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肾癌术后辅助性免疫治疗临床疗效评价 被引量:11
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作者 郑建华 杜君 +3 位作者 陈旭升 杨庆 张艳辉 姚欣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期97-100,共4页
目的:观察免疫治疗对肾癌术后患者远期复发及转移的预防作用,分析免疫治疗对肾癌术后患者预后的影响。方法:对2000年1月至2005年12月根治性肾切除术后病理诊断为肾细胞癌的298例病例进行回顾性研究,术前影像学未见局部淋巴结及远处转移... 目的:观察免疫治疗对肾癌术后患者远期复发及转移的预防作用,分析免疫治疗对肾癌术后患者预后的影响。方法:对2000年1月至2005年12月根治性肾切除术后病理诊断为肾细胞癌的298例病例进行回顾性研究,术前影像学未见局部淋巴结及远处转移。分析患者临床特征及免疫治疗与无进展生存时间及总生存时间的关系。结果:根活性肾切除术后接受IFNα-2a治疗的70例患者5年无进展生存率及总生存率分别为90.0%和91.4%;接受LAK细胞治疗的109例患者5年无进展生存率及总生存率分别为83.5%和89.9%;而术后未接受任何治疗的119例患者5年无进展生存率和5年总生存率分别为68.1%和76.5%,有显著性差异。单因素分析免疫治疗为无进展生存时间和总生存时间影响因素;多因素分析显示,免疫治疗可作为肾癌独立的预后因素。结论:根治性肾切除术后辅助性免疫治疗可以降低国内肾癌患者术后复发转移风险,延长生存时间。 展开更多
关键词 肾肿瘤 根治性肾切除术 免疫治疗 预后
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缺血性心肌病患者血清DKK3、Gal-3表达水平及与心室重构的关系 被引量:7
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作者 刘铁红 董琳琳 +1 位作者 高阿妮 胡国玲 《临床误诊误治》 CAS 2022年第2期59-62,72,共5页
目的分析缺血性心肌病(ICM)患者血清抑癌基因DKK3、半乳糖凝集素-3(Gal-3)的表达水平及与心室重构的关系。方法收集2018年1月—2020年5月收治的ICM 61例为ICM组,另选取同期体检健康志愿者53例为健康组。比较两组血清DKK3、Gal-3表达水... 目的分析缺血性心肌病(ICM)患者血清抑癌基因DKK3、半乳糖凝集素-3(Gal-3)的表达水平及与心室重构的关系。方法收集2018年1月—2020年5月收治的ICM 61例为ICM组,另选取同期体检健康志愿者53例为健康组。比较两组血清DKK3、Gal-3表达水平以及心功能指标[左心室射血分数(LVEF)、左心房内径(LA)、右心室内径(RV)和左心室舒张末期内径(LVEDD)],Pearson相关性分析血清DKK3、Gal-3表达与心室重构的相关性。结果ICM组血清DKK3表达水平和LVEF低于健康组,血清Gal-3表达水平和LVEDD高于健康组(P<0.01);两组LA、RV比较差异无统计学意义(P>0.05)。血清DKK3表达与LVEF呈正相关,与LVEDD呈负相关(P<0.05,P<0.01)。血清Gal-3表达与LVEF呈负相关,与LVEDD呈正相关(P<0.05,P<0.01)。血清DKK3、Gal-3表达与LA、RV无相关性(P>0.05)。结论ICM患者血清中DKK3表达下调,Gal-3表达上调,二者与ICM患者心室重构均存在明显相关性。 展开更多
关键词 缺血性心肌病 dkk3 半乳糖凝集素-3 心室重构 左心室射血分数 左心室舒张末期内径
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DKK3基因过表达对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖和凋亡的影响 被引量:8
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作者 郭洪耀 乔军波 +1 位作者 林斌 沙树奎 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第3期474-477,共4页
目的:探究DKK3基因过表达对人瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法:取瘢痕疙瘩组织21例和正常皮肤组织20例,采用qRT-PCR检测其中DKK3 mRNA的表达水平。构建真核表达质粒pc DNA3. 0-DKK3,通过脂质体介导的方法将其转入瘢痕成纤维细胞中... 目的:探究DKK3基因过表达对人瘢痕成纤维细胞增殖和凋亡的影响。方法:取瘢痕疙瘩组织21例和正常皮肤组织20例,采用qRT-PCR检测其中DKK3 mRNA的表达水平。构建真核表达质粒pc DNA3. 0-DKK3,通过脂质体介导的方法将其转入瘢痕成纤维细胞中(DKK3组),未转染细胞为对照组,转染pc DNA3. 0空质粒的细胞为pc DNA组。转染48 h后,qRT-PCR和Western blot检测转染效率; CCK-8法检测成纤维细胞的增殖情况;双染法检测成纤维细胞的凋亡情况。结果:DKK3 mRNA在瘢痕疙瘩组织中表达下调(P <0. 05)。3组瘢痕疙瘩成纤维细胞中DKK3 mRNA和蛋白的表达差异有统计学意义(P <0. 05),DKK3组高于其他两组(P <0. 05)。3组细胞凋亡和增殖情况差异有统计学意义(P <0. 05),DKK3组增殖减少,凋亡增加(P <0. 05)。结论:DKK3基因过表达可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖并诱导其发生凋亡。 展开更多
