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miR-101通过抑制DNA甲基转移酶3a抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移 被引量:14
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作者 刘健 庞亚梅 +5 位作者 王黄震 李艳波 孙欣 徐菲 任宏 刘大鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期299-303,共5页
目的研究miR-101对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。方法采用实时荧光定量PCR检测miR-101和DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在乳腺癌组织和相对应的正常乳腺组织,正常乳腺细胞以及多种乳腺... 目的研究miR-101对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响,并分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。方法采用实时荧光定量PCR检测miR-101和DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在乳腺癌组织和相对应的正常乳腺组织,正常乳腺细胞以及多种乳腺癌细胞系中的表达水平,应用慢病毒介导感染的方法分别将miR-101序列及shRNA-DNMT3a转至MDAMB-231人乳腺癌细胞,通过Western blot法检测DNMT3a以及上皮钙黏素(E-cadherin)的表达,分析miR-101影响乳腺癌细胞生物学行为的可能机制。通过MTT法检测乳腺癌细胞的增殖能力,划痕实验检测乳腺癌细胞的迁移能力。结果miR-101在MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-361、HCC70乳腺癌细胞系及乳腺癌组织中表达低于正常乳腺组织及MCF-10A乳腺细胞系,而DNMT3a表达则升高。Western blot实验结果显示过表达miR-101的MDA-MB-231细胞中,DNMT3a的表达明显下降,而E-cadherin的表达升高;应用shRNA-DNMT3a抑制DNMT3a表达后,E-cadherin的表达也明显升高,证实miR-101可能通过抑制DNMT3a而发挥作用。体外实验显示过表达miR-101可明显抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖和迁移能力。结论miR-101抑制乳腺癌细胞增殖和迁移能力可能是通过抑制DNMT3a进而恢复E-cadherin表达来实现。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-101 dnmt3a 上皮钙黏素 增殖 迁移
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人工注射Dnmt3 siRNA对意大利蜜蜂雌蜂发育的影响 被引量:14
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作者 石元元 曾志将 +2 位作者 吴小波 颜伟玉 王子龙 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期272-278,共7页
为了研究人工注射DNA甲基化转移酶3(DNA methyltransferase3,Dnmt3)siRNA对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica雌蜂的Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量、dynactin p62基因甲基化水平以及蜜蜂形态指标之间的影响和关系,分别给3组3日龄的... 为了研究人工注射DNA甲基化转移酶3(DNA methyltransferase3,Dnmt3)siRNA对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica雌蜂的Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量、dynactin p62基因甲基化水平以及蜜蜂形态指标之间的影响和关系,分别给3组3日龄的意大利蜜蜂幼虫人工注射50ng Ringer,uth siRNA和Dnmt3 siRNA溶液。在幼虫的发育过程中,测定每组幼虫头部的Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量、dynactin p62基因甲基化水平以及刚羽化雌性蜜蜂的初生重、体长、前翅长、前翅宽、吻长、第3背板长等形态指标。结果表明:人工注射Dnmt3 siRNA不仅可以显著降低意大利蜜蜂幼虫头部Dnmt3酶活性、Dnmt3 mRNA表达量和dynactin p62基因整体甲基化水平,同时显著提高了刚羽化雌性蜜蜂的初生重、体长、第3背板长。结果说明Dnmt3的改变可以影响雌性意蜂幼虫的发育。 展开更多
关键词 意大利蜜蜂 蜂王 工蜂 SIRNA dnmt3 dynactin P62
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散发性乳腺癌中DNMT3a、DNMT3b表达与ERα基因启动子甲基化状态及蛋白表达的关系 被引量:10
3
作者 王勇 王晓东 +4 位作者 陈文捷 于兆进 吴慧哲 赵琳 魏敏杰 《天津医药》 CAS 2015年第5期500-504,共5页
