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金振口服液对SARS病毒抑制作用的实验研究 被引量:13
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作者 萧伟 徐兰兰 +4 位作者 霍翠翠 张孝法 孙兰 王振中 王京燕 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第5期343-344,352,共3页
目的观察金振口服液对VeroE6细胞内SAILS相关冠状病毒的抑制作用。方法取一定量的SAILS相关冠状病毒BJ-01株加入培养好的VeroE6细胞中,置37℃、5%CO2培养箱吸附2h,吸出病毒液,再分别加入不同浓度的药物稀释液,在同样条件下培养4~5... 目的观察金振口服液对VeroE6细胞内SAILS相关冠状病毒的抑制作用。方法取一定量的SAILS相关冠状病毒BJ-01株加入培养好的VeroE6细胞中,置37℃、5%CO2培养箱吸附2h,吸出病毒液,再分别加入不同浓度的药物稀释液,在同样条件下培养4~5d,观察细胞病变情况。结果金振口服液抑制冠状病毒半数有效浓度(IC劬)为2.0μg/mL,治疗指数(TI)为35。结论金振口服液对SAPS病毒有较好的抑制作用。 展开更多
关键词 金振口服液 SARS病毒 VeRO e6细胞
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新型冠状病毒上海株(nCoV-SH01)的分离和鉴定 被引量:9
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作者 张荣 易志刚 +19 位作者 王玉燕 滕峥 徐巍 宋武慧 蔡霞 孙志平 谷陈建 周艳秋 陈洪友 叶荣 韩文东 朱云凯 冯飞 房方皓 李崇山 张曦 瞿涤 付晨 谢幼华 袁正宏 《微生物与感染》 2020年第1期16-21,共6页
新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情对人类生命健康构成极大威胁。病毒的分离是构建新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)细胞感染模型和动物感染模型的基础。本研究利用冠状病毒易感的Vero E6细胞,从... 新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情对人类生命健康构成极大威胁。病毒的分离是构建新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)细胞感染模型和动物感染模型的基础。本研究利用冠状病毒易感的Vero E6细胞,从1例上海感染者的咽拭子中分离到一株2019-nCoV,命名为nCoV-SH01。对该毒株全基因组采用一代Sanger和二代Illumina法测序,发现该毒株与GenBank MN908947的同源性>99.99%。免疫荧光检测显示,该毒株与COVID-19康复者的血清呈阳性反应。当nCoV-SH01感染Vero E6细胞后,导致典型的合胞体病变,细胞病变效应明显且进展迅速,提示nCoV-SH01可用于进一步建立2019-nCoV的细胞感染和动物感染模型,为开展致病性研究以及抗病毒药物和疫苗研发奠定了基础。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 合胞体 VeRO e6细胞 鼻/咽拭子 细胞模型
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抗传染性法氏囊病病毒VP5蛋白单克隆抗体的制备与初步应用 被引量:4
3
作者 张宁 高宏雷 +4 位作者 高玉龙 李俊山 王晓艳 冉多良 王笑梅 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期719-723,共5页
原核表达的IBDVGx-VP5蛋白经纯化后免疫8周龄的BALB/c雌性小鼠,三次基础免疫后,融合前加强免疫,取脾细胞在PEG(MW1500)的作用下与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经过三次亚克隆筛选,获得稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为4B4、6D12、... 原核表达的IBDVGx-VP5蛋白经纯化后免疫8周龄的BALB/c雌性小鼠,三次基础免疫后,融合前加强免疫,取脾细胞在PEG(MW1500)的作用下与SP2/0小鼠骨髓瘤细胞融合,经过三次亚克隆筛选,获得稳定分泌抗VP5蛋白的杂交瘤细胞,分别命名为4B4、6D12、3E8,以三株杂交瘤细胞制备的腹水ELISA效价分别为5×104、3.5×104、3×104,特异性实验表明三株单抗能与IBDVGt株反应。以单抗介导的间接免疫荧光检测表达Gt-VP5的VeroE6细胞,可以见到特异的荧光,能做为特异性的检测VP5蛋白的工具,为今后IBDVVP5蛋白的研究打下基础。 展开更多