关键词 dkk3 瘢痕 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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甲状腺乳头状癌中DKK3基因表达及其启动子区甲基化的研究 被引量:7
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作者 殷德涛 李明闯 +5 位作者 王勇飞 吴文迅 李红强 张艳 江金花 王庆端 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2013年第2期150-153,共4页
目的探讨甲状腺乳头状癌(papillarythyroidcarcinoma,PTC)组织中DKK3基因mRNA表达、其启动子区甲基化状态及其与PTC的发生、发展的相关性。方法运用甲基化特异性PCR(MSP)检测49例PTC及其相对应癌旁组织(NCE)中DKK3基因启动子甲... 目的探讨甲状腺乳头状癌(papillarythyroidcarcinoma,PTC)组织中DKK3基因mRNA表达、其启动子区甲基化状态及其与PTC的发生、发展的相关性。方法运用甲基化特异性PCR(MSP)检测49例PTC及其相对应癌旁组织(NCE)中DKK3基因启动子甲基化状态,采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测该基因的mRNA表达。结果在NCE中,无一例出现DKK3基因启动子甲基化,而在PTC中38.8%出现甲基化;NCE和PTC中,DKK3基因mRNA表达的阳性率分别为100%和44.9%,2组差异均有统计学意义(P〈0.01);PTC中DKK3基因启动子甲基化及mRNA表达与患者的病理学分级、TNM分期、淋巴结转移有相关性(P〈0.05)。DKK3基因启动子甲基化与其mRNA表达有明显的相关性(P〈0.01)。结论DKK3基因启动子甲基化是基因失活的重要机制之一,在PTC的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 甲基化 dkk3 WNT通路
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基于DKK3调控探讨藏红花素对Aβ25-35诱导神经元损伤的保护作用
5
作者 杨晓佳 吴敏 +1 位作者 江萌 刘立权 《中国中医药科技》 CAS 2024年第1期27-32,共6页
目的:探究藏红花素通过调控dickkopf WNT信号通路抑制因子3 (Dickkopf3,DKK3)对Aβ25-35诱导神经细胞损伤的保护作用及机制。方法:Aβ25-35诱导小鼠海马神经细胞系HT22细胞模拟细胞损伤,CCK8增殖实验检测藏红花素最佳干预浓度。qPCR检测... 目的:探究藏红花素通过调控dickkopf WNT信号通路抑制因子3 (Dickkopf3,DKK3)对Aβ25-35诱导神经细胞损伤的保护作用及机制。方法:Aβ25-35诱导小鼠海马神经细胞系HT22细胞模拟细胞损伤,CCK8增殖实验检测藏红花素最佳干预浓度。qPCR检测DKK3沉默质粒(DKK3 siRNA)以及DKK3过表达质粒(DKK3-OE)的DKK3 mRNA表达,随后进行细胞转染。细胞分为正常组、Aβ25-35组、Aβ25-35+藏红花素组(1.0μmol/L)、Aβ25-35+DKK3 siRNA组、Aβ25-35+siRNA对照组、DKK3-OE组、空白质粒对照组、DKK3-OE+藏红花素组(1.0μmol/L)组。采用流式细胞数检测细胞凋亡,Tubulin β染色观察细胞神经突触形态,Western blot检测细胞Aβ、DKK3、β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:0.5~2.0μmol/L藏红花素可显著上调HT22细胞活力(P<0.05)。与正常组相比,Aβ25-35组和DKK3-OE组细胞凋亡显著增加,突触长度、分支数显著减少,Aβ、DKK3、p-GSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高,β-catenin、Bcl-2蛋白蛋白表达显著降低(P<0.01)。与DKK3-OE组相比,藏红花素干预则能逆转以上结果。与Aβ25-35组相比,Aβ25-35+藏红花素组和Aβ25-35+DKK3 siRNA组细胞的凋亡显著降低,突触长度、分支数显著增加,Aβ、DKK3、p-GSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax蛋白表达显著降低,β-catenin、Bcl-2蛋白蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:藏红花素对Aβ25-35诱导神经细胞损伤具有保护作用,其作用与通过抑制DKK3调控GSK-3β/β-catenin信号通路表达有关。 展开更多
关键词 阿尔兹海默症 藏红花素 dkk3 神经元 GSK-3β/β-catenin信号通路 细胞凋亡 体外实验
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藏红花素介导DKK3调控GSK-3β/β-catenin通路对阿尔兹海默症大鼠的认知改善作用 被引量:1