目的探讨散发性乳腺癌中DNA甲基转移酶(DNMT)3a、DNMT3b蛋白表达情况及其与雌激素受体(ER)α基因启动子甲基化状态及蛋白表达的关系。方法选取180例散发性乳腺癌与30例乳腺纤维腺瘤组织,采用免疫组化法检测组织中DNMT3a、DNMT3b蛋... 目的探讨散发性乳腺癌中DNA甲基转移酶(DNMT)3a、DNMT3b蛋白表达情况及其与雌激素受体(ER)α基因启动子甲基化状态及蛋白表达的关系。方法选取180例散发性乳腺癌与30例乳腺纤维腺瘤组织,采用免疫组化法检测组织中DNMT3a、DNMT3b蛋白的表达情况,甲基化特异性PCR检测97例散发性乳腺癌中ERα基因启动子的甲基化状态。结果乳腺纤维腺瘤与乳腺癌组织中的DNMT3a、DNMT3b蛋白阳性表达率差异无统计学意义;Ⅲ-Ⅳ期乳腺癌组织的DNMT3a、DNMT3b水平高于Ⅰ-Ⅱ期,有淋巴结转移者的DNMT3a表达水平高于无淋巴结转移者(均P〈0.05);97例乳腺癌中有39例(40.2%)发生ERα基因启动子甲基化,DNMT3a蛋白阳性表达与ERα基因甲基化呈正相关(rs=0.250);DNMT3a蛋白表达对患者的总体生存期(OS)有显著影响(P=0.035),对无病生存期(DFS)无明显影响(P=0.064),DNMT3b蛋白表达对患者的OS和DFS无影响(P分别为0.914、0.961)。结论DNMT3a、DNMT3b阳性表达与乳腺癌侵袭转移、病程进展、预后相关;DNMT3a与ERα基因启动子甲基化状态呈正相关;抑制DNMT3a、DNMT3b蛋白可能有利于散发性乳腺癌的预防和治疗。 展开更多
关键词 散发性乳腺癌 dnmt3a dnmt3B ERΑ DNA甲基化 启动区(遗传学)
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Survivin、Dnmt和CD44在胃溃疡及胃癌中表达的差异 被引量:10
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作者 宋述安 王宁 +4 位作者 赵志威 侯国伟 张哲男 姜涛 朴大勋 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第10期1954-1956,1962,共4页
胃溃疡(Gastric Ulcer GU)和胃癌(Gastrio Cancer Gc)均是我国乃至全世界人群中的常见病、多发病。近年来,虽然胃溃疡的发病率开始呈下降趋势,但仍属消化系统疾病中最常见的疾病之一,目前已被认为是癌前病变之一。据统计,5%左右的胃溃... 胃溃疡(Gastric Ulcer GU)和胃癌(Gastrio Cancer Gc)均是我国乃至全世界人群中的常见病、多发病。近年来,虽然胃溃疡的发病率开始呈下降趋势,但仍属消化系统疾病中最常见的疾病之一,目前已被认为是癌前病变之一。据统计,5%左右的胃溃疡可发生癌变,甚至有统计最高达29.4%的胃癌来自胃溃疡[1]。在世界范围内恶性肿瘤中,胃癌位居第4,病死率位居第2,在我国则居第1位。胃癌发生的分子机制研究表明多基因变异是细胞发生癌变的内因[2]。各种癌基因、抑癌基因和错配修复基因、细胞信号传导通路的异常、细胞周期调控改变及相关产物均对胃癌的发生发展产生影响。如Survivin、DNA甲基化和CD44等均是近年来在胃癌组织中发现的并成为研究热点的基因。通过对Survivin、Dnmt和CD44三种基因在胃溃疡及胃癌中表达的差异的了解,有助于加深对胃癌发生、发展及转移机制的认识,更好的为临床应用中胃溃疡及胃癌的治疗提供理论依据和找到更好的治疗方法。 展开更多
关键词 胃溃疡 胃癌 SURVIVIN dnmt3 CD44
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hSOD1-G93A突变的肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脊髓中5-mC水平以及DNMT1、DNMT3A和DNMT3B表达的变化
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作者 鲍炜炜 管英俊 +5 位作者 陈晓素 吕舒畅 陈燕春 张皓云 刘金梦 闫秋鹏 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2024年第2期111-117,共7页
目的探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)水平以及DNA甲基转移酶1、3A和3B(DNMT1、DNMT3A和DNMT3B)蛋白表达变化与肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)之间的关系。方法选用发病前期(70 d)、发病早期(95 d)、发病中期(108 d)和发... 目的探讨5-甲基胞嘧啶(5-mC)水平以及DNA甲基转移酶1、3A和3B(DNMT1、DNMT3A和DNMT3B)蛋白表达变化与肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)之间的关系。方法选用发病前期(70 d)、发病早期(95 d)、发病中期(108 d)和发病晚期(122 d)的hSOD1-G93A突变的ALS转基因小鼠,以同窝野生型(wild type,WT)小鼠作为对照,应用ELISA和Dot blot技术检测ALS小鼠脊髓中5-mC水平的变化规律,采用Western blot和免疫荧光双标染色技术检测ALS小鼠不同时期的脊髓中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B的蛋白水平变化以及定位。结果ELISA和Dot blot结果显示,与WT小鼠相比,ALS转基因小鼠脊髓中5-mC水平升高;Western blot分析显示,与WT小鼠相比,ALS转基因小鼠脊髓中DNMT1蛋白水平在70 d无显著性变化,在95 d、108 d和122 d显著升高;DNMT3A蛋白水平在70 d、95 d和108 d升高,在122 d无显著性变化;DNMT3B蛋白水平在70 d无显著性变化,在95 d、108 d和122 d显著升高。结论ALS转基因小鼠脊髓中5-mC水平及关键DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B的蛋白水平异常升高与ALS发病密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 5-mC dnmt1 dnmt3A dnmt3B
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骨髓增生异常综合征向急性髓系白血病转化相关基因的研究进展 被引量:9