关键词 IBDV VP5蛋白 单克隆抗体 Vero e6细胞
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不同固定液对Vero E6细胞形态和染色的影响及在病毒噬斑分析中的应用 被引量:2
4
作者 黄楠 郎巧利 +1 位作者 葛良鹏 杨希 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1394-1399,共6页
病毒噬斑形成实验是确定病毒滴度的重要方法,其中噬斑染色是非常关键的步骤,而良好的固定液不仅能够维持细胞形态,也能起到助染作用,是有效识别病毒噬斑的关键因素。为了研究不同固定液对Vero E6细胞形态和结晶紫染色效果的影响,本研究... 病毒噬斑形成实验是确定病毒滴度的重要方法,其中噬斑染色是非常关键的步骤,而良好的固定液不仅能够维持细胞形态,也能起到助染作用,是有效识别病毒噬斑的关键因素。为了研究不同固定液对Vero E6细胞形态和结晶紫染色效果的影响,本研究采用五种固定液对Vero E6细胞进行固定(100%甲醇、4%甲醛、10%甲醛、75%乙醇和95%乙醇)。以只加PBS缓冲液的细胞作为对照组。细胞固定30 min后利用1%结晶紫进行染色。利用光学显微镜和肉眼观察细胞形态,从而评价固定和染色效果。结果显示,10%甲醛的细胞固定效果最佳,细胞形态良好,细胞染色均匀且着色深,利用该固定剂能在病毒噬斑实验中很好的识别噬斑,是Vero E6较为理想的固定剂。 展开更多
关键词 固定液 Vero e6细胞 病毒噬斑分析
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新型冠状病毒肺炎患者粪便中新型冠状病毒的分离鉴定
5
作者 周艳秋 崔晓娴 +5 位作者 牟嘉斌 房方皓 滕峥 吴寰宇 陈敏 张曦 《上海预防医学》 CAS 2022年第12期1173-1179,共7页
【目的】分离鉴定新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者粪便标本中的新型冠状病毒(SARS-CoV-2),并进行生物学特性分析。【方法】利用Vero E6细胞对收集到的SARS-CoV-2核酸阳性粪便标本开展病毒分离,对产生细胞病变的培养物进行病毒核酸检测... 【目的】分离鉴定新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者粪便标本中的新型冠状病毒(SARS-CoV-2),并进行生物学特性分析。【方法】利用Vero E6细胞对收集到的SARS-CoV-2核酸阳性粪便标本开展病毒分离,对产生细胞病变的培养物进行病毒核酸检测、免疫荧光抗原检测、病毒含量测定及全基因组测序分型。收集每代细胞培养物后进行半数组织培养感染剂量(TCID50)实验。【结果】8份粪便标本经处理后分别接种Vero E6细胞,培养48 h,1份标本在Vero E6细胞上发现明显细胞病变。8例COVID-19患者粪便病毒核酸阳性标本中分离到1株SARS-CoV-2,阳性分离率为12.5%。病毒能稳定传至第3代,P1代病毒TCID50为104.0/0.2 mL,P2代病毒TCID50为104.5/0.2 mL,P3代病毒TCID50为104.75/0.2 mL。8份粪便样本中仅1份有SARS-CoV-2活毒的复制扩增,传代培养的核酸检测Ct值约为10。该分离株的序列与Wuhan-Hu-1株序列(Gen Bank MN908947)的同源性>99.99%。【结论】从COVID-19患者粪便中分离到SARS-CoV-2活毒株,COVID-19患者中不仅存在粪便排毒的现象,且有活病毒存在。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 粪便 Vero e6细胞 聚合酶链反应 全基因组测序
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猪流行性腹泻病毒NSP1蛋白在细胞器中定位特性
6
作者 季朝阳 张莎 +4 位作者 石达 陈建飞 时洪艳 张鑫 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期842-844,共3页
