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绿木霉ZY-01中纤维素酶EGⅣ基因的克隆及其在E.coli中的原核表达
1
作者
胡侨
罗伟
+3 位作者
阮涛
侯亚利
黄皓
杨忠华
《武汉科技大学学报》
CAS
北大核心
2016年第2期156-160,共5页
以前期筛选到的纤维素酶高产菌株绿木霉T.viride ZY-01的总RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆出内切葡聚糖酶EGⅣ基因,连接至pET-28a构建出重组质粒,并转化至E.coli BL21(DE3)中表达。该EGⅣ基因约有1089bp,在启动子T7lac的控制和IPTG的诱导...
以前期筛选到的纤维素酶高产菌株绿木霉T.viride ZY-01的总RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆出内切葡聚糖酶EGⅣ基因,连接至pET-28a构建出重组质粒,并转化至E.coli BL21(DE3)中表达。该EGⅣ基因约有1089bp,在启动子T7lac的控制和IPTG的诱导下,目的基因成功地在原核细胞中表达。通过SDSPAGE检测得出目标蛋白分子量为39kDa,重组酶的比酶活为1.05U/mg,该酶最适pH值为6、最适反应温度为50℃。
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关键词
绿色木霉
纤维素酶
内切葡聚糖酶
eg
ⅳ
基因
基因
重组
原核表达
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职称材料
题名
绿木霉ZY-01中纤维素酶EGⅣ基因的克隆及其在E.coli中的原核表达
1
作者
胡侨
罗伟
阮涛
侯亚利
黄皓
杨忠华
机构
武汉科技大学化学工程与技术学院
出处
《武汉科技大学学报》
CAS
北大核心
2016年第2期156-160,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(21376184)
文摘
以前期筛选到的纤维素酶高产菌株绿木霉T.viride ZY-01的总RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆出内切葡聚糖酶EGⅣ基因,连接至pET-28a构建出重组质粒,并转化至E.coli BL21(DE3)中表达。该EGⅣ基因约有1089bp,在启动子T7lac的控制和IPTG的诱导下,目的基因成功地在原核细胞中表达。通过SDSPAGE检测得出目标蛋白分子量为39kDa,重组酶的比酶活为1.05U/mg,该酶最适pH值为6、最适反应温度为50℃。
关键词
绿色木霉
纤维素酶
内切葡聚糖酶
eg
ⅳ
基因
基因
重组
原核表达
Keywords
Trichoderma viride
cellulase
endoglucanase
eg
ⅳ
gene
gene recombination
prokaryotic expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绿木霉ZY-01中纤维素酶EGⅣ基因的克隆及其在E.coli中的原核表达
胡侨
罗伟
阮涛
侯亚利
黄皓
杨忠华
《武汉科技大学学报》
CAS
北大核心
2016
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