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大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)逆转录病毒周期蛋白(OrfA)相互作用蛋白的酵母双杂交筛选 被引量:5
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作者 徐坤 王亮亮 +3 位作者 张婷婷 周罡 张志强 张智英 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期267-275,共9页
大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤(WDS)在秋季发生春季萎缩的季节性生长特点与大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因的表达有关.其中辅助基因orfA的表达产物OrfA蛋白可能是1个潜在的肿瘤相关因子,OrfA与细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D同源,也被称... 大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤(WDS)在秋季发生春季萎缩的季节性生长特点与大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助基因的表达有关.其中辅助基因orfA的表达产物OrfA蛋白可能是1个潜在的肿瘤相关因子,OrfA与细胞周期蛋白cyclin A和cyclin D同源,也被称为逆转录病毒周期蛋白(retroviral-cyclin).为了深入研究OrfA的作用和功能,我们构建了诱饵表达载体pGBKT7-orfA,采用酵母双杂交技术,从HeLa cDNA文库中筛选与其相互的蛋白因子.通过2轮高强度压力的筛选、β-半乳糖苷酶活性验证、回转验证以及测序分析,最终获得了1个与OrfA相互作用的转录因子E2F5.OrfA C端78个氨基酸的多肽或者缺失C端78个氨基酸的OrfA突变体均不能在酵母双杂交系统中与E2F5相互作用.这些发现为进一步研究OrfA在肿瘤萎缩中的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒 逆转录病毒周期蛋白(OrfA) 酵母双杂交 e2f5转录因子
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Identification of a novel pathway involving a GATA transcription factor in yeast and possibly in plant Zn uptake and homeostasis 被引量:3
2
作者 Matthew J.Milner Nicole S.Pence +1 位作者 Jiping Liu Leon V.Kochian 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2014年第3期271-280,共10页
To gain a better understanding of the regulation of Zn homeostasis in plants and the degree of conservation of Zn homeostasis between plants and yeast, a cDNA library from the Zn/Cd hyperaccumulating plant species, No... To gain a better understanding of the regulation of Zn homeostasis in plants and the degree of conservation of Zn homeostasis between plants and yeast, a cDNA library from the Zn/Cd hyperaccumulating plant species, Noccaea caerulescens, was screened for its ability to restore growth under Zn limiting conditions in the yeast mutant zaplA. ZAP1 is a transcription factor that activates the Zn dependent transcription of yeast genes involved in Zn uptake, including ZRT1, the yeast high affinity Zn transporter. From this screen two members of the E2F family of transcription factors were found to activate ZRT1 expression in a Zn independent manner. The activation of ZRTI by the plant E2F proteins involves E2F- mediated activation of a yeast GATA transcription factor which in turn activates ZRT1 expression. A ZRT1 promoter region necessary for activation by E2F and GATA proteins is upstream of two zinc responsive elements previously shown to bind ZAP1 in ZRT1. This activation may not involve direct binding of E2F to the ZRT1 promoter. The expression of E2F genes in yeast does not replace function of ZAP1; instead it appears to activate a novel GATA regulatory pathway involved in Zn uptake and homeostasis that is not Zn responsive. 展开更多