为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)非结构蛋白1(NSP1)在Vero E6细胞中的分布和亚细胞定位情况,本研究采用RT-PCR方法扩增NSP1基因,并将其克隆至真核表达载体pAcGFP-C1中构建重组质粒pAcGFPNSP1。将pAcGFP-NSP1转染至Vero E6细胞中进行瞬时表... 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)非结构蛋白1(NSP1)在Vero E6细胞中的分布和亚细胞定位情况,本研究采用RT-PCR方法扩增NSP1基因,并将其克隆至真核表达载体pAcGFP-C1中构建重组质粒pAcGFPNSP1。将pAcGFP-NSP1转染至Vero E6细胞中进行瞬时表达,并收集转染后48 h的细胞进行western blot检测。通过激光共聚焦显微镜观察NSP1在细胞中的定位情况。结果表明,NSP1在Vero E6细胞中表达,其主要定位于细胞质中,与细胞中的线粒体、内质网、高尔基体均呈现高度共定位。本研究在Vero E6细胞中表达了PEDV NSP1蛋白,并首次对其亚细胞定位进行了解析,为进一步了解病毒的复制及其致病机制的研究提供了依据。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 NSP1 VeRO e6细胞 细胞定位
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VeroE6细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定
7
作者 迟延彬 石达 +8 位作者 朱庆贺 陈建飞 时洪艳 张鑫 李长龙 韩斅 刘宁 赵鑫 冯力 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期124-127,共4页
为寻找与猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)相互作用的VeroE6细胞蛋白,深入研究病毒感染机制,本试验建立了一个VeroE6细胞酵母杂交cDNA文库。采用Trizol试剂从培养的VeroE6细胞中提取细胞总RNA,通过SMART技术... 为寻找与猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)相互作用的VeroE6细胞蛋白,深入研究病毒感染机制,本试验建立了一个VeroE6细胞酵母杂交cDNA文库。采用Trizol试剂从培养的VeroE6细胞中提取细胞总RNA,通过SMART技术合成双链cDNA,并利用同源重组的方法构建VeroE6细胞的酵母cDNA文库。结果显示,文库滴度为9.7×10^8 CFU/mL,插入的双链cDNA片段大小为0.5~3kb,平均长度约为1.6kb,文库重组率为87%,此文库可以用来筛选与病毒相互作用的VeroE6蛋白。该文库的构建为发现和研究与PEDV结构蛋白相互作用的宿主细胞蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 VeRO e6细胞 CDNA文库 SMART技术 酵母双杂交
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中药注射剂对SARS作用的实验研究
8
作者 王满霞 孙刚 王笑红 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期130-131,共2页
为研究中药注射剂BA和JI对SARS病毒的作用,按照国家食品药品监督管理局制定的细胞模型筛选抗SARS病毒药物试验的技术要求,进行了实验研究。三批试验结果显示,BA对SARS病毒无明显的抑制作用,而JI对SARS病毒有较好的抑制作用,其平均半数... 为研究中药注射剂BA和JI对SARS病毒的作用,按照国家食品药品监督管理局制定的细胞模型筛选抗SARS病毒药物试验的技术要求,进行了实验研究。三批试验结果显示,BA对SARS病毒无明显的抑制作用,而JI对SARS病毒有较好的抑制作用,其平均半数抑制浓度为4.4~12.5ul/ml,对SARS病毒抑制率为50%~95.8%,平均治疗指数为5.15。 展开更多
关键词 SARS病毒 注射液 VeRO e6细胞
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利用酵母双杂交系统筛选Vero E6细胞中与汉坦病毒核衣壳蛋白相互作用的基因
9
作者 王桂珍 周正任 程颖 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第5期48-50,共3页
