全反式维甲酸联合LY294002对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K、MMP-2表达的影响 被引量：5

1

作者 崔会娟 李娜 +3 位作者 路彦娟 李珊珊 王珍珍 路太英 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第1期1-5,共5页

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)抑制剂LY294002单独或联合作用对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K和MMP-2表达的影响。方法:将常规培养的EC1细胞随机分为ATRA组、LY294002组、ATRA+LY294002组和对照组4组,采用CCK-... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)、磷脂酰肌醇激酶-3(PI3K)抑制剂LY294002单独或联合作用对食管癌EC1细胞增殖、迁移及PI3K和MMP-2表达的影响。方法:将常规培养的EC1细胞随机分为ATRA组、LY294002组、ATRA+LY294002组和对照组4组,采用CCK-8检测各组细胞的增殖情况,通过划痕实验测定各组细胞的迁移能力,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组细胞中PI3K及MMP-3 mRNA和蛋白的表达情况。结果:作用24、48和72 h后,ATRA+LY294002组的细胞增殖抑制率均高于其他2组(P<0.05);作用24 h后,ATRA+LY294002组细胞迁移能力均低于其他3组(P<0.05);作用48 h后,ATRA+LY294002组细胞PI3K及MMP-2 mRNA和蛋白的表达量均低于其他3组(P<0.05)。结论:ATRA联合LY294002可协同抑制EC1细胞的增殖、迁移和PI3K、MMP-2的表达,进而可能协同抑制肿瘤血管生成。 展开更多

关键词 全反式维甲酸 LY294002 ec1细胞 PI3K MMP-2

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顺铂对TRAIL诱导EC1细胞凋亡的增敏效应 被引量：2

2

作者 江亚南 马俊芬 +4 位作者 黄幼田 李沛 李芳芳 杨浩 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第3期346-348,共3页

目的:观察顺铂(cDDP)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导EC1细胞凋亡的增敏效应。方法:MTT法检测单用TRAIL(10、50、100、500和1000μg/L)或cDDP(1.0、2.0、4.0、10.0和20.0mg/L)分别作用24、48和72h对EC1细胞增殖的影响。流式... 目的:观察顺铂(cDDP)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导EC1细胞凋亡的增敏效应。方法:MTT法检测单用TRAIL(10、50、100、500和1000μg/L)或cDDP(1.0、2.0、4.0、10.0和20.0mg/L)分别作用24、48和72h对EC1细胞增殖的影响。流式细胞术检测100μg/LTRAIL和10.0mg/LcDDP单用或联用48h对EC1细胞凋亡和细胞周期的影响,并设空白对照组。结果:单用TRAIL作用24、48和72h对EC1细胞增殖影响不明显(P>0.05),单用cDDP对EC1细胞增殖有抑制作用(P<0.05)。单用TRAIL对EC1细胞凋亡率无影响(FTRAIL=5.836,P=0.250),而单用cDDP可提高EC1细胞凋亡率(FcDDP=20.763,P=0.041),二者联合有交互作用(F交互=57.422,P<0.001)。单用TRAIL和cDDP对EC1细胞周期无影响,二者联用后G0/G1和S期细胞比例下降,G2/M细胞比例上升(P均<0.001)。结论:cDDP可增加EC1细胞对TRAIL的敏感性,二者联用可诱导EC1细胞凋亡,并诱导其在G/M期阻滞。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 顺铂 ec1细胞 细胞凋亡 细胞周期

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HP根治前后胃粘膜Gas、SS、SP变化及G、D、EC_1细胞图像定量研究 被引量：2