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作者 杨晓佳 江萌 +5 位作者 吴敏 张伊黎 吕兰 吴嫄芬 王鑫昱 刘立权 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第5期489-497,共9页
目的:探讨藏红花素(crocin)对阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)小鼠认知能力的改善作用及机制。方法:SD大鼠海马区注射Aβ25-35建立AD模型,随机分为AD组、AD+L、M、H-crocin组(10、20、40 mg/kg)和AD+donepezil组(1 mg/kg盐酸多... 目的:探讨藏红花素(crocin)对阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)小鼠认知能力的改善作用及机制。方法:SD大鼠海马区注射Aβ25-35建立AD模型,随机分为AD组、AD+L、M、H-crocin组(10、20、40 mg/kg)和AD+donepezil组(1 mg/kg盐酸多奈哌齐),腹腔注射治疗4周,另设置Sham组。采用避暗实验、水迷宫实验评估大鼠学习、记忆能力,ELISA测定大鼠血清Aβ含量,HE染色和Tunel染色确定大鼠海马区内病理改变及神经元细胞凋亡,免疫组化测定大鼠海马区Brdu、Dcx、NeuN表达,Western blot测定大鼠脑组织Aβ、DKK3、β-catenin、p-GSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:与Sham组相比,AD组大鼠的学习、记忆能力下降,血清Aβ含量升高,且海马区的病理改变严重,神经元细胞凋亡增加,Brdu、Dcx、NeuN含量降低,Aβ、DKK3、pGSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax蛋白表达升高,β-catenin、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01)。与AD组相比,给予不同剂量crocin和donepezil治疗后,AD大鼠学习、记忆能力提高,血清Aβ含量降低,海马区的病理改变减轻,神经元细胞凋亡减少,Brdu、Dcx、NeuN含量升高,Aβ、DKK3、p-GSK-3β/GSK-3β、Caspase-3、Bax蛋白表达升高,β-catenin、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),crocin的剂量依赖效应显著。结论:crocin通过减少神经元细胞凋亡,介导DKK3调控GSK-3β/β-catenin通路来改善AD大鼠认知损伤。 展开更多
关键词 藏红花素 阿尔兹海默症 神经细胞凋亡 dkk3 GSK-3β/β-catenin通路
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DKK3在胃癌组织中的甲基化表达及其临床意义 被引量:5
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作者 宋国栋 王力 +3 位作者 沈洪 李盟 翟儒钧 牛远杰 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期935-937,共3页
目的探讨胃癌组织中DKK3基因的mRNA表达、其启动子区甲基化状况及其与胃癌发生发展的关系。方法应用甲基化特异性PCR检测76例配对的胃癌和癌旁组织中DKK3基因启动子甲基化状态,再采用RT-PCR检测该基因的mRNA表达。结果76例胃癌组织中DK... 目的探讨胃癌组织中DKK3基因的mRNA表达、其启动子区甲基化状况及其与胃癌发生发展的关系。方法应用甲基化特异性PCR检测76例配对的胃癌和癌旁组织中DKK3基因启动子甲基化状态,再采用RT-PCR检测该基因的mRNA表达。结果76例胃癌组织中DKK3mRNA表达率低于癌旁组织(43%比60%,X2=5.663,P=0.017)。在癌旁组织中,有29例出现DKK3基因启动子甲基化,而在胃癌组织中有44例出现甲基化(38%比58%,X2=19.405,P=0.000)。胃癌组织中DKK3基因启动子甲基化表达与胃癌患者的肿瘤浸润深度(P=0.014)、TNM分期(P=0.032)、病理类型(P=0.016)及淋巴结转移(P=0.007)密切相关。DKK3基因启动子甲基化与其mRNA表达具有负相关性(X2=64.286,P=0.000)。结论胃癌组织中DKK3基因启动子的异常甲基化是其失活的重要机制.在胃癌的进展中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 DNA甲基化 病理学 临床 dkk3
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WNT信号抑制因子DKK3基因对结直肠癌细胞系HCT116迁移与侵袭的影响 被引量:5
8
作者 刘桂元 张永慧 庞毅 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第10期1437-1443,共7页