目的 利用酵母双杂交系统 (yeasttwo -hybridsystem)筛选VeroE6细胞中与汉坦病毒核衣壳蛋白 (N蛋白 )特异结合的蛋白质基因序列 ,研究汉坦病毒与其宿主细胞相互作用的机制。方法 构建含N蛋白基因的“诱饵”质粒 (pGBT9N)和含VroE6细... 目的 利用酵母双杂交系统 (yeasttwo -hybridsystem)筛选VeroE6细胞中与汉坦病毒核衣壳蛋白 (N蛋白 )特异结合的蛋白质基因序列 ,研究汉坦病毒与其宿主细胞相互作用的机制。方法 构建含N蛋白基因的“诱饵”质粒 (pGBT9N)和含VroE6细胞基因片段的“猎物”质粒 (PATC2 )。将两种质粒转入到酵母HF7c株 ,用选择培养基筛选带有两种质粒的克隆株 ,测定 β -半乳糖苷酶 (β -Gal)的活性确定 pGBT9N质粒的存在。用PCR方法扩增克隆株中VroE6细胞基因片段 ,根据插入片段的长度及限制性内切酶酶切图谱对所筛选的克隆株进行分组、测序 ,从人的基因库中查找与插入片段相关的基因序列。结果 在筛选出的克隆中 ,73 5 %的克隆所插入的基因与已知的Ubiqutin(泛素 )蛋白有很高的同源性 (大于 99% ) ,l6 2 %的克隆所插入基因与鼠蛋白激酶有约 72 %的同源性。结论 汉坦病毒N蛋白可能与VeroE6细胞中泛素蛋白以及某种蛋白激酶特异性结合 ,激发并产生某些信号传导 ,进而使病毒能利用宿主细胞完成其复制释放的功能。 展开更多
关键词 VeRO e6细胞 酵母双杂交系统 汉坦病毒 核衣壳蛋白
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辽宁省新布尼亚病毒流行特点及生物特性分析 被引量:19
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作者 刘芸 张洁 +9 位作者 王博 田疆 毛玲玲 孙英伟 王子江 孙婷婷 吴炜 于丹梅 姚文清 赵卓 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期721-723,共3页
目的调查2009—2011年辽宁省8市发热伴血小板减少综合征新病原,探讨新布尼亚病毒在自然界中可能存在的动物宿主及传播媒介。方法采用ELISA方法检测2009—2011年辽宁省发热伴血小板减少患者血液中发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV... 目的调查2009—2011年辽宁省8市发热伴血小板减少综合征新病原,探讨新布尼亚病毒在自然界中可能存在的动物宿主及传播媒介。方法采用ELISA方法检测2009—2011年辽宁省发热伴血小板减少患者血液中发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)IgM抗体,采用间接免疫荧光染色法检测鼠肺SFTSV抗原,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测鼠肺、蜱悬液、细胞阳性分离物的SFTSV核酸,采用VERO-E6细胞对患者血液及脾悬液标本进行病毒分离鉴定,并进行核苷酸测序分析。结果大连、丹东、抚顺、铁岭均检出SFTSV的IgM抗体阳性;103份中检出20份鼠肺SFTSV抗原阳性,但SFTSV核酸检测均阴性;20组中1组蜱悬液SFTSV核酸检测阳性并分离出SFTSV病毒;148份中有26份急性期血液样本经VERO-E6细胞分离出现细胞病变,经鉴定为SFTSV病毒,并对M片段进行核苷酸序列分析。结论新布尼亚病毒是辽宁省4市发热伴血小板减少综合征的新病原,未检出可能的自然界中的动物宿主鼠类携带SFTSV核酸,蜱可能是其传播媒介之一。 展开更多
关键词 新布尼亚病毒 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) VeRO-e6细胞 传播媒介
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汉滩病毒感染诱导热休克蛋白70表达 被引量:2
11
作者 叶苓 杨守京 刘彦仿 《中国病毒学》 CSCD 2000年第2期106-110,共5页
为了解汉滩病毒感染后细胞的应激反应及HSP70的表达与病毒复制的关系 ,在汉滩病毒A9株感染Vero E6细胞后 ,用免疫组织化学及核酸分子原位杂交法 ,对细胞HSP70基因的表达进行了检测。结果表明 ,汉滩病毒感染细胞 4h后即可诱导Vero E6细... 为了解汉滩病毒感染后细胞的应激反应及HSP70的表达与病毒复制的关系 ,在汉滩病毒A9株感染Vero E6细胞后 ,用免疫组织化学及核酸分子原位杂交法 ,对细胞HSP70基因的表达进行了检测。结果表明 ,汉滩病毒感染细胞 4h后即可诱导Vero E6细胞表达HSP70 ,表达可持续至感染后 5d ,且HSP70在细胞内的分布也有改变。 展开更多
关键词 热休克蛋白 汉滩病毒 VeRO-e6细胞 应激反应