3

作者 张宇民 董树强 +4 位作者 李保刚 宣昆生 赖苇 曹丽玲 刘玉梅 《中国内镜杂志》 CSCD 2001年第2期55-57,共3页

该研究旨在探讨HP感染的慢性胃炎和消化性溃疡患者HP根治前后胃粘膜中胃肠激素Gas、SS、SP及G、D、EC1细胞变化和其相关性。方法 :1997年 3月～ 1999年 12月对 10 2例HP感染的病人 ,HP根治前后分别用放射免疫法及免疫组化染色图像定量分... 该研究旨在探讨HP感染的慢性胃炎和消化性溃疡患者HP根治前后胃粘膜中胃肠激素Gas、SS、SP及G、D、EC1细胞变化和其相关性。方法 :1997年 3月～ 1999年 12月对 10 2例HP感染的病人 ,HP根治前后分别用放射免疫法及免疫组化染色图像定量分析Gas、SS、SP含量和G、D、EC1细胞密度、灰度。结果 :HP阳性的三组病人经药物治疗根治后胃粘膜Gas含量均较治疗前明显降低 (P <0 .0 1) ,SS、SP含量较治疗前升高 (P<0 .0 1,P <0 .0 5 )。图像定量分析示HP根治前后胃粘膜G、D、EC1细胞密度显著降低 (P <0 .0 5 ) ,D、EC1细胞灰度增加 (P <0 .0 5 )。结论 :三组病人HP根除后胃粘膜Gas减少 ,G细胞灰度降低 ,SS、SP升高 ,D、EC1细胞灰度增加 ,细胞分泌颗粒变化与粘膜相应激素变化呈正相关。提示HP感染干扰了这些激素分泌释放的调控 ,可能是HP相关性胃炎和消化性溃疡的发病机制之一。根除HP后SS、SP升高 ,Gas降低纠正HP感染所致的这些激素分泌释放紊乱 ,可能是HP根除后溃疡复发率降低的原因之一。在HP根除前SP ,EC1细胞灰度降低 ,根除后升高 ,提示SP抑制胃泌素分泌释放 ,而对生长抑素无抑制作用 ,具有胃粘膜保护功能。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 胃粘膜 胃泌素 生长抑素 P物质 细胞

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地塞米松和1,25-(OH)_2D_3对EC1细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：1

4

作者 张震 付聪 +4 位作者 王冰一 窦蒙蒙 赵继敏 黄幼田 赵明耀 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第5期664-666,共3页

目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况... 目的:观察地塞米松(DEX)和1,25-(OH)2D3及2药联用对食管鳞状细胞癌EC1细胞增殖及周期的影响。方法:分别用10-7mol/LDEX与10-7mol/L1,25-(OH)2D3以及同种浓度2药联合处理EC1细胞48、72和96h,并设溶剂对照组。采用MTT法检测细胞增殖情况及流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:1,25-(OH)2D3单独应用具有抑制EC1细胞增殖的作用(F1,25-(OH)2D3=51.185,P<0.001);DEX单独应用具有阻滞细胞周期的作用(FDEX=8.170,P=0.009)。DEX、1,25-(OH)2D3及时间3种因素两两间均存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX=11.017,P=0.003;F1,25-(OH)2D3×时间=3.668,P=0.041;FDEX×时间=7.887,P=0.002。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX=12.381,P=0.002;F1,25-(OH)2D3×时间=6.583,P=0.005;FDEX×时间=5.096,P=0.014),且两药间提示存在拮抗作用。未发现3因素之间存在交互作用(细胞增殖抑制:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.512,P=0.606。G0/G1期细胞比率:F1,25-(OH)2D3×DEX×时间=0.410,P=0.668)。结论:DEX和1,25-(OH)2D3单独及联合使用能对EC1细胞增殖起抑制作用,且使EC1细胞周期阻滞在G0/G1期。 展开更多

关键词 地塞米松 1 25-(OH)2D3 ec1细胞 细胞周期 食管肿瘤 鳞状细胞癌

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Smac过表达对食管鳞癌细胞Warburg效应和细胞凋亡的影响 被引量：1

5

作者 朱立强 张乐 +4 位作者 李庆华 张彦婷 张璐玉 刘腾飞 关方霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期789-793,共5页

