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改良的胎鼠海马神经元原代培养及模拟糖尿病并发抑郁环境对其的损伤作用 被引量:24
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作者 刘检 王宇红 +4 位作者 徐雅岚 孟盼 刘林 杨蕙 韩远山 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期459-465,共7页
目的:建立一种改良的胎鼠海马神经元原代培养方法,研究模拟糖尿病并发抑郁(diabetes mellitus with depression,DD)环境对其的损伤作用。方法:取胎龄18 d的SD大鼠,体视显微镜下分离海马,0.25%胰蛋白酶和0.2%胶原酶(1∶1)消化后进行体外... 目的:建立一种改良的胎鼠海马神经元原代培养方法,研究模拟糖尿病并发抑郁(diabetes mellitus with depression,DD)环境对其的损伤作用。方法:取胎龄18 d的SD大鼠,体视显微镜下分离海马,0.25%胰蛋白酶和0.2%胶原酶(1∶1)消化后进行体外培养,分别观察培养后4 h、24 h、5 d、8 d、14 d海马神经元的基本形态结构;神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。采用高糖联合皮质酮造模构建类似糖尿病并发抑郁症状的模拟DD环境,MTT法检测神经元的存活率;流式AnnexinV/PI双染和Hoechst荧光染色检测神经元的凋亡情况。结果:经NSE免疫细胞化学鉴定,培养7 d后的神经元纯度达95%以上,细胞胞体成球形,树突分支明显,并相互交织成丰富的神经网络;高糖、皮质酮及两者联用造模18 h后,与正常对照组相比,MTT检测细胞存活率分别为53.1%、64.3%和56.7%,P<0.05;流式细胞仪检测正常对照组、高糖组、皮质酮组、两者联用组Q3区的比例(分别为71.6%、47.9%、53.6%和39.2%),明显低于阴性对照组(98.5%),P<0.05。后四者Q2+Q4区总比例分别为24.4%、46.6%、40.4%、67.0%;Hoechst染色结果提示上述三个造模组的神经元细胞核均出现不同程度的核染色质聚集、浓缩,甚至核碎裂,呈现出典型的凋亡特征。结论:成功建立一种操作简便、细胞纯度佳、活性好、产率高的胎鼠海马神经元原代培养方法,验证了模拟DD环境对海马神经元的损伤作用,为体外深入研究DD的发病机制及药物防治提供了实验依据。 展开更多
关键词 细胞培养 海马神经元 糖尿病 抑郁症 模拟DD环境 凋亡 胎鼠
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖血脂的影响 被引量:20
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作者 王宇红 杨蕙 +4 位作者 尹玲桃 柴上 韩远山 张秀丽 谭元生 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1602-1606,共5页
目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖、血脂的影响。方法采用ig高脂乳剂、iv链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)和慢性应激联合的方法制备糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为5组:模型组,阳性药(二甲双胍0.18 g/kg+百忧解1.8 mg/... 目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠血糖、血脂的影响。方法采用ig高脂乳剂、iv链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)和慢性应激联合的方法制备糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为5组:模型组,阳性药(二甲双胍0.18 g/kg+百忧解1.8 mg/kg)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量(20.53、10.26、5.13 g/kg)组,同时以正常大鼠为对照组。各组造模同时ig给药,共4周;生化法检测各组大鼠血糖、糖化血红蛋白水平、胰岛素抵抗及血脂水平,ELISA法测定大鼠血浆皮质酮水平,HE染色观察大鼠肾上腺的病理改变。结果与对照组比较,模型组大鼠血糖、糖化血红蛋白、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和血浆皮质酮水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P<0.05),具有明显的胰岛素抵抗。给予左归降糖解郁方干预后,大鼠血糖、糖化血红蛋白、TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著升高,胰岛素抵抗程度减轻,血浆皮质酮水平明显降低(P<0.05、0.01),肾上腺损伤程度减轻。结论左归降糖解郁方可改善糖尿病并发抑郁症大鼠的血糖、血脂异常,该作用可能与其保护肾上腺,降低循环系统皮质酮水平有关。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 血糖 血脂 皮质酮 胰岛素抵抗
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左归降糖解郁方对自噬介导的糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经血管单元中神经元损伤的保护作用及其机制 被引量:20
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作者 刘检 刘林 +6 位作者 唐林 韩远山 杨蕙 凌佳 龙红萍 蔺晓源 王宇红 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2420-2427,共8页