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流行性出血热病毒在Vero一E6细胞内引起细胞病变作用的新发现 被引量:6
12
作者 董关木 姚智慧 俞永新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期81-84,共4页
自McCormick等发现Vero-E6细胞对流行性出血热病毒的敏感性后,国内外已有不少学者应用该细胞进行病毒分离和试验研究,但均未发现病毒在该细胞内规律性病变。病毒的存在和滴度只能按免疫荧光法(IFA)证实和测出。本文应用我国分离的出血... 自McCormick等发现Vero-E6细胞对流行性出血热病毒的敏感性后,国内外已有不少学者应用该细胞进行病毒分离和试验研究,但均未发现病毒在该细胞内规律性病变。病毒的存在和滴度只能按免疫荧光法(IFA)证实和测出。本文应用我国分离的出血热病毒在Vero-E6细胞上培养和观察,发现病毒在该细胞上出现有规律的病变并能测出病毒滴度,病变能被特异性中和抗体中和。现将结果报道如下。 展开更多
关键词 流行性出血热 病毒 VeRO-e6细胞
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抗SARS冠状病毒药物细胞筛选模型的建立及应用 被引量:4
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作者 李晓萸 朱舜亚 +3 位作者 魏云玲 杨佩英 祝庆余 秦鄂德 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2003年第5期325-326,369,共3页
目的 :建立抗SARS冠状病毒 (SARS_CoV)药物细胞筛选模型 ,应用于抗SARS_CoV药物的筛选 ,为SARS的防治奠定基础。方法 :将一定数量的细胞接种 96孔板 ,根据药物的作用机制采用不同的给药途径 ,以观察到的细胞病变 (cytopathiceffect,CPE... 目的 :建立抗SARS冠状病毒 (SARS_CoV)药物细胞筛选模型 ,应用于抗SARS_CoV药物的筛选 ,为SARS的防治奠定基础。方法 :将一定数量的细胞接种 96孔板 ,根据药物的作用机制采用不同的给药途径 ,以观察到的细胞病变 (cytopathiceffect,CPE)为指标 ,按照Reed_Muench法 ,计算药物的细胞半数中毒浓度 (TD50 )和抑制细胞半数病变的有效浓度 (IC50 )。结果与结论 :Vero_E6细胞接种SARS_CoV后 2 4h即可出现CPE ,且CPE明显 ,便于观察 ,可作为抗SARS病毒药物细胞筛选模型。依此模型筛选了 3类 87种药物 ,确认 6种药物在Vero_E6细胞上具有抑制SARS病毒的作用。该模型的建立也为其他的抗病毒药物的筛选提供了技术平台。 展开更多
关键词 细胞筛选模型 SARS-COV VeRO-e6细胞 抗病毒药物
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反义RelA下调白血病耐药细胞株HL-60/E6 bcl-x_L mRNA 被引量:3
14
作者 曹文静 张瑶珍 +3 位作者 张东华 邹萍 李登举 唐锦治 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期294-297,共4页
为了探讨NF κB对白血病耐药细胞株HL 6 0 E6bcl x基因转录的影响 ,首先在体外采用间歇小剂量表阿霉素 (6ng ml)作用于HL 6 0细胞的方法 ,建立了性能稳定的广谱耐药细胞株HL 6 0 E6。然后用RT PCR方法检测 5 μmol L硫代修饰反义R... 为了探讨NF κB对白血病耐药细胞株HL 6 0 E6bcl x基因转录的影响 ,首先在体外采用间歇小剂量表阿霉素 (6ng ml)作用于HL 6 0细胞的方法 ,建立了性能稳定的广谱耐药细胞株HL 6 0 E6。然后用RT PCR方法检测 5 μmol L硫代修饰反义RelA作用于HL 6 0 E6细胞后bcl x基因mRNA水平的变化。同时应用免疫荧光技术和流式细胞术分别对HL 6 0 E6细胞中NF κB RelA的功能状态及脂质体作为寡核苷酸载体的转染效率进行评估。结果表明 ,在HL 6 0 E6细胞中RelA表达于胞核 ,NF κB处于持续活化状态。脂质体介导的寡核苷酸 (ODN)的转染效率明显高于裸ODN组 ,在 4 ,6和12小时时有显著差异 (P <0 .0 1)。反义RelA作用于HL 6 0 E6细胞后 ,bcl xL mRNA水平下降呈时间依赖性 ,8小时抑制达到最高峰 ,15小时后逐渐恢复 ,而对照组bcl xL mRNA水平变化不明显。分析结果认为 ,NF κB对bcl x有转录调节作用 ,反义技术封闭RelA亚基可以减弱NF κB对bcl xL 基因的转录激活 ,进而推测NF κB可能是白血病细胞耐药的一个重要因子。 展开更多