目的分析DKK3在结直肠癌组织中的表达及对患者预后的影响,同时探索DKK3对结直肠癌细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响,并对机制进行一定的探索。方法在线数据库分析DKK3在结直肠癌组织中的表达及其对患者预后的影响。用RNA干扰技术,下调D... 目的分析DKK3在结直肠癌组织中的表达及对患者预后的影响,同时探索DKK3对结直肠癌细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响,并对机制进行一定的探索。方法在线数据库分析DKK3在结直肠癌组织中的表达及其对患者预后的影响。用RNA干扰技术,下调DKK3;用MTT检测细胞增殖,同时运用细胞小室迁移实验检测细胞迁移及侵袭能力,并通过RT-qPCR技术以及Western blot技术检测迁移相关蛋白表达。结果与正常组织相比,DKK3在结直肠癌组织中的表达显著上调并会导致患者整体预后情况变差(P<0.05),干涉DKK3后细胞增殖速率明显减缓(P<0.05),并且细胞迁移以及侵袭能力减弱(P<0.01)。MMP2、MMP7以及MMP9与DKK3的表达呈正相关关系(P<0.001)。在敲低DKK3后,MMP2、MMP7、MMP9以及p-ERK的表达均显著下调(P<0.01)。结论DKK3在结直肠癌细胞系HCT116中表达上调,可能通过MAPK/ERK信号通路促进细胞增殖以及迁移能力。 展开更多
关键词 dkk3 结直肠癌 增殖 迁移及侵袭
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北京黑猪DKK3和CCR1基因多态性检测及其与背膘厚的关联分析 被引量:4
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作者 田威龙 兰干球 +3 位作者 张龙超 王立贤 梁晶 刘欣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期2083-2093,共11页
旨在探讨DKK3和CCR1基因多态性及其对北京黑猪背膘厚的影响,以期能够筛选出可用于提高北京黑猪背膘厚性状的分子标记,为北京黑猪优良性状定向选育提供依据。本研究以413头健康的北京黑猪为试验材料,对其进行DNA提取、PCR扩增、基因测序... 旨在探讨DKK3和CCR1基因多态性及其对北京黑猪背膘厚的影响,以期能够筛选出可用于提高北京黑猪背膘厚性状的分子标记,为北京黑猪优良性状定向选育提供依据。本研究以413头健康的北京黑猪为试验材料,对其进行DNA提取、PCR扩增、基因测序筛选候选基因的SNPs,同时利用SAS 9.2软件对突变位点的不同基因型分别与北京黑猪的六七肋背膘厚和腰荐部背膘厚进行关联分析。结果显示,在北京黑猪DKK3基因的外显子区共检测到10个SNPs,包含1个可变剪切突变、1个错义突变和8个3′UTR突变,其中有4个3′UTR突变位点均与腰荐部背膘厚显著关联(P<0.05),分别为g.47443779 T>C、g.47444258 C>T、g.47444912 G>T和g.47445304 T>C,其余位点与六七肋背膘厚和腰荐部背膘厚均不显著关联(P>0.05)。在CCR1基因的外显子区共检测到3个SNPs,包含2个同义突变和1个错义突变,其中1个同义突变位点g.29229037 G>A与六七肋背膘厚显著关联(P<0.05)。对DKK3的10个SNPs进行连锁不平衡分析,结果显示,g.47443779 T>C和g.47443783 C>T处于完全连锁状态(D’=1),g.47443783 C>T和g.47443858 C>T处于完全连锁状态(D’=1),g.47444258 C>T和g.47444275 C>T呈现高度连锁状态(D’=0.98)。综上所述,DKK3和CCR1基因的SNPs分别与北京黑猪的腰荐部背膘厚和六七肋背膘厚有显著关联性,可为北京黑猪背膘厚的早期分子选育提供参考。 展开更多
关键词 北京黑猪 dkk3 CCR1 背膘厚
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DKK3基因甲基化在输卵管癌诊断中的价值及临床意义 被引量:5
10
作者 赵楠楠 王艳 +4 位作者 郭艳娟 袁金灵 高杰 邹歌 刘萍 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第10期1706-1709,共4页
目的研究Wnt抑制因子(dickkopf-related protein 3,DKK3)在原发性输卵管癌中的表达,并探讨DKK3启动子甲基化的临床意义。方法选取46例输卵管癌患者的输卵管癌组织标本和相应的癌旁组织标本。通过免疫组织化学法检测DKK3蛋白表达情况,通... 目的研究Wnt抑制因子(dickkopf-related protein 3,DKK3)在原发性输卵管癌中的表达,并探讨DKK3启动子甲基化的临床意义。方法选取46例输卵管癌患者的输卵管癌组织标本和相应的癌旁组织标本。通过免疫组织化学法检测DKK3蛋白表达情况,通过荧光定量PCR检测DKK3 mRNA的表达水平,通过甲基化特异性PCR(MSP)检测DKK3基因启动子甲基化水平,并分析其与患者临床病理的关系。结果免疫组化检测结果显示,输卵管癌组织中DKK3蛋白高表达率为28.3%(13/46),明显低于癌旁对照组65.2%(30/46),差异具有统计学意义(P<0.01)。荧光定量PCR结果显示,输卵管癌组织中DKK3 mRNA水平明显低于癌旁对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。MSP检测结果显示,输卵管癌组织DKK3基因发生甲基化概率为73.9%(34/46),明显高于癌旁对照组的39.1%(18/46),差异具有统计学意义(P<0.01)。DKK3启动子甲基化水平与输卵管癌患者年龄(χ^2=0.031,P>0.05)、输卵管癌病理分级(χ^2=3.184,P>0.05)和病理类型(χ^2=0.654,P>0.05)均无显著相关性。DKK3甲基化水平与FIGO分期存在显著相关性(χ^2=5.007,P<0.05)。结论DKK3基因启动子甲基化水平与输卵管癌的发生发展密切相关,可作为输卵管癌诊断和治疗的签字靶点。 展开更多