目的探讨左归降糖解郁方(ZGF)对自噬介导的糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠海马神经血管单元(neurovascularunit,NVU)中神经元的保护作用及其机制。方法原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元、星形胶质细... 目的探讨左归降糖解郁方(ZGF)对自噬介导的糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠海马神经血管单元(neurovascularunit,NVU)中神经元的保护作用及其机制。方法原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元、星形胶质细胞及脑微血管内皮细胞,构建海马NVU体外共培养体系,并进行免疫细胞化学染色鉴定。采用高糖(150mmol/L)联合皮质酮(200μmol/L)干预制备海马NVU细胞模型,实验设对照组、模型组、空白血清对照组和ZGF含药血清组。采用Furo-3/AM染色法检测海马NVU神经元细胞内钙水平,高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)检测海马NVU神经元细胞内自噬标志物自噬相关蛋白1(Beclin-1)、人微管相关蛋白轻链3II(LC3-II)及谷氨酸受体2(Glu R2)/Ca2+/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路关键蛋白的表达,TUNEL染色法观察各组海马神经元细胞凋亡。结果与对照组比较,模型组及空白血清对照组海马NVU神经元细胞内钙水平显著升高,自噬标志物Beclin-1、LC3-II蛋白表达水平显著升高,Glu R2、m TOR蛋白表达水平显著降低,AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)蛋白表达水平显著升高,且细胞凋亡明显增多;与模型组比较,ZGF含药血清组海马NVU神经元细胞内钙水平明显降低,自噬标志物Beclin-1、LC3-II蛋白表达水平降低,GluR2/Ca2+/mTOR信号通路中Glu R2、m TOR蛋白表达水平升高,AMPK蛋白表达水平降低,同时细胞凋亡显著减少。结论 ZGF对自噬介导的DD大鼠海马NVU神经元细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制与调控GluR2/Ca2+/mTOR信号通路及细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 神经血管单元 海马神经元 自噬 凋亡 GluR2/Ca^2+/mTOR信号通路
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当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸对糖尿病抑郁症模型大鼠的影响及机制研究 被引量:18
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作者 王文恺 张蔚 +2 位作者 孙悦 钟琪 薛梅 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期649-654,共6页
目的探讨当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸对糖尿病抑郁症(Diabetes mellitus with depression,DD)模型大鼠的影响及机制。方法将32只雄性自发性2型糖尿病(Goto-Kakizaki,GK)大鼠随机分为模型组、氟西汀组(2.20 mg·kg^-1)、当归... 目的探讨当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸对糖尿病抑郁症(Diabetes mellitus with depression,DD)模型大鼠的影响及机制。方法将32只雄性自发性2型糖尿病(Goto-Kakizaki,GK)大鼠随机分为模型组、氟西汀组(2.20 mg·kg^-1)、当归补血汤组(4.0 g·kg^-1)和阿魏酸组(1.36 mg·kg^-1),每组8只,另取8只普通Wistar大鼠作为正常对照组。采用慢性温和不可预知性应激抑郁(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型复制方法造模,同时按上述剂量灌胃给药(10 mL·kg^-1),每日1次,连续4周。全程监测动物体质量及随机血糖;末次给药后,采用悬尾试验、强迫游泳和旷场实验观察动物行为学变化;采用ELISA法测定大鼠血清和海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)的含量;采用HE染色法进行大鼠海马组织病理形态学观察。结果与正常对照组比较,模型组大鼠体质量逐渐下降,血糖值始终明显升高(P <0.01);大鼠悬尾和强迫游泳的不动时间明显增加,而在旷场的自主运动总距离明显减少(P <0.001);血清BDNF及海马组织CREB、BDNF、TrkB的含量均明显降低(P <0.001)。与模型组比较,各给药组大鼠体质量逐渐增加,在给药2周后开始随机血糖值均明显下降(P <0.05,P <0.01);悬尾和强迫游泳不动时间明显缩短,自主运动距离明显增加(P <0.01,P <0.05);血清BDNF及海马组织CREB、BDNF、TrkB含量均明显上升(P <0.05,P <0.01)。结论当归补血汤及其主要活性成分阿魏酸能够显著改善糖尿病抑郁模型大鼠的抑郁样行为,保护海马神经元,其作用机制可能与CREB/BDNE/TrkB信号通路有关。 展开更多
关键词 当归补血汤 阿魏酸 糖尿病抑郁症 大鼠 脑源性神经营养因子 环磷腺苷效应元件结合蛋白 酪氨酸激酶受体B
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丹栀逍遥散对糖尿病抑郁大鼠胰岛素受体和胰岛素底物-1 mRNA表达的影响 被引量:16
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作者 王晓敏 谢斌 +2 位作者 周志愉 欧阳永伟 邓志成 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1181-1183,共3页
目的探讨丹栀逍遥散对糖尿病抑郁大鼠肝组织胰岛素受体和胰岛素底物-1 mRNA影响的分子机制。方法以高脂高糖乳剂加链尿佐菌素复制糖尿病大鼠模型,再予慢性孤养加慢性不可预见性中等刺激,建立糖尿病抑郁模型,给予丹栀逍遥散3 w后,观察其... 目的探讨丹栀逍遥散对糖尿病抑郁大鼠肝组织胰岛素受体和胰岛素底物-1 mRNA影响的分子机制。方法以高脂高糖乳剂加链尿佐菌素复制糖尿病大鼠模型,再予慢性孤养加慢性不可预见性中等刺激,建立糖尿病抑郁模型,给予丹栀逍遥散3 w后,观察其体重、行为学、空腹血糖、胰岛素、葡萄糖耐量试验、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的激素的变化、采用RT-PCR检测肝组织胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)mRNA的表达。结果丹栀逍遥散提高糖尿病抑郁大鼠活动度;降低血糖和胰岛素;降低CRH、ACTH、CorT;提高胰岛素靶组织肝的IR、IRS-1mRNA的表达。结论丹栀逍遥散治疗糖尿病抑郁其机制可能与纠正紊乱HPA轴和提高肝组织IR、IRS-1的基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。 展开更多