目的:探究Smac过表达对食管鳞癌细胞Warburg效应和细胞凋亡的影响。方法:以含Smac过表达载体的慢病毒感染食管鳞癌细胞EC1和Eca109(Smac过表达组),以感染含空载体的慢病毒为阴性对照,以未感染细胞为空白对照。采用Western blot法检测3... 目的:探究Smac过表达对食管鳞癌细胞Warburg效应和细胞凋亡的影响。方法:以含Smac过表达载体的慢病毒感染食管鳞癌细胞EC1和Eca109(Smac过表达组),以感染含空载体的慢病毒为阴性对照,以未感染细胞为空白对照。采用Western blot法检测3组细胞Smac蛋白的表达情况。用过氧化氢刺激Smac过表达组和阴性对照组细胞,利用线粒体膜电位检测试剂盒和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡情况,并用Western blot法检测细胞中凋亡信号通路相关蛋白[细胞色素C(Cyt-C)、Bcl-2、Caspase-3前体]以及Warburg效应关键蛋白[己糖激酶Ⅱ(HK2)和乳酸脱氢酶(LDH)]的表达。结果:EC1和Eca109 Smac过表达组Smac蛋白表达水平升高,提示成功构建了Smac过表达细胞株。经过氧化氢刺激后,与阴性对照组相比,Smac过表达组HK2和LDH表达水平下降,细胞线粒体膜电位降低,细胞凋亡率升高,Cyt-C的表达水平升高,Bcl-2和Caspase-3前体蛋白的表达水平下降(P<0.05)。结论:氧化应激刺激下,Smac过表达可抑制食管鳞癌细胞的Warburg效应,促进食管鳞癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 SMAC蛋白 食管鳞癌 ec1细胞 ecA109细胞 Warburg效应 细胞凋亡

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β-胡萝卜素对食管鳞癌EC1细胞内活性氧和细胞凋亡的影响 被引量：1

6

作者 刘艳霞 张璐玉 +9 位作者 崔艳艳 张乐 刘雯雯 黄团结 李鹏 杨璐 许玲 植清雪 张彦婷 关方霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2018年第3期272-276,共5页

目的:探讨β-胡萝卜素对食管鳞癌EC1细胞内活性氧和细胞凋亡的影响。方法:分别用不同质量浓度的β-胡萝卜素(30、50、80μmo L/L)处理食管鳞癌EC1细胞48 h后,采用化学荧光法检测EC1细胞内活性氧(ROS)含量变化,通过JC-1从红色荧光到绿色... 目的:探讨β-胡萝卜素对食管鳞癌EC1细胞内活性氧和细胞凋亡的影响。方法:分别用不同质量浓度的β-胡萝卜素(30、50、80μmo L/L)处理食管鳞癌EC1细胞48 h后,采用化学荧光法检测EC1细胞内活性氧(ROS)含量变化,通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变检测线粒体膜电位(MMP)变化,ELISA法检测胞内细胞色素C(Cyt-C)含量的变化,Western blot检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达,流式细胞术检测不同质量浓度的β-胡萝卜素对EC1细胞凋亡的影响。结果:β-胡萝卜素处理能够提高EC1细胞内ROS含量,引起MMP下降,促进Cyt-C的释放,上调Bax和Caspase-3蛋白表达,并下调Bcl-2蛋白表达;同时,β-胡萝卜素作用能提高EC1细胞凋亡率。结论:β-胡萝卜素能够通过上调细胞内ROS的水平,降低MMP,进一步促进食管鳞癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 Β-胡萝卜素 食管鳞癌 活性氧 凋亡 ec1细胞

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雷帕霉素靶蛋白RNA干扰联合雷帕霉素对人食管癌移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素蛋白基因表达的影响

7

作者 陈玉 亚国伟 +1 位作者 张威 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1135-1138,共4页

目的:探讨RNA干扰技术联合雷帕霉素对人食管癌裸鼠移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的影响。方法:①构建裸鼠食管癌EC1细胞移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,将荷瘤小鼠随机分为雷帕霉素治疗组[(腹腔注射雷帕霉素,50μg... 目的:探讨RNA干扰技术联合雷帕霉素对人食管癌裸鼠移植瘤生长和移植瘤组织中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因表达的影响。方法:①构建裸鼠食管癌EC1细胞移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,将荷瘤小鼠随机分为雷帕霉素治疗组[(腹腔注射雷帕霉素,50μg/(kg.次)]、mTOR小分子干扰RNA(siRNA)治疗组[腹腔注射mTORsiRNA,3μg/次]和联合治疗组(先腹腔注射mTORsiRNA,第2天腹腔注射雷帕霉素),另设空白对照组(腹腔注射PBS代替药物)和顺铂治疗组[腹腔注射常规化疗药顺铂,1mg/(kg.次)];每组各5只。连续治疗2周,治疗结束取瘤组织,分析治疗前后移植瘤体积的变化。②采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达。结果:①单用雷帕霉素(F=185.00,P<0.001)或mTORsiRNA(F=199.01,P<0.001)均能降低裸鼠移植瘤体积;雷帕霉素和mTORsiRNA有交互作用(F=30.30,P<0.001),2者联合应用后,裸鼠移植瘤体积有更大幅度的下降。顺铂治疗后,裸鼠移植瘤体积与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.426,P=0.682)。②单用雷帕霉素(F=395.76,F=550.04,P均<0.001)或mTORsiRNA(F=367.58,F=573.39,P均<0.001)均能降低裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达;雷帕霉素和mTORsiRNA有交互作用(F=11.68,P=0.004;F=10.23,P=0.006),2者联合应用后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达有更大幅度的下降。顺铂治疗后,裸鼠移植瘤组织中mTOR蛋白(7.15±0.56)及mRNA(6.88±0.59)的表达与联合治疗的效果差异无统计学意义(t=0.622,P=0.551;t=0.572,P=0.583)。结论:应用RNA干扰技术沉默mTOR基因及应用雷帕霉素治疗均可有效抑制肿瘤的生长,下调裸鼠食管癌移植瘤组织中mTOR蛋白及mRNA的表达,且2者联合效果最佳。 展开更多