关键词 输卵管癌 dkk3 甲基化 FIGO分期
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超声微泡介导miR-1290通过调节DKK3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响
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作者 钟淑娟 高新茹 强荣 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2023年第5期586-591,共6页
目的探讨超声微泡介导miR-1290通过调节DKK3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的作用机制。方法将对数期SKOV3细胞分为对照组(Control)、miR-1290 NC组、微泡处理(MB)组、miR-1290 inhibitor组、miR-1290 inhibitor-MB组。双荧光素酶实... 目的探讨超声微泡介导miR-1290通过调节DKK3表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的作用机制。方法将对数期SKOV3细胞分为对照组(Control)、miR-1290 NC组、微泡处理(MB)组、miR-1290 inhibitor组、miR-1290 inhibitor-MB组。双荧光素酶实验验证miR-1290与DKK3的靶向关系;RT-PCR检测SKOV3细胞中miR-1290与DKK3 mRNA的表达;MTT法检测SKOV3细胞活性;流式细胞仪检测SKOV3细胞凋亡情况;细胞划痕实验和Transwell实验检测SKOV3细胞迁移侵袭能力;Western blot检测蛋白表达。结果双荧光素酶实验证明,miR-1290与DKK3有靶向关系,miR-1290可负靶向调控DKK3;与miR-1290 NC组[24、48、72 h:(0.53±0.05)、(0.82±0.06)、(1.24±0.06)]比较,MB组[24、48、72 h:(0.43±0.06)、(0.71±0.03)、(1.03±0.03)]、miR-1290 inhibitor组[24、48、72 h:(0.41±0.03)、(0.66±0.04)、(0.78±0.05)]、miR-1290 inhibitor-MB组[24、48、72 h:(0.33±0.04)、(0.54±0.05)、(0.67±0.06)]SKOV3细胞增殖活性明显下降(P<0.05)。与miR-1290 NC组SKOV3细胞迁移率、侵袭数目[(45.98±4.11)%、(235.14±5.78)个]比较,MB组[(36.77±4.24)%、(189.57±4.58)个]、miR-1290 inhibitor组[(32.14±3.78)%、(165.35±5.01)个]、miR-1290 inhibitor-MB组SKOV3细胞迁移率、侵袭数目[(20.40±3.01)%、(86.21±4.23)个]明显下降,SKOV3细胞中DKK3 mRNA及蛋白表达、细胞凋亡率、促凋亡蛋白C-Caspase-3、Bax表达显著上升(P<0.05);miR-1209 NC组与Control组SKOV3细胞上述指标无显著差异(P>0.05)。结论miR-1290可负向调DKK3表达,而超声微泡可下调miR-1290表达,上调DKK3表达,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移侵袭,促进癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 超声微泡 miR-1290 卵巢癌 dkk3
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抑癌基因DKK3对皮肤恶性黑素瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量:4
12
作者 李晶 余音 +5 位作者 刘林红 黎智 刁庆春 王开振 肖亮 刘素桃 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期904-908,共5页
目的 探讨DKK3 在人皮肤恶性黑素瘤细胞及组织中的表达及其对黑素瘤细胞A375增殖与凋亡的影响。方法 通过反转录(RT)?PCR及实时定量PCR分析DKK3 mRNA在人恶性黑素瘤细胞系HM、A375、WM451、WM35、SK?MEL?1、Hs?695T和MDA?MB?435... 目的 探讨DKK3 在人皮肤恶性黑素瘤细胞及组织中的表达及其对黑素瘤细胞A375增殖与凋亡的影响。方法 通过反转录(RT)?PCR及实时定量PCR分析DKK3 mRNA在人恶性黑素瘤细胞系HM、A375、WM451、WM35、SK?MEL?1、Hs?695T和MDA?MB?435s及38例原发性黑素瘤、4例转移性黑素瘤和20例色素痣组织中的相对表达。分别转染恶性黑素瘤A375细胞pcDNA3.1(+)?Flag?DKK3 质粒(实验组)和pcDNA3.1(+)?Flag?Vector 质粒(对照组),RT?PCR 验证 DKK3 的过表达;通过CCK8法和平板克隆实验分析 DKK3 对A375细胞增殖的影响,流式细胞仪分析 DKK3对A375细胞凋亡的影响,Western印迹检测A375细胞周期和凋亡相关蛋白的表达。结果 DKK3 mRNA 在WM35细胞系表达下调,HM、A375、WM451、SK?MEL?1和Hs?695T细胞系表达缺失,MDA?MB?435s细胞高表达。与色素痣相比,DKK3 mRNA在人恶性黑素瘤组织表达降低(P 〈 0.001)。与对照组A375细胞相比 (100%),实验组A375细胞克隆形成效率明显受到抑制(23.22% ± 3.55%);同时转染后24、48、72 h细胞活性受到明显抑制(均P 〈 0.05)。流式细胞仪检测发现,与对照组A375细胞(G1期,25.38% ± 2.92%)相比,实验组A375细胞明显阻滞于G1期(48.68% ± 3.92%,P 〈 0.001),细胞凋亡率明显升高(P 〈 0.001)。与对照组A375细胞相比,实验组周期凋亡相关蛋白p21、Bax、活化的parp和 活化的Caspase?3表达升高,细胞周期蛋白D1和Bcl2表达降低(均P 〈 0.001)。结论 DKK3在人皮肤恶性黑素瘤组织中表达下调,可能作为潜在的抑癌基因参与皮肤恶性黑素瘤的进展。 展开更多