关键词 HL-60细胞 e6细胞 反义RelA bcl-xLmRNA 白血病耐药细胞 免疫荧光技术
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天津地区汉坦病毒分离株TJJ16 S基因片段克隆和序列分析 被引量:5
15
作者 李力 杨东靖 +4 位作者 陈锦英 丁建清 苏旭 田永琴 魏骏飞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期652-655,共4页
目的了解天津地区汉坦病毒分离株TJJ16S基因的分子特征。方法采用细胞培养法从鼠肺标本中分离汉坦病毒,命名为TJJ16,提取TJJ16感染VeroE6细胞的总RNA,经逆转录扩增病毒cDNA,继而进行PCR扩增S基因片段,纯化后克隆于pMD18T载体,测定核苷... 目的了解天津地区汉坦病毒分离株TJJ16S基因的分子特征。方法采用细胞培养法从鼠肺标本中分离汉坦病毒,命名为TJJ16,提取TJJ16感染VeroE6细胞的总RNA,经逆转录扩增病毒cDNA,继而进行PCR扩增S基因片段,纯化后克隆于pMD18T载体,测定核苷酸序列并进行分析。结果天津地区首次从社鼠中分离出汉坦病毒TJJ16,其S基因片段全序列长为1701nt。只有1个编码N蛋白的开放读码框架(ORF),起始密码子为第37nt,终止于1326nt,推导其编码的蛋白长为429个氨基酸。经核苷酸系统发生树分析,TJJ16株应归属为汉坦病毒的汉滩型(HTN型)毒株,与HTN型新亚型A16株同属一个亚型。结论TJJ16病毒株的分离与S基因片段序列分析,证实在天津市鼠间存在HTN型汉坦病毒感染,对临床和流行病学的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 汉坦病毒 S基因片段 序列分析 病毒分离株 天津地区 汉坦病毒感染 VeRO-e6细胞 核苷酸序列 克隆 开放读码框架
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水痘带状疱疹病毒蚀斑减少中和试验 被引量:4
16
作者 郑官增 姚苹苹 +1 位作者 朱函平 朱智勇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2001年第5期522-523,共2页
〔目的〕建立水痘带状疱疹病毒中和抗体测定方法。〔方法〕用VZV1毒种制备中和抗原 ,以 5 0pfu左右病毒量加待测血清 36℃中和 1h ,接种Vero-E6单层细胞 ,烛缸法培养 10d后 ,用结晶紫染色 ,计数pfu ;以中和后pfu减少 5 0 %的血清最高稀... 〔目的〕建立水痘带状疱疹病毒中和抗体测定方法。〔方法〕用VZV1毒种制备中和抗原 ,以 5 0pfu左右病毒量加待测血清 36℃中和 1h ,接种Vero-E6单层细胞 ,烛缸法培养 10d后 ,用结晶紫染色 ,计数pfu ;以中和后pfu减少 5 0 %的血清最高稀释度为中和抗体滴度。〔结果〕VZV1在Vero -E6细胞上形成的蚀斑呈椭圆形 ,平均Φ0 .85mm ,边界清晰 ;经试验 3只VZV1免前家兔血清中和抗体滴度 <1:2 ,免后分别为 1:16、1:31、1:6 4;5份中和抗体阳性血清经重复测试 3次 ,中和抗体最多相差 1个滴度 ;2 4份血清同时测定VZV中和、荧光、酶标抗体的GMT比值为 1:1.83:46 .2 5。〔结论〕VZV蚀斑减少中和试验特异性、重复性良好 ,可用于VZV疫苗免疫效果考核。 展开更多
关键词 水痘带状疱疹病毒 蚀斑减少中和试验 VeRO-e6细胞
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板蓝根抗肾综合症出血热病毒的研究 被引量:1
17
作者 李闻文 《实用预防医学》 CAS 2005年第6期1448-1449,共2页
目的了解板蓝根对肾综合症出血热病毒的作用。方法将板蓝根加入吸附肾综合症出血热病毒的培养细胞,培养后用荧光检测。结果一定浓度的板蓝根有抗肾综合症出血热病毒的作用。结论高浓度板蓝根对肾综合症出血热病毒有杀灭或抑制作用,临床... 目的了解板蓝根对肾综合症出血热病毒的作用。方法将板蓝根加入吸附肾综合症出血热病毒的培养细胞,培养后用荧光检测。结果一定浓度的板蓝根有抗肾综合症出血热病毒的作用。结论高浓度板蓝根对肾综合症出血热病毒有杀灭或抑制作用,临床上可用高浓度板蓝根注射液治疗肾综合症出血热。 展开更多
关键词 板蓝根 肾综合症出皿热病毒 抗病毒试验 VeRO-e6细胞
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用Vero-E6细胞大量增殖恙虫病立克次体的研究 被引量:3
