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不孕奶牛宫颈黏液相关ASA免疫印迹分析 被引量：1
1
作者 马瑛 马明 +2 位作者 沈辉 骆新荣 高庆华 《中国奶牛》 2013年第6期4-7,共4页
为探讨和分析免疫性不孕奶牛和可孕奶牛宫颈黏液ASA能够识别的精子膜抗原及其差异，本试验通过提取精子膜总蛋白，对24头免疫性不孕奶牛和14头可孕奶牛宫颈黏液ASA能够识别的精子抗原进行了比较分析。免疫印迹试验结果显示，不孕奶牛宫... 为探讨和分析免疫性不孕奶牛和可孕奶牛宫颈黏液ASA能够识别的精子膜抗原及其差异，本试验通过提取精子膜总蛋白，对24头免疫性不孕奶牛和14头可孕奶牛宫颈黏液ASA能够识别的精子抗原进行了比较分析。免疫印迹试验结果显示，不孕奶牛宫颈黏液ASA对分子质量为88-90ku、66ku、55~57ku、25-27ku的精子膜抗原有特殊免疫性反应，识别抗原率为100％（24／24）、100％（24／24）、87．5％（21／24）、70．8％（17／24）；而可孕奶牛宫颈黏液AsA对分子质量为88-90ku、55-57ku、25-27ku的识别率仅为21．4％（3／14）、14．2％（2／14）、14．2％（2／14），可孕奶牛宫颈黏液不能识别分子质量为66ku#~精子膜抗原。结果表明，不孕奶牛宫颈黏液ASA~g够识别更多的精子膜抗原，这些精子膜抗原可能与免疫性不孕有密切相关，对其深入的研究将有助于免疫性不孕相关精子膜抗原的筛选和鉴定。 展开更多
关键词 奶牛 不孕 抗精子抗体 宫颈黏液 免疫印迹
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间接ELISA检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕
2
作者 王姗姗 马瑛 +2 位作者 马梦婷 廉德平 高庆华 《中国奶牛》 2014年第16期13-16,共4页
为建立检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕的间接ELISA方法,以精子膜蛋白为包被抗原,进行奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA的优化试验。对27头ASA阳性不孕和29头ASA阳性可孕奶牛进行了间接ELISA检测标准的确定试验;对137头奶牛的宫颈黏液ASA免疫不... 为建立检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕的间接ELISA方法,以精子膜蛋白为包被抗原,进行奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA的优化试验。对27头ASA阳性不孕和29头ASA阳性可孕奶牛进行了间接ELISA检测标准的确定试验;对137头奶牛的宫颈黏液ASA免疫不孕进行间接ELISA临床检测。奶牛宫颈黏液ASA的间接ELISA优化条件为:抗原包被量为5μg/mL,宫颈黏液稀释度为1:5,宫颈黏液反应时间1h,二抗反应时间1.5h;奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕检测的判定标准为:当样品OD490nm值大于0.513时判定为ASA阳性免疫不孕,当样品OD490nm值小于0.410时可孕,当样品OD490nm值介于0.410~0.513时为ASA阳性疑似,重复试验的变异系数均小于10%。对临床137份宫颈黏液样品进行检测,发现13头ASA阳性免疫不孕奶牛都不能受孕,而98头阴性结果牛中有89头怀孕。结果表明,间接ELISA可以有效检测奶牛宫颈黏液ASA免疫不孕。 展开更多
关键词 奶牛 不孕 抗精子抗体 宫颈黏液 间接ELISA
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膜联蛋白Ⅴ去除奶牛死精子技术及其在性控冷冻精液生产中的应用
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作者 张健 祁琦 +5 位作者 周雪原 梁永厚 董志岷 王贵 吉日嘎拉 李喜和 《中国奶牛》 2021年第10期21-27,共7页
本研究旨在通过膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)与奶牛死精子的特异结合,并尝试与免疫磁珠技术共用去除奶牛精液中死精子,从而提高性控精液生产效率。试验结果显示,通过膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选后的精子活力、膜完整性、线粒体活性均有不同幅... 本研究旨在通过膜联蛋白Ⅴ(Annexin Ⅴ)与奶牛死精子的特异结合,并尝试与免疫磁珠技术共用去除奶牛精液中死精子,从而提高性控精液生产效率。试验结果显示,通过膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选后的精子活力、膜完整性、线粒体活性均有不同幅度改善,特别是上机分离时X/Y死精率明显下降(P<0.05),说明该技术流程设计可以有效去除部分死精子,提高性控精液生产效率。同时,试验证明膜联蛋白Ⅴ与免疫磁珠筛选操作对于分离后的X或Y精子制备的性控冷冻精液各项产品技术指标均没有明显影响(P>0.05),说明该技术流程并不会对精子造成额外的损伤。综上所述,本研究开发的Annexin Ⅴ蛋白的特异性结合免疫磁珠方法与技术工艺,可以有效去除奶牛精液中的死精子,显著提升奶牛性控冷冻精液生产效率、降低生产成本,为家畜性别控制冷冻精液推广应用提供新的技术支撑。 展开更多
关键词 奶牛精子 膜联蛋白Ⅴ 免疫磁珠 性控冷冻精液
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