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作者 朱晨 马燕 许小平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期873-878,共6页
骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干细胞的高度异质性、高风险向急性髓系白血病转化的恶性克隆性疾病。随着分子生物学技术的不断发展,发现了多种基因与MDS向急性髓系白血病转化(转白)密切相关。SRSF2是与RNA剪接相关的基因,该... 骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干细胞的高度异质性、高风险向急性髓系白血病转化的恶性克隆性疾病。随着分子生物学技术的不断发展,发现了多种基因与MDS向急性髓系白血病转化(转白)密切相关。SRSF2是与RNA剪接相关的基因,该基因突变提示患者可能预后不良,并较未突变者有更高向AML转化的几率;与DNA甲基化密切相关的DNMT3A,其突变多预示较差的总生存率,并可能更快地向AML转化;调节组蛋白合成的ASXL1,其框移突变是预后不良的分子标志,并且较无突变者有更快向AML转化的现象;与三羧酸循环密切相关的IDH又可分为IDH1与IDH2,前者多提示较短的生存时间以及较高的转白率,而有部分报道发现后者在低危组患者中提示不良的预后;另一与DNA甲基化状态密切相关的基因TET2,是目前MDS中最常见的基因突变,有学者认为它可能是一种抑癌基因,但目前其对MDS患者预后影响的观点尚未统一,有报道提示其突变与MDS较快向AML转化有明显关联。因为研究对象人种、地域、临床特点等众多因素的不同,各家报道结果仍存在差异。本文就这五个基因进行综述。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征(MDS) 急性髓系白血病(AML) SRSF2 dnmt3A ASXL1 IDH TET2
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新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清DNMT1、DNMT3a和BDNF检测对预后评估的临床价值
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作者 颜海峰 霍开明 +1 位作者 吴小红 周家仍 《四川医学》 CAS 2024年第8期886-890,共5页
目的探讨血清DNA甲基化转移酶(DNMT)1、DNMT3a和脑源性神经营养因子(BDNF)检测在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿预后评估中的价值。方法选取2016年1月至2023年1月在我院诊治的84例新生儿HIE患儿为观察组,并选取同期84例于我院出生的健... 目的探讨血清DNA甲基化转移酶(DNMT)1、DNMT3a和脑源性神经营养因子(BDNF)检测在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿预后评估中的价值。方法选取2016年1月至2023年1月在我院诊治的84例新生儿HIE患儿为观察组,并选取同期84例于我院出生的健康新生儿为对照组。根据患儿病情程度分为轻度组36例、中度组28例、重度组20例。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清DNMT1、DNMT3a和BDNF水平;多因素Logistic回归分析新生儿HIE患儿预后的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清DNMT1、DNMT3a和BDNF水平对新生儿HIE患儿预后的预测价值。结果与对照组相比,轻度、中度、重度组新生儿HIE患儿血清DNMT1、DNMT3a水平依次升高(P<0.05),BDNF水平依次降低(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组新生儿HIE患儿血清DNMT1、DNMT3a水平升高(P<0.05),BDNF水平降低(P<0.05);多因素Logistic回归分析发现,病情程度、DNMT1、DNMT3a是影响新生儿HIE患儿预后的危险因素(P<0.05),新生儿Apgar评分、BDNF是影响患儿预后的保护因素(P<0.05);血清DNMT1、DNMT3a、BDNF联合检测预测新生儿HIE患儿预后的ROC曲线下面积(AUC)为0.955,均优于其各自单独预测(Z_(联合检测-DNMT1)=2.046,P=0.020;Z_(联合检测-DNMT3a)=3.046,P=0.001;Z_(联合检测-BDNF)=2.073,P=0.019)。结论新生儿HIE患儿血清DNMT1、DNMT3a水平升高,BDNF水平降低,在新生儿HIE患儿预后评估中具有一定价值。 展开更多
关键词 新生儿缺氧缺血性脑病 dnmt1 dnmt3a BDNF 预后
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血管免疫母T细胞淋巴瘤发病机制及治疗进展 被引量:8
8
作者 肖音 张利玲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期633-637,共5页
血管免疫母T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)是外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,PTCL)中较为常见的类型,其恶性细胞起源为滤泡辅助T细胞(follicular T helper cell,TFH)。近年来研究发现有较多基因突... 血管免疫母T细胞淋巴瘤(angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL)是外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,PTCL)中较为常见的类型,其恶性细胞起源为滤泡辅助T细胞(follicular T helper cell,TFH)。近年来研究发现有较多基因突变与之发病相关,如TET2、DNMT3A、IDH2和RHOA等。治疗上以蒽环类化疗药物为基础的一线治疗效果欠佳,目前更多的研究关注于化疗与新药联合是否有助于提升疗效。随着对发病机制的深入研究,越来越多的靶点将成为潜在治疗药物的基础。 展开更多