关键词 糖尿病抑郁 丹栀逍遥散 胰岛素受体 胰岛素受体底物-1
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构AQP4、Cx43的影响 被引量:14
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作者 王宇红 谭小雯 +4 位作者 曾嵘 柴上 杨蕙 孟盼 张秀丽 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2109-2114,共6页
目的研究左归降糖解郁方(黄芪、贯叶连翘、姜黄、熟地黄、山茱萸等)对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构水通道蛋白AQP4和缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素、28 d慢性应激联合的方法复... 目的研究左归降糖解郁方(黄芪、贯叶连翘、姜黄、熟地黄、山茱萸等)对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障精细结构水通道蛋白AQP4和缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素、28 d慢性应激联合的方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型,并随机分为5组:模型组,阳性药(二甲双胍+盐酸氟西汀)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量组,以正常大鼠为空白组,灌胃给药4周。给药后,采用Morris水迷宫测试大鼠空间学习能力,HE染色法观察海马组织病理学,免疫组化法检测海马血脑屏障精细结构AQP4和Cx43表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),海马细胞存在明显损伤,AQP4和Cx43表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,差异有显著统计学意义(P<0.01),海马细胞形态趋于正常,且AQP4和Cx43表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠的治疗作用可能与调控海马血脑屏障精细结构AQP4和Cx43表达有关。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 大鼠 糖尿病并发抑郁症 海马 水通道蛋白AQP4 缝隙连接蛋Cx43
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马区星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响 被引量:13
7
作者 徐雅岚 赵洪庆 +3 位作者 杜青 杨蕙 孟盼 王宇红 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期470-475,共6页
目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠星形胶质细胞兴奋性氨基转运体3(EAAT 3)、囊泡谷氨酸转运体2(VGLUT 2)表达的影响。方法采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素、28天慢性应激联合的方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型,S... 目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠星形胶质细胞兴奋性氨基转运体3(EAAT 3)、囊泡谷氨酸转运体2(VGLUT 2)表达的影响。方法采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素、28天慢性应激联合的方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型,SD大鼠随机分为5组:糖尿病并发抑郁症组,二甲双胍+氟西汀组,左归降糖解郁方高、中、低剂量组,以正常大鼠为空白对照组,灌胃给药4周。药物干预后,采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习能力,免疫组化双标法检测星形胶质细胞中EAAT 3、VGLUT 2的表达情况。结果与空白对照组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),EAAT 3表达下降,VGLUT 2表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与糖尿病并发抑郁症组比较,二甲双胍+氟西汀组和左归降糖解郁方高剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,差异有显著统计学意义(P<0.01),且二甲双胍+氟西汀组和左归降糖解郁方高、中、低剂量组EAAT 3表达升高,二甲双胍+氟西汀组和左归降糖解郁方高剂量组VGLUT 2表达下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论左归降糖解郁方可以改善糖尿病并发抑郁症大鼠海马区星形胶质细胞EAAT 3、VGLUT 2表达的紊乱状态。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 星形胶质细胞 兴奋性氨基转运体3 囊泡谷氨酸转运体2 大鼠
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马星形胶质细胞神经营养的影响 被引量:12
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作者 杨蕙 王宇红 +5 位作者 杜青 韩远山 孟盼 刘检 刘林 赵洪庆 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2017年第9期43-47,共5页