关键词 e2f transcription factor GATA transcription factor ZRT1 Znhomeostasis
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微小核糖核酸miR-613通过下调E2F5的表达抑制前列腺癌细胞增殖 被引量:4
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作者 何岩 韩广业 +3 位作者 刘沛 李泽宇 李建昌 吴春磊 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2019年第10期859-864,共6页
目的研究微小核糖核酸miR-613在前列腺癌组织及细胞系中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测前列腺癌组织及细胞系中miR-613的表达情况,并检测各组细胞中E2F5 mRNA的表达情况;蛋白质印迹法检测... 目的研究微小核糖核酸miR-613在前列腺癌组织及细胞系中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测前列腺癌组织及细胞系中miR-613的表达情况,并检测各组细胞中E2F5 mRNA的表达情况;蛋白质印迹法检测E2F5蛋白的表达;通过细胞增殖实验检测过表达miR-613后细胞的增殖能力;集落形成实验检测单个细胞克隆增殖情况;双荧光素酶报告实验验证miR-613和E2F5是否靶向结合。结果qPCR结果显示,miR-613在前列腺癌组织和细胞系均显示低表达。与Control组相比,转染miR-613组PC3和LnCap细胞中E2F5蛋白表达水平降低,细胞增殖明显受抑制。而在过表达E2F5后,PC3和LnCap细胞增殖又明显回升,可逆转miR-613的调节作用。双荧光素酶报告实验结果表明,miR-613能够直接靶向E2F53′-UTR。结论miR-613能够通过下调E2F5转录因子的表达而抑制前列腺癌细胞增殖。 展开更多
关键词 微小RNA 前列腺癌 e2f5转录因子 细胞增殖
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OrfA与E2F5的互作关系及其对肺腺癌细胞增殖的影响
4
作者 穆璐 张潇筠 +3 位作者 韩宝泉 陈昱光 张智英 徐坤 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第12期11-17,27,共8页
【目的】确认大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助因子OrfA与转录因子E2F5的互作关系,以及OrfA对肿瘤细胞增殖的影响。【方法】采用重组DNA技术构建orfA与E2F5基因过表达载体;通过Western Blot试验,检测对比HEK293T、Hela229宫颈癌细胞、A... 【目的】确认大眼狮鲈鱼皮肤肿瘤病毒(WDSV)辅助因子OrfA与转录因子E2F5的互作关系,以及OrfA对肿瘤细胞增殖的影响。【方法】采用重组DNA技术构建orfA与E2F5基因过表达载体;通过Western Blot试验,检测对比HEK293T、Hela229宫颈癌细胞、A375恶性黑色素瘤细胞、SMMC-7721肝癌细胞和SPC-A-1肺腺癌细胞中E2F5的表达量;通过酵母双杂交和免疫共沉淀试验,验证OrfA与E2F5的互作关系;采用CCK-8试剂盒和PI单染色法,检测过表达orfA基因对SPC-A-1细胞增殖的影响;采用RT-qPCR,检测过表达orfA基因对SMAD4和caspase-3基因表达的影响。【结果】成功构建了orfA与E2F5基因过表达载体pLenti-EF1α-orfA和pLenti-EF1α-E2F5;在5种细胞系中,以SPC-A-1细胞E2F5蛋白表达量最高;酵母双杂交和免疫共沉淀试验结果均证明,OrfA与E2F5可以直接相互作用;过表达orfA基因对SPC-A-1细胞增殖具有显著促进作用,同时能够增强SMAD4基因的表达,抑制caspase-3基因的表达。【结论】WDSV OrfA与E2F5有相互作用,且能促进SPC-A-1肺腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 逆转录病毒周期蛋白(OrfA) e2f5转录因子 SPC-A-1肺腺癌细胞 细胞增殖
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转录因子E2F1表达对前列腺癌细胞侵袭能力的影响 被引量:9
5
作者 毕学成 蒲小勇 +1 位作者 刘久敏 黄尚 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第36期2856-2859,共4页
目的探讨转录因子E2F1对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及相关临床意义。方法通过前列腺癌临床基因芯片微列阵数据分析E2F1基因表达水平与临床预后指标的关系;构建稳定沉默E2F1表达的前列腺癌PC3细胞株;运用蛋白免疫印迹方法检测转染细... 目的探讨转录因子E2F1对前列腺癌细胞侵袭能力的影响及相关临床意义。方法通过前列腺癌临床基因芯片微列阵数据分析E2F1基因表达水平与临床预后指标的关系;构建稳定沉默E2F1表达的前列腺癌PC3细胞株;运用蛋白免疫印迹方法检测转染细胞株中E2F1和相关肿瘤侵袭分子标志物蛋白表达水平;按照空白对照组和sh-E2F1实验组进行细胞侵袭实验和细胞划痕实验,检测两组在单位时间内的细胞迁移数量。结果E2F1的mRNA表达水平上调与前列腺癌患者术后生化复发率和总体生存率的降低呈正相关(P=0.047,0.035),而且E2F1表达水平与前列腺癌病理分期、Gleason评分和肿瘤转移密切相关(P〈0.05);稳定沉默E2F1的前列腺癌PC3细胞构建成功,蛋白免疫印迹结果显示E2F1抑制组的波形蛋白(Vimentin)、CD147、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达量与对照组相比下降,而E-钙黏附蛋白(cadherin)的蛋白表达量上升,差异均有统计学意义(均P〈0.05);抑制E2F1表达的前列腺癌细胞与对照组相比,侵袭和迁移功能均明显减弱,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论E2F1通过多种机制增强前列腺癌细胞的侵袭转移能力,其表达水平与前列腺癌患者的不良预后存在重要关系。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 e2f1转录因子 侵袭性