关键词 黑色素瘤 细胞增殖 细胞凋亡 dkk3 抑癌基因
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Hsa-miR-98-5p/DKK3信号轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:3
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作者 姚嘉 李冠乔 +1 位作者 杨时平 苏慧銮 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期807-816,共10页
背景与目的:乳腺癌威胁着全世界女性的健康。虽然已发现大量微小RNA(microRNA,miRNA)在乳腺癌中异常表达,但仍需要构建一个完整的miRNA-信使RNA(messenger RNA,mRNA)网络。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据... 背景与目的:乳腺癌威胁着全世界女性的健康。虽然已发现大量微小RNA(microRNA,miRNA)在乳腺癌中异常表达,但仍需要构建一个完整的miRNA-信使RNA(messenger RNA,mRNA)网络。方法:利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载乳腺癌相关数据集,分析肿瘤组织与正常组织之间差异表达的miRNA。利用miRDB、miRTarBase和StarBase数据库分析差异miRNA靶向的基因。使用R语言中的ClusterProfiler包对靶基因进行富集分析。使用String数据库联合Cytoscape 3.6.2软件进行蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析及Hub基因的筛选;构建miRNA-Hub mRNA调控网络确定研究信号轴,然后通过细胞实验进行验证。结果:采用TCGA数据集识别出两个差异miRNAs。3个数据库取交集预测得到278个靶基因。共鉴定出10个Hub基因,从构建的miRNA-Hub基因网络图中发现,hsa-miR-98-5p/DKK3轴可能在乳腺癌的进展中起关键作用。细胞功能学实验证实hsa-miR-98-5p可抑制细胞凋亡,促进细胞的增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验进一步验证了hsa-miR-98-5p与DKK3的结合作用。结论:本研究首先通过生物信息学分析鉴定出一个与乳腺癌进展相关的hsa-miR-98-5p/DKK3轴,初步证实hsa-miR-98-5p可通过靶向DKK3抑制乳腺癌细胞凋亡,促进细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺癌 Hsa-miR-98-5p dkk3 双荧光素酶活性报告实验
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DKK3在慢性肾小球肾炎中表达及诱导肾小球足细胞迁移的机制研究 被引量:3
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作者 许为佳 李涛 +2 位作者 费沛 程鹏 朱晓文 《临床肾脏病杂志》 2019年第3期181-186,共6页
目的研究DKK3在慢性肾小球肾炎中的表达,分析DKK3在慢性肾小球肾炎发生、发展中的意义。方法选取人正常肾组织20例、慢性肾小球肾炎组织80例为研究材料,通过实时定量PCR和免疫蛋白印迹实验验证DKK3在人正常肾组织、慢性肾小球肾炎组织... 目的研究DKK3在慢性肾小球肾炎中的表达,分析DKK3在慢性肾小球肾炎发生、发展中的意义。方法选取人正常肾组织20例、慢性肾小球肾炎组织80例为研究材料,通过实时定量PCR和免疫蛋白印迹实验验证DKK3在人正常肾组织、慢性肾小球肾炎组织中的相对表达;实时定量PCR分析β-catenin mRNA在人正常肾组织、慢性肾小球肾炎组织中的相对表达,Pearson相关性分析DKK3与β-catenin在慢性肾小球肾炎组织中的表达相关性;选取肾小球足细胞MPC5进行DKK3基因过表达,transwell实验验证实验组和对照组中细胞迁移和侵袭的影响;免疫蛋白印迹实验验证DKK3对细胞迁移和侵袭的影响机制。结果与正常肾组织相比,DKK3在慢性肾小球肾炎组织中表达上调(P<0.01),同时DKK3的表达与β-catenin呈正相关性,并参与慢性肾小球肾炎的进展(P=0.0002,r^2=0.1651);DKK3基因过表达后能明显促进细胞迁移和侵袭(P<0.01);免疫蛋白印迹实验显示DKK3基因过表达后能上调Vimentin、N-cadherin、MMP7、β-catenin蛋白的表达,下调E-cadherin蛋白的表达水平(P<0.01)。结论 DKK3在慢性肾小球肾炎组织中表达上调,可能是重要的调控因子参与慢性肾小球肾炎的进展。 展开更多