18
作者 张志强 胡玲美 +3 位作者 杨青 刘昕昕 魏安明 鲁志新 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期62-63,共2页
目的 为了探讨建立一种简便而可靠的恙虫病立克次体增殖方法, 以得到较大量的恙虫病立克次体。方法 采用了以 Vero - E6 细胞增殖恙虫病立克次, 并且对 Vero - E6 感染细胞的培养条件进行了改进。结果 成功地使恙... 目的 为了探讨建立一种简便而可靠的恙虫病立克次体增殖方法, 以得到较大量的恙虫病立克次体。方法 采用了以 Vero - E6 细胞增殖恙虫病立克次, 并且对 Vero - E6 感染细胞的培养条件进行了改进。结果 成功地使恙虫病立克次体在 Vero - E6 细胞中得到大量增殖。结论 改进后的 Vero - E6 细胞培养法可以获得大量的恙虫病立克次体, 该方法既经济又适用。 展开更多
关键词 恙虫病 立克次体 VeRO-e6细胞 细胞增殖
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用原子力显微镜观察汉坦病毒感染前后Vero-E6细胞的形貌变化 被引量:3
19
作者 唐蕊华 薛小平 +2 位作者 尹焕才 谢玉为 苏婧 《中国实验诊断学》 2008年第5期598-601,共4页
目的用原子力显微镜(atom force microscope,AFM)观察汉坦病毒感染前后Vero-E6细胞的形貌变化。方法①用不同浓度的戊二醛固定细胞;②用不同稀释度的病毒感染细胞;③用同一稀释度的病毒分别感染细胞15、30、45、60、75、90分钟。结果①... 目的用原子力显微镜(atom force microscope,AFM)观察汉坦病毒感染前后Vero-E6细胞的形貌变化。方法①用不同浓度的戊二醛固定细胞;②用不同稀释度的病毒感染细胞;③用同一稀释度的病毒分别感染细胞15、30、45、60、75、90分钟。结果①用0.5%和1.0%的戊二醛处理的细胞形态正常;用1.5%和2.0%的戊二醛固定的细胞表面凸凹不平孔洞较多,大部分细胞皱缩。②用不同稀释度的病毒感染过的Vero-E6细胞,与正常细胞相比,细胞表面粗糙,在细胞核周围有孔洞出现,但稀释度不同出现孔洞的数量也有差别,细胞表面光滑程度也有不同。③用同一稀释度的病毒感染细胞不同时间,发现细胞的形貌、表面粗糙度及细胞表面的孔洞数量都有了变化。结论用AFM技术可以观察到病毒感染前后细胞的超微结构,近似的反映出病毒感染细胞的动态过程。 展开更多
关键词 原子力显微镜 汉坦病毒 VeRO-e6细胞
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新型冠状病毒南非B.1.351变异株的分离与分子特征分析 被引量:2
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作者 郑焕英 张欢 +9 位作者 陆靖 欧阳方竹 邹丽容 胡瑶 李振翠 黎薇 李柏生 何剑锋 柯昌文 邓小玲 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期534-540,共7页
2020年12月广州市第八人民医院收治了1例南非输入性COVID-19病例,经检测为SARS-CoV-2核酸阳性的实验室确诊病例。本研究使用Vero-E6细胞,对该病例咽拭子样本进行病毒分离,逐日观察,咽拭子接种的细胞管3d开始出现细胞融合样细胞病变(Cyto... 2020年12月广州市第八人民医院收治了1例南非输入性COVID-19病例,经检测为SARS-CoV-2核酸阳性的实验室确诊病例。本研究使用Vero-E6细胞,对该病例咽拭子样本进行病毒分离,逐日观察,咽拭子接种的细胞管3d开始出现细胞融合样细胞病变(Cytopathic effect,CPE),5d出现完全CPE后再进行第二代接种,2d出现病变,提取核酸进行鉴定,为SARS-CoV-2阳性。第2代复传的SARS-CoV-2病毒株TCID50测定结果为5.5log TCID50/0.1mL~5.8log TCID50/0.1mL。对分离毒株经采用三代测序成功获得全基因组序列,进化分析结果为与参考毒株Wuhan/Hu-1/2019相比共发生30个碱基的变异、18个氨基酸的突变和18个碱基的缺失,比对结果显示分离到的毒株为SARS-CoV-2南非B.1.351变异株。 展开更多
关键词 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 病毒分离 VeRO-e6细胞 全基因组序列
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