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Delta样蛋白1同源物与生长激素腺瘤临床表型的关系及其对生长激素的影响研究 被引量：1
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作者 贾焕珍 陈一元 +1 位作者 赵斯达 郑淑荣 《实用心脑肺血管病杂志》 2023年第5期62-67,共6页
目的分析Delta样蛋白1同源物(DLK1)在生长激素(GH)腺瘤中的表达情况及其临床意义。方法本实验时间为2020年10月至2022年6月。肿瘤标本来自2016—2020年于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行手术切除的34例GH腺瘤患者。采用免疫组... 目的分析Delta样蛋白1同源物(DLK1)在生长激素(GH)腺瘤中的表达情况及其临床意义。方法本实验时间为2020年10月至2022年6月。肿瘤标本来自2016—2020年于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科行手术切除的34例GH腺瘤患者。采用免疫组织化学染色检测肿瘤标本中DLK1、GH表达情况。取对数生长期的大鼠GH3细胞,将其随机分为A组、B组、C组、D组〔B组、C组、D组分别加入1、5、20μg/ml抗DLK1抗体,A组加入等体积的二甲基亚砜(DMSO)〕,分别于培养0、24、48、72 h后采用细胞增殖实验检测各组细胞活力。取对数生长期的大鼠GH3细胞,将其随机分为E组、F组(F组加入5μg/ml抗DLK1抗体,E组加入等体积的DMSO),分别于培养0、24、48、72 h后采用ELISA检测各组GH3细胞培养上清液中GH水平。取对数生长期的大鼠GH3细胞,将其随机分为G组、H组、I组、J组(H组、I组、J组分别加入1、5、20μg/ml抗DLK1抗体,G组加入等体积的DMSO),采用Western blot法检测各组GH3细胞中磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70S6K)、磷酸化起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)、磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)水平。结果DLK1主要位于稀疏颗粒型肿瘤标本的细胞核及致密颗粒型肿瘤标本的细胞质,GH主要位于疏松颗粒型、致密颗粒型肿瘤标本的细胞质。Pearson相关分析结果显示,肿瘤标本的DLK1评分与GH评分呈正相关(r=0.550,P<0.001)。根据DLK1评分中位数将肿瘤标本分为高DLK1评分组(≥110分,n=17)和低DLK1评分组(<110分,n=17)。高DLK1评分组患者血清GH及肿瘤标本GH评分、临床表型为致密颗粒型者占比高于低DLK1评分组(P<0.05)。B组培养48、72 h后细胞活力高于A组,C组、D组培养24、48、72 h后细胞活力高于A组(P<0.05);C组培养48 h后细胞活力高于B组,D组培养24、48、72 h后细胞活力高于B组(P<0.05);D组培养48、72 h后细胞活力高于C组(P<0.05)。A组、B组、C组、D组培养24、48、72 h 展开更多
关键词 垂体肿瘤 生长激素 delta样蛋白1同源物 细胞增殖 p70核糖体蛋白S6激酶 起始因子4E结合蛋白1 雷帕霉素靶蛋白
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Delta样蛋白1在垂体腺瘤细胞株中的表达及生物学功能研究
2
作者 董伟 陈一元 +2 位作者 李振业 张亚卓 高华 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第3期282-287,共6页
目的探讨Delta样蛋白1(DLK1)在垂体腺瘤细胞株中的表达水平及生物学功能。方法体外培养垂体腺瘤GH3、MMQ和ATT20细胞,分为实验组和对照组,实验组细胞分别给予抗DLK1抗体1μg/ml和5μg/ml,对照组细胞给予等体积的二甲基亚砜,共培养24、48... 目的探讨Delta样蛋白1(DLK1)在垂体腺瘤细胞株中的表达水平及生物学功能。方法体外培养垂体腺瘤GH3、MMQ和ATT20细胞,分为实验组和对照组,实验组细胞分别给予抗DLK1抗体1μg/ml和5μg/ml,对照组细胞给予等体积的二甲基亚砜,共培养24、48及72 h。采用蛋白质免疫印迹实验检测各个细胞株DLK1的水平和谱系来源,细胞增殖实验检测细胞的活力,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞的分泌能力[GH3细胞:GH和胰岛素样生长因子(IGF-1),MMQ细胞:催乳素(PRL),ATT2细胞:促肾上腺皮质激素(ACTH)],细胞免疫荧光实验和蛋白质免疫印迹实验检测抗DLK1抗体对GH3细胞表达PIT1蛋白水平的影响。结果蛋白质免疫印迹实验结果证实,GH3和MMQ细胞为POU结构域转录因子1(POU1F1)谱系细胞,DLK1表达水平高;ATT20细胞为T盒转录因子19(TBX19)谱系细胞,DLK1表达水平低。与抗DLK1抗体共培养48 h,仅GH3细胞5μg/ml实验组的细胞活力高于对照组(P=0.017);共培养72 h,GH3细胞1μg/ml、5μg/ml实验组(均P<0.05)及MMQ细胞5μg/ml实验组(P=0.041)的细胞活力高于对照组;ATT20细胞的实验组与对照组所有时间点的细胞活力差异均无统计学意义(均P>0.05)。与抗DLK1抗体培养24、48、72 h,GH3细胞对照组培养上清中GH含量分别为(8.8±0.6)、(10.4±0.8)及(13.2±0.9)ng/ml,5μg/ml实验组分别为(6.7±0.7)、(6.1±0.4)及(4.7±0.4)ng/ml,各时间点两组比较差异均有统计学意义(均P<0.001);GH3细胞对照组3个时间点培养上清中IGF-1的含量分别为(12.5±0.7)、(14.6±1.0)及(15.9±1.1)ng/ml,5μg/ml实验组分别为(10.9±0.7)、(11.8±0.8)及(8.3±0.7)ng/ml,48 h和72 h时间点两组的差异均有统计学意义(均P<0.05);与对照组相比,ATT20细胞5μg/ml实验组各时间点分泌ACTH的量及MMQ细胞分泌PRL的量差异均无统计学意义(均P>0.05)。细胞免疫荧光实验和蛋白质免疫印迹实验均显示,与抗DLK1抗体共培养24 h,GH3细胞5μg/ml实验组的DLK1和PIT1 展开更多
关键词 垂体肿瘤 细胞 体外培养 delta样蛋白1 POU结构域转录因子1
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