关键词 血管免疫母T细胞淋巴瘤 滤泡辅助T细胞 TET2 dnmt3A IDH2 RHOA
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敲低环状RNA WD重复含蛋白1抑制膝骨关节炎软骨细胞增殖并诱导凋亡 被引量:1
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作者 申飞燕 姚吉祥 +2 位作者 苏珊珊 赵忠民 唐巍东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第4期499-504,共6页
背景:环状RNA(circular RNA,circRNA)在多种疾病或肿瘤中发挥着重要作用,近年研究结果发现,膝骨关节炎中circRNA失常表达,并可通过调控微小RNA(miRNA)/mRNA参与疾病进展。目的:探究circ-BRWD1/miR-488-3p/DNMT3A对膝骨关节炎软骨细胞增... 背景:环状RNA(circular RNA,circRNA)在多种疾病或肿瘤中发挥着重要作用,近年研究结果发现,膝骨关节炎中circRNA失常表达,并可通过调控微小RNA(miRNA)/mRNA参与疾病进展。目的:探究circ-BRWD1/miR-488-3p/DNMT3A对膝骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR检测膝骨关节炎软骨细胞miR-488-3p、circ-BRWD1、DNMT3A表达。将细胞分为si-NC组、si-circ-BRWD1组、si-circ-BRWD1+anti-miR-NC组、si-circ-BRWD1+anti-miR-488-3p组、vector组、circ-BRWD1组、miR-NC组、miR-488-3p组、miR-488-3p+vector组、miR-488-3p+DNMT3A组、anti-miR-NC组、anti-miR-488-3p组;实时荧光定量PCR检测circ-BRWD1、miR-488-3p、DNMT3A表达,MTT、流式细胞术检测增殖和凋亡,Western blot检测DNMT3A、增殖、凋亡相关蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ-BRWD1与miR-488-3p、miR-488-3p与DNMT3A的靶向关系。结果与结论:①与正常软骨细胞相比,circ-BRWD1、DNMT3A在膝骨关节炎软骨细胞中高表达,miR-488-3p低表达;②敲低circ-BRWD1或过表达miR-488-3p可抑制膝骨关节炎软骨细胞增殖并诱导凋亡;③circ-BRWD1靶向负调控miR-488-3p,抑制miR-488-3p可逆转敲低circ-BRWD1对膝骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响;④miR-488-3p靶向负调控DNMT3A,上调DNMT3A可逆转过表达miR-488-3p对膝骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响;⑤circ-BRWD1可通过调控miR-488-3p进而调控DNMT3A的表达;⑥结果表明,敲低circ-BRWD1可抑制膝骨关节炎软骨细胞增殖并诱导凋亡,其作用机制可能与调控miR-488-3p/DNMT3A轴有关。 展开更多
关键词 circ-BRWD1 miR-488-3p dnmt3A 膝骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡
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microRNA-200b下调DNMT3A的表达对SD大鼠心肌纤维化抑制作用的机制研究 被引量:7
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作者 秦润禾 陶辉 +4 位作者 倪世豪 代晨 丁季飞 施鹏 石开虎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1465-1470,共6页
目的研究微小RNA200b(miR-200b)靶向下调DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对SD大鼠心肌纤维化的影响。方法 SD大鼠构建心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变;qRT-PCR检测miR-200b的表达;Western blot法测定α-SMA、Col1A1、DNMT3A的表... 目的研究微小RNA200b(miR-200b)靶向下调DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对SD大鼠心肌纤维化的影响。方法 SD大鼠构建心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变;qRT-PCR检测miR-200b的表达;Western blot法测定α-SMA、Col1A1、DNMT3A的表达。提取SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),将miR-200b促进剂和抑制剂分别转染于CFs中,同时设立空白及阴性对照组。qRT-PCR检测miR-200b、DNMT3A、Col1A1和α-SMA水平;Western blot测定DNMT3A、Col1A1和α-SMA的蛋白表达;MTT法观察CFs的增殖情况。结果 HE和Masson染色结果显示,模型组SD大鼠心肌组织胶原纤维明显增多,心肌细胞排列杂乱;qRT-PCR显示miR-200b表达降低;Western blot显示,α-SMA、Col1A1、DNMT3A蛋白水平升高。体外实验qRT-PCR结果显示,α-SMA、Col1A1、DNMT3A在miR-200b促进剂组中的表达降低,miR-200b抑制剂组则相反;Western blot显示,miR-200b促进剂组中DNMT3A、Col1A1和α-SMA的表达降低,miR-200b抑制剂组结果则相反;MTT结果显示,外源性过表达miR-200b 24、48、72、96 h后,CFs增殖水平降低,而miR-200b抑制剂组结果相反。结论 miR-200b可能通过下调DNMT3A来影响CFs的活化增殖,从而改善心肌纤维化。 展开更多