关键词 雷帕霉素 食管肿瘤 ec1细胞 裸鼠 RNA干扰

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曲古菌素A对食管癌细胞系EC1细胞凋亡的影响 被引量：1

8

作者 马俊芬 李沛 +3 位作者 黄幼田 杨洪艳 郑智敏 董子明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第2期180-182,共3页

目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响。方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24 h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化... 目的:探讨曲古菌素A(TSA)对食管癌EC1细胞凋亡的影响。方法:用DMSO(对照组)和0.3、0.5及1.0μmol/L的TSA处理EC1细胞24 h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,West-ern Blot检测4组细胞中Bax及Bcl-2表达的变化。结果:对照组、0.3、0.5及1.0μmol/L TSA组作用24 h后,EC1细胞凋亡率分别为(2.18±0.37)%、(2.96±0.34)%、(7.41±1.01)%和(14.03±1.23)%,Bax蛋白表达水平分别为(0.42±0.23)、(0.45±0.11)、(1.16±0.28)和(1.89±0.30),Bcl-2蛋白表达水平分别为(1.15±0.14)、(1.11±0.15)、(0.59±0.06)和(0.40±0.07),4组间3指标差异均有统计学意义(F=211.96,25.12和33.68,P均<0.001),随TSA作用浓度的增加,EC1细胞凋亡率、Bax蛋白表达均增加,Bcl-2表达减少。结论:一定剂量的TSA可以诱导EC1细胞凋亡,凋亡的发生可能与Bax表达增加和Bcl-2表达减少有关。 展开更多

关键词 曲古菌素A 细胞凋亡 食管癌 BAX BCL-2 ec1细胞

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雷帕霉素对食管癌EC1细胞mTOR表达及细胞生长与凋亡的影响 被引量：1

9

作者 王贵琴 张威 +2 位作者 陈玉 亚国伟 陈奎生 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期709-712,共4页

目的:探讨雷帕霉素对人食管癌EC1细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长、凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度的雷帕霉素(100、150、200nmol/L)分别作用于EC1细胞24、48、72h,同时设溶剂对照组和空白对照组,用免疫细胞化... 目的:探讨雷帕霉素对人食管癌EC1细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及细胞生长、凋亡的影响。方法:采用低、中、高浓度的雷帕霉素(100、150、200nmol/L)分别作用于EC1细胞24、48、72h,同时设溶剂对照组和空白对照组,用免疫细胞化学及原位杂交法检测EC1细胞中mTOR蛋白与mRNA的表达,MTT法检测EC1细胞的增殖情况,TUNEL法检测各组作用24h后细胞凋亡情况。结果:雷帕霉素作用24、48与72h,5组细胞mTOR蛋白与mRNA的表达差异均有统计学意义(mTOR蛋白:F=29.273、34.328、41.571,P均<0.001;mTORmRNA:F=34.969、53.614、36.943,P均<0.001),细胞生长抑制率差异亦有统计学意义(F=566.732、51.768和186.022,P均<0.001);雷帕霉素低、中、高浓度组EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达均低于各对照组,且其表达随雷帕霉素浓度的增加及作用时间的延长而减弱(P<0.05)。雷帕霉素低、中、高浓度组细胞生长抑制率均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加和作用时间的延长而升高(P<0.05)。作用24h,5组细胞凋亡指数(AI)差异有统计学意义(F=524.563,P<0.001),雷帕霉素低、中、高浓度组AI均高于各对照组,且随雷帕霉素浓度的增加而增高(P<0.05)。结论:雷帕霉素可能通过抑制EC1细胞mTOR蛋白与mRNA的表达从而抑制EC1细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 雷帕霉素 食管肿瘤 ec1细胞 MTOR 增殖 凋亡