目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马星形胶质细胞神经营养功能的保护作用。方法采用复合方法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。实验大鼠随机分为模型组、阳性药组和左归降糖解郁方高、中、低剂量组,每组12只,另取12只S... 目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马星形胶质细胞神经营养功能的保护作用。方法采用复合方法建立糖尿病并发抑郁症大鼠模型。实验大鼠随机分为模型组、阳性药组和左归降糖解郁方高、中、低剂量组,每组12只,另取12只SD大鼠作为正常组。各给药组给予相应药物灌胃,连续4周。旷场实验检测大鼠抑郁行为,免疫组化检测大鼠海马星形胶质细胞标记物特异性蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经元细胞标记物微管相关蛋白2(MAP2)的表达,Western blot和RT-PCR检测大鼠海马星形胶质细胞营养分泌物脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、神经生长因子(NGF)表达。结果与正常组比较,模型组大鼠活动次数明显减少,海马GFAP表达明显增加,MAP2、BDNF、GDNF、NGF表达明显减少;左归降糖解郁方干预后,模型大鼠抑郁行为明显改善,大鼠海马BDNF、GDNF、NGF、MAP2表达增加,GFAP表达明显减少。结论左归降糖解郁方可有效改善大鼠海马星形胶质细胞的分泌功能,其可能通过增强星形胶质细胞的营养作用保护神经元,从而发挥抗抑郁作用。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 星形胶质细胞 神经营养 大鼠
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障紧密连接蛋白、IV型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响 被引量:12
9
作者 杨蕙 杜青 +3 位作者 赵洪庆 谭小雯 孟盼 王宇红 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期3214-3218,共5页
目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马血脑屏障紧密连接蛋白(ZO-1)、IV型胶原蛋白(Co IV)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法采用ig高脂乳剂、尾iv链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)、28 d慢性应激联合的方法建立DD... 目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马血脑屏障紧密连接蛋白(ZO-1)、IV型胶原蛋白(Co IV)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法采用ig高脂乳剂、尾iv链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)、28 d慢性应激联合的方法建立DD大鼠模型并随机分为5组:模型组,阳性药(盐酸二甲双胍0.18 g/kg+百忧解1.8 mg/kg)组,左归降糖解郁方高、中、低剂量(32.82、16.41、8.20 g/kg)组,并以正常大鼠为对照组,每组10只。给药4周后,电镜下观察血脑屏障的形态变化,免疫组化法检测海马血脑屏障Co IV、ZO-1、α-SMA的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠ZO-1、α-SMA的表达下降,Co IV的表达升高,差异显著(P<0.05);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组大鼠ZO-1、α-SMA的表达升高,Co IV的表达下降,差异显著(P<0.05、0.01)。结论左归降糖解郁方可以保护DD大鼠血脑屏障的损伤,其保护机制可能与升高血脑屏障ZO-1和α-SMA的表达,降低Co IV的表达有关。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 紧密连接蛋白 IV型胶原蛋白 α-平滑肌肌动蛋白
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马神经元突触功能可塑性相关蛋白的影响 被引量:12
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作者 杜青 赵洪庆 +3 位作者 王宇红 徐雅岚 杨蕙 孟盼 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2016年第5期521-525,共5页
目的针对NR受体亚型及其下游分子Ca MKII、Syn GAP的表达情况,探索左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马神经元突触功能可塑性的影响。方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为4组:模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g·kg... 目的针对NR受体亚型及其下游分子Ca MKII、Syn GAP的表达情况,探索左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症模型大鼠海马神经元突触功能可塑性的影响。方法复制糖尿病并发抑郁症大鼠模型并随机分为4组:模型组,阳性药组(二甲双胍0.18 g·kg?1+盐酸氟西汀1.8 mg·kg?1),左归降糖解郁方高、低剂量组(32.82,8.20 g·kg?1),以正常大鼠为空白对照组。采用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,Western-blotting实验检测大鼠海马NR2A、NR2B、Ca MKII、Syn GAP的表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间减少(P<0.05),NR受体亚型NR2A、NR2B及Ca MKII、Syn GAP的表达明显减少(P<0.01);与模型组比较,阳性药组和左归降糖解郁方高剂量组逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),空间探索时间显著增加(P<0.05),NR2A、NR2B、Ca MKII、Syn GAP的表达明显增多(P<0.05或0.01)。结论左归降糖解郁方可以明显增强糖尿病并发抑郁症大鼠的学习记忆能力,改善认知功能障碍,缓解抑郁症状,该作用可能与调节海马NR受体亚型NR2A、NR2B及其下游分子Ca MKII、Syn GAP的表达,保护海马神经元突触功能可塑性有关。 展开更多