关键词 miR-200b Α-SMA COL1A1 dnmt3A 心肌纤维化 心肌成纤维细胞
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miR-29b对肝癌细胞中甲基化转移酶表达的调控作用 被引量:4
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作者 吕赛群 金华君 钱其军 《浙江理工大学学报(自然科学版)》 2011年第1期101-105,共5页
DNA甲基化异常在肿瘤发生中起着极为重要的作用,而基因组DNA的甲基化主要通过DNA甲基化转移酶(DNA methyhransferases,DNMTs)来完成。microRNA和甲基化转移酶的表达具有一定的联系。构建携带有miR-29b的腺病毒载体并包装病毒,鉴定正确后... DNA甲基化异常在肿瘤发生中起着极为重要的作用,而基因组DNA的甲基化主要通过DNA甲基化转移酶(DNA methyhransferases,DNMTs)来完成。microRNA和甲基化转移酶的表达具有一定的联系。构建携带有miR-29b的腺病毒载体并包装病毒,鉴定正确后,将病毒感染肝癌细胞PLC,用qRT-PCR的方法检测miR-29b在PLC细胞中对甲基化转移酶表达的调控作用。结果表明,成功构建携带有miR-29b的腺病毒,qRT-PCR方法检测表明miR-29b能有效地调控甲基化转移酶的表达。 展开更多
关键词 miR-29b 甲基化转移酶 dnmt3A dnmt3B
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宫颈癌组织中DNA甲基转移酶1、3A和3B mRNA的表达 被引量:5
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作者 姜树原 张颜波 +3 位作者 随鑫 黄丽华 赵志英 邵国 《泰山医学院学报》 CAS 2011年第5期321-323,共3页
目的探讨DNA甲基转移酶1、3A和3B在宫颈癌发生发展中的作用。方法应用real-time PCR技术检测10例宫颈癌、10例宫颈上皮内瘤变和10例正常宫颈组织DNMT1、3A和3BmRNA的表达。结果宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 1mRNA对GAPDH... 目的探讨DNA甲基转移酶1、3A和3B在宫颈癌发生发展中的作用。方法应用real-time PCR技术检测10例宫颈癌、10例宫颈上皮内瘤变和10例正常宫颈组织DNMT1、3A和3BmRNA的表达。结果宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 1mRNA对GAPDH mRNA的相对丰度值分别是0.30±0.1、0.26±0.12和0.10±0.04,宫颈癌组织组织中与正常宫颈中DNMT 1表达有显著差异(P<0.05);宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT3A mRNA对GAPDH mRNA的相对丰度值分别是0.94±0.27、0.51±0.24和0.13±0.04,三组相比较有显著性差异(P<0.05);宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈中DNMT 3B mRNA对GAPDH mR-NA的相对丰度值分别是0.30±0.09、0.28±0.11和0.11±0.04,宫颈癌组织组织中与正常宫颈中DNMT 3B表达有显著差异(P<0.05)。结论 DNMT1、3A和3B参与了宫颈癌的发生,并在宫颈上皮内瘤变时就已经起了一定作用。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤变 DNA甲基转移酶1 DNA甲基转移酶3A DNA甲基转移酶3B
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FLT3-ITD与DNMT3A R882双突变对急性髓系白血病异基因造血干细胞移植预后的影响 被引量:6
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作者 唐善浩 陆滢 +10 位作者 张丕胜 刘旭辉 杜小红 陈冬 沙科娅 李双月 曹俊杰 陈列光 庄贤栩 裴仁治 唐晓文 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期552-557,共6页
目的探讨FLT3-ITD和DNMT3AR882双突变对急性髓系白血病(AML)患者allo-HSCT预后的影响。方法使用直接测序法检测206例接受allo-HSCT的AML患者(M3和使用分子靶向药物索拉菲尼的病例除外)初诊时骨髓中常见的基因突变组套(包括FLT3.IT... 目的探讨FLT3-ITD和DNMT3AR882双突变对急性髓系白血病(AML)患者allo-HSCT预后的影响。方法使用直接测序法检测206例接受allo-HSCT的AML患者(M3和使用分子靶向药物索拉菲尼的病例除外)初诊时骨髓中常见的基因突变组套(包括FLT3.ITD、DNMT3A、c-kit、CEBPA、FLT3-TKD、NPMI),回顾性分析患者的临床资料,比较各基凶突变组的移植预后。结果①206例AML患者中男104例,女102例,中位年龄38(3-63)岁。FAB分型:M0 6例,M1 24例,M2 56例,M4 39例,M5 63例,M6 6例,不能分类12例。