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介导分泌表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建 被引量：2
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作者 张春雷 靳立明 +5 位作者 叶昱 张杰 朱俊 高又文 廖明 樊惠英 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期564-568,共5页
应用杆状病毒表达系统,将猪圆环病毒2型ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMDual pH启动子控制下的多克隆位点,引入EGT信号肽取代ORF2原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转... 应用杆状病毒表达系统,将猪圆环病毒2型ORF2基因插入供体质粒pFastBacTMDual pH启动子控制下的多克隆位点,引入EGT信号肽取代ORF2原有核定位信号肽以实现在昆虫细胞中分泌型表达,并在C端融合6个组氨酸标签以便于后期的纯化.将构建质粒转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭载体,提取重组Bacmid质粒.将阳性重组Bacmid质粒转染Sf9昆虫细胞,72 h收集培养上清液获得重组杆状病毒.间接免疫荧光试验和Westernblot表明,该重组杆状病毒可以在昆虫细胞实现猪圆环病毒2型Cap蛋白的分泌表达. 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ORF2基因 egt信号肽 CAP蛋白 重组杆状病毒
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