关键词 糖尿病并发抑郁症 左归降糖解郁方 NR2A NR2B Ca MKII Syn GAP
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左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下模型大鼠海马神经元凋亡相关蛋白的影响 被引量:11
11
作者 凌佳 杨琴 +5 位作者 刘检 王宇红 徐雅岚 韩远山 杨蕙 孟盼 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2017年第10期35-39,共5页
目的探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-8的调控作用。方法采用受孕18 d SD大鼠胎鼠进行海马神经元原代培养,葡萄糖联合皮质酮干预构建DD模拟环境。将培养的海马神经元随... 目的探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-8的调控作用。方法采用受孕18 d SD大鼠胎鼠进行海马神经元原代培养,葡萄糖联合皮质酮干预构建DD模拟环境。将培养的海马神经元随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药(二甲双胍+氟西汀)药物血清组和待测药(左归降糖解郁方)药物血清组,正常组和模型组给予等量培养液,其余组给予相应体积分数10%药物血清或空白血清,造模干预18 h后,Hoechst荧光染色检测海马神经元凋亡;高内涵分析技术检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-8的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠海马神经元树突断裂或减少,神经网络连接降低,细胞存在明显的浓染、破碎、光点分布不均现象,Bcl-2蛋白表达显著下降(P<0.05),Bax和Caspase-8蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,阳性药药物血清组和待测药药物血清组大鼠海马神经元网络连接显著恢复,Hoechst荧光染色可见细胞核明显均匀化,局部亮点明显减少,Bcl-2蛋白表达水平显著上调(P<0.05,P<0.01),Bax和Caspase-8蛋白表达水平显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论左归降糖解郁方对模型大鼠海马神经元凋亡的保护作用可能与调控海马神经元Bcl-2,Bax和Caspase-8的表达有关。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 海马神经元 Bcl-2 Bax CASPASE-8 大鼠
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疏肝解郁法联合针刺对糖尿病合并抑郁大鼠血糖、胰岛素受体及ERK1/2、CaMK信号通路表达的影响 被引量:10
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作者 房丹 《吉林中医药》 2021年第4期505-509,共5页
目的探讨疏肝解郁法联合针刺对糖尿病合并抑郁大鼠血糖、胰岛素受体及ERK1/2、CaMK信号通路表达的影响。方法选择SPF级雄性大鼠48只,随机选取8只作为空白组(A组),给予标准饲料饲养;其余40只则为造模组,给予高糖高脂饲料饲养。造模组所... 目的探讨疏肝解郁法联合针刺对糖尿病合并抑郁大鼠血糖、胰岛素受体及ERK1/2、CaMK信号通路表达的影响。方法选择SPF级雄性大鼠48只,随机选取8只作为空白组(A组),给予标准饲料饲养;其余40只则为造模组,给予高糖高脂饲料饲养。造模组所有大鼠通过腹腔内注射STZ溶液、慢性孤养和不可预见性中等刺激造模,建立糖尿病合并抑郁大鼠模型,并将其随机分为5组,分别为模型组(B组)、阳性对照组(C组)、针刺组(D组)、疏肝解郁方组(E组)和疏肝解郁方联合针刺组(F组)。A组与B组给予等剂量生理盐水灌胃;C组给予临床等效剂量二甲双胍(0.18 g/kg)加百忧解(1.8 mg/kg)灌胃治疗;D组统一于每天早上10点进针刺百会、后三里、三阴交;E组给予疏肝解郁方(柴胡6 g,陈皮6 g,川芎6 g,党参8 g,白术8 g,茯苓8 g,香附5 g,白芍5 g,甘草3 g)临床等效剂量3.5 g/kg标准灌胃;F组治疗方法为针刺加疏肝解郁方。治疗7 d后测定空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),RT-PCR法检测胰岛素受体(IR)、胰岛素底物-1(IRS-1)mRNA表达,Western-bloting法检测大鼠海马组织CaM、CaMKⅡ、ERK1/2表达。结果与A组比较,B组FBG、HbA1c、HOMA-IR均明显升高(P<0.05),肝组织IR、IRS-1 mRNA和海马组织CaM、CaMKⅡ、ERK1/2明显降低(P<0.05);与B组比较,C、D、E、F组FBG、HbA1c、HOMA-IR、IR、IRS-1 mRNA、CaM、CaMKⅡ、ERK1/2明显统计学差异(P<0.05);F组FBG、HbA1c、HOMA-IR、IR、IRS-1 mRNA、CaM、CaMKⅡ、ERK1/2与D、E组比较有显著差异(P<0.05),除CaMKⅡ表达外与C组比较无明显差异(P>0.05)。结论疏肝解郁法联合针刺治疗糖尿病合并抑郁大鼠的机制可能与改善血糖异常,提高肝组织IR、IRS-1的基因表达从而改善胰岛素的信号传导,激活ERK1/2、CaMK信号通路调节大鼠海马神经元再生有关。 展开更多
关键词 疏肝解郁法 针刺 糖尿病合并抑郁 大鼠 血糖 胰岛素受体 ERK1/2 CAMK
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠行为学及认知功能的影响 被引量:10
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作者 王宇红 杨蕙 +3 位作者 孟盼 张秀丽 谭小雯 韩远山 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2014年第12期1427-1431,共5页