②全部206例患者根据初诊时的突变基因情况分为4组:FLT3-ITD^+ DNMT3A R882^+组(A组)19例,FLT3-ITD^+ DNMT3A R882^-组(B组)38例,FLT3-ITD^- DNMT3A R882^+组(C组)21例,FLT3-ITD^-DNMT3A R882^-组(D组)128例。四组间性别、年龄、初诊时白细胞计数、FAB分型、移植前疾病状态、染色体核型、供者类型、预处理方案及GVHD发生率比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。③A组和B、C、D组比较,2年累积复发率较高[分别为(72.2±2.6)%、(38.6±0.6)%、(36.8±1.6)%、(27.8±0.1)%,P值均〈0.05],总生存率较低[分别为(30.9±13.3)%、(67.5±7.8)%、(61.4±12.4)%、(80.1±3.7)%,P值均〈0.05],无白血病生存率较低[分别为(11.3±10.2)%、(47.9±8.4)%、(56.8±12.5)%、(79.7±3.6)%,P值均〈0.05]。结论伴有FLT3-ITD与DNMT3A R882双突变的AML患者移植后累积复发率较高,总生存率和无白血病生存率较差。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 白血病 髓样 急性 FLT3-ITD突变 dnmt3A R882突变
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DNMT3A和Hyp在ISO诱导大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究 被引量:6
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作者 汪裕琪 石开虎 +6 位作者 吴君旭 徐盛松 陶辉 宣海洋 曹炜 沙纪名 占红英 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第5期606-609,共4页
目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)和羟脯氨酸(Hyp)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究。方法将40只雄性SD大鼠随机等分为正常对照组和模型组。模型组给予ISO[5 mg/kg·d)],正常对照组皮下注射给予等... 目的探讨DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)和羟脯氨酸(Hyp)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化中的表达及相关性研究。方法将40只雄性SD大鼠随机等分为正常对照组和模型组。模型组给予ISO[5 mg/kg·d)],正常对照组皮下注射给予等量生理盐水,连续7 d后处死大鼠获取血液标本,并取心肌组织。同时,测定心重指数(HW/BW)、左心室质量指数(LVW/BW);采用ELISA法检测血清中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量;HE染色和Masson染色法观察心肌纤维化程度;Western blot法测定DNMT3A和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;紫外分光光度法测定心肌组织中Hyp的含量。结果与正常对照组比较,模型组HW/BW、LVW/BW明显增加;模型组血清标本中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量较正常对照组明显增加;HE染色和Masson染色显示模型组心肌组织出现明显的胶原纤维增生;Western blot法检测显示模型组DNMT3A和α-SMA的表达明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);同时,紫外分光光度法检测显示模型组心肌组织中Hyp含量明显增高(P<0.05);DNMT3A和Hyp在大鼠心肌纤维化组织中的表达呈正相关(r=0.675,P<0.05)。结论 DNMT3A表达上调在心肌纤维化的形成过程中起重要促进作用,可能与Hyp升高有一定的相关性。 展开更多
关键词 心肌纤维化 dnmt3A HYP 胶原
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DNMT3a通过提升基因内部甲基化介导紫杉醇诱导的LINE-1异常表达 被引量:6
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作者 王昕源 张雨 +2 位作者 杨楠 程禾 孙玉洁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期100-111,共12页
药物诱导的长散在重复序列LINE-1异常激活可促进细胞基因组不稳定,而基因组不稳定是促进肿瘤发生发展和耐药表型形成的重要因素。因此,探索LINE-1异常激活的分子机制具有重要的理论和临床意义。DNA甲基化是调控基因表达的重要方式,已知... 药物诱导的长散在重复序列LINE-1异常激活可促进细胞基因组不稳定,而基因组不稳定是促进肿瘤发生发展和耐药表型形成的重要因素。因此,探索LINE-1异常激活的分子机制具有重要的理论和临床意义。DNA甲基化是调控基因表达的重要方式,已知DNA甲基转移酶家族成员DNMT3a不仅能通过促进基因启动子甲基化抑制基因表达,还可通过增强基因内部甲基化上调基因表达。本实验室前期研究发现,将乳腺癌细胞暴露于化疗药物可诱导LINE-1异常高表达,但LINE-1启动子甲基化水平并无显著改变。本研究进一步探讨了在化疗药物压力下DNMT3a是否可通过增强LINE-1基因内部甲基化水平促进LINE-1在乳腺癌细胞中的异常高表达。ChIP实验和甲基分析结果显示,用化疗药物紫杉醇(PTX)处理乳腺癌细胞,不仅可以诱导DNMT3a表达,而且可以促进DNMT3a与LINE-1基因内部区域的结合,提升其基因内部甲基化水平,进而上调LINE-1的表达水平。利用表达载体增加细胞内DNMT3a的表达水平,可显著上调LINE-1基因内部的甲基化及基因的表达水平,而下调DNMT3a的表达可有效抑制LINE-1表达。上述研究结果表明,DNMT3a介导的基因非启动子区甲基化在药物诱导的LINE-1异常激活中发挥重要作用,为认识LINE-1在乳腺癌化疗耐药性形成过程中异常激活的机制提供了新思路。 展开更多