关键词 慢性肾小球肾炎 dkk3 足细胞
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胃癌外周血DKK3基因启动子甲基化检测及其临床价值 被引量:3
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作者 刘礼 袁昌劲 +4 位作者 郭敬杰 余涛 吕秀玮 刘娇萍 赖小晶 《临床和实验医学杂志》 2017年第15期1460-1463,共4页
目的检测胃癌患者外周血DKK3基因启动子甲基化并研究其临床意义。方法选择80例胃癌患者(GAC组)和40例正常健康人(CON组)为研究对象,检测两组研究对象外周血DKK3基因启动子甲基化并比较其差异。分析GAC组胃癌患者DKK3基因启动子甲基化与... 目的检测胃癌患者外周血DKK3基因启动子甲基化并研究其临床意义。方法选择80例胃癌患者(GAC组)和40例正常健康人(CON组)为研究对象,检测两组研究对象外周血DKK3基因启动子甲基化并比较其差异。分析GAC组胃癌患者DKK3基因启动子甲基化与临床病理的关系。比较GAC组患者DKK3基因启动子甲基化与未甲基化患者预后的差异。结果 GAC组患者DKK3基因甲基化率显著高于CON组(P<0.05)。GAC组胃癌病变分布全胃、低分化、肿瘤最大径≥5 cm、淋巴结转移、远处转移和Ⅲ+Ⅳ患者DKK3基因启动子甲基化率显著高于病变分布局部、中高分化、肿瘤最大径<5 cm、无淋巴结转移、无远处转移和Ⅰ+Ⅱ患者(均P<0.05)。GAC组中DKK3基因启动子甲基化患者R0切除率、3年生存率及总生存时间均显著低于DKK3基因启动子未甲基化患者(P<0.05),并发症发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论胃癌患者外周血DKK3基因启动子处于高甲基化状态,与病情严重程度及预后密切相关,外周血DKK3基因启动子甲基化检测可用于病情及预后的评估。 展开更多
关键词 胃癌 dkk3 甲基化 临床意义
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Dkk3心脏特异表达转基因小鼠心脏功能分析 被引量:3
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作者 吕丹 董伟 +5 位作者 陈炜 张丽 张伟 赵海苹 秦川 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第5期16-19,I0005,I0006,共6页
目的建立心脏特异表达Dkk3转基因模型小鼠,研究Dkk3对心脏发育及和心肌病的调节作用。方法把Dkk3基因插入心肌特异启动子-αMHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J Dkk3转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,采用Northern b... 目的建立心脏特异表达Dkk3转基因模型小鼠,研究Dkk3对心脏发育及和心肌病的调节作用。方法把Dkk3基因插入心肌特异启动子-αMHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J Dkk3转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,采用Northern blot检测Dkk3在心脏组织中的表达,HE染色和超声检查转基因小鼠心脏结构和功能。结果建立了3个不同表达水平的Dkk3转基因小鼠品系。转入的Dkk3基因在心脏组织的表达水平均高于同龄对照小鼠。组织学分析显示Dkk3小鼠室壁变厚,心腔减小,心肌细胞排列轻度紊乱。超声检查显示心室壁变厚,收缩期容积和舒张期容积显著减小,射血分数,短轴缩短率增加。结论Dkk3过表达导致转基因小鼠室壁变厚,心腔减小,心肌细胞排列轻度紊乱,心肌舒张功能轻度失调。 展开更多
关键词 dkk3 转基因 心脏
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Dkk3在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 崔丹 翟博 +1 位作者 张明 张建军 《肝胆外科杂志》 2014年第4期304-307,共4页
目的探讨dkk3在肝细胞肝癌中的表达及临床意义。方法 40例肝癌及其癌旁组织,10例正常肝组织采用Real time PCR检测DKK3mNA水平表达情况和228例肝癌组织及癌旁组织石蜡切片采用免疫组织化学方法对DKK3蛋白水平表达情况进行检测;并对228... 目的探讨dkk3在肝细胞肝癌中的表达及临床意义。方法 40例肝癌及其癌旁组织,10例正常肝组织采用Real time PCR检测DKK3mNA水平表达情况和228例肝癌组织及癌旁组织石蜡切片采用免疫组织化学方法对DKK3蛋白水平表达情况进行检测;并对228例肝癌患者预后生存率进行分析。结果 DKK3mRNA水平中在肝癌组织中低表达,在正常组织中高表达(P<0.05),DKK3蛋白水平在肝癌组织中低表达(P<0.05),DKK3蛋白高表达肝癌患者预后生存时间长于低表达(P<0.05),差异有统计学意义。结论 DKK3在肝细胞肝癌组织中低表达,说明DKK3是一种抑癌基因,并且预后结果分析提示DKK3有可能在抑制肿瘤增长,分化,转移中发挥作用。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 dkk3 预后生存.