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转录因子8在食管癌细胞EC1的表达及其对EC1细胞迁移侵袭的影响

10

作者 江亚南 张艳艳 +4 位作者 杨洪艳 田芳 马俊芬 刘康栋 董子明 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期1552-1555,共4页

目的:研究食管癌细胞EC1中转录因子8(transcription factor 8,TCF8)的表达对EC1细胞迁移侵袭的影响。方法:通过共聚焦显微镜观察EC1细胞中TCF8的表达;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)作用于EC1细胞24 h后,West... 目的:研究食管癌细胞EC1中转录因子8(transcription factor 8,TCF8)的表达对EC1细胞迁移侵袭的影响。方法:通过共聚焦显微镜观察EC1细胞中TCF8的表达;吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)作用于EC1细胞24 h后,Western blot法检测NF-κBp65、TCF8和E-cadherin蛋白表达变化,划痕损伤和transwell实验检测对细胞转移和侵袭的影响。结果:TCF8表达于EC1细胞核,PDTC可以导致EC1细胞中NF-κBp65、TCF8表达降低,而E-cadherin表达增高;PDTC组细胞迁移距离和穿过的细胞数明显低于对照组。结论:食管癌细胞EC1中表达TCF8,下调TCF8可上调E-cadherin,抑制EC1细胞的迁移侵袭,为阐明食管癌侵袭转移的分子机制提供理论依据,为临床治疗提供分子靶点。 展开更多

关键词 食管肿瘤 转录因子8 ec1细胞 细胞迁移 细胞侵袭

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端粒酶抑制因子X1过表达对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响 被引量：2

11

作者 赵倩 卢桂芳 +4 位作者 刘亚萍 和水祥 任牡丹 李雅睿 杨振威 《国际消化病杂志》 CAS 2023年第1期28-31,38,共5页

目的探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照(NG)组(空白对照细胞)、pcDNA组(转染阴性对照质粒)、pcDNA-PinX1组(转染PinX1过表达质粒)、N-乙酰-L-半... 目的探究端粒酶抑制因子X1(PinX1)对人食管癌EC1细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人食管癌细胞系EC1细胞株,并将其分为空白对照(NG)组(空白对照细胞)、pcDNA组(转染阴性对照质粒)、pcDNA-PinX1组(转染PinX1过表达质粒)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组(加入信号通路抑制剂)。采用实时荧光定量PCR法检测各组PinX1 mRNA的表达水平。分别采用CCK-8法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、凋亡情况。采用荧光探针法检测各组活性氧簇(ROS)水平。采用蛋白质印迹法检测各组腺苷酸激活蛋白激酶/信号转导与转录激活因子3(AMPK/STAT3)信号通路相关蛋白的表达水平。结果经成功转染细胞后,与NG组、pcDNA组比较,pcDNA-PinX1组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均升高,而p-STAT3/STAT3均降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与pcDNA-PinX1组比较,NAC组细胞的增殖抑制率、凋亡率、ROS水平、p-AMPK/AMPK均降低,p-STAT3/STAT3升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论PinX1过表达可抑制人食管癌EC1细胞增殖并诱导其凋亡,可能通过促进ROS/AMPK/STAT3信号通路活化来实现。 展开更多

关键词 端粒酶抑制因子X1 人食管癌ec1细胞 活性氧簇 增殖 凋亡

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重组PAC1-EC1(N)对表达不同PAC1变体的细胞系细胞活性的影响

12

作者 李娟 余榕捷 +2 位作者 王静静 黄霖 刘晓飞 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期22-28,共7页

垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)特异受体PAC1(normal型)N端胞外域[简称PAC1-EC1(N)]具有调控PAC1活性的作用。为研究PAC1-EC1(N)对表达不同PAC1变体的细胞系活性的影响,利用基因... 垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)特异受体PAC1(normal型)N端胞外域[简称PAC1-EC1(N)]具有调控PAC1活性的作用。为研究PAC1-EC1(N)对表达不同PAC1变体的细胞系活性的影响,利用基因工程技术获得C端带有6个his纯化标签的重组PAC1-EC1(N)。质谱检测、SDS-PAGE电泳和Western blot检测结果均显示成功表达和纯化目的蛋白PAC1-EC1(N)。Western blot检测确定兔眼角膜基质细胞、人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y、人前列腺癌细胞22RV1中分别表达一个或多个分子量不同的PAC1变体。重组PAC1-EC1(N)作用3株细胞,MTT方法检测细胞活性,结果显示:PAC1-EC1(N)有效促进只表达一个小分子PAC1变体的兔眼角膜基质细胞的增殖;但显著抑制只表达一个大分子PAC1变体的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的活性。对于表达3种大小不一的PAC1变体的人前列腺癌细胞22RV1,PAC1-EC1(N)对细胞的活性具有复杂的调控。显示PAC1-EC1(N)对表达PAC1变体数量不同,类型不同的细胞具有不同的生物活性的作用,提示了PAC1变体可能具有较复杂的自我调控机制。 展开更多

关键词 重组PAC1-ec1(N) 胞外端细胞系 生物活性

原文传递

稳定表达磷酸化Stat3蛋白的EC-1细胞株的获取

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作者 贺红柳 轩小燕 +4 位作者 李刚 王志强 宋一民 李蕴蕴 李珊珊 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期297-300,共4页

目的:建立稳定表达磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的EC-1细胞株。方法:应用脂质体Lipofectamine2000将pXJ40-Stat3质粒转染入EC-1细胞中,G418筛选得稳定转染pXJ40-Stat3的EC-1细胞株,IL-6处理20min以获得稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株(转... 目的:建立稳定表达磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的EC-1细胞株。方法:应用脂质体Lipofectamine2000将pXJ40-Stat3质粒转染入EC-1细胞中,G418筛选得稳定转染pXJ40-Stat3的EC-1细胞株,IL-6处理20min以获得稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株(转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组)。同时以稳定转染pXJ40-Stat3(转染pXJ40-Stat3组)、IL-6处理组(不转染)、空载体组和空白组细胞作为对照。分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中Stat3 mRNA和p-Stat3蛋白的表达。结果:5组细胞中Stat3 mRNA和p-Stat3表达差异有统计学意义(FStat3 mRNA=5.971,P=0.010;Fp-Stat3=7.334,P=0.005)。转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中Stat3 mRNA表达最高(0.72±0.01),其次是转染pXJ40-Stat3组(0.65±0.01),均高于其他3组。转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中p-Stat3蛋白表达最高(0.72±0.03),其次为IL-6处理组(0.65±0.01),均高于其他3组。结论:成功建立稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 ec-1细胞 pXJ40-Stat3 磷酸化Stat3蛋白 转染

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三氧化二砷对人食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用 被引量：3

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作者 崔艳慧 梁海军 +2 位作者 张清琴 路平 苗战会 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期667-670,共4页

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对食管癌离体肿瘤细胞EC-1的放射增敏作用,并探讨其机制。方法利用多靶单击数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,观察As2O3对食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用。流式细胞法观察As2O3对细胞周期分布及细胞凋亡的... 目的探讨三氧化二砷(As2O3)对食管癌离体肿瘤细胞EC-1的放射增敏作用,并探讨其机制。方法利用多靶单击数学模型拟合放射剂量-细胞存活曲线,观察As2O3对食管癌细胞株EC-1的放射增敏作用。流式细胞法观察As2O3对细胞周期分布及细胞凋亡的影响。结果 As2O3对食管癌细胞株EC-1有明显的放射增敏效应,3μmol/L As2O3作用48 h的放射增敏比为1.285。药物作用后G2/M期细胞比例增加,G0/G1期和S期细胞比例减少;细胞凋亡指数增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 As2O3对食管癌细胞株EC-1有明显的放射增敏效应。放射增敏的机制可能与As2O3抑制EC-1细胞的修复能力、使细胞周期阻滞在G2/M期、G0/G1期和S期细胞减少以及凋亡增加有关。 展开更多