关键词 乳腺癌 LINE-1异常激活 基因内部DNA甲基化 dnmt3a
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姜黄素对人胰腺癌PANC-1细胞甲基化转移酶表达影响的体外研究 被引量:3
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作者 梁春丽 王峥 +1 位作者 李炳 卜淑蕊 《上海中医药杂志》 2015年第10期77-79,97,共4页
目的探讨姜黄素对人胰腺癌PANC-1细胞甲基化转移酶(DNMTs)基因表达的影响及其作用机制。方法将体外培养的PANC-1细胞分为对照组、吉西他滨组、姜黄素组和联合组。各组分别干预48 h后,采用CCK8法检测人胰腺癌PANC-1细胞的增殖情况,采用RT... 目的探讨姜黄素对人胰腺癌PANC-1细胞甲基化转移酶(DNMTs)基因表达的影响及其作用机制。方法将体外培养的PANC-1细胞分为对照组、吉西他滨组、姜黄素组和联合组。各组分别干预48 h后,采用CCK8法检测人胰腺癌PANC-1细胞的增殖情况,采用RT-PCR法检测DNMTs mRNA表达情况,采用Western blotting法检测DNMT1和Caspase-3蛋白表达水平。结果 1联合组PANC-l细胞增殖抑制率高于姜黄素组和吉西他滨组(P<0.05)。2吉西他滨组、姜黄素组和联合组DNMT1及DNMT3mRNA表达均较对照组降低(P<0.05);联合组低于吉西他滨组和姜黄素组(P<0.05)。3吉西他滨组、姜黄素组和联合组DNMT1蛋白表达均较对照组明显下调(P<0.05,P<0.01),Caspase-3蛋白表达均较对照组明显上调(P<0.01);联合组与吉西他滨组和姜黄素组比较有显著差异(P<0.05)。结论姜黄素可协同吉西他滨促进胰腺癌细胞的凋亡,其机制与调控胰腺癌PANC-1细胞癌基因的去甲基化作用有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 姜黄素 PANC-1细胞 dnmt1 dnmt3 CASPASE-3 细胞凋亡
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基于lncGAS5/DNMT3A通路探讨心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响 被引量:1
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作者 郭冰 毛以林 +4 位作者 余意 王敏 李园 贺璇 刘蓉芳 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第3期82-86,I0004,I0005,共7页
目的 探讨心康冲剂调控长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(long non-coding RNA growth arrest specific transcript 5,lncGAS5)/DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferase 3A,DNMT3A)通路抗慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的机制。方法 62... 目的 探讨心康冲剂调控长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(long non-coding RNA growth arrest specific transcript 5,lncGAS5)/DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferase 3A,DNMT3A)通路抗慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的机制。方法 62只SD大鼠,其中随机取6只大鼠为正常组,余56只经腹腔注射阿霉素药物建立慢性心力衰竭模型,将造模成功的52只大鼠随机分为模型组12只(注射PBS+生理盐水灌胃),GAS5沉默组(注射AAV9-GAS5-RNAi病毒+生理盐水灌胃)、阴性对照组(注射AAV NC病毒+生理盐水灌胃)、心康冲剂组(注射AAV9-GAS5-RNAi病毒+心康冲剂溶液灌胃)、缬沙坦组(注射AAV9-GAS5-RNAi病毒+缬沙坦溶液灌胃)各10只。分组处理后,心脏超声检测各组大鼠心功能;Masson染色观察心脏组织形态;免疫荧光染色检测各组大鼠左心室纤维化蛋白α-SMA表达;酶联免疫吸附法检测大鼠血清Col I表达;实时荧光定量PCR法检测各组大鼠心尖组织lncGAS5、DNMT3A mRNA;Western blot法检测DNMT3A、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, PTEN)、磷酸化蛋白质激酶蛋白B(phosphorylated protein kinase B,AKT)各蛋白表达量。结果 与正常组相比,模型组大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fractions, LVEF)、左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening, LVFS)均明显降低(P<0.05);染色结果显示心肌纤维化严重;血液中I型胶原(type I collagen, Col I)明显升高(P<0.05);lncGAS5 mRNA表达降低,DNMT3A mRNA及蛋白表达升高,PTEN蛋白表达降低,AKT蛋白表达升高(P<0.05);与模型组相比,GAS5沉默组染色或指标结果进一步降低或升高;与GAS5沉默组相比,染色结果显示心康冲剂、缬沙坦组干预后心肌纤维化减轻,LVEF、LVFS都不同程度地增加(P<0.05);血清中Col I水平降低;lncGAS5mRNA表达升高,DNMT3AmRNA表达降低;DNMT3A、AKT蛋白表达降低,PTEN蛋白表达升高(P<0.05) 展开更多