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E2F-1在胃腺癌细胞内质网应激反应中对Mcl-1的调控作用 被引量:8
6
作者 王丽 侯丽丽 +3 位作者 吴亚欧 桂丽 张旭东 张林杰 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第4期332-336,共5页
目的探讨Mcl-1在胃腺癌细胞对内质网应激诱导细胞凋亡耐受中的作用,以及内质网应激状态下E2F-1调控Mcl-1的机制。方法采用PI单染法测定细胞凋亡率;Western blot检测GRP78、Mcl-1、Bcl-2、E2F-1蛋白变化;实时荧光定量PCR检测Mcl-1 mRNA... 目的探讨Mcl-1在胃腺癌细胞对内质网应激诱导细胞凋亡耐受中的作用,以及内质网应激状态下E2F-1调控Mcl-1的机制。方法采用PI单染法测定细胞凋亡率;Western blot检测GRP78、Mcl-1、Bcl-2、E2F-1蛋白变化;实时荧光定量PCR检测Mcl-1 mRNA水平变化;转染pcDNA-E2F-1-Flag质粒使细胞高表达E2F-1。结果胃腺癌细胞对衣霉素(TM)诱导的内质网应激性凋亡相对不敏感,这与Mcl-1在蛋白水平和mRNA水平的上调有关。Mcl-1的转录抑制因子E2F-1在TM诱导细胞后表达下调。在内质网应激状态下的胃腺癌细胞中高表达E2F-1可以减弱Mcl-1的上调。结论内质网应激反应引起Mcl-1上调可能在胃腺癌细胞对内质网应激诱导的凋亡耐受中起重要作用;转录因子E2F-1下调可能参与调控Mcl-1的表达。 展开更多
关键词 胃肿瘤 腺癌 e2f1转录因子 内质网 衣霉素 细胞凋亡 转染
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转录因子E2F1抑制CREG表达调控体外培养的人血管平滑肌细胞分化 被引量:5
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作者 韩雅玲 赵昕 +5 位作者 闫承慧 康建 张效林 邓捷 徐红梅 刘海伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期490-496,共7页
为探讨转录因子E2F1在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表型转化中的作用及其对E1A激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)表达调控的分子机制,应用生物信息学方法,定位人CREG(hCREG)基... 为探讨转录因子E2F1在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)表型转化中的作用及其对E1A激活基因阻遏子(cellular repressor of E1A-stimulated genes,CREG)表达调控的分子机制,应用生物信息学方法,定位人CREG(hCREG)基因启动子并确定转录因子E2F1在hCREG启动子区的结合位点,PCR方法克隆并构建hCREG基因启动子绿色荧光报告基因载体,以hCREG启动子区E2F1结合位点为模板,化学合成E2F1寡聚脱氧核苷酸(ODN)和错配E2F1ODN,利用转录因子"诱骗(Decoy)"策略,用E2F1ODN转染体外培养的VSMCs以阻断E2F1与hCREG基因启动子区的结合,蛋白质印迹(Western blot)分析检测阻断前后细胞内hCREG蛋白、报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和平滑肌细胞分化标志蛋白SMα-actin表达变化.结果显示:分化表型HITASY细胞中E2F1表达下调伴出核转位,而增殖表型的HITASY细胞中E2F1蛋白表达明显增加且定位于核内.进一步应用FuGene6瞬时转染E2F1ODN和错配E2F1ODN于体外培养HITASY细胞中,蛋白质印迹分析发现,转染E2F1ODN后,HITASY细胞中hCREG、SMα-actin和GFP表达均较未阻断组及错配组细胞明显增加.上述研究结果证实,E2F1是hCREG基因转录的重要调控因子,能够直接结合于hCREG启动子区阻遏hCREG表达,参与hCREG蛋白对VSMCs表型转化的调控作用. 展开更多
关键词 e2f1 转录因子 阻遏蛋白 e1A 表型 血管平滑肌细胞
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树豆酮酸A可减轻db/db小鼠非酒精性脂肪肝损伤
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作者 王一凡 吕厚星 +6 位作者 李志阳 代云莉 冯昭卫 陈佳佳 陈圣杰 王建塔 肖瑛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期373-382,共10页
