率,Western Blot(WB)检测细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),BCL2-AssociatedX蛋白(Bax),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达。结果与阴性对照组比较,实验组TA可降低EJ细胞活力,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,促进细胞内Caspase3表达、降低Bcl-2蛋白表达、增加Bax/Bcl-2比值差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论TA可能通过调节细胞内Caspase3、Bax、Bcl-2蛋白表达诱导EJ细胞凋亡,抑制增殖,提示TA可能是一种潜在的抗膀胱癌药物。 展开更多

关键词 人膀胱癌ej细胞 五倍子单宁酸 细胞凋亡 机制研究

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姜黄素对膀胱癌EJ细胞的作用研究 被引量：7

12

作者 孙明 杨宇如 +4 位作者 李虹 苏斌 卢一平 魏强 范天勇 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期848-850,共3页

目的 :观察姜黄素对膀胱癌系细胞EJ的体外作用 ,并探讨其可能的作用机制。方法 :应用光镜形态学 ,MTT法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了 5、10、2 0mg/L姜黄素在体外对膀胱癌EJ细胞的生长抑制和诱导凋亡作用 ,以及对细胞DNA含量 ,对... 目的 :观察姜黄素对膀胱癌系细胞EJ的体外作用 ,并探讨其可能的作用机制。方法 :应用光镜形态学 ,MTT法、流式细胞仪和免疫细胞化学法观察了 5、10、2 0mg/L姜黄素在体外对膀胱癌EJ细胞的生长抑制和诱导凋亡作用 ,以及对细胞DNA含量 ,对NF κB、CyclinD1表达的影响。结果 :所有浓度组姜黄素均对膀胱癌EJ细胞有明显的生长抑制作用 ,抑制率≥ ( 2 7 5± 3 1) % (P <0 0 5 )。 10mg/L以上浓度均可出现显著的诱导调亡作用 ,凋亡率≥ 4 6 %± 1 8% (P <0 0 5 ) ,下调NF κΒ(表达率≤ 35 8%± 4 2 % ,P <0 0 5 ) ,下调CyclinD1的表达 (表达率≤ 2 9 7%± 3 2 % ,P <0 0 5 )。姜黄素导致的细胞周期阻滞以G1期为主 ,使S期细胞比例显著减少 (P <0 0 5 )。结论 :姜黄素对膀胱癌细胞系EJ有明显的生长抑制和诱导凋亡作用 ,其作用机制与其影响细胞周期和下调NF κB、CyclinD1的表达相关 。 展开更多

关键词 姜黄素 膀胱癌 ej细胞 膀胱痛 中医药疗法

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Genistein对bFGF诱导的EJ细胞增殖的抑制作用

13

作者 卜仁戈 宋永胜 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第12期2377-2379,共3页

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人膀胱癌细胞株EJ细胞的增殖作用;以及酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂Genistein对bFGF诱导的EJ细胞增殖的抑制作用。方法:以不同浓度的bFGF刺激EJ细胞,再对由bFGF引起的细胞增殖施加不同浓度的Genis... 目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人膀胱癌细胞株EJ细胞的增殖作用;以及酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂Genistein对bFGF诱导的EJ细胞增殖的抑制作用。方法:以不同浓度的bFGF刺激EJ细胞,再对由bFGF引起的细胞增殖施加不同浓度的Genistein;以MTT法检测细胞的增殖程度,原位凋亡细胞检测(TUNEL)和流式细胞仪(FCM)检测Genistein对EJ细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:bFGF可以使EJ细胞增殖比明显上升,Genistein可引起细胞增殖比明显下降,其程度均随浓度增高而增强;Genistein可以促进EJ细胞的凋亡,使细胞阻滞于G2/M期。结论:bFGF可以诱导EJ细胞的增殖,Genistein可以诱导EJ细胞凋亡,对bFGF诱导的细胞增殖有抑制作用,可能为膀胱肿瘤的治疗提供新的方法。 展开更多

关键词 GENISTEIN 碱性成纤维细胞生长因子 ej细胞 增殖 凋亡

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3种不同的survivin siRNA对EJ28细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

14

作者 吴跃 苟欣 +1 位作者 吕天兵 余周 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第22期2152-2155,共4页

目的观察靶向survivin的不同siRNA对EJ28细胞增殖和凋亡的影响。方法通过化学合成方法合成3对siRNA和1对荧光标记的阴性对照siRNA。转染荧光标记的siRNA后,在荧光显微镜下观察转染效率。实验分为siRNA164、siRNA167、siRNA389、阴性对... 目的观察靶向survivin的不同siRNA对EJ28细胞增殖和凋亡的影响。方法通过化学合成方法合成3对siRNA和1对荧光标记的阴性对照siRNA。转染荧光标记的siRNA后,在荧光显微镜下观察转染效率。实验分为siRNA164、siRNA167、siRNA389、阴性对照组、脂质体对照组和细胞对照组。转染后24、48h和72h,MTT法检测siRNA对EJ28细胞增殖的影响,流式细胞术检测凋亡率。结果靶向survivin的序列特异性siRNA均能抑制EJ28细胞的增殖,其中以siRNA164抑制细胞的增殖能力最强(P<0.05),转染48h后的抑制率最高[(41.32±2.54)%];转染48h后,siRNA164组凋亡率最高[(13.20±0.25)%]。结论靶向survivin的RNAi技术在膀胱癌的基因治疗中可能具有一定的价值。 展开更多