目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠行为学及认知功能的影响。方法建立糖尿病并发抑郁症动物模型并随机分为6组,模型组、二甲双胍(0.18 g·kg-1)+盐酸氟西汀(1.8 mg·kg-1)组(阳性药组)、左归降糖解郁方高、中、低剂... 目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠行为学及认知功能的影响。方法建立糖尿病并发抑郁症动物模型并随机分为6组,模型组、二甲双胍(0.18 g·kg-1)+盐酸氟西汀(1.8 mg·kg-1)组(阳性药组)、左归降糖解郁方高、中、低剂量(20.53,10.26,5.13 g·kg-1)组,并设正常对照组。给药42 d后,进行开野和Morris水迷宫行为学评价,采用ELISA法测定各组大鼠血浆促肾上腺激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)含量。结果与正常对照组比较,模型组大鼠开野实验中活动总数明显减少(P<0.01),Morris水迷宫实验中逃避潜伏期明显延长(P<0.05或P<0.01),空间探索时间明显缩短(P<0.05);血浆CRH、ACTH含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,给予左归降糖解郁方高剂量后,模型大鼠活动次数增多(P<0.05),学习记忆能力得到一定程度恢复,血浆CRH、ACTH水平明显降低(P<0.05)。结论左归降糖解郁方可改善糖尿病并发抑郁症模型大鼠的抑郁行为及认知障碍,可能与其降低CRH和ACTH水平,缓解HPA轴亢进有关。 展开更多
关键词 糖尿病并发抑郁症 左归降糖解郁方 促肾上腺皮质激素释放激素 促肾上腺皮质激素
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左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠HPA轴及海马糖皮质激素受体表达的影响 被引量:9
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作者 韩远山 赵洪庆 +4 位作者 杨蕙 杜青 孟盼 柳卓 王宇红 《中国中医基础医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1710-1713,共4页
目的:探讨复方中药左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠HPA轴及糖皮质激素受体的调控作用,阐明其对海马组织的可能保护机制。方法:采用尾静脉注射STZ联合慢性应激建立DD大鼠模型,并按随机数字... 目的:探讨复方中药左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠HPA轴及糖皮质激素受体的调控作用,阐明其对海马组织的可能保护机制。方法:采用尾静脉注射STZ联合慢性应激建立DD大鼠模型,并按随机数字表法分为模型组、左归降糖解郁方低、中、高剂量组和阳性药组,同时以正常大鼠为对照组。末次给药后,测定各组大鼠血糖值及抑郁行为,病理切片染色观察大鼠海马组织损伤情况,ELISA试剂盒检测大鼠血浆促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)、促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质酮(corticosterone,CORT)水平,蛋白免疫印迹法(Western-blotting)检测大鼠海马糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达。结果:左归降糖解郁方能显著降低模型大鼠的血糖值和抑郁样行为,海马病理损伤情况得以缓解,且血浆ACTH、CORT水平下降,海马GR蛋白表达上升。结论:左归降糖解郁方能明显改善DD大鼠血糖值和抑郁行为,保护海马神经元,其作用可能与上调GR表达密切相关。 展开更多
关键词 糖皮质激素 糖皮质激素受体 糖尿病并发抑郁症 左归降糖解郁方
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基于mTOR介导的线粒体自噬探讨左归降糖解郁方对DD海马NVU神经元损伤的保护作用 被引量:9
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作者 刘检 刘林 +3 位作者 唐林 杨蕙 韩远山 王宇红 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期4631-4636,共6页
目的:基于mTOR介导的线粒体自噬探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(DD)神经血管单元(NVU)中海马神经元损伤的保护作用。方法:原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元(Ne)、星形胶质细胞(As)与脑微血管内皮细胞(Bm),并分别进行细胞鉴... 目的:基于mTOR介导的线粒体自噬探讨左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症(DD)神经血管单元(NVU)中海马神经元损伤的保护作用。方法:原代分离、纯化和培养SD大鼠海马神经元(Ne)、星形胶质细胞(As)与脑微血管内皮细胞(Bm),并分别进行细胞鉴定。采用Transwell小室及高糖联合皮质酮干预构建DD海马NVU细胞模型,实验设正常组、模型组、GluR2阻断剂组、mTOR阻断剂、左归降糖解郁方含药血清组、GluR2阻断剂+左归降糖解郁方含药血清组和mTOR阻断剂+左归降糖解郁方含药血清组。采用CCK-8法检测海马神经元细胞存活率;Hoechst染色法检测海马神经元凋亡;免疫荧光检测自噬标志物LC3-Ⅱ、SQSTM1、Parkin及mTOR途径关键蛋白(GluR2、AMPK、mTOR)表达水平。结果:左归降糖解郁方能提高模拟DD环境下NVU中海马神经元细胞存活率(P<0.01),减少海马神经元凋亡,降低自噬标志物LC3-Ⅱ、SQSTM及Parkin水平(P<0.05,P<0.01),并显著抑制mTOR通路中GluR2、mTOR表达下调及AMPK表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论:左归降糖解郁方对线粒体自噬介导的DD海马NVU神经元损伤具有明显的保护作用,其提高细胞活力及抗凋亡的机制可能与调控mTOR途径有关。 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 神经血管单元 线粒体自噬 凋亡 mTOR途径
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疏肝健脾方配合中医五行情志干预对糖尿病伴抑郁患者心境状态及血糖控制的影响 被引量:9
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作者 毕菲菲 姚岚 +4 位作者 张冬冬 荀艳平 刘伟 张军 《世界中西医结合杂志》 2020年第10期1850-1854,共5页