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指肝中储存过多的脂肪,与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病(type-2 diabetes mellitus,T2DM)、血脂异常等代谢综合征密切相关。肝纤维化是NAFLD进一步发展为肝细胞癌(hepatoce... 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指肝中储存过多的脂肪,与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病(type-2 diabetes mellitus,T2DM)、血脂异常等代谢综合征密切相关。肝纤维化是NAFLD进一步发展为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的关键过程,减少肝内的脂肪积累,从而延缓或阻止NAFLD向纤维化的进展是治疗的关键。树豆酮酸A(cajanonic acid A,CAA)在2型糖尿病中能够有效改善胰岛素抵抗,发挥降糖减脂作用。本研究旨在探究CAA对NAFLD肝损伤的保护作用。通过采用db/db自发性NAFLD小鼠模型,将db/db小鼠分为NAFLD组和CAA给药组,CAA组予50 mg/(kg·d)灌胃给药,同期C57BL小鼠作为正常对照组(NC组),每组6只。小鼠生化指标检测和组织病理染色发现,CAA干预可有效缓解db/db小鼠的糖脂代谢紊乱、肝功能损伤(P<0.05)及肝脂肪变性和减少脂质沉积(P<0.05)。ELISA法结果显示,经过CAA治疗后肝组织上清液中白细胞介素1β(Interlecukin-1β,IL-1β)的水平显著降低(P<0.05),提示CAA具有明显抗炎作用,并且CAA干预显著减轻小鼠肝的纤维化程度,天狼星红染色发现,CAA组胶原沉积显著减少(P<0.05),进一步Western印迹结果表明,CAA组纤维化相关基因纤连蛋白(fibronectin,FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白质水平表达降低,E-钙黏着蛋白(E-cadherin,E-ca)的表达升高(P<0.05)。E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)被证实在肝中是葡萄糖和脂质代谢的主要因子,在肥胖小鼠中表达增加,并且可通过PPARγ的转录调节参与脂肪组织代谢,我们猜测,E2F1是CAA改善NAFLD肝脂质沉积和纤维化的中间作用靶标。通过免疫组织化学染色观察E2F1和其同家族拮抗转录因子E2F转录因子7(E2F transcription factor 7,E2F7)在小鼠经CAA处理后在肝组织核质中均表达,通过Western印迹法和实时荧光定量PCR进一步检测蛋白质和mRNA的表达发现,在CAA组中E2 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 e2f转录因子1 e2f转录因子7 树豆酮酸A 肝纤维化 上皮-间充质转化
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黄芩苷对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量:8
9
作者 尹青桥 夏瑗瑜 +5 位作者 陈杰 肖玲 王优 赵媛媛 叶刚 吴军 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第5期8-13,共6页
目的研究黄芩苷对核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)信号通路的影响,探讨黄芩苷对糖尿病肾病(DN)的治疗机制。方法30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白对照组(对照组)、DN模型组(DN组)和黄芩苷干预组(干预组),每组10只。通过腹... 目的研究黄芩苷对核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)信号通路的影响,探讨黄芩苷对糖尿病肾病(DN)的治疗机制。方法30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白对照组(对照组)、DN模型组(DN组)和黄芩苷干预组(干预组),每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素复制DN模型并给予黄芩苷药物干预。ELISA法检测小鼠尿白蛋白。对肾小管上皮细胞进行分组:①高糖组:细胞在含25 mmol/L葡萄糖的高糖培养基中培养。②激活组:细胞在高糖组处理的基础上,用Nrf2激活剂NK-252(20μmol/ml)预处理肾小管上皮细胞24 h。③黄芩苷组:细胞在高糖组处理的基础上,用黄芩苷(100μmol/L)预处理肾小管上皮细胞24 h。④干扰对照组:高糖培养基中培养的细胞在加入黄芩苷的同时,通过Lipofectamine 2000对肾小管上皮细胞转染si-control(si-Nrf2的阴性对照),24 h后收集细胞。⑤Nrf2干扰组:高糖培养基中培养的细胞在加入黄芩苷的同时,通过Lipofectamine 2000对肾小管上皮细胞转染si-Nrf2(Nrf2的小干扰RNA),24 h后收集细胞。Western blotting检测Nrf2的表达水平,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡状况。结果与DN组比较,干预组小鼠的尿白蛋白水平降低、Nrf2的表达水平升高、ARE的活性增强,差异均有统计学意义(P<0.05),且干预组小鼠的肾小管扩张变形程度减轻。细胞实验中发现,与高糖组比较,加入Nrf2激活剂或黄芩苷后,均能激活Nrf2,上调ARE活性,降低丙二醛(MDA)表达水平,并抑制肾小管上皮细胞凋亡(P<0.05)。同时,干扰Nrf2能逆转黄芩苷的作用,促进肾小管上皮细胞凋亡(P<0.05)。结论黄芩苷可能通过上调Nrf2-ARE信号通路抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,发挥治疗DN的作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 黄芩苷 转录因子e2 抗氧化反应元件
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miRNAs调控E2F5在癌症发生发展中的作用及其机制研究进展 被引量:2
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作者 李婷婷 朱心怡 +1 位作者 李思浓 邵阳光 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第2期367-373,共7页