关键词 三氧化二砷 人食管癌细胞株ec-1 放射增敏

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热疗对食管癌细胞株EC-1放疗的增敏作用 被引量：3

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作者 谷见法 路平 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期337-339,共3页

目的初步探讨热疗对食管癌细胞株EC-1放射增敏作用及其可能机制,为热疗与放疗联合治疗食管癌提供理论依据。方法采用平板克隆形成分析法计算各组细胞存活分数SF,"多靶单击数学模型"拟合细胞存活曲线。流式细胞术检测细胞凋亡... 目的初步探讨热疗对食管癌细胞株EC-1放射增敏作用及其可能机制,为热疗与放疗联合治疗食管癌提供理论依据。方法采用平板克隆形成分析法计算各组细胞存活分数SF,"多靶单击数学模型"拟合细胞存活曲线。流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化。结果热疗对食管癌细胞株EC-1放疗有显著的增敏作用,热疗30 min的放射增敏比为1.060。热疗可使细胞阻滞在G2/M期,使G0/G1期、S期细胞比例减少,增加细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论热疗对食管癌EC-l细胞具有增敏作用,热疗可通过影响食管癌EC-l细胞周期,诱导细胞凋亡,增强放射线对细胞的杀伤作用。 展开更多

关键词 热疗 人食管癌细胞株ec-1 放疗增敏

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中药“龙泉复方”的不同配伍对肿瘤细胞系HepG-2和EC-1增殖的影响 被引量：2

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作者 李劲 邓志芳 +6 位作者 高雯琪 胡文娟 刘莹 姚品芳 李广灿 陈焕朝 梅之南 《中南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2011年第1期46-49,共4页

通过MTT（四甲基偶氮唑盐）法绘制细胞增殖曲线观察药物对肝癌细胞系HepG-2和食管鳞癌细胞系EC-1细胞增殖的影响,用荧光染色法进一步确定＂龙泉复方＂有效成分诱导细胞凋亡的较佳配伍及其有效作用浓度范围.结果表明：对抑制HepG-2细胞... 通过MTT（四甲基偶氮唑盐）法绘制细胞增殖曲线观察药物对肝癌细胞系HepG-2和食管鳞癌细胞系EC-1细胞增殖的影响,用荧光染色法进一步确定＂龙泉复方＂有效成分诱导细胞凋亡的较佳配伍及其有效作用浓度范围.结果表明：对抑制HepG-2细胞增殖有效作用的浓度：七味单方（马钱子、山慈菇、喜树果、龙葵、石上柏、青黛、紫菀）浸膏混合物和龙葵单方浸膏均〈125μg/mL,七味药物复方总浸膏为250~1000μg/mL;对抑制EC-1细胞增殖有效作用的浓度：三味药物混合浸膏（马钱子,喜树果、青黛提取的浸膏的混合物）〈50μg/mL和150~400μg/mL,七味单方混合浸膏〈25μg/mL和50~400μg/mL,喜树果单方浸膏为25μg/mL和50~200μg/mL;3种浸膏促进EC-1细胞增殖的浓度依次为：50~100、25~50、25~50μg/mL.通过对EC-1荧光染色观察发现诱导细胞凋亡的有效作用浓度：七位单方浸膏混合物为5~10μg/mL,三味药复方混合浸膏为10~25μg/mL,喜树果约为50μg/mL.研究结果提示,药物浓度范围和细胞系的不同导致其效果也不尽相同,临床应据具体情况调整,使之用药少效果佳. 展开更多

关键词 龙泉复方 配伍 药物浓度 肿瘤细胞 MTT(四甲基偶氮唑盐)法 AO/EB染色法

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Indirubin-3’-monoxime对人食管癌EC-1细胞Survivin表达的影响

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作者 陈小兵 张军辉 +3 位作者 曹新广 罗素霞 黄幼田 索振河 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期465-468,共4页