关键词 心康冲剂 慢性心力衰竭 心肌纤维化 lncGAS5 dnmt3A
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DNA甲基转移酶在胃癌和癌前病变中的表达及意义 被引量:3
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作者 叶振 刘文天 《泰山医学院学报》 CAS 2010年第5期351-354,共4页
目的本研究通过对胃癌及癌前病变组织中Dnmt3A和Dnmt3B表达水平的检测,为探讨其在胃癌发病中的作用机理提供依据。方法通过手术及内镜活检取68例病例标本,依据病理检查结果,分为三组:胃癌组26例;胃癌前病变组(萎缩性胃炎伴肠化及不典型... 目的本研究通过对胃癌及癌前病变组织中Dnmt3A和Dnmt3B表达水平的检测,为探讨其在胃癌发病中的作用机理提供依据。方法通过手术及内镜活检取68例病例标本,依据病理检查结果,分为三组:胃癌组26例;胃癌前病变组(萎缩性胃炎伴肠化及不典型增生)20例;正常对照组21例。应用免疫组织化学SP法检测组织中Dnmt3A和Dnmt3B的表达水平。结果胃癌组Dnmt3A表达的阳性率是96.2%,胃癌前病变组是65.0%,正常对照组是76.2%。在胃癌组织中Dnmt3B表达的阳性率96.2%,胃癌前病变组是55.0%,正常对照组是81.0%。结论 1.胃癌组织中Dnmt3A、Dnmt3B高表达。Dnmt3A、Dnmt3B可能通过促进DNA甲基化,抑制相关基因的表达,在胃癌发生发展的过程中,Dnmt3A、Dnmt3B可能参与胃癌的分化过程。2.检测胃黏膜组织Dnmt3A、Dnmt3B可能是一种有用的肿瘤标志物。3.Dnmt3A、Dnmt3B的表达不参与胃癌的进展。 展开更多
关键词 胃癌 dnmt3A dnmt3B 免疫组织化学
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转位蛋白基因在FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变急性髓系白血病疗效评估中的价值 被引量:1
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作者 唐善浩 陆滢 +11 位作者 张丕胜 陈冬 刘旭辉 杜小红 曹俊杰 李双月 沙科娅 陈列光 庄贤栩 叶佩佩 林丽 裴仁治 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期45-49,共5页
目的:观察转位蛋白(TSPO)基因在FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变急性髓系白血病(AML)疗效评估中的价值。方法:纳入2018年6月至2020年6月在宁波大学附属人民医院血液科住院治疗的初发AML患者76例,其中伴有FLT3-ITD突变34例,伴有DNMT3A R882突... 目的:观察转位蛋白(TSPO)基因在FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变急性髓系白血病(AML)疗效评估中的价值。方法:纳入2018年6月至2020年6月在宁波大学附属人民医院血液科住院治疗的初发AML患者76例,其中伴有FLT3-ITD突变34例,伴有DNMT3A R882突变27例,伴有FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变15例,对照组为同期住院治疗的免疫性血小板减少症(ITP)患者19例。骨髓穿刺留取骨髓3 ml,常规提取RNA,通过转录组测序方法检测TSPO基因的表达量(使用2^(-ΔΔCT)法计算)。结果:FLT3-ITD单突变组和DNMT3A R882单突变组初诊时TSPO基因表达量分别为2.02±1.04、1.85±0.76,均高于对照组的1.00±0.06,但比较差异无统计学意义(P=0.671,P=0.821);双突变组初诊时TSPO基因表达量为3.98±1.07,明显高于FLT3-ITD单突变组和DNMT3A R882单突变组(P=0.032,P=0.021);双突变组化疗后达到完全缓解的患者,达到完全缓解时的TSPO基因表达量为1.19±0.87,明显低于其初诊时的水平(P=0.011)。结论:TSPO基因或许可以作为评估FLT3-ITD/DNMT3A R882双突变AML治疗疗效的一个指标。 展开更多
关键词 转位蛋白基因 急性髓系白血病 FLT3-ITD dnmt3A R882
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异基因造血干细胞移植治疗携带TP53、TET2、DNMT3A基因突变的急性白血病/MDS的挑战 被引量:5
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作者 张睿 刘代红 《天津医药》 CAS 北大核心 2018年第8期837-841,共5页
随着二代测序技术临床应用逐渐成熟,在急性白血病/骨髓增生异常综合征(MDS)患者中不断有新的基因突变被发现,并在临床中被证实对预后有重要影响。携带TP53、TET2、DNMT3A基因突变的此类疾病患者化疗缓解时间短,3年无白血病存活率极低。... 随着二代测序技术临床应用逐渐成熟,在急性白血病/骨髓增生异常综合征(MDS)患者中不断有新的基因突变被发现,并在临床中被证实对预后有重要影响。携带TP53、TET2、DNMT3A基因突变的此类疾病患者化疗缓解时间短,3年无白血病存活率极低。异基因造血干细胞移植是唯一可能治愈此类疾病的手段,但疗效远差于未携带上述基因突变者。去甲基化药物、新型靶向药物及免疫靶向治疗有可能为此类疾病的综合治疗带来希望。本文就此类基因对于急性白血病/MDS的预后意义、对异基因造血干细胞移植疗效的影响以及可能的治疗突破进行综述。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 白血病 髓样 急性 白血病 淋巴样 骨髓增生异常综合征 基因 p53 dnmt3A TET2
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