E2F转录因子5(E2F transcription factor 5,E2F5)是腺病毒E2启动子结合因子(adenovirus E2 promoter binding factor,E2F)转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种重要细胞过程。由于E2F5在细胞周期调控中发挥重要作用,因此... E2F转录因子5(E2F transcription factor 5,E2F5)是腺病毒E2启动子结合因子(adenovirus E2 promoter binding factor,E2F)转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和凋亡等多种重要细胞过程。由于E2F5在细胞周期调控中发挥重要作用,因此它与多种癌症的发生,发展和预后密切相关。近来随着对微小RNA(microRNAs,miRNAs)研究的进展,发现多种miRNAs通过靶向E2F5来影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭和耐药。本文结合最新研究报道,对E2F5在癌症中的研究进展,特别是不同肿瘤中miRNAs与E2F5之间的关系作一综述,为制定癌症的治疗策略提供新的思路。 展开更多
关键词 e2f5 e2f转录因子 MIRNAS 癌症
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巨噬细胞在创面愈合中的调节作用及其相关机制 被引量:3
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作者 贺伟峰 闫凌峰 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期106-113,共8页
创面愈合是一个被精准调控的复杂过程,包含了炎症、抗炎、再生等多个阶段。由于巨噬细胞具有明显的可塑性,可以在具有差异化的创面愈合过程中发挥重要的调节作用。巨噬细胞若未能适时表达特定功能,将会影响组织的愈合功能并导致组织病... 创面愈合是一个被精准调控的复杂过程,包含了炎症、抗炎、再生等多个阶段。由于巨噬细胞具有明显的可塑性,可以在具有差异化的创面愈合过程中发挥重要的调节作用。巨噬细胞若未能适时表达特定功能,将会影响组织的愈合功能并导致组织病理性愈合。因此,了解巨噬细胞在创面愈合的不同阶段发挥的不同功能并进行针对性调控,对促进创伤组织的愈合再生有重要意义。该文根据创面愈合的基本过程,阐述了创面内不同类型巨噬细胞发挥的不同功能及其基本机制,并强调了未来可能应用于临床治疗的巨噬细胞调控策略。 展开更多
关键词 伤口愈合 e2f1转录因子 M1型巨噬细胞 M2型巨噬细胞
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去甲基化酶JMJD6影响BRAF突变型黑色素瘤耐药性形成的机制研究
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作者 唐永吉 朱智鑫 +2 位作者 尚艳 樊丹 赵海龙 《遵义医科大学学报》 2024年第8期749-758,共10页
目的探究去甲基化酶JMJD6影响BRAF突变型黑色素瘤耐药性形成的可能机制。方法利用荷瘤小鼠腹腔给药的方式建立针对BRAF抑制剂(达拉非尼)和MEK抑制剂(曲美替尼)具有稳定耐药表型的BRAF突变型黑色素瘤体内模型,使用TCGA、Oncomine、OSskc... 目的探究去甲基化酶JMJD6影响BRAF突变型黑色素瘤耐药性形成的可能机制。方法利用荷瘤小鼠腹腔给药的方式建立针对BRAF抑制剂(达拉非尼)和MEK抑制剂(曲美替尼)具有稳定耐药表型的BRAF突变型黑色素瘤体内模型,使用TCGA、Oncomine、OSskcm等数据库分析、Western blot和免疫组化研究JMJD6在黑色素瘤中的表达情况及预后价值,同时在下调其表达水平后通过TUNEL凋亡试剂盒与体内成瘤实验检测耐药表型在体内外的逆转情况,最后通过生物信息学分析、shRNA干扰、Western blot和免疫荧光实验验证转录因子E2F2是否为JMJD6潜在靶点。结果在依次建立3代耐药体内模型后,成功获得具有稳定耐药表型的BRAF突变型黑色素瘤体内模型A375-R和SK-Mel-28-R,TCGA、Oncomine、OSskcm等数据库均显示JMJD6在黑色素瘤中的表达较正常健康者明显升高且具有更差的预后(P<0.05)。Western blot和免疫组化结果显示,JMJD6在耐药型BRAF突变型黑色素瘤中出现高表达;利用shRNA下调JMJD6表达水平后,A375-R和SK-Mel-28-R在药物压力下凋亡水平和成瘤能力显著降低(P<0.05),呈现体内外耐药表型逆转现象;通过GeneMANIA、GEPIA数据库分析发现JMJD6与E2F2存在表达相关性(P<0.05),同时Western blot和免疫荧光验证下调JMJD6可以抑制E2F2表达以及RNA聚合酶Ⅱ的结合,并在shRNA下调E2F2表达水平的基础上验证其位于JMJD6分子机制下游。结论JMJD6通过调控E2F2表达进而影响BRAF突变型黑色素瘤对BRAF和MEK抑制剂耐药性的形成。 展开更多
关键词 BRAf突变型黑色素瘤 耐药性 Jumonji结构域蛋白6 e2f家族转录因子2
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MRI预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的价值
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作者 张铭 张莉华 +2 位作者 喻晓庆 钱金锋 盛美红 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期510-516,共7页