目的:研究靛玉红衍生物Indirubin-3’-monoxime(IRO)对人食管癌EC-1细胞增殖、细胞周期和Survivin蛋白表达的影响。方法:分别采用1、5、10μmol/L的IRO处理培养的食管癌EC-1细胞后,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期的... 目的:研究靛玉红衍生物Indirubin-3’-monoxime(IRO)对人食管癌EC-1细胞增殖、细胞周期和Survivin蛋白表达的影响。方法:分别采用1、5、10μmol/L的IRO处理培养的食管癌EC-1细胞后,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期的变化情况,采用Western blotting检测Survivin蛋白水平表达。结果:IRO对EC-1细胞生长具有明显的抑制作用,且表现为剂量依赖性和时间依赖性(F=12.39,P<0.05);以5μmol/L的IRO作用EC-1细胞24、48和72h后,G0/G1期细胞比例逐渐下降(P<0.05),S期细胞比例未见明显改变(P>0.05),G2/M期细胞比例逐渐上升(P<0.05),细胞周期向G2/M期阻滞,呈时间依赖性;IRO作用24h后EC-1细胞内Sur-vivin蛋白的表达开始下调,在48h和72h时进一步下降。结论:IRO可抑制食管癌EC-1细胞增殖,诱导EC-1细胞阻滞于G2/M期,下调EC-1细胞中Survivin蛋白表达。 展开更多

关键词 Indirubin-3’-monoxime 食管癌ec-1细胞 细胞增殖 细胞周期 SURVIVIN

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真核起始因子4E反义寡核苷酸对人食管癌EC-1细胞中真核起始因子4E表达的影响

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作者 陈奎生 王志永 +3 位作者 周强 柴雅玫 高冬玲 张红 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期935-937,959,共4页

目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核酸(ASODN)对人食管癌EC-1细胞中eIF4E表达的影响。方法:将针对eIF4E不同基因位点的2条反义寡核苷酸(ASODN1、2)和1条无义寡核苷酸(N-ODN)转染EC-1细胞(设5、10、15μmol/L3个转染浓度),分别培养2... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核酸(ASODN)对人食管癌EC-1细胞中eIF4E表达的影响。方法:将针对eIF4E不同基因位点的2条反义寡核苷酸(ASODN1、2)和1条无义寡核苷酸(N-ODN)转染EC-1细胞(设5、10、15μmol/L3个转染浓度),分别培养24、48、72h,并设空脂质体转染作为空白对照,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测转染后细胞中eIF4E蛋白和mRNA表达的变化。结果:ASODN1、2转染EC-1细胞培养24、48、72h后,各组中eIF4E蛋白和mRNA的表达均降低,2者分别与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);ASODN1、2组每个时间段内随浓度增加ASODN抑制效应增强,差异具有统计学意义(F=9.423、10.284、10.496、7.621、8.420和9.089,P<0.05),组间相同时间点、相同浓度的抑制效应比较差异无统计学意义(P>0.05);NODN组和空白对照组对eIF4E的表达均无抑制效应。结论:特异性的ASODN能有效抑制人食管癌EC-1细胞中eIF4E的表达。 展开更多

关键词 真核起始因子4E 反义寡核苷酸 人食管癌ec-1细胞 转染

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三氧化二砷对食管癌细胞株EC-1的生长抑制作用

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作者 谷见法 王晓敏 路平 《中国医学创新》 CAS 2015年第30期116-118,共3页

目的:探讨三氧化二砷((Arsenic trioxide,As2O3)对食管癌细胞株EC-1生长抑制作用及机制。方法:采用MTT法检测不同浓度As2O3(0.5、1、2、4、8、16、32、64μmol/L)在不同时间段(24、48、72 h)对EC-1细胞增殖的抑制率,计算半数抑制率(IC50... 目的:探讨三氧化二砷((Arsenic trioxide,As2O3)对食管癌细胞株EC-1生长抑制作用及机制。方法:采用MTT法检测不同浓度As2O3(0.5、1、2、4、8、16、32、64μmol/L)在不同时间段(24、48、72 h)对EC-1细胞增殖的抑制率,计算半数抑制率(IC50)值。流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期变化。结果:三氧化二砷对食管癌EC-1细胞具有增殖抑制作用,呈剂量-效应和时间-效应关系(P<0.05)。IC50约为18.74μmol/L。As2O3可使细胞阻滞在G2/M期,使G0/G1期、S期细胞比例减少,增加细胞凋亡,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:As2O3能抑制食管癌EC-l细胞株的增殖,具有明显的量效和时效关系。其机制可能与改变周期,增加其细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 食管癌ec-1细胞系 三氧化二砷

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