目的分析疏肝健脾方配合中医五行情志干预在糖尿病伴抑郁患者治疗中的应用价值。方法将符合条件的120例糖尿病伴抑郁患者依据入院顺序进行编号(1~120号),将1~60号分为对照组,61~120号分为治疗组。两组均给予常规二甲双胍降糖干预,在此... 目的分析疏肝健脾方配合中医五行情志干预在糖尿病伴抑郁患者治疗中的应用价值。方法将符合条件的120例糖尿病伴抑郁患者依据入院顺序进行编号(1~120号),将1~60号分为对照组,61~120号分为治疗组。两组均给予常规二甲双胍降糖干预,在此基础上,对照组给予草酸艾司西酞普兰片治疗,治疗组给予疏肝健脾汤治疗,期间均实施常规干预措施,治疗组同时施以中医五行情志干预,两组均观察6周。对比两组中医证候疗效,治疗前后心境状态[抑郁(SDS)、自我负担感受(SPBS)],血糖[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)]水平,生活质量(A-DQOL)评分及治疗安全性评价。结果治疗组中医证候总有效率高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义;治疗后两组SDS、SPBS评分及A-DQOL量表各维度评分均较本组治疗前降低,且治疗组低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义;治疗后两组FPG、2 h PG、Hb A1c水平均较本组治疗前下降,且治疗组低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义;治疗期间两组均未出现血尿常规异常、肝肾功能及心功能损害等严重并发症,但治疗组不良反应发生率低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论疏肝健脾方配合中医五行情志干预治疗糖尿病伴抑郁症效果显著,有利于改善患者心境状态及血糖控制水平,提高其生活质量,且安全性更高。 展开更多
关键词 糖尿病伴抑郁症 疏肝健脾方 五行情志干预 心境状态 血糖
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糖尿病并发抑郁症大鼠海马神经元凋亡情况及潜在机制研究 被引量:5
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作者 赵洪庆 杜青 +3 位作者 凌佳 杨琴 徐雅岚 王宇红 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2016年第12期55-58,共4页
目的研究糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马神经元凋亡情况,探讨其可能的分子机制。方法采用高脂灌胃联合尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,随机分为糖尿病模型组和DD模型组,另取正常大鼠随机分为空白对照组和抑郁症模型组,抑郁症模型组... 目的研究糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马神经元凋亡情况,探讨其可能的分子机制。方法采用高脂灌胃联合尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,随机分为糖尿病模型组和DD模型组,另取正常大鼠随机分为空白对照组和抑郁症模型组,抑郁症模型组和DD模型组继续给予28 d慢性不可预见性应激。造模结束后,采用Open-field实验和Morris水迷宫实验评价大鼠行为活动能力,HE染色观察大鼠海马病理改变,Western blot检测大鼠海马p-JNK、Bax、Bcl-2、Caspase8、Caspase3蛋白表达。结果 Open-field实验结果显示,各模型组大鼠自主活动能力显著下降,其中DD模型组大鼠较糖尿病模型组明显下降;Morris水迷宫实验结果显示,各模型组大鼠逃避潜伏期延长,其中DD模型组大鼠较糖尿病模型组明显延长;HE染色结果显示,DD模型组大鼠海马损伤最为严重;Western blot结果显示,各模型组大鼠较空白对照组p-JNK、Bax、Caspase8、Caspase3表达显著升高,Bcl-2表达显著降低,其中DD模型组差异更显著。结论基于糖尿病,DD引起海马神经元凋亡,其机制可能与细胞凋亡相关蛋白p-JNK、Bax、Bcl-2、Caspase8、Caspase3等异常表达相关。 展开更多
关键词 糖尿病 抑郁症 糖尿病并发抑郁症 神经元凋亡
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左归降糖解郁方改善糖尿病并发抑郁症大鼠抑郁样行为的作用及其机制 被引量:6
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作者 杨蕙 王宇红 +5 位作者 杨琴 凌佳 李薇 柳卓 孟盼 刘检 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第21期2167-2170,共4页
目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠抑郁样行为的作用及其对细胞外信号调节蛋白激酶信号通路调节的影响。方法依次给予SD大鼠高脂乳剂灌胃与链脲佐菌素尾静脉注射和慢性不可预知应激的方法,建立糖尿病并发抑郁症动物模型。... 目的研究左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠抑郁样行为的作用及其对细胞外信号调节蛋白激酶信号通路调节的影响。方法依次给予SD大鼠高脂乳剂灌胃与链脲佐菌素尾静脉注射和慢性不可预知应激的方法,建立糖尿病并发抑郁症动物模型。按照体重将大鼠随机分为5组:模型组、对照组(0.18 g·kg^(-1)二甲双胍+1.8 mg·kg^(-1)氟西汀)、高中低3个剂量实验组(左归降糖解郁方:20.52,10.26,5.13 g·kg^(-1)),给药体积均为10 mL·kg^(-1),连续给药4周;另设正常大鼠为正常组。用开野实验检测各组大鼠抑郁行为,用水迷宫实验检测大鼠的学习记忆功能,用蛋白质免疫印迹法检测大鼠海马小鸟苷酸三磷酸结合蛋白(Ras)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白p-ERK1/2、环磷酸腺苷反应单元结合蛋白(CREB)及其磷酸化蛋白p-CREB的表达。结果中药干预后,在开野实验中的活动次数:正常组、模型组和高剂量实验组分别是(47.50±15.81),(7.50±5.24),(21.88±14.47)次,与正常组比较,模型组差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,高剂量实验组差异有统计学意义(P<0.05)。