目的探讨MRI诊断乳腺癌转录因子E2F2高表达的价值,以及进一步评估乳腺癌的生物侵袭性。方法该研究为横断面研究。回顾性分析2014年10月至2020年12月在南通大学第二附属医院病理诊断为乳腺癌的92例患者的临床及影像资料。患者均为女性,年... 目的探讨MRI诊断乳腺癌转录因子E2F2高表达的价值,以及进一步评估乳腺癌的生物侵袭性。方法该研究为横断面研究。回顾性分析2014年10月至2020年12月在南通大学第二附属医院病理诊断为乳腺癌的92例患者的临床及影像资料。患者均为女性,年龄32~82(56±11)岁,均接受MRI,包括T 1WI、T 2WI、扩散加权成像(DWI)和动态增强MRI。根据免疫组化结果将患者分为转录因子E2F2高表达组和E2F2低表达组。采用独立样本t检验、Mann-Whitney U检验或χ2检验比较2组患者的临床资料、MRI特征及病理学特征。将单因素分析中P≤0.1的特征纳入多因素logistic回归筛选预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的独立危险因素。结果92例患者中E2F2高表达组68例、E2F2低表达组24例。2组在瘤周水肿、时间-信号强度曲线类型构成比、雌激素受体表达、人表皮生长因子受体2表达、脉管内癌栓及分子分型构成比方面差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素logistic回归分析显示仅瘤周水肿(OR=7.061,95%CI 1.837~27.144,P=0.004)是预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的独立危险因素。结论MRI上显示瘤周水肿是预测乳腺癌转录因子E2F2高表达的独立危险因素,其与乳腺癌的侵袭性有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 磁共振成像 e2f2转录因子 侵袭性 瘤周水肿
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HPV感染的宫颈病变对血清锌、IL-2、IL-10及组织E2F1表达的影响 被引量:7
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作者 辛乐 米淑玲 +3 位作者 尹利荣 马洪达 孙俊杰 王宇全 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第1期7-9,98,共4页
目的:研究高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染的宫颈病变患者血清锌、白细胞介素(IL)-2、IL-10的含量和组织中E2F1的表达及其临床意义。方法:选取宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ级组、CINⅡ级组各30例,CINⅢ级及宫颈癌组各20例,均为高危型HPV感... 目的:研究高危型人乳头状瘤病毒(HPV)感染的宫颈病变患者血清锌、白细胞介素(IL)-2、IL-10的含量和组织中E2F1的表达及其临床意义。方法:选取宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ级组、CINⅡ级组各30例,CINⅢ级及宫颈癌组各20例,均为高危型HPV感染。慢性宫颈炎患者30例(对照组),HPV阴性。分别用原子吸收光谱法测定血清锌,酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-2及IL-10水平,免疫组化法测定宫颈组织中E2F1表达。结果(:1)血清锌、IL-2的含量在CINⅡ级组、CINⅢ级组、宫颈癌组中逐级降低,3组间比较差异均有统计学意义,且3组分别与CINⅠ级、对照组比较差异亦均有统计学意义(均P<0.01)。宫颈癌组血清IL-10高于CIN各组,CINⅢ级组高于Ⅱ级组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。组织中E2F1的表达在宫颈癌组、CIN组及对照组间比较差异有统计学意义(P<0.005),CIN各组内相比差异无统计学意义(P>0.005)。(2)血清IL-2与锌水平呈正相关(P<0.05)。血清IL-2与IL-10水平、组织E2F1表达均呈负相关(P<0.05)。结论:高级别宫颈病变及宫颈癌患者中存在Th1/Th2的漂移,可能影响了机体对HPV的清除。机体缺锌可能参与了这种变化。 展开更多
关键词 白细胞介素2 白细胞介素10 e2f1转录因子 乳头状瘤病毒科 宫颈上皮内瘤样病变 宫颈肿瘤
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口腔鳞状细胞癌E2F转录因子1的表达与临床的意义
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作者 王锦航 崔子峰 +2 位作者 杨凯成 陈彦平 彭士雄 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2024年第2期100-107,共8页
目的:探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达和临床意义,并阐明其在细胞凋亡和周期中的作用。方法:基于R语言和癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA... 目的:探讨E2F转录因子1(E2F transcription factor 1,E2F1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达和临床意义,并阐明其在细胞凋亡和周期中的作用。方法:基于R语言和癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析OSCC中E2F1的表达和临床病理的相关性,通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)发现E2F1参与的主要生物学过程。蛋白质印迹法(Western blotting)和实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测E2F1在OSCC患者组织中的表达。通过细胞转染升高和敲低SCC15细胞系中E2F1的表达后,利用流式细胞术检测E2F1表达的改变对SCC15细胞凋亡和周期的影响。结果:E2F1在OSCC相关TCGA数据集中呈高表达,与T分期(T2或T4 vs T1)、组织学分级(G2或G3 vs G1)、临床分期(Ⅲ期vsⅠ期)、年龄(中年人vs青年人)和性别(男vs女)相关(P<0.05),多富集于细胞周期或核苷酸切除修复等基因组[P<0.05,错误发现率(false discovery rate,FDR)<0.25]。在37例OSCC患者组织中,E2F1的mRNA和蛋白均表达上调(P<0.001),表达上调的E2F1可降低SCC15细胞的凋亡率(P<0.05),以及在细胞周期中降低G1期的比率(P<0.01),并升高S期的比率(P<0.001)。结论:E2F1在OSCC中呈高表达,且可抑制细胞凋亡并促进细胞周期中G1/S期的转换。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 e2f转录因子1 生物信息学分析 细胞凋亡 细胞周期