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DKK3和vWF在结直肠癌组织中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 牛云霞 王晨昱 +4 位作者 杨爱军 刘伟 尚丽娜 李敏 王金穗 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期182-186,共5页
背景与目的:有研究提示抑癌基因DKK3(dickkopf homolog 3 gene)在肿瘤中表达减少或缺失,而部分肿瘤内皮血管表达DKK3;vWF是一种由血管内皮细胞和巨核细胞合成和释放的大分子糖蛋白,其在肿瘤组织中有表达,目前两者对肿瘤的发生的机制还... 背景与目的:有研究提示抑癌基因DKK3(dickkopf homolog 3 gene)在肿瘤中表达减少或缺失,而部分肿瘤内皮血管表达DKK3;vWF是一种由血管内皮细胞和巨核细胞合成和释放的大分子糖蛋白,其在肿瘤组织中有表达,目前两者对肿瘤的发生的机制还不清楚。本研究通过检测DKK3和vWF在结直肠癌中的表达,以探讨其临床意义、两者与微血密度(micro vascular density,MVD)的关系以及两者之间的相关性。方法:94例结直肠癌组织制作片,应用免疫组织化学SP法检测DKK3、vWF蛋白和MVD在结直肠癌中的表达。结果:DKK3在癌组织中的表达明显降低或缺失,与在正常肠黏膜组织中的表达相比,差异有统计学意义(P<0.05);vWF在癌组织中的表达明显高于其在正常组织中的表达,差异同样有统计学意义(P<0.05);DKK3与vWF的表达均与结直肠癌患者的性别、年龄、浸润深度和生长部位无关(P>0.05),但均与组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。DKK3和vWF在结直肠癌中的表达均与MVD无相关性(P>0.05);DKK3和vWF的表达在结直肠癌中无相关性(r=0.1310,P=0.2090)。结论:DKK3的低表达和vWF的高表达与结直肠癌的发生、发展、生物学行为和转移可能有关,可望成为一个用于结直肠癌诊断的新的生物学标志物。 展开更多
关键词 结直肠癌 组织芯片 免疫组织化学 dkk3 VWF
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DKK3在胃癌组织中的表达及其与预后的关系 被引量:3
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作者 宋国栋 王力 +3 位作者 沈洪 李盟 翟儒钧 牛远杰 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期585-588,共4页
目的探讨胃癌组织中DKK3蛋白和mRNA的表达水平及其与患者预后的关系。方法应用免疫组织化学方法检测158例胃癌和癌旁组织中DKK3蛋白的表达水平,用免疫印迹和实时定量PCR检测76例胃癌和癌旁组织中DKK3蛋白和mRNA的表达水平。结果158例... 目的探讨胃癌组织中DKK3蛋白和mRNA的表达水平及其与患者预后的关系。方法应用免疫组织化学方法检测158例胃癌和癌旁组织中DKK3蛋白的表达水平,用免疫印迹和实时定量PCR检测76例胃癌和癌旁组织中DKK3蛋白和mRNA的表达水平。结果158例胃癌组织中DKK3阳性表达率低于癌旁组织(40.5%比55.1%,X^2=41.442,P=0.000)。76例胃癌组织中DKK3蛋白和mRNA的表达水平均低于癌旁组织(1.096±1.110比3.476±1.119,t=3.332.P=0.017;1.136±1.013比3.314±1.105,t=2.673,P=0.022)。DKK3的表达水平与胃癌的肿瘤浸润深度(P=0.006)、TNM分期(P=0.005)及淋巴结转移(P=0.009)密切相关,与胃癌患者的总生存率呈正相关(47.4%比28.0%,P=0.011),并且是其独立预后因素(P=0.016)。结论DKK3在胃癌组织中表达水平降低,并与胃癌患者的预后密切相关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 病理学 临床 预后 dkk3
原文传递
Wnt途径拮抗剂Dickkopf-3蛋白在肝细胞癌中表达亚细胞定位及临床意义 被引量:2
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作者 王宁 杨斌 +4 位作者 骆莹 王涛 王凤梅 高英堂 杜智 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期93-96,104,共5页
目的:分析Wnt途径拮抗剂Dickkopf-3(DKK3)蛋白在肝细胞癌中表达和亚细胞定位,探讨其在肝细胞癌中的临床意义。方法:采用细胞免疫荧光和免疫组织化学方法,分析肝癌细胞系及43例肝细胞癌与相应癌旁组织中DKK3的蛋白表达,并对其中31例中DKK... 目的:分析Wnt途径拮抗剂Dickkopf-3(DKK3)蛋白在肝细胞癌中表达和亚细胞定位,探讨其在肝细胞癌中的临床意义。方法:采用细胞免疫荧光和免疫组织化学方法,分析肝癌细胞系及43例肝细胞癌与相应癌旁组织中DKK3的蛋白表达,并对其中31例中DKK3基因的甲基化状态进行检测。结果:DKK3蛋白在肝细胞癌组织中的高表达率为67.4%(29/43),显著高于相应癌旁组织中的41.8%(18/43)(P=0.017),且细胞核内呈明显高表达;肝细胞癌组织中DKK3基因甲基化发生率为90.3%(28/31),显著高于相应的癌旁组织中的64.5%(20/31)(P=0.015),DKK3基因的甲基化状态与蛋白表达无明显相关性(P=0.844);DKK3低表达的肝细胞癌患者5年总生存率和无瘤生存率明显高于高表达者(P=0.049,P=0.001)。结论:肝细胞癌中DKK3基因的甲基化状态可能与肝细胞癌中DKK3蛋白表达呈负相关;DKK3在癌组织中的高表达可能对肝细胞癌具有促进而非抑制性作用,可以作为判断肝细胞癌预后的指标。 展开更多
关键词 肝细胞癌 dkk3 预后 甲基化
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