在水迷宫实验中大鼠逃避潜伏期回归直线方程:正常组、模型组和高剂量实验组分别为y=66.88-10.76x,y=63.56-5.964x,y=67.75-9.51x,与正常组比较,模型组差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,高剂量实验组差异有统计学意义(P<0.05)。这3组的探索时间分别为(36.63±13.39),(22.25±5.42),(30.75±7.92)s,与正常组比较,模型组差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,高剂量实验组大鼠差异有统计学意义(P<0.05)。正常组、模型组和高剂量实验组的Ras表达灰度值分别为0.70±0.06,0.08±0.03,0.52±0.08,这3组的p-ERK1/ERK1的比值分别为0.62±0.10,0.20±0.03,0.41±0.02,这3组的p-ERK2/ERK2的比值分别为0.40±0.09,0.29±0.09,0.32±0.10,这3组的p-CREB/CREB的比值分别为0.60±0.10,0.10±0.02,0.46±0.08� 展开更多
关键词 左归降糖解郁方 糖尿病并发抑郁症 小鸟苷酸三磷酸结合蛋白 细胞外信号调节激酶1/2 环磷酸腺苷反应单元结合蛋白
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糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障结构的损伤及其机制 被引量:6
19
作者 杜青 王宇红 +3 位作者 赵洪庆 杨蕙 孟盼 徐雅岚 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期558-562,共5页
目的:研究糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障结构关键蛋白紧密连接蛋白(ZO-1)、基底膜蛋白(CoIV)、周细胞蛋白(a-SMA)的表达情况及其损伤机制。方法:采用高脂灌胃14 d后,再尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,38mg/kg),随机分为2组(n=15):糖尿病... 目的:研究糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障结构关键蛋白紧密连接蛋白(ZO-1)、基底膜蛋白(CoIV)、周细胞蛋白(a-SMA)的表达情况及其损伤机制。方法:采用高脂灌胃14 d后,再尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,38mg/kg),随机分为2组(n=15):糖尿病组和糖尿病并发抑郁症组;正常大鼠随机分为2组(n=15):空白对照组和抑郁症组。糖尿病组与空白对照组正常饲养,糖尿病并发抑郁症组和抑郁症组慢性不可预知性应激28 d。检测各组大鼠血糖值的变化,Open-field及Morris实验评价大鼠行为学变化,透射电子显微镜观察大鼠海马血脑屏障形态学改变,免疫组化法检测大鼠海马血脑屏障关键蛋白ZO-1、Co IV、a-SMA表达情况。结果:与空白对照组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠血糖异常升高,自主活动次数减少,逃避潜伏期延长,空间探索时间减少(P<0.05,P<0.01);海马血脑屏障内皮模糊,毛细血管管腔狭窄,周边胶质细胞终足水肿,ZO-1、α-SMA表达显著减少(P<0.05),CoIV的表达显著增加(P<0.05);与糖尿病组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠自主活动次数显著减少(P<0.01),逃避潜伏期延长(P<0.05),海马血脑屏障毛细血管管腔更为狭窄、胶质细胞终足水肿更为明显,a-SMA表达显著下降(P<0.05)。结论:糖尿病并发抑郁症血脑屏障关键蛋白ZO-1、CoIV、α-SMA表达紊乱可能是其结构损伤发生机制之一。 展开更多
关键词 糖尿病并发抑郁症 CoIV ZO-1 A-SMA 大鼠
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左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症环境下海马神经血管单元的保护作用 被引量:5
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作者 凌佳 罗薇絮 +3 位作者 刘灿 刘检 韩远山 王宇红 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期5865-5869,共5页
目的:探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经血管单元(NVU)的保护作用。方法:构建海马NVU共培养体系,并使用高糖联合皮质酮模拟DD环境。将NVU共培养体系随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药含药血清组(... 目的:探讨左归降糖解郁方对模拟糖尿病并发抑郁症(DD)环境下海马神经血管单元(NVU)的保护作用。方法:构建海马NVU共培养体系,并使用高糖联合皮质酮模拟DD环境。将NVU共培养体系随机分为正常组、空白血清组、模型组、阳性药含药血清组(氟西汀0.18g/kg+二甲双胍1.8mg/kg)和中药含药血清组(32.82g/kg)。3个血清组分别给予10%的对应自制血清,正常组和模型组给予培养液补齐液面。18h后采用ELISA法检测体系中5-HT和分泌蛋白含量,采用跨内皮电阻值(TEER)和4h渗漏试验液面差评价NVU屏障功能,Western blot法检测GFAP表达情况,流式细胞术检测神经元凋亡情况。结果:与正常组比较,模型组胞内外5-HT和分泌蛋白含量均显著降低(P<0.01,P<0.05),TEER显著降低(P<0.01),4h渗漏试验液面差显著增加(P<0.01),GFAP表达显著降低(P<0.05),NE凋亡率显著增加(P<0.01);与模型组比较,中药含药血清组的胞内外5-HT和分泌蛋白含量均显著上升(P<0.05),TEER显著升高(P<0.05),4h渗漏试验液面差显著降低(P<0.05),GFAP表达显著升高(P<0.05),NE凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:左归降糖解郁方对模拟DD环境下海马NVU具有保护作用,可能与调控NVU分泌功能有关。 展开更多
关键词 糖尿病并发抑郁症 神经血管单元 屏障结构 分泌功能 左归降糖解郁方
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