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基于miR-320/E2F转录因子1轴探讨天南星提取物对肺癌细胞顺铂耐药的影响及相关机制 被引量:5
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作者 刘雪娇 张雪云 张勇 《实用心脑肺血管病杂志》 2022年第8期19-23,共5页
目的基于miR-320/E2F转录因子1(E2F1)轴探讨天南星提取物对肺癌细胞顺铂耐药的影响及相关机制。方法本实验时间为2020年9月至2021年6月。取对数期A549/DDP细胞分为空白组和天南星组,空白组置于RPMI 1640培养基中常规培养,天南星组置于... 目的基于miR-320/E2F转录因子1(E2F1)轴探讨天南星提取物对肺癌细胞顺铂耐药的影响及相关机制。方法本实验时间为2020年9月至2021年6月。取对数期A549/DDP细胞分为空白组和天南星组,空白组置于RPMI 1640培养基中常规培养,天南星组置于加入天南星提取物的RPMI 1640培养基中常规培养。另取对数期A549/DDP细胞,转染miR-320抑制质粒后随机分为转染组、转染联合天南星组,转染组置于RPMI 1640培养基中常规培养,转染联合天南星组置于加入天南星提取物的RPMI 1640培养基中常规培养。培养48 h后进行后续实验。采用qRT-PCR检测不同细胞系及四组miR-320相对表达量,采用MTT法检测四组不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度(IC_(50));采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用双荧光素酶实验验证miR-320与E2F1的靶向关系,采用Western blotting法检测E2F1蛋白相对表达量。结果16HBE细胞系miR-320相对表达量高于A549/DDP细胞系(P<0.001)。与空白组比较,天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高,IC_(50)、E2F1蛋白相对表达量降低,转染组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低,IC_(50)、E2F1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与天南星组比较,转染联合天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低,IC_(50)、E2F1蛋白相对表达量升高(P<0.05);与转染组比较,转染联合天南星组miR-320相对表达量、不同浓度顺铂处理后细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高,IC_(50)、E2F1蛋白相对表达量降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,E2F1是miR-320的一个靶基因,两者结合位点是E2F1的3'-UTR片段。结论天南星提取物可逆转肺癌细胞顺铂耐药,促进肺癌细胞凋亡,其机制可能与调控miR-320,进而靶向下调E2F1表达有关。 展开更多
关键词 肺癌 顺铂 天南星提取物 微小RNA-320 e2f转录因子1 药理作用分子作用机制(中药)
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E2F3在浸润性膀胱癌中的表达关系以及对患者生存的影响 被引量:6
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作者 焦勇 张波 +5 位作者 李瑞晓 王采 赵致广 窦小亮 贾洪涛 Kamal Pohar 《中国医师杂志》 CAS 2016年第1期29-32,共4页
目的 探讨转录因子家族(E2F)3以及Retinoblastoma(RB)在膀胱癌组织中的表达情况,并明确RB通路失活与E2F3高表达在膀胱癌组织中的关系及对膀胱癌患者预后的影响.方法 通过免疫组织化学法验证E2F3和RB在112例膀胱癌组织中的表达,分析... 目的 探讨转录因子家族(E2F)3以及Retinoblastoma(RB)在膀胱癌组织中的表达情况,并明确RB通路失活与E2F3高表达在膀胱癌组织中的关系及对膀胱癌患者预后的影响.方法 通过免疫组织化学法验证E2F3和RB在112例膀胱癌组织中的表达,分析其表达水平与患者的临床分期、病理分级之间的关系.结果 在112例不同分期的膀胱癌组织样本中,有83例膀胱癌样本表现为RB的失活,这种表达差异具有统计学意义(P<0.01),E2F3高表达只出现在浸润性膀胱癌中(x2 =8.67,P<0.01),并且与RB失活关系密切(r=0.031,P=0.014).生存曲线显示,E2F3过表达对膀胱癌患者预后有着一定的影响(P<0.05).结论 E2F3在浸润性膀胱癌中高表达,并且与RB失活存在着密切的关系,同时E2F3高表达的膀胱肿瘤患者预后更差. 展开更多
关键词 e2f3转录因子/代谢 膀胱肿瘤/代谢 预后
原文传递
全反式维甲酸对兔颈动脉粥样硬化病灶VSMC增殖及E2F1表达的影响 被引量:4
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作者 张青青 董果雄 +1 位作者 张社华 朱秀兰 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2009年第5期282-286,共5页