关键词 ej28细胞 SURVIVIN 小干扰RNA 转染

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慢病毒介导的过表达microRNA-663a对膀胱癌细胞功能学的影响 被引量：1

15

作者 宋瑞祥 曾蜀雄 +5 位作者 赵俊杰 张振声 张威 马重 陈新 许传亮 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期426-429,F0003,共5页

目的探讨负载microRNA-663a(miR-663a)的慢病毒上调miR-663a对膀胱癌EJ和5637细胞系功能学的影响。方法将负载过表达miR-663a的慢病毒转染人膀胱癌EJ和5637细胞系。EJ和5637细胞系各设干扰组、阴性对照组和空白对照组,转染72h后置于荧... 目的探讨负载microRNA-663a(miR-663a)的慢病毒上调miR-663a对膀胱癌EJ和5637细胞系功能学的影响。方法将负载过表达miR-663a的慢病毒转染人膀胱癌EJ和5637细胞系。EJ和5637细胞系各设干扰组、阴性对照组和空白对照组,转染72h后置于荧光显微镜下观察转染效率,采用实时定量PCR法检测miR-663a的表达量,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测膀胱癌细胞增殖生长情况,通过细胞划痕实验检测膀胱癌细胞迁移能力,通过Transwell小室侵袭实验检测膀胱癌细胞侵袭能力。结果 EJ和5637细胞系中,干扰组的miR-663相对表达量均显著高于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05),空白对照组的miR-663a相对表达量与阴性对照组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。EJ细胞系转染miR-663a后第4、5天,干扰组D值显著低于阴性对照组和空白对照组同时间(P值均<0.05);5637细胞系转染miR-663a后第3、4、5天,干扰组D值显著低于阴性对照组和空白对照组同时间(P值均<0.05)。EJ和5637细胞系中,干扰组细胞培养48h时的闭合率均显著低于空白对照组和阴性对照组同时间(P值均<0.05)。EJ和5637细胞系中,干扰组Transwell小室滤膜下表面细胞数均显著低于空白对照组和阴性对照组(P值均<0.05)。结论 miR-663a体外可显著抑制膀胱癌EJ和5637细胞系的细胞增殖、迁移和侵袭能力,为miR-663a可能成为膀胱癌的治疗新靶点提供了实验依据。 展开更多

关键词 慢病毒 膀胱癌 ej和5637细胞系 microRNA-663a

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人膀胱癌细胞株EJ中热休克蛋白70的热诱导表达及其意义

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作者 何凌峰 管考鹏 +3 位作者 许克新 王小峰 何湘君 侯树坤 《中国药物与临床》 CAS 2015年第10期1385-1387,共3页

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在膀胱癌细胞株EJ中的热诱导表达及其意义。方法 106/ml EJ置于1.5 ml Eppendorf管中,将它们在不同温度水浴分别加热诱导2 h、4 h、6 h、8 h。5%CO2孵箱中(37℃)恢复2 h。流式细胞术(FCM)和蛋白印迹法检测HS... 目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在膀胱癌细胞株EJ中的热诱导表达及其意义。方法 106/ml EJ置于1.5 ml Eppendorf管中,将它们在不同温度水浴分别加热诱导2 h、4 h、6 h、8 h。5%CO2孵箱中(37℃)恢复2 h。流式细胞术(FCM)和蛋白印迹法检测HSP70,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSP70 m RNA,SPSS16.0统计软件处理数据。结果人膀胱癌细胞株EJ中HSP70随着温度的增高表达增多,差异有统计学意义(P<0.05),但温度超过43℃时,细胞死亡率增高;随着热诱导时间的延长而增多,差异有统计学意义(P<0.05),超过8 h EJ中HSP70不再增高。结论人膀胱癌细胞株EJ中HSP70热诱导表达的最适条件是43℃、6 h,这对基于HSP70膀胱肿瘤的瘤苗制作提供一定的实验基础。 展开更多

关键词 HSP70热休克蛋白质类 膀胱肿瘤 ej细胞株 热诱导

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斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株毒性作用的研究 被引量：5

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作者 刘春霞 马建国 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2010年第5期395-397,407,共4页

目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株的毒性作用。方法:采用5,10,20μg/ml斑蝥酸钠作用于EJ细胞株2,4,24,48 h后,观察细胞形态改变,MTT法检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变以及细胞凋亡情况。结果:5μg/ml斑蝥... 目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株的毒性作用。方法:采用5,10,20μg/ml斑蝥酸钠作用于EJ细胞株2,4,24,48 h后,观察细胞形态改变,MTT法检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变以及细胞凋亡情况。结果:5μg/ml斑蝥酸钠作用2,4 h后细胞无明显改变,10,20μg/ml作用2,4 h后细胞出现水肿、空泡、核固缩以及细胞溶解现象;药物作用细胞后其抑制率显著增高(P<0.05);细胞周期中G2/M期延长,细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论:斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株有明显的毒性作用,通过诱导细胞凋亡的途径抑制细胞生长。 展开更多

关键词 斑蝥酸钠 膀胱癌 ej细胞 凋亡

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