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成年小鼠ECSIT 3′-UTR的鉴定及功能分析
1
作者 周小蓉 陆霞 +2 位作者 李建涛 阙玲琍 李跃华 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期937-942,共6页
目的:鉴定成年小鼠Toll途径进化保守信号介导因子(evolutionarily conserved signaling intermediate in Toll pathways,ECSIT)的3′非翻译区(3′-untranslated region,3′-UTR)序列,并在细胞中验证非编码RNA对ECSIT表达的影响。方法:采... 目的:鉴定成年小鼠Toll途径进化保守信号介导因子(evolutionarily conserved signaling intermediate in Toll pathways,ECSIT)的3′非翻译区(3′-untranslated region,3′-UTR)序列,并在细胞中验证非编码RNA对ECSIT表达的影响。方法:采用RACE技术克隆得到小鼠ECSIT 3′-UTR序列,并与基因组数据库进行比对;预测ECSIT 3′-UTR可能结合的微小RNA(microRNA,miRNA),并针对ECSIT的全长序列设计小干扰RNA(siRNA);通过Western blot分别检测使用不同miRNA和siRNA干扰后,细胞中ECSIT的表达。结果:成功鉴定了346 bp的小鼠ECSIT 3′-UTR,与NCBI上序列一致率达到99%;在细胞中miR-7-5p和siRNA1、2可以干扰ECSIT的表达。结论:成功鉴定得到成年小鼠心脏ECSIT m RNA 3′-UTR序列,该非编码区可作为非编码RNA的调控区域,为进一步从分子水平探明ECSIT在小鼠生长发育及疾病中的作用提供科学依据。 展开更多
关键词 3′非翻译区 3′RACE ecsit MICRORNA SIRNA
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线粒体靶向过表达ECSIT转基因小鼠的构建与鉴定
2
作者 何昀 张美玲 +3 位作者 胡媛萍 李建涛 阙玲琍 李跃华 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1095-1100,共6页
目的:构建线粒体靶向过表达ECSIT转基因小鼠,并对其进行鉴定和心功能分析,建立ECSIT基因相关功能研究模型动物。方法:构建过表达打靶载体pCAG-OTCL-ECSIT-3Xflag-BPA,采用电转导方法将线性化打靶载体转入胚胎干细胞(ES细胞);将含有过表... 目的:构建线粒体靶向过表达ECSIT转基因小鼠,并对其进行鉴定和心功能分析,建立ECSIT基因相关功能研究模型动物。方法:构建过表达打靶载体pCAG-OTCL-ECSIT-3Xflag-BPA,采用电转导方法将线性化打靶载体转入胚胎干细胞(ES细胞);将含有过表达载体的ES细胞进行囊胚腔注射,并将嵌合囊胚移植至代孕小鼠体内,繁殖嵌合体小鼠。嵌合体小鼠和C57BL/6J鼠交配繁殖出杂合子,PCR筛选阳性过表达小鼠。采用小动物超声分析线粒体靶向过表达ECSIT小鼠的心功能。结果:成功构建了线粒体靶向过表达ECSIT载体p CAG-OTCL-ECSIT-3Xflag-BPA,经PCR鉴定为阳性;完成线粒体靶向过表达ECSIT基因打靶及囊胚注射,经PCR鉴定为阳性;分别提取转基因小鼠心肌组织线粒体和胞浆蛋白,检测发现线粒体特异性过表达ECSIT。8周龄转基因小鼠心功能与同龄野生型小鼠无明显差异。结论:成功构建出线粒体靶向过表达ECSIT小鼠;线粒体过表达ECSIT对8周龄小鼠心功能无明显影响。 展开更多
关键词 ecsit 线粒体靶向过表达 转基因小鼠
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《ECSIT基因V140A突变在结外NK/T细胞淋巴瘤中诱发过度炎症并引起“噬血综合症”》解读 被引量：15
3
作者 黄慧强 文海军 《临床血液学杂志》 CAS 2018年第3期329-331,共3页
本文最初发表于2018年《Nature Medicine》杂志上,文章题录为:Wen H,Ma H,Cai Q,et al.Recurrent ECSIT mutation encoding V140Atriggers hyperinflammation and promotes hemophagocytic syndrome in extranodal NK/T cell lymphoma[J... 本文最初发表于2018年《Nature Medicine》杂志上,文章题录为:Wen H,Ma H,Cai Q,et al.Recurrent ECSIT mutation encoding V140Atriggers hyperinflammation and promotes hemophagocytic syndrome in extranodal NK/T cell lymphoma[J].Nat Med,2018,24:154-164。本研究通过全外显子技术、靶向测序等方法分析了88例NK/T细胞淋巴瘤的肿瘤标本,发现了ECSIT基因V140A突变在肿瘤相关"噬血综合症"的作用及机制,对于提升NK/T细胞淋巴瘤合并噬血综合症的临床治疗效果奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 NK/T细胞淋巴瘤 噬血综合症 ecsit基因 V140A突变
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