目的探讨全反式维甲酸(atRA)对兔颈动脉内膜损伤后内膜增生、E2F1表达的影响和机制。方法新西兰雄性大白兔随机分为9组(n=6):假手术组(A、B、C),对照组(A、B、C)及atRA治疗组(A、B、C)。各组均高脂饮食两周后,对照组作颈动脉内膜损伤模... 目的探讨全反式维甲酸(atRA)对兔颈动脉内膜损伤后内膜增生、E2F1表达的影响和机制。方法新西兰雄性大白兔随机分为9组(n=6):假手术组(A、B、C),对照组(A、B、C)及atRA治疗组(A、B、C)。各组均高脂饮食两周后,对照组作颈动脉内膜损伤模型。atRA治疗组于术前3d开始每天给予atRA灌胃,其余操作同对照组。假手术组手术但不损伤内膜。术后分别于7d、14d、28 d处死A、B、C组动物。采取颈动脉标本,对血管粥样硬化病变进行大体形态学观察,用免疫组化法检测粥样硬化病灶中E2F1、PCNA的表达水平。结果对照组术后7 d内膜开始增生,14d及28 d时增生明显,粥样斑块形成,管腔狭窄,E2F1、PCNA阳性表达明显。治疗组内膜增生较轻,14d、28 d时,内膜面积及斑块厚度低于对照组(分别为P<0.01、P<0.05,P<0.01、P<0.01),E2F1、PCNA阳性表达指数低于对照组(分别为P<0.01、P<0.01,P<0.01、P<0.05)。结论atRA抑制兔颈动脉内皮损伤后E2F1 PCNA的表达,抑制VSMC增殖,减轻新生内膜及动脉粥样硬化病变进程。 展开更多
关键词 维甲酸 平滑 血管 冠状动脉硬化 冠状动脉再狭窄 转录因子 e2f1
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食管癌来源外泌体通过E2F4对CD4+T细胞向Th17细胞分化的影响 被引量:1
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作者 樊慧 陈林林 +6 位作者 郭军辉 李治国 王娅菲 柳淼 王花花 赵乃阔 胡庆军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期86-93,共8页
目的:研究食管癌来源外泌体对CD4+T细胞向Th17细胞分化的可能作用机制。方法:分离人正常食管上皮细胞HEEC和人食管癌细胞Eca-109来源外泌体(即HEEC-Exo、Eca-109-Exo),同时构建稳定表达的sh-NC和sh-E2F4的Eca-109细胞株并分离其外泌体(... 目的:研究食管癌来源外泌体对CD4+T细胞向Th17细胞分化的可能作用机制。方法:分离人正常食管上皮细胞HEEC和人食管癌细胞Eca-109来源外泌体(即HEEC-Exo、Eca-109-Exo),同时构建稳定表达的sh-NC和sh-E2F4的Eca-109细胞株并分离其外泌体(即sh-NC-Exo、sh-E2F4-Exo)。应用所得的外泌体处理CD4+T细胞;此外,应用稳定表达sh-NC和sh-E2F4的Eca-109细胞株建立食管癌异种移植小鼠模型。流式细胞术检测CD4+T细胞中Th17细胞比例;qRT-PCR检测E2F转录因子4(E2F4)mRNA表达;Western blot检测E2F4、维甲酸相关核孤儿受体γt(ROR-γt)和IL-17蛋白表达;ELISA试剂盒检测IL-17的含量。结果:与PBS组相比,HEEC-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白的表达、IL-17含量以及E2F4mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与HEEC-Exo组相比,Eca-109-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白表达、IL-17含量以及E2F4 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。与Eca-109-Exo组相比,sh-NC-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白表达、IL-17含量以及E2F4 mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与sh-NC-Exo组相比,shE2F4-Exo组CD4+T细胞中Th17细胞比例、ROR-γt蛋白表达、IL-17含量以及E2F4 mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与Eca-109组相比,sh-NC组小鼠肿瘤大小和E2F4、ROR-γt、IL-17蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与sh-NC组相比,sh-E2F4组小鼠肿瘤大小和E2F4、ROR-γt、IL-17蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:食管癌来源外泌体可能通过E2F4促进CD4+T细胞向Th17细胞分化,从而促进肿瘤生长。 展开更多
关键词 食管癌 外泌体 e2f转录因子4 CD4+T细胞 TH17细胞
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基于生信数据库探究E2F3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义
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作者 张晶 孔丽丽 《中国实验诊断学》 2023年第7期861-866,共6页
目的探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点... 目的探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点。应用RT-qPCR和Western blot检测EOC及对照组中转录因子E2F3及其靶基因的mRNA及蛋白表达水平。结果TCGA数据信息结合GEO测序结果提示,与对照组相比在EOC中E2F1、E2F3呈现显著高表达(P<0.05),且均具有良好的诊断价值(AUC=0.964、AUC=0.967),E2F3高表达组中患者预后较差。联合JASPAR及Cistrome DB数据库预测E2F3转录调控靶基因ERCC1,且二者呈负相关(R=-0.243、P<0.001)。与对照组相比,EOC中E2F3与ERCC1的mRNA及蛋白表达水平均显著增高(P<0.05)。结论转录因子E2F3可靶向调控ERCC1,在EOC中呈现高表达,且与预后不良相关,可作为EOC早期诊断和治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 转录因子 上皮性卵巢癌 TCGA GeO e2f